CC BY
32
© коллектив авторов, 2015
удк 616.517-085.831-036:87-092:612.017.1]-078.33
Пинегин В.Б., Муругин В.В., Теплюк Н.П.
взаимосвязь между уровнем антимикробного пептида ll-37, показателями иммунитета и развитием рецидивов у больных псориазом, леченных различными методами фототерапии
ГБОУ ВПО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова МЗ РФ, 119991, г Москва; ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России, 115478, г Москва
По изменению уровня сывороточного антимикробного пептида LL-37 под влиянием фототерапии больных вульгарным псориазом можно было разделить на группу с повышением и на группу с понижением этого пептида. Эффективность лечения, оцененная по индексу PASI, была в обеих группах одинаковой. Но за 6 мес наблюдения в группе больных с понижением пептида было 5% обострений, в группе больных с повышением пептида - 100%. Среди показателей иммунной системы в группе с понижением пептида было понижение в крови CD3+, CD3+C4+, CD3+CD8+, CD3+HLA-DR+, CD3+CD4+CD161+-клеток и цитокинов IL-22 и IL-8. В группе с повышением пептида было понижение только CD3+ и CD3+CD4+-клеток. Мы считаем, что понижение уровня пептида LL-37 вело к снижению его иммуностимулирующего влияния на иммунную систему. Следствием этого было снижение уровня цитокинов и Т-клеток, главных участников псориатического воспаления, и, в конечном итоге, уменьшение рецидивов.
Ключевые слова: пептидLL-37; цитокины; клетки иммунной системы;рецидив.
Для цитирования: Иммунология. 2015; 36(6): 373-377.
Pinegin V.B., Murugin V.V., TeplyukN. P.
THE RELATIONSHIP BETWEEN THE LEVEL OF ANTIMICROBIAL PEPTIDE LL-37, THE INDICES OF IMMUNITY AND THE DEVELOPMENT OF RELAPSES IN PSORIASIS PATIENTS, TREATED BY VARIOUS METHODS OF PHOTOTHERAPY
I.M. Sechenov First Moscow State University, Ministry of Health of Russia, 119991, Moscow; "National Research Center -Institute of Immunology", FMBA of Russia, 115478, Moscow
The changes in serum antimicrobial peptide LL-37 levels under the phototherapy of psoriasis vulgaris allowed to divide the patients into two groups: with the increase and with the decrease of this peptide. The effectiveness of treatment, evaluated by PASI index, was equal in both groups. But for 6 months of observations in the patients with the peptide decrease there was 5% of exacerbations, and in the patients with the peptide increase — 100%. Among the immune indices in the group with peptide decrease there was lowering in blood CD3+, CD3+C4+, CD3+CD8+, CD3+HLA-DR+, CD3+CD4+CD161 + cells and Il-22 and Il-8 cytokines. In the group with peptide increase there was lowering only in CD3+ and CD3+CD4+ cells. We consider that the decrease in the level of peptide LL-37 led to lowering its immunostimulatory effect. This resulted in a decrease of the levels of cytokines and T cells, the main participants in psoriatic inflammation, and ultimately reduced the relapses.
Keywords: peptide LL-37; cytokines; immune cells; relapse.
citation: Immunologiya. 2015; 36(6): 373-377.
В этиопатогенезе псориаза существенную роль играет антимикробный катионный пептид LL-37, один из важнейших защитных факторов врожденного иммунитета [1]. Этот пептид является продуктом расщепления специфической протеазой кателицидина hCAP-18/LL-37, синтезируемого в нейтрофилах, моноцитах/макрофагах, кератиноцитах, клетках эпителия дыхательного, пищеварительного и урогени-тального трактов. Помимо антибактериальных, противогрибковых и противовирусных свойств, этот пептид обладает выраженными иммунорегуляторными свойствами, что делает его важным участником многих аутоиммунных и ауто-воспалительных процессов.
