Взаимодействие клебсиелл с коммерческим бактериофагом в кишечнике детей Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

■ ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ

Н.Н. Зинин-Бермес, О.И. Кочемасова, Р.Н. Муратова, Н.А. Ильина, Г.И. Вязьмина

Кемеровская государственная медицинская академия, МУЗ Детская клиническая больница № 7,

г. Кемерово

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КЛЕБСИЕЛЛ С КОММЕРЧЕСКИМ БАКТЕРИОФАГОМ В КИШЕЧНИКЕ ДЕТЕЙ

Клебсиеллы, циркулирующие среди детей в Кузбассе, как правило, резистентны по отношению к коммерческому бактериофагу (Микроген). Даже редкие культуры этих микробов, отнесенные больничными лабораториями к чувствительным, содержат примесь резистентных особей. При фагировании детей, в содержимом их кишечника количество резистентных к препарату клебсиелл не уменьшается, но сокращается количество чувствительных. Таким образом, в местных условиях применение коммерческого бактериофага не может быть признано действенным способом уменьшения количества клебсиелл в кишечнике детей, но опасно из-за селекции резистентных особей этих микробов, и без того распространенных.

Ключевые слова: клебсиелла, бактериофаг, резистентность.

Klebsiella circulating among children in Kuzbass are as a rule resistant in relation to commercial bacteriophag (Microgene). Even rare cultures of these microbes referred to sensitive ones by hospital laboratories contain admixtures of resistant specimens. While phaging children the amount of resistant to Klebsiella preparations does not decrease in the content of their intestine, but the amount of sensitive ones is reducing if they were there. Thus under the local conditions the applying of commercial bacteriophage cannot be recognized as an effective method of reducing the number of Klebsiella in children, s intestine, but it is dangerous because of selection of resistant specimens of these microbes which are widespread besides.

Key words: klebsiella, bacteriophag, resistans.

Клебсиеллы часто в большом количестве (104105 на 1 гр. фекалий) выделяются как у здоровых детей, так и в случаях редко дифференцируемых дисбактериозов и инфекций [2, 3, 4]. В связи с трудностью установления причин, приводящих к усиленному размножению клебсиелл в разных случаях диарей, всегда желательно медикаментозное подавление этих усиленно размножающихся микробов. Снижение концентрации этих бактерий в организме ребенка с помощью антибиотиков требует осторожности, т.к. при этом страдает нормальная микрофлора. Теоретически наилучшим средством против клебсиелл является бактериофаг из-за узкой специфичности его действия. Однако, по данным больничных лабораторий, в местных условиях клебсиеллы, чувствительные к фагу, встречаются редко. Это проверяют in vitro. Но не известно, так ли это в организме ребенка.

Цель работы — установить, насколько обоснованно использование коммерческого препарата фага для лечения клебсиеллезов у детей в Кузбассе.

Задачи работы:

1) Установить, влияет ли на концентрацию клебсиелл в кишечнике детей применение коммерческого препарата бактериофага.

2) Установить, влияет ли применение фага на количественное соотношение чувствительных и резистентных особей клебсиелл в кишечнике детей.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Для опытов использовали фекалии детей с концентрацией в них клебсиелл 104-105 на 1 гр. Отбор пациентов был труден, поскольку необходимо было работать только с детьми, состояние здоровья которых допускало не применение других антимикробных средств на протяжении 3-4 дней. Поэтому кандидатуры рассматривались только с участием лечащих врачей. В испражнениях детей определяли концентрацию клебсиелл и количественное соотношение чувствительных и резистентных особей этих микробов в популяции.

Последнее определяли так: из изолированных колоний в первичном посеве получали 25 чистых культур. Трехчасовые культуры испытывали с коммерческим бактериофагом (Микроген поливалентный, очищенный, жидкий, С. 43 К 896, годен до апреля 2006 г.) по несколько модифицированному способу М.Н. Фишера [1]. Затем в течение 3-4 дней детей поили клебсиеллезным фагом по приложенной к

№3(22) 2005 с/^ть и^пя вс7|узбассе

ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ КЛЕБСИЕЛЛ С КОММЕРЧЕСКИМ _________БАКТЕРИОФАГОМ В КИШЕЧНИКЕ ДЕТЕЙ

нему инструкции и повторно определяли концентрацию и количественное соотношение чувствительных и резистентных особей клебсиелл в фекалиях.

