CC BY
13
Взаимосвязь гомоцистеина и полиморфизмов генов фолатного обмена с клиническими исходами у пациентов с ишемической болезнью сердца и сахарным диабетом 2-го типа
Давыдчик Э.В.1, Снежицкий В.А.1, Степуро Т.Л.2, Дорошенко Е.М.1, Смирнов В.Ю.1
Гродненский государственный медицинский университет, Беларуси 2 Институт биохимии биологически активных соединений НАН Беларуси, Минск
Davydchyk E.V.1, Snezhitskiy V.A.1, Stepuro TL.2, Doroshenko E.M.1, Smirnov VYu.1
'Grodno State Medical University, Belarus 2Institute of Biochemistry of Biologically Active Compounds of the NAS of Belarus, Minsk
The interrelation of homocysteine and polymorphisms of genes of folate exchange with clinicaloutcomes in patients with coronary heart disease and diabetes mellitus type 2
Резюме. Обследовано '35 пациентов. Основную группу составили 65 пациентов с хронической ишемической болезнью сердца (ИБС) и сахарным диабетом (СД) 2-го типа, группу сравнения - 70 пациентов с хронической ИБС. руппа контроля сформирована из 30 относительно здоровых пациентов. В зависимости от наличия коронарного события (перенесенный инфаркт миокарда (ИМ), реваскуляризация миокарда) пациенты были разделены на 2 подгруппы: 'А - с ИМ и реваскуляризацией, СД 2-го типа (n=42), 'В - реваскуляризацией, СД 2-го типа (n='7), 2А - с ИМ и реваскуляризацией (n=4'), 2В - реваскуляризацией (n='6). Получены достоверные различия по уровню гомоцистеина (Нсу) между исследуемыми подгруппами и группой контроля, причем наиболее высокий уровень Нсу выявлен у пациентов с СД 2-го типа, перенесших ИМ и реваскуляриза-цию миокарда. Установлены достоверные различия между исследуемыми подгруппами и группой контроля по содержанию в плазме крови Нсу в зависимости от генотипов и аллелей полиморфных вариантов С677Т, А1298С гена MTHFR, A66G гена MTRR, A2756G гена MTR. Ключевые слова: ишемическая болезнь сердца, сахарный диабет 2-го типа, инфаркт миокарда, реваскуляризация миокарда, гомоцистеин, полиморфные варианты С677Т,А'298С гена метилентетрагидрофолатредуктазы, N66G гена метионинсинтазы-редуктазы, A2756G гена метионинсинтазы.
Медицинские новости. — 2019. — №9. — С. 39—43. Summary. '35 patients have been examined. The main group was composed of 65 patients with chronic CHD and DM type 2, the comparison group contained 70 patients with chronic CHD. The control group has included 30 relatively healthy patients. Depending on existence of coronary event (undergone myocardial infarction (MI), myocardium revascularization) the patients were divided into 2 subgroups: 'A - MI and revascularization (n=42), 'B - revascularization (n='7), 2A - MI and revascularization (n=4'), 2B - revascularization (n='6). Significant differences of the Hcy level are received between the studied subgroups and the control group, the highest Hcy level is revealed in patients wtth DM type 2 undergone MI and revascularization. Reliable differences about the content of Hcy in blood plasma depending on genotypes and alleles of polymorphic options of C677T A'298C of gene MTHFR, A66G of gene MTRR, A2756G of gene MTR are estabiished between the studied subgroups and the control group. Keywords: coronary heart disease, diabetes mellitus type 2, myocardial infarction, myocardium revascularization, homocysteine, polymorphic options С677Т, А'298С of gene MTHFR, A66G of gene MTRR, A2756G of gene MTR. Meditsinskie novosti. - 2019. - N9. - P. 39-43.