В здоровой коже в норме пептид LL-37 практически отсутствует. Но после ранения, любого повреждения кожи, при развитии воспалительного процесса и любых стрессовых ситуациях уровень пептида LL-37 в кератиноцитах резко возрастает, где он оказывает антимикробный и ранозажив-ляющий эффект [2-5]. Эти свойства пептида дали основание отнести его к сигналам тревоги или аларминам [6]. Параллельно с этим пептид LL-37 обладает рядом иммунорегу-ляторных свойств. Он является хематтрактантом для ней-трофилов, моноцитов, дендритных клеток и Т-лимфоцитов; способствует созреванию дендритных клеток и развитию
Для корреспонденции: Пинегин владимир Борисович, [email protected]
For correspondence: Pinegin Vladimir Borisovich, vbpinegin@ gmail.com
Т-клеточного иммунного ответа; стимулирует ангиогенез в коже, индуцирует синтез и высвобождение ряда цитокинов, хемокинов и гистамина; способствует пролиферации, миграции кератиноцитов и реэпитализации раны [3, 7, 8]. Эти свойства пептида дают основание относить его к ростовым факторам кератиноцитов.
При псориазе экспрессия пептида LL-37 в кератиноцитах существенно повышена, причем в отличие от здоровой кожи основная его масса находится в процессированной форме [9, 10]. Уровень пептида LL-37 у больных псориазом повышен также в крови, что, вероятно, является следствием повышенного синтеза этого пептида кератиноцитами [11]. Повышенный уровень пептида LL-37 в коже способствует развитию псориаза. Это связано с тем, что в кератиноцитах пептид LL-37 оказывает антиапоптотический эффект путем усиления экспрессии ингибитора апоптоза-2 (1АР-2) и циклогеназы-2, оказывающей анти-апоптотический эффект [12]. Является очевидным, что снижение апоптоза кератиноцитов способствует развитию псориаза. Кроме того, в коже больных псориазом образуется комплекс из нуклеиновых кислот и пептида LL-37, являющийся мощным индуктором синтеза ряда провоспалительных цитокинов, играющих роль в инициации и поддержании псориатического воспаления [13, 14].
Фототерапия продолжает оставаться одним из главных методов лечения псориаза. Важным показателем эффективности этого лечения является продолжительность ремиссии. Чем дольше ремиссия, тем выше эффективность лечения. Однако взаимосвязь изменений пептида LL-37, возникающих после проведенной фототерапии, и продолжительностью ре-
миссии практически не изучена. Также мало изучена его взаимосвязь с изменениями после проведенной фототерапии других показателей врожденного и адаптивного иммунитета. Изучению этих взаимосвязей, т.е. изменений уровня пептида LL-37 и других показателей иммунитета с продолжительностью ремиссии после проведенной фототерапии, и посвящено данное исследование.
Материал и методы. Исследование проводили у 60 больных псориазом: 54 (90%) с диагнозом вульгарный псориаз и 6 (10%) экссудативный псориаз. Распределение по половому признаку: 9 (15%) женщин и 51 (85%) мужчина. Возраст больных от 18 до 68 лет, с давностью заболевания от 1 года до 48 лет. Локальный статус кожного процесса соответствовал клинической разновидности псориаза - вульгарный псориаз или экссудативный псориаз. Кожный процесс носил распространенный характер и был представлен папулезно-бляшечными элементами различных размеров, с выраженной инфильтрацией, обильным шелушением по всей поверхности элементов. Субъективные ощущения в виде зуда отмечали 76% пациентов. Методы обследования соответствовали стандартам при данной патологии и включали осмотр с оценкой дерматологического статуса c использованием общепринятого индекса PASI (Psoriatic area and severity index) и дерматологического индекса качества жизни - ДИКЖ.
Больные были разделены на четыре группы по 15 человек, сопоставимые по основным параметрам. Больные получали: 1-я группа ПУВА-терапию с системным (пероральным) применением фотосенсибилизатора; 2-я группа - узкополосную средневолновую УФБ-311 нм; 3-я группа - комбинированную фототерапию в виде сочетания методик - ПУВА-терапия плюс эксимерная лампа 308 нм; 4-я группа - комбинированную фототерапию в виде сочетания узкополосной средневолновой УФБ-311 нм терапию плюс эксимерная лампа 308 нм.
Лечение осуществляли на аппарате Waldman UV-7001K («Waldman», Германия). Аппарат оснащен 40 люминесцентными лампами: 20 ламп F85/100W-TL01 и 20 ламп F85/100W-PUvA, излучающих узкополосные средневолновые лучи с длиной волны 311 нм и широкополосные длинноволновые лучи с длинной волны в диапазоне 320-400 нм. Использовали также узкополосную эксимерную лампу (308 нм).