Использованные культуры — K. pneumonia и K. uxytoca.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Больничной лабораторией признаны резистентными к бактериофагу 27 культур клебсиелл, выделенных от детей. Однако, при исследовании по 25 культур, полученных из отдельных колоний в первичном посеве испражнений, оказалось, что только у 22 детей все особи клебсиелл были фагорезистентными. У сравнительно небольшого количества обследованных детей вместе с резистентными были в кишечнике и чувствительные к фагу особи. Понятно, что при определении чувствительности к фагу только одной субкультуры бактерий, оставленной для дальнейшего изучения, она окажется, скорее всего, резистентной при редкой встречаемости в местных условиях чувствительных вариантов.

Культуры, выделенные у трех детей, признаны лабораторией больницы чувствительными к фагу. Но при испытании по 25 субкультур от каждого ребенка во всех случаях была обнаружена и примесь резистентных особей.

В организменных популяциях 13 детей была примесь чувствительных к фагу клебсиелл.

В практическом плане нужен был эксперимент, способный показать, может ли фаготерапия в чистом виде, т.е. без применения других антимикробных средств, повлиять на содержание клебсиелл в фекалиях детей, и будет ли при этом меняться количественное соотношение резистентных и чувствительных особей этих микробов.

У трех детей с концентрацией клебсиелл в фекалиях 105 на 1 гр. и двух детей с концентрацией 104 на 1 гр., при исследовании 25 субкультур от каждого пациента, наличие чувствительных к фагу особей бактерий не выявлено. После 4-дневного фа-

гирования количественное содержание клебсиелл в их фекалиях не изменилось, и все особи этих микробов в организменных популяциях оставались резистентными. Таким образом, коммерческий препарат фага в кишечнике детей на соответствующие бактерии не действовал, как и в опытах in vitro.

В аналогичных опытах с четырьмя детьми, у которых в кишечнике были как резистентные, так и чувствительные к фагу клебсиеллы, установлено, что фагирование несколько снижало концентрацию бактерий в кишечном содержимом (с 105 до 104 или с 104 до 103). Количество же чувствительных особей в организменных популяциях снижалось в 2-3 и даже в 9 раз.

Приведенные данные показывают, что в кишечнике детей имеющийся в продаже бактериофаг «выедает» только чувствительные к нему особи бактерий в популяции и поэтому в местных условиях не может рассматриваться как пригодный для надежного снижения концентрации соответствующих бактерий в кишечнике. Более того, применение этого фага в Кузбассе опасно, поскольку он помогает селекции фагорезистентных бактерий, и без того распространенных.

ЛИТЕРАТУРА:

1. Алешукина, А.В. Медицинская микробиология /А.В. Алешукина. -Ростов-на-Дону, 2003. - 108 с.

2. Белобородов, В.Б. Проблема антибактериальной терапии инфекций в отделениях реанимации и интенсивной терапии с позиции доказательной медицины /В.Б. Белобородов //Consil. med. -2002. - Т. 4, № 1. - С. 31-37.

3. Аутосерологические исследования при кишечных заболеваниях у детей младших возрастов и назначение рациональной антимикробной терапии /Н.Н. Зинин-Бермес, Л.П. Осипова, В.А. Громова и др. //Мать и дитя в Кузбассе. - 2004. - № 3. - С. 20-21.

4. Сурикова, Е.В. О распространенности клебсиелл у жителей Кемеровской области /Е.В. Сурикова, Л.А. Леванова //Медицина в Кузбассе: Спецвыпуск № 5-2003: Проблемы гигиены и эпидемиологии в Сибири. - С. 97.

УЧЕНЫЕ ВЫЯСНИЛИ, ЧТО ДЕТЯМ ДО 5-ТИ ЛЕТ НУЖНО ДАВАТЬ СВОБОДУ Детский психолог Мирелла Джоуссмет из Монреальского университета исследовала, как зависит учеба младших школьников от особенностей дошкольного воспитания.

В ходе работы сначала проводились интервью с матерями пятилетних детей. В них выяснялся уровень автономности, который предоставлялся детям: часто ли у них бывает возможность самостоятельного выбора, возлагается ли на них какая-то ответственность. Затем, через три года, оценивалась социальная адаптация детей в школе и их успехи в чтении и математике. Результаты исследования показывают, что дети, которым родители предоставляли в дошкольном возрасте больше самостоятельности, лучше справляются с учебой. Этот результат не зависит от социально-экономического положения семьи, пола ребенка и уровня его 10.

Источник: www.medolina.ru.

с/^ть и^пя Вс^узбассе №3(22) 2005

Л