Гомоцистеин (Нсу) представляет собой деметилированное производное незаменимой аминокислоты метио-нин. Необходимое низкое содержание этой потенциально цитотоксичной аминокислоты в клетках обеспечивается путем реметилирования до метионина, транссульфирования до цистеина или путем образования окисленных форм, преимущественно дисульфидов [8, 3]. Точками приложения гипергомоцисте-инемии (ГГЦ), как фактора агрессии, могут быть эндотелиальные и гладко-мышечные клетки стенок кровеносных сосудов, тромбоциты, клетки эндотелия, липиды крови, оксид азота и факторы коагуляции [4, 7]. Повреждения структуры стенки сосудов и функции эндотелия наблюдаются и при умеренной концен-
трации Нсу в плазме крови. ГГЦ приводит к характерным для атеросклероза изменениям в стенках сосудов, помимо этого происходит нарушение регуляции сосудодвигательной функции и анти-коагулянтных свойств эндотелия [4, 15].
Цель исследования - оценить содержание Нсу и распределение генотипов и аллелей полиморфных вариантов С677Т А1298С гена метилентетрагидрофолат-редуктазы (MTHFR), A66G гена метионинсинтазы-редуктазы (MTRR), A2756G гена метионинсинтазы (MTR) у пациентов с клиническими исходами хронической ишемической болезни сердца (ИБС), ассоциированной с сахарным диабетом (СД) 2-го типа.
Материалы и методы
Обследовано 135 не состоящих в родстве пациентов мужского и жен-
ского пола, которые находились на стационарном лечении в кардиологическом отделении 1родненского областного клинического кардиологического центра. Пациенты были разделены на 2 группы. Основную группу (группа 1) составили 65 пациентов с хронической ИБС и СД 2-го типа, средний возраст - 59 (55; 61) лет. Группа сравнения (группа 2) представлена пациентами с хронической ИБС (п=70), средний возраст - 59 (53;64) лет. Группа контроля (группа 3) была сформирована из 30 человек, средний возраст - 54 (52; 56) года, не родственных между собой, без клинических проявлений ИБС, СД, артериальной гипертензии (АГ). Набор пациентов контрольной группы осуществлен на базе Поликлиники УВД Гродно. Паци-
енты 1 и 2 группы были разделены на 2 подгруппы в зависимости от наличия коронарного события (перенесенный инфаркт миокарда (ИМ), реваскуляри-зация миокарда): 1А подгруппа - ИМ и реваскуляризация, СД 2-го типа (n=42), 1В подгруппа - реваскуляризация, СД 2-го типа (n=17), 2А подгруппа - ИМ и реваскуляризация (n=41), 2В подгруппа - реваскуляризация (n=16). В план обследования пациентов входило изучение анамнеза, физикальное обследование, инструментальная и лабораторная диагностика. Длительность СД 2-го типа на момент исследования у пациентов 1 группы составила в среднем 10 лет. С целью компенсации углеводного обмена пациенты 1 группы получали препараты группы сульфонилмочевины (глибенкламид, гликлазид), бигуаниды (метформин), инсулин. Значение глики-рованного гемоглобина составило 7,2% (6,8; 7,8). Длительность ИБС у пациентов
1 группы составила 11 лет, у пациентов
2 группы - 10 лет (р>0,05). Все пациенты были ознакомлены с протоколом обследования и дали свое согласие на участие в нем. Критериями включения в исследование пациентов мужского и женского пола были: верифицированный диагноз хронической ИБС, СД 2-го типа, отсутствие сопутствующих заболеваний в фазе обострения. В исследование не включались пациенты с наличием СД
1-го типа, декомпенсации СД 2-го типа, печеночной и почечной недостаточности, заболеваний щитовидной железы с нарушением функции, а также с наличием тяжелых сопутствующих соматических и инфекционных заболеваний в стадии декомпенсации патологического процесса, острого коронарного синдрома.
Уровень общего Hcy определяли в плазме венозной крови. Использованный метод основан на предколоночной дериватизации SH-содержащих соединений с аммоний-7-фторбензол-
2-оксо-1,3-диазола-4-сульфонатом с последующим разделением полученных производных методом обращен-но-фазовой ВЭЖХ с изократическим элюированием. Для восстановления тиолов из дисульфидов и высвобождения связанных с белками тиолов использовали трис-(карбоксиэтил)-фосфин гидрохлорид. При определениях использовались приборы ВЭЖХ Agilent 1200 в конфигурации, включа-
Таблица 1 Уровень Нсу у пациентов 1А, 2А подгрупп, 3 группы
Показатель Подгруппа 1А (n=42) Подгруппа 2А (n=41) 1руппа 3 (n=30) Р 1А-2А Р 1А-3 Р 2А-3
Нсу, мкмоль/л 14,07 (10,99; 17,69) 10,23 (8,08; 15,02) 8,37 (6,79; 11,44) р=0,01 р<0,05 нд
Примечание: здесь и в табл. 2-6 нд - недостоверные межгрупповые различия.