До и после лечения у больных производили забор венозной крови с целью оценки уровня пептида LL-37, ци-токинов и субпопуляционного состава Т-лимфоцитов. К цельной гепаринизированной крови добавляли МАТ для идентификации Т-клеток (CD3+), Т-хелперов (CD3+CD4+), Т-киллеров (CD3+CD8+), В-клеток (CD19+), активированных Т-клеток (CD3+HLA-DR+, CD3+CD25+) и ТЫ7-клеток (CD3+CD4+CD161+). Инкубировали при +4°С в течение 20 мин, после чего для разрушения эритроцитов добавляли лизирующий раствор и инкубировали еще 10 мин при комнатной температуре. После окончания инкубации пробы отмывали 1 раз фосфатно-солевым буфером, анализировали на проточном цитометре FacsCalibur (Becton-Dickenson, США) и определяли соответствующие субпопуляции лимфоцитов: CD3+, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD19+, CD3+HLA-DR+, CD3+CD25+ в процентах от общего числа лимфоцитов и CD3+CD4+CD161+ в процентах от общего числа CD3+CD4+-клеток.
Определение концентрации цитокинов проводили методом иммуноферментного анализа (ИФА) с помощью коммер-
Таблица 1
Клиническая эффективность использованных методов фототерапии
Показатели ПУВА УФБ ЭЛ + ПУВА ЭЛ + УФБ
(n = 15) (n = 15) (n = 15) (n = 15)
PASI
до лечения 33,6 20,5 31,7 18,8
(19-53,4) (7,6-34) (12,8-52,3) (10,6-43,8)
после лечения 7,6 3,5 3,4 2,5
(2,8,2-13,1) (0,6-6,3) (1,3-13,1) (1-6,7)
Регресс PASI (%) 82,8 83,6 85,6 87,5
(67,4-89,1) (54-93,4) (72-92,3) (78,5-92,3)
DIQL
до лечения 21 18,5 18 15
(13,1-29,8) (10,2-24,8) (10-26,9) (12,1-27,2)
после лечения 4 4 4,5 2,5
(2-16,7) (2-18,6) (1,1-13,6) (2-6,9)
ческих наборов фирм ООО «Цитокин», Россия (IFNa, IFNy, IL-1ß, IL-6, IL-8, TNFa) и eBioscience, США (IL-17A, IL-22) в соответствии с прилагающимися к ним протоколами. Уровень пептида LL-37 в сыворотке крови больных изучали с помощью иммуноферментного анализа, используя набор «LL-37, Human, Elisa», фирмы Hycult biotech. Реакцию проводили в соответствии с инструкцией производителя.
Статистическую обработку осуществляли с применением программы SPSS Statistica v. 21. Различия считали статистически значимыми при р < 0,05.
результаты. При анализе клинической эффективности лечения больных с псориазом было установлено, что все 4 использованных метода фототерапии дали примерно одинаковый результат. Так, индекс PASI в 1 группе составил 33,6 (19-53,4) балла, во 2 группе - 20,5 (7,6-34) балла, в 3 группе
- 1,7 (12,8-52,3) балла, во 4 группе - 18,8 (10,6-43,8) балла. На фоне проводимой терапии отмечалось значительное снижение уровня PASI. Регресс индекса PASI в первой группе составил 82,8% (67,4-89,1%), во второй группе - 83,6% (5493,4%), в третьей - 85,6% (72-92,3%), в четвертой - 87,5% (78,5-92,3%.). Примерно одинаковый эффект использованные методы фототерапии оказывали на показатели качества жизни, оцениваемые по индексу ДИКЖ (табл. 1).
При анализе показателей иммунной системы мы обратили внимание, что после проведенного лечения всех больных с псориазом можно разделить на группу с понижением и на группу с повышением пептида LL-37 по сравнению с исходным уровнем (табл. 2). Изменения уровня пептида после лечения по сравнению с уровнем до лечения в обеих группах были статистически достоверны. Оказалось, что клиническая эффективность проведенной фототерапии при оценке по индексу PASI была одинаковой в группах с понижением и повышением пептида LL-37. Регресс этого индекса в группе больных с повышением пептида LL-37 составил 81,4% (59,9-91,5%), в группе с понижением пептида LL-37
- 87,2% (71,1-92,1%). Однако продолжительность ремиссии в этих группах была принципиально различной. В группе с повышением пептида LL-37 через 1 мес, 3 мес и 6 мес после окончания лечения у 71,4, 92,2 и 100% больных происходило обострение заболевания. В группе с понижением пептида
Таблица 2
Уровень пептида LL-37 (пкг/мл), клиническая эффективность и % обострений
Уровень пептида ЬЬ-37 Число больных в группах Уровень LL-37 (Med (10p-90p)) Индекс PASI (Med (10p - 90p)) % обострений через
до лечения после лечения до лечения после лечения регресс индекса (%) 1 мес 3 мес 6 мес
Повышение 21 67 97,5 (52-118)* 23,4 4,2 (2-11,3)* 81,4 (59,9-91,5) 71.4 92,2 100
после лечения (41,5-86) (6,4-45,7)
Понижение по- 39 88,5 56,5 (36-78,3)* 23,1 3,1 (1,2-8,5) * 87,2 (71,1-92,1) 5 0 0
сле лечения (46-105) (12,5-47,2)
* p < 0,05 по сравнению с уровнем до лечения в тесте Вилкоксона.
Таблица 3
субпопуляции лимфоцитов (в %) больных псориазом до и после лечения фототерапией
Субпопуляция
До лечения
После лечения
CD3
CD3CD4
CD3CD8
CD3HLA-DR
CD3CD25
CD3CD4CD161
CD19
75,5 (63,2-84,0) 40,4 (33,1-51) 31,3 (22,1-45,7) 12,0 (6,0-21,8) 21,5 (10,1-28,9) 28,0 (14-42) 8,0 (6,0-13,9)
72 (60-79)* 37,5 (30-48,9)* 29,0 (20-34)* 11,0 (6-16,9)** 18,5 (13-25)*** 24,5 (14,1-38,8)* 8,0 (6-12)
* p < 0,05, ** p < 0,01, ***р < 0,001 по сравнению с уровнем до лечения в тесте Вилкоксона.
LL-37 через 1 мес после окончания лечения обострение наблюдалось только у 5%. Через 3 и 6 мес развития обострений у больных этой группы не наблюдалось (см. табл. 2).
Учитывая примерно одинаковую клиническую эффективность использованных методов фототерапии, мы объединили иммунные показатели больных всех 4 групп в одну группу. При анализе субпопуляционного состава лимфоцитов (табл. 3) видно, что под влиянием проводимой фототерапии параллельно с клиническим эффектом происходило значимое понижение всех субпопуляций Т-клеток. Понижения В-клеток не происходило. Аналогичная картина наблюдалась при анализе уровня цитокинов (табл. 4): после лечения происходило значимое понижение уровня всех исследованных цитокинов.
Однако при раздельной оценке показателей иммунной системы в группах с понижением и в группах с повышением пептида LL-37 были получены другие результаты. При анализе данных определения субпопуляций лимфоцитов (табл. 5) установлено, что после проведенной фототерапии в группе с повышением пептида LL-37 происходило понижение процента общего количества Т-клеток (CD3+) и Т-хелперов (CD3+CD4+). У больных с понижением уровня пептида LL-37 наблюдалась более выраженная картина изменения субпопуляционного состава лимфоцитов. Помимо понижения общего количества Т-клеток и Т-хелперов у этих больных происходило понижение Т-киллеров (CD3+CD8+), активированых Т-клеток (CD3+HLA-DR+) и Т17-клеток (CD3+C4+CD161+). Мы не склонны думать, что понижение количества Т-киллеров, активированных
Уровень цитокинов (пкг/мл) в крови больных псориазом до и после лечения в зависимости от уровня пептида LL-37
Цитокин Показатель Уровень цитокина
IFN-a до лечения 27 (12-71,3)
после лечения 21** (10-48,9)
IFN-y до лечения 32 (24-47,9)
после лечения 20,5*** (12,1-38,9)
IL-6 до лечения 25,9 (16-37)
после лечения 19*** (11-32)
IL-8 до лечения 38,5 (17,3-71,9)
после лечения 27*** (13,2-59,9)
IL-22 до лечения 25 (15-45,7)
после лечения 16*** (10-27,8)
TNF-a до лечения 46,5 (37-71)
после лечения 31*** (18,1-45)
IL-1ß до лечения 41,5 (33-59,9)
после лечения 29***(16-39)
IL-Па до лечения 15,5 (11-22,8)
после лечения 11*** (6,1-17)
Т-клеток и ТЫ7-хелперов является главной причиной отсутствия рецидивов у больных с понижением уровня LL-37. Но то, что указанные субпопуляции могут вносить свой вклад в развитие рецидивов, является несомненным. Является очевидным, что снижение CD3+HLA-DR+-клеток свидетельствует о снижении интенсивности воспалительного процесса. Большой вклад в этиопатогенез псориаза вносят СВ3+СВ8+-клеток. На модели псориатического воспаления кожи мышей SCID с помощью им-муногистохимического анализа показано, что по сравнению с нормальной кожей в пораженной коже значимо повышено количество как CD4+, так и CD8+-клеток, но последние существенно преобладали в гиперплазированном эпидермисе, и их появление четко коррелировало с развитием воспаления [15]. Велик вклад в этиопатогенез псориаза и ТЫ7-клеток.