Таблица 2 Уровень Нсу у пациентов 1В, 2В подгрупп, 3 группы
Показатель Подгруппа 1В (n=17) Подгруппа 2В (n=16) 1руппа 3 (n=30) Р 1В-2В Р 1В-3 Р 2В-3
Нсу, мкмоль/л 9,84 (7,96; 15,47) 13,94 (8,05; 16,31) 8,37 (6,79; 11,44) нд нд р=0,007
Таблица 3
Распределение генотипов и аллелей полиморфных вариантов C677T, A1298C гена MTHFR, A66G гена MTRR, A2756G гена MTR у пациентов 1А, 2А подгрупп и 3 группы
Полиморфизм, генотип
1А подгруппа (n=42), абс. (%)
2А подгруппа (n=41), абс. (%)
3 группа (n=30), абс. (%)
р
1А-2А
1А-3
2А-3
MTHFR С677Т
СС 12 (28,6) 21 (51,2) 15 (50) р=0,04 нд нд
СТ 16 (38,1) 15 (36,6) 14 (46,7) нд нд нд
ТТ 14 (33,3) 5 (12,2) 1 (3,3) р=0,03 р=0,002 нд
Аллель С 40 (47,6) 57 (69,5) 44 (73,3) р=0,005 р=0,002 нд
Аллель Т 44 (52,4) 25 (30,5) 16 (26,7) р=0,005 р=0,002 нд
MTHFR А1298С
АА 18 (42,9) 17 (41,5) 18 (60) нд нд нд
АС 14 (33,3) 15 (36,6) 12 (40) нд нд нд
СС 10 (23,8) 9 (21,9) 0 нд р=0,004 р=0,008
Аллель А 50 (59,5) 49 (59,8) 48 (80) нд р=0,01 р=0,01
Аллель С 34 (40,5) 33 (40,2) 12 (20) нд р=0,01 р=0,01
MTRR A66G
AA 11 (26,2) 9 (22) 5(16,7) нд нд нд
AG 15 (35,7) 24 (58,5) 18 (60) р=0,04 нд нд
GG 16 (38,1) 8 (19,5) 7 (23,3) нд нд нд
Аллель А 37 (44) 42 (51,2) 28 (46,7) нд нд нд
Аллель G 47 (56) 40 (48,8) 32 (53,3) нд нд нд
MTR A2756G
AA 27 (64,3) 25 (61) 18 (60) нд нд нд
AG 12 (28,6) 13 (31,7) 8 (26,7) нд нд нд
GG 3 (7,1) 3 (7,3) 4 (13,3) нд нд нд
Аллель А 66 (78,6) 63 (76,8) 44 (73,3) нд нд нд
Аллель G 18 (21,4) 19 (23,2) 16 (26,7) нд нд нд
Примечание: здесь и в табл. 4-6 нд - недостоверные межгрупповые различия.
ющей 4-канальную систему подачи растворителя с вакуумным дегазатором, термостатируемый автосамплер, термостат колонок, детектор флуоресценции, колонка Zorbax Eclipse Plus C18,3,5 мкм, 2,1x150 мм. Прием данных и обработка хроматограмм проводились с помощью программы Agilent ChemStation C01.03 с ручной коррекцией базовой линии в режиме расчета по внутреннему стандарту с использованием одно-
уровневой калибровки [2]. Определение полиморфных вариантов С677Т А1298С гена MTHFR, A66G гена MTRR, A2756G гена MTR осуществляли с помощью метода полимеразной цепной реакции с детекцией результатов в режиме реального времени с применением набора реагентов производства «Литех» (Россия). Выделение геномной ДНК человека проводилось набором реагентов «ДНК-экспресс-кровь» производства
Щ1П4 Распределение генотипов и аллелей полиморфных вариантов Cb// 1,
AI298C гена M 1HFR, AbbG гена M 1 rR, A2/5bG гена M 1 r
у пациентов 1В, 2В подгрупп и 3 группы
Полиморфизм, 1В под- 2В под- 3 группа Р
генотип группа группа (n=30), 1В-2В 1В-3 2В-3
(n=17), (n=16), абс. (%)
абс. (%) абс. (%)
MTHFR С677Т
СС 8 (47) 8 (50) 15 (50) нд нд нд
СТ 8 (47) 5 (31,3) 14 (46,7) нд нд нд
ТТ 1 (6) 3 (18,7) 1 (3,3) нд нд нд
Аллель С 24 (70,6) 21 (65,6) 44 (73,3) нд нд нд
Аллель Т 10 (29,4) 11 (34,4) 16 (26,7) нд нд нд
MTHFR А1298С
АА 6 (35,3) 9 (56,2) 18 (60) нд нд нд
АС 7 (41,2) 6 (37,5) 12 (40) нд нд нд
СС 4 (23,5) 1 (6,3) 0 нд р=0,01 нд
Аллель А 19 (55,9) 24 (75) 48 (80) нд р=0,02 нд
Аллель С 15 (44,1) 8 (25) 12 (20) нд р=0,02 нд
MTRR A66G
AA 3 (17,7) 5 (31,25) 5(16,7) нд нд нд
AG 10 (58,8) 6 (37,5) 18 (60) нд нд нд
GG 4 (23,5) 5 (31,25) 7 (23,3) нд нд нд
Аллель А 16 (47,1) 16 (50) 28 (46,7) нд нд нд
Аллель G 18 (52,9) 16 (50) 32 (53,3) нд нд нд
MTR A2756G
AA 8 (47,1) 12 (75) 18 (60) нд нд нд
AG 7 (41,2) 4 (25) 8 (26,7) нд нд нд
GG 2 (11,7) 0 4 (13,3) нд нд нд
Аллель А 23 (67,6) 28 (87,5) 44 (73,3) нд нд нд
Аллель G 11 (32,3) 4 (12,5) 16 (26,7) нд нд нд
«Литех» (Россия). Для статистического анализа данных использовались программы STATISTICA 10.0 и Microsoft Excel. Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей у разных групп пациентов осуществлялся с помощью точного критерия Фишера. Количественные данные, распределение которых не являлось нормальным, представлялись в виде медианы (верхний/нижний квартили). Для оценки различий количественных признаков применялся непараметрический дисперсионный анализ Краскела - Уол-лиса. Различия считались достоверными при значении р<0,05.
Результаты и обсуждение
Уровень Нсу в плазме крови был достоверно выше у пациентов 1А подгруппы (14,07 мкмоль/л) по сравнению с пациентами 2А подгруппы и группы контроля (табл. 1).
Достоверные различия (р=0,007) по уровню Нсу были получены между пациентами 2В подгруппы (13,94 мкмоль/л) и группы контроля (8,37 мкмоль/л) (табл. 2).
По результатам молекулярно-генети-ческого исследования полиморфных вари-
антов исследуемых генов в общей выборке пациентов выявлены 3 вида генотипов: полиморфизм С677Т гена MTHFR (СС -гомозиготный дикий, СТ - гетерозиготный, ТТ - гомозиготный мутантный); полиморфизм А1298С гена MTHFR (АА - гомозиготный дикий, АС - гетерозиготный, СС -гомозиготный мутантный); полиморфизм A66G гена MTRR (АА - гомозиготный дикий, AG - гетерозиготный, GG - гомозиготный мутантный); полиморфизм А2756G гена MTR (АА - гомозиготный дикий, AG - гетерозиготный, GG - гомозиготный мутантный). Распределение частот генотипов соответствовало равновесию Харди - Вайнберга.
В таблице 3 представлены результаты генотипирования исследуемых пациентов по полиморфным вариантам изучаемых генов. В таблице 4 - результаты распределения и сравнительного анализа генотипов и аллелей полиморфных вариантов изучаемых генов у пациентов 1В, 2В подгрупп и группы контроля.