В настоящее время ряд исследователей рассматривают псориаз вообще как ТЫ7-опосредованное заболевание [16-21]. Поэтому положительный эффект фототерапии может зависеть и от понижения количества ТЫ7-клеток. Эти клетки синтезируют провоспалительные цитокины IL-17 (A,B,C,D,E,F), IL-21, IL-22, IL-6, TNF-a, играющие ведущую роль в развитии псориатического воспаления кожи [16, 17, 22]. Абсолютное количество ТЫ7-клеток на 1 мм2 поражённой кожи существенно выше, чем на 1 мм2 здоровой кожи [23]. Маркером ТЫ7-клеток является антиген CD161. Имеется четкая корреляция между снижением экспрессии CD161 и снижением уровня PASI [24-26].
При анализе данных определения цитокинов установлено, что после проведенной фототерапии как в группе с повышением, так и в группе с понижением пептида LL-37 происходило некоторое понижение практически всех провоспали-тельных цитокинов: IFN-y, TNF-a, IL-1ß, IL-8, IL-22, IL-17a (табл. 6). Вклад всех этих цитокинов в развитие псориаза хорошо доказан. В коже больных псориазом выявляют высокий уровень Т-клеток и продуцируемых ими IFN-y и TNF-a [27, 28]. IFN-y активизирует дендритные клетки и кератиноциты к синтезу IL-1ß и IL-23. Эти цитокины, а также TGF-ß в низких дозах, являются индукторами ТЫ7-клеток, причем особая роль принадлежит IL-23, необходимого для выживания и пролиферации этих клеток [29]. ТЫ7-клетки синтезируют цитокины IL-17 (A, B, C, D, E, F), IL-21, IL-22, IL-6 и TNF-a
Таблица 5
субпопуляции лимфоцитов (%) в крови больных псориазом до и после лечения в зависимости от уровня пептида LL-37
4 Клетка Показатель Повышение Понижение
LL-37 после LL-37 после
лечения лечения
CD3
CD3CD4
CD3CD8 CD19
CD3HLA-DR CD3CD25
до лечения 76,5 (61,5-85,5) после лечения 73 (59-81,5)**
до лечения 43 (29-52,5)
после лечения
до лечения после лечения
до лечения после лечения
до лечения после лечения
40(31-48)* 29 (19-42,5) 26 (17,5-34) 8 (4,5-13) 8,5 (6-12,5) 13,5 (4,5-22,5) 11,5 (4,5-19)
до лечения 23 (8-34) после лечения 18,5 (14-30,5)
CD3CD8CD161 до лечения 30,5 (15-44) после лечения 29 (16,5-41,5)
75 (64,4-83,3) 72
(58,8-79,3)** 38,5 (32,4-50,3) 33 (29-51,6)* 33 (24,4-47) 29** 8,5 (6-14) 8 (6-11,3)* 11 (6-23,8) 9,5
(5,7-15,3)** 21 (10,7-28)
18,5 (11,7-24,3) 27,5 (13,7-42) 23
(13,4-35,6)**
** - p < 0,01, *** тесте Вилкоксона
- р < 0,001 по сравнению с уровнем до лечения в
* - p < 0,05, ** - p < 0,01 по сравнению с уровнем до лечения в тесте
Вилкоксона.