При выполнении сравнительного анализа уровня Нсу получены достоверные различия по наличию генотипа СТ,
аллелям С и Т полиморфизма С677Т гена MTHFR между исследуемыми пациентами (табл. 5).
В таблице 6 представлены результаты уровня Нсу у пациентов 1В, 2В подгрупп и группы контроля в зависимости от генотипов и аллелей полиморфизмов исследуемых генов.
В различных исследованиях показано, что ГГЦ является независимым фактором риска развития ИБС [21]. Нсу - сильный мутаген и специфически участвует в развитии атеросклероза благодаря усиленной пролиферации гладкомышечных клеток. Избыток Нсу способствует активации XII и V факторов, а также экспрессии тканевого фактора. При этом нарушается высвобождение естественных ингибиторов коагуляции и антиагрегантов - протеина С, ингибитора внешнего пути свертывания крови, снижается гликозаминогликан-зависимая активация антитромбина III, подавляется активность тромбомодулина. Обозначенные атерогенные и тромбофилические эффекты в совокупности определяют хроническую эндотелиальную дисфункцию при ГГЦ [10, 23]. Увеличение в крови содержания Нсу приводит к снижению продукции сульфатированных глико-заминогликанов (мукополисахариды), активирующих плазменную липопроте-идлипазу, что в совокупности с прямым активирующим действием на ДНК гладких мышечных клеток субэндотелия снижает эластичность внутрисосудистой выстилки. По данным S. Guba, совокупность этих воздействий усиливает рост гладких мышечных клеток сосудов в сочетании с ингибированием роста эндотелиальных клеток [5]. Изменение уровня Нсу в плазме крови рассматривается как независимый фактор риска усиления тяжести течения среди больных СД. Существуют также указания на то, что ГГЦ в ряде случаев сочетается с инсулинорезистентностью. Предполагается, что высокие концентрации Нсу повреждают структуру и нарушают функцию митохондрий, а также влияют на экспрессию митохондриальных генов у больных с инсулинорезистентностью [11]. ГГЦ за счет окислительного стресса способствует дисфункции ß-клеток, значительно ускоряя переход инсулино-резистентности в СД 2-го типа [1]. Также имеются сведения о высокой частоте развития рестенозов коронарных арте-
Таблица 5 Уровень Нсу в зависимости от генотипов и аллелей полиморфных
вариантов С6771, А1298С гена M 1HFR, A66G
гена MTRR, A2756G гена MTR у пациентов 1А, 2А подгрупп и 3 группы |
Полимор- 1А подгруп- 2А подгруп- 3 группа р
физм, па (n=42) па (n=41) (n=30) 1А-2А 1А-3 2А-3
генотип
MTHFR С677Т
СС 9,28 9,61 8,77 нд нд нд
(7,61; 11,18) (7,20; 11,68) (6,57; 12,19)
СТ 15,72 11,80 8,16 нд р<0,05 нд
(12,09; 16,69) (8,90; 15,08) (7,26; 11,44)
ТТ 18,26 16,68 4,78 нд нд нд
(14,08; 19,92) (11,31; 17,59)
Аллель С 12,01 10,12 8,56 нд р<0,05 нд
(9,28; 16,03) (7,55; 13,57) (7,23; 11,44)
Аллель Т 16,24 12,57 7,76 р=0,02 р<0,05 р=0,007
(12,25; 18,31) (9,99; 16,83) (7,23; 11,44)
MTHFR А1298С
АА 14,07 11,80 8,67 нд р<0,05 р=0,03
(11,12; 17,11) (9,61; 15,07) (6,79; 11,44)
АС 12,01 10,19 7,97 нд нд нд
(9,16; 16,17) (7,48; 13,79) (7,1; 11,81)
СС 17,95 9,60 - нд - -
(11,37; 21,06) (7,20; 12,47)
Аллель А 12,28 10,49 8,37 нд р<0,05 р=0,04
(10,96; 16,24) (8,49; 15,05) (6,79; 11,44)
Аллель С 13,28 10,12 7,97 р=0,03 р=0,008 нд
(9,27; 19,04) (7,34; 13,13) (7,10; 11,81)
MTRR A66G
AA 12,31 7,63 8,19 нд р=0,04 нд
(9,34; 18,31) (5,46; 13,34) (7,76; 8,56)
AG 15,90 10,95 7,73 нд р<0,05 р=0,007
(11,94; 17,59) (9,60; 15,88) (6,42; 10,84)
GG 12,17 10,28 10,76 нд нд нд
(11,02; 17,26) (7,34; 15,0) (7,63; 13,29)
Аллель А 15,10 10,23 7,76 р=0,03 р<0,05 р=0,02
(10,99; 17,69) (8,90; 15,02) (6,42; 10,84)
Аллель G 14,08 10,49 8,77 нд р<0,05 р=0,03
(11,12; 17,59) (9,43; 15,88) (6,79; 11,44)
MTR A2756G AA
AG 15,54 11,37 7,97 нд р<0,05 р=0,04
(11,12; 18,29) (9,60; 15,08) (6,79; 11,80)
GG 13,08 8,08 8,67 р=0,03 р=0,02 нд
(11,28; 17,17) (5,92; 11,97) (7,1; 11,1)
Аллель А 9,34 10,75 9,09 нд нд нд
(7,81; 10,92) (9,81; 20,40) (6,97; 10,64)
Аллель G 14,29 10,21 8,37 р<0,05 р<0,05 нд
(11,19; 18,22) (7,63; 15,02) (6,79; 11,80)
11,37 9,81 8,67 нд р=0,008 нд
(9,34; 16,64) (6,56; 12,88) (7,10; 10,64)
рий после ангиопластики у лиц с ГГЦ. При уровне Нсу <9 мкмоль/л рестенозы возникают почти в 2 раза реже, чем у пациентов с более высоким уровнем Нсу [20]. При этом основными генетическими факторами риска развития ГГЦ являются полиморфные маркеры генов фолатно-гомоцистеино-метионинового обмена [16, 15]. Мутация 677С>Т в гене MTHFR
ведет к снижению функциональной активности белка MTHFR, что выражается в повышенном уровне Нсу плазмы крови [12]. При изучении полиморфизма C677T гена MTHFR у 384 здоровых лиц, 260 пациентов с СД и 348 пациентов с атеросклерозом без СД выявлено, что у носителей мутантной аллели MTHFR C677T достоверно чаще в анамнезе
был предшествующий ИМ [24]. Мета-анализ 30 исследований, включивших 8140 пациентов с ИМ и 10522 здоровых лиц, показал, что полиморфизм MTHFR С677Т ассоциирован с риском развития ИМ у европейцев молодого и зрелого возраста [25]. В работах других исследователей не было выявлено ассоциаций между носительством полиморфизма С677Т гена MTHFR и риском развития сердечно-сосудистых заболеваний. К. КоШпд и соавт. провели исследование типа «случай - контроль», в которое вошли 2121 пациент с ангиографически подтвержденной ИБС и 617 пациентов группы контроля. После учета классических факторов риска ни полиморфизм гена MTHFR С677Т (р=0,38), ни полиморфизм МТ^ А1298С (р=0,13), ни уровень Нсу (р=0,89) не проявили себя как независимые факторы риска развития ИБС [13].
В последнее время появляются работы по оценке влияния полиморфизмов других генов, участвующих в метаболизме Нсу, на риск развития ИБС. Так, в исследование R. Gueant-Rodriguez были включены 530 пациентов с ИБС, группу контроля составили 248 больных. Полиморфизм MTRR A66G являлся независимым предиктором развития ИБС [9]. Одним из важнейших функциональных полиморфных маркеров гена MTR является А2756G. Частота предрасполагающего G-аллеля широко варьируется у разных рас: так, у европейцев частота распространения составляет 20%. Для данного полиморфного маркера показана ассоциация с риском развития как ГГЦ, так и заболеваний сосудистого ге-неза [18, 6]. Большинство исследований свидетельствуют о сниженном уровне Нсу чаще при гомозиготном носитель-стве полиморфизма A2756G гена MTR, чем при гетерозиготном [17, 19, 22].