Таблица 6
Цитокины (пкг/мл) в крови больных псориазом до и после лечения в зависимости от уровня пептида LL-37
Цито- Показатель Повышение LL-37 Понижение LL-37
кины после лечения после лечения
IFN-a до лечения 26,5 (9,5-82) 27(12,1-61,1)
после лечения 28 (9-68) 20,5 (12,2-81,4)х
ifn-y до лечения 34,5 (20-48,5) 31(24-47,3)
после лечения 21,5 (15,5-42) 19 (11,7-32,7)
IL-6 до лечения 24,5 (15,4-39,5) 28 (16-37)
после лечения 19 (11,5-44) 19 (10-32)
IL-8 до лечения 41,5 (14,5-85) 38 (20,7-67,8)*
после лечения 35,8 (14,6-72,3) 25,5 (13-37)
IL-22 до лечения 25 (9-43,5) 25,6 (15,6-47,8)
после лечения 19 (11-39,7) 16 (10-25)*
TNF-a до лечения 49,5 (38-72) 43 (28,1-68,2)
после лечения 33 (20,5-44) 33 (21-46,9)
IL-1ß до лечения 47 (33,5-62,5) 39,5 (30,7-56,1)
после лечения 33 (18,5-41) 29,5 (15-40,1)
ИЛ17а до лечения 16,5 (13-26) 15(10-23)
после лечения 14 (7,5-18,5) 10 (6-16,3)
* -p < 0,05 по сравнению с уровнем до лечения в тесте Вилкоксона.
[21], которые играют ведущую роль в инициации, развитии и поддержании псориатического воспаления. Наибольшее значение в этом процессе имеет ГЬ-17А, роль которого состоит в привлечении в воспалительный очаг большого количества нейтрофилов, дендритных клеток, ТЫ - и ТЫ7-клеток.
Цитокин ГЬ-17А может оказывать прямой эффект на ке-ратиноциты, индуцируя синтез хемокинов, привлекающих нейтрофилы [30]. Этот цитокин резко усиливает в кератино-цитах синтез антимикробных пептидов (АМП) в сосочковом слое кожи - ангиогенез. Высокий уровень АМП и гиперплазия кровеносных сосудов являются характерными чертами псориатической кожи. IL-17F, имеющий выраженную гомологию с ГЬ-17А, в такой же степени индуцирует синтез кера-тиноцитами провоспалительных цитокинов
Несмотря на общую тенденцию к понижению провоспа-лительных цитокинов после проведенного лечения, статистически значимым понижение было только в группе больных с понижением уровня пептида LL-37, и это понижение касалось только двух цитокинов - ГЬ-8 и L-22 (см. табл. 4). Учитывая эти данные, следует отметить особую роль цитокина ГЬ-22 в развитии псориатического воспаления. В настоящее время имеется тенденция выделять Т-клетки, синтезирующие ГЬ-22, в отдельную субпопуляцию СБ3+СБ4+-клеток, характеризующуюся определенным набором цитокинов (ГЬ-22, ГЬ-13, ТЫЬ-а) и поверхностным иммунофенотипом [31, 32]. Главной особенностью ГЬ-22 является его способность непосредственно воздействовать на эпителиальные клетки кожи, кишечника, легких и почек, вызывая их пролиферацию. На кератиноци-тах имеются гетеродимерные рецепторы для ГЬ-22 (ГЬ-22R), экспрессия которых в псориатической бляшке увеличена. На клетках иммунной системы эти рецепторы отсутствуют.
Цитокин ГЬ-22, действуя синергически с ГЬ-17, существенно повышает экспрессию IL-22R на кератиноцитах [33]. При связывании с рецептором ГЬ-22 активирует в эпителиальных клетках транскрипционный фактор 8ТЛГ3, который опосредует практически все его эффекты. Следствием активации 8ТАГ3 является пролиферация кератиноцитов, что ведет к развитию акантоза - главного морфологического признака псориаза. Конститутивная экспрессия 8ТЛГ3 у трансгенных мышей вызывает развитие псориатических поражений кожи [34].