Выводы:
1. Получены достоверные различия по уровню Нсу между исследуемыми подгруппами пациентов и группой контроля, причем наиболее высокий уровень Нсу обнаружен у пациентов с СД 2-го типа, перенесших ИМ и реваскуляризацию миокарда (14,07 мкмоль/л). Достоверно выше (р=0,007) был уровень Нсу у пациентов с выполненной реваскуляризацией миокарда (13,94 мкмоль/л) по сравнению с пациентами контрольной группы (8,37 мкмоль/л).
Таблица 6 Уровень Нсу в зависимости от генотипов и аллелей полиморфных
вариантов С6771, А1298С гена M 1HFR, A66G гена
MTRR, A2756G гена MTR у пациентов 1В, 2В подгрупп и 3 группы
Полимор- 1В подгруппа 2В подгруппа 3 группа р
физм, (n=17) (n=16) (n=30) 1В-2В 1В-3 2В-3
генотип
MTHFR С677Т
СС 8,47 11,30 8,77 нд нд нд
(6,48; 9,45) (8,05; 15,01) (6,57; 12,19)
СТ 16,30 14,19 8,16 нд р=0,01 р=0,04
(13,16; 18,85) (14,06; 15,58) (7,26; 11,44)
ТТ 8,67 17,34 4,78 - нд -
(6,32; 17,59)
Аллель С 10,63 13,82 8,56 нд нд р=0,01
(7,38; 16,30) (8,16; 15,58) (7,23; 11,44)
Аллель Т 15,47 14,89 7,76 нд р=0,01 р=0,02
(11,42; 18,77) (10,46; 17,37) (7,23; 11,44)
MTHFR А1298С
АА 14,69 11,97 8,67 нд р=0,04 нд
(19,84; 18,94) (7,95; 16,21) (6,79; 11,44)
АС 11,42 14,82 7,97 нд нд нд
(7,96; 17,13) (8,16; 17,41) (7,1; 11,81)
СС 7,73 13,82 - нд - -
(6,35; 8,87)
Аллель А 13,92 14,06 8,37 нд р=0,02 р=0,01
(8,97; 17,13) (7,95; 16,42) (6,79; 11,44)
Аллель С 8,97 14,06 7,97 нд нд р=0,03
(6,79; 14,89) (8,16; 17,40) (7,10; 11,81)
MTRR A66G
AA 13,92 14,06 8,19 нд нд нд
(6,14; 17,13) (11,97; 16,21) (7,76; 8,56)
AG 10,19 12,23 7,73 нд нд нд
(7,96; 18,77) (8,16; 17,41) (6,42; 10,84)
GG 9,45 14,19 10,76 нд нд нд
(7,93; 12,36) (7,95; 15,58) (7,63; 13,29)
Аллель А 11,42 13,82 7,76 нд нд р=0,01
(7,96; 17,13) (8,16; 16,42) (6,42; 10,84)
Аллель G 9,45 13,82 8,77 нд нд р=0,03
(7,96; 15,47) (7,95; 17,34) (6,79; 11,44)
MTR A2756G
AA 14,40 14,01 7,97 нд р=0,01 р=0,01
(10,63; 16,30) (9,29; 16,78) (6,79; 11,80)
AG 7,96 1,11 8,67 нд нд нд
(6,14; 8,97) (7,06; 15,24) (7,1; 11,1)
GG 13,91 - 9,09 - нд -
(9,06; 18,77) (6,97; 10,64)
Аллель А 9,84 13,94 8,37 нд нд р=0,01
(6,79; 15,47) (8,05; 16,31) (6,79; 11,80)
Аллель G 8,67 11,11 8,67 нд нд нд
(6,17; 9,06) (7,06; 15,24) (7,10; 10,64)
2. Изучено распределение частот генотипов и аллелей полиморфизмов С677Т А1298С гена MTHFR, A66G гена MTRR, А2756G гена MTR у исследуемых пациентов. Получены достоверные различия по генотипам СС и ТТ, а также аллелям С и Т полиморфизма С677Т гена MTHFR между пациентами 1А и 2А
подгрупп, а также пациентами 1А подгруппы и группы контроля. Достоверно чаще встречались генотип СС и аллели А и С полиморфизма А1298С гена MTHFR у пациентов 1А и 2А подгрупп. Частота встречаемости гетерозиготного генотипа AG полиморфизма A66G гена MTRR достоверно выше у пациентов 2А подгруппы
в сравнении с пациентами 1А подгруппы. Достоверных различий по распределению генотипов и аллелей полиморфизма A2756G гена MTR между исследуемыми пациентами получено не было. При выполнении сравнительного анализа генотипа СС и аллелей А и С полиморфизма А1298С гена MTHFR получены достоверные различия между пациентами подгруппы 1В и группой контроля.
3. Установлены достоверные различия по содержанию в плазме крови Нсу в зависимости от генотипов и аллелей полиморфных вариантов С677Т А1298С гена MTHFR, A66G гена MTRR, A2756G гена MTR у исследуемых пациентов.
Л И Т Е Р А Т У Р А
1. Давыдчик Э.В., Снежицкий В.А., Никонова Л.В. // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2015. - №1 (49). - С.9-13.
2. Дорошенко Е.М., Снежицкий В.А., Лелевич В.В. // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. - 2017. - №5 (15). - С.551-556.
3. Снежицкий В.А., Пырочкин В.М. // Клинические аспекты гипергомоцистеинемии. - Гродно, 2011. - 292 с.
4. Albert CM. // JAMA. - 2008. - Vol.299. - P.2027-2036.
5. Borowczyk К., Shih D.M., Jakubowski H. // J. Alzheimers Dis. - 2012. - Vol.2, N30. - P.225-231.
6. Chen L., Liu L., Hong K. // DNA Cell Biol. - 2012. -Vol.31, N2. - P.238-249.
7. D'Angelo A., Coppola A., Modonna P. // Thromb. Haemost. - 2000. - Vol.83. - P.563-570.
8. Ebbing M. // JAMA. - 2008. - Vol.300. - P.795-804.
9. Guеant-Rodriguez R.M., Juilliеre Y, Candito M. // Thromb. Haemost. - 2005. - Vol.94. - P.510-515.
10. Guthikonda S., Haynes W.G. // Curr. Atheroscler. Rep. - 2006. - Vol.8, N2. - P.100-106.
11. Кауе J., Stanton K., Mreann W., Vasicaran S. // Clin. Sci. - Vol.102, N6. - P.631-637.
12. Khandanpour N. // J. Vasc. Surg. - 2009. - Vol.49, N3. - P.711-718.
13. tolling K., Ndrepepa G., Koch W. // Am. J. Cardiol. - 2004. - Vol.15, N93. - P.1201-1206.
14. Koubaa N., Nakbi A., Smaoui M. // Clin. Biochem. - 2007. - Vol.40, N13-14. - P.1001-1007.
15. Lonn E. // JAMA. - 2008. - Vol.299. - P.2086-2087.
16. Mello A.L., Cunha S.F, Foss-Freitas M.C., Vannucchi H. // Arq. Bras. Endocrinol. Metabol. -2012. - Vol.56, N7. - P.429-434.
17. Miltenberger-Miltenyi G., Laccone F. // Hum. Mutat. - 2003. - Vol.22, N2. - P.107-115.
18. Pangilinan FI., Molloy A.M., Mills J.L. // BMS Med. Genet. - 2012. - Vol.13. - P.62-69.
19. Scarano M.I., Strazzullo M., Matarazzo R. // J. Cell. Physiol. - 2005. - Vol.204, N1. - P.21-35.
20. Schnyder G., Roffi M., Flammer Y // Eur. Heart J. - Vol.23. - P.726-733.
21. Shenoy V, Mehendale V, Prabhu K. // Indian J. Clin. Biochem. - 2014. - Vol.29, N3. - P.339-344.
22. Shibata K.R., Aoyama T, Shima Y // Stem. Cells. - 2007. - Vol.25, N9. - P.2371-2382.
23. Steed M.M., Tyagi S.C. // Antioxid Redox Signal. -2011. - Vol.15, N7. - P.1927-1943.
24. Szabо V // Interv. Med. Appl. Sci. - 2013. - Vol.5, N1. - P.46-51.
25. Xuan C. // Arch. Med. Res. - 2011. - Vol.42, N8. -P.677-685.
Поступила '7.04.20'9г.