На основании полученных результатов мы считаем, что развитие длительной ремиссии у группы больных псориазом с понижением уровня пептида ЬЬ-37 после проведенной фототерапии связано именно с понижением после проведенной
фототерапии этого пептида и, соответственно, с понижением в организме его иммуностимулирующего эффекта. Следствием этого понижения явилось понижение основных субпопуляций Т-лимфоцитов (CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3+HLA-DR+, CD3+CD4+CD161+) и провоспалительных цитокинов (IL-22, IL-8). За исключением понижения CD3+CD4+ перечисленные изменения у больных с развившимся через 6 мес рецидивом отсутствовали.
Обсуждение полученных результатов. В настоящее время является очевидным, что аутоиммунные процессы играют ведущую роль в развитии псориаза. Об этом свидетельствует интенсивная инфильтрация кожи практически всеми клетками иммунной системы. Эти клетки активированы и интенсивно продуцируют провоспалительные цитокины. Активированными являются и кератиноциты, основные клетки эпидермиса кожи, которые также продуцируют провоспали-тельные цитокины. Также очевидно, что избыточный синтез провоспалительных цитокинов является ведущей причиной псориатического воспаления. Однако неясно, что же является первопричиной их повышенного синтеза, какой конкретный фактор является инициатором псориатического воспаления. На эту тему имеется ряд предположений, основанных на экспериментальных и клинических данных. Одно из таких предположений основано на участии в инициации и поддержании псориатического воспаления пептида LL-37 и (или) комплекса из пептида LL-37 и ауто-нуклеиновых кислот (НК).
Роль пептида LL-37 в развитии псориатического воспаления впервые была установлена Lande R. с соавт. [13]. Ими было выявлено, что экстракт из кожи больного псориазом, но не из здоровой кожи или кожи больного атопическим дерматитом, вызывал в культуре плазмацитоидных дендритных клеток (pDC) мощный синтез IFN-a. С помощью методов препаративной химии было доказано, что одним из компонентов экстракта был пептид LL-37 и антитела к пептиду LL-37 полностью отменяли способность экстракта индуцировать в культуре pDC синтез IFN-a. Другим компонентом экстракта псориати-ческой кожи являлась ауто-ДНК. При появлении во внеклеточном пространстве свободных НК пептид LL-37, находящийся во всех тканевых жидкостях организма, мгновенно образует с ними стабильный и устойчивый к действию нуклеаз комплекс, основанный на электростатическом взаимодействии. В модельных экспериментах in vitro показано, что искусственные комплексы LL-37/ДНК и LL-37/РНК являются мощными индукторами гантеза IFN-a в pDC. С помощью ингибиторного анализа с использованием коротких олигонуклеотидов, блокирующих функции соответствующих TLR, показано, что синтез IFN-a, индуцированный комплексами ДНК/КЬ-37 и РНК/ LL-37, является результатом активации соответственно TLR-9 и TLR7 сигнальных путей [13, 14]. Характер активации миело -идных дендритных клеток (mDC) комплексом LL-37/РНК существенно отличается от активации pDC. Комплекс ауто-РНК/ LL-37 вызывает в mDC синтез IL-6 и TNF-a, но не IFN-a. Этот комплекс в mDC распознается TLR-8 [14].
В настоящее время накапливаются убедительные данные о том, что в инициации псориатического воспаления ведущая роль принадлежит IFN I типа. Это подтверждается экспериментальными и клиническими наблюдениями. Установлено, что на первых этапах развития псориатического воспаления дерма кожи больных интенсивно инфильтрируется pDC, синтезирующими большие количества IFN I типа. На модели ксеногенного трансплантата кожи больного псориазом показано, что ингибиция синтеза IFN-a в pDC полностью предохраняет кожу от развития псориатического воспаления [35]. Под влиянием IFN-a происходит активация на кератиноцитах IL-22R. IFN-a совместно с IL-22 активирует STAT3 и усиливает IL-22-сигналинга [36].
Нередко развитие псориаза у предрасположенных людей начинается с небольшого ранения кожи. В этом случае происходит быстрая инфильтрация раны pDC. Под влиянием НК, выделяющихся из травмированных клеток, pDC сразу же начинают синтезировать большие количества IFN I типа, необходимых для эпидермальной регенерации. Параллельно с
