сыворотками, 2 — дизентерийными и 1 — сальмонеллезными и дизентерийными. После пересевов в течение 6 мес 45 культур подверглись реверсии, все они принадлежали к непатогенным представителям семейства кишечных бактерий, за исключением 2 культур, типированных как сальмонеллы.
Выводы
1. Используемые для орошения промышленно-бытовые сточные воды после биологической очистки характеризуются относительно небольшим микробным числом, низким ко-лн-титром и наличием патогенных микроорганизмов — сальмонелл и шигелл.
2. Промышленно-бытовые стоки при внесении их в почву меняют соотношение сани-тарно-показательных микроорганизмов. При значительном снижении титра бактерий группы кишечной палочки (0,0001) клостридии перфрингенс и протей в ряде случаев не высеваются (>1).
3. На участках, подвергшихся в течение 2 лет орошению сточными водами, наблюдается накопление микроорганизмов группы кишечной палочки с изменением биоценоза почвы.
4. Учитывая нарушение биоценоза орошаемой стоками почвы, следует установить нормы нагрузки и время использования под полив постоянно действующих полей орошения, а также время, необходимое для полного самоочищения этих участков.
Поступила 4/XI 1974 г.
УДК в 14.37:в78.7:[57в.851.49+576.851.262
М. JI. Б рыск U Н
ВЫЖИВАЕМОСТЬ МИКРООРГАНИЗМОВ КИШЕЧНОЙ ГРУППЫ И ЗОЛОТИСТОГО СТАФИЛОКОККА НА СИНТЕТИЧЕСКИХ ПОЛИМЕРНЫХ МАТЕРИАЛАХ
Всесоюзный научно-исследовательский институт дезинфекции и стерилизации, Москва
Нами изучена выживаемость золотистого стафилококка, кишечной палочки, возбудителей брюшного тифа и дизентерии Зонне на тест-объектах из различных пластмасс — полиэтилена,1 полипропилена, полистирола, поливинилхлорида, фторопласта, полиметил-метакрилата, полиформальдегида, полиамида, поликарбоната, поливика, аминопласта и фенопласта. Тест-объекты готовили в виде пластинок размером 2X2 см. Контролем в опытах служило стекло. Образцы материалов подвергали исследованию через 3—6 мес после изготовления. Тест-объекты предварительно тщательно очищали путем обработки 1% раствором синтетического моющего средства «Новость-С» (ТУ 38-7-12-67) при 50° с последующим длительным промыванием горячей, холодной и дистиллированной водой. Далее тесты высушивали при 37° (не более 2 ч) между листками стерильной фильтровальной бумаги.
В работе использовали музейные культуры микроорганизмов: Staph, aureus, штамм № 906, Е. coli, штамм № 1257, Salm, typhi, штаммы № 675, 645 и 65, Sh. sonnei, штаммы № 6491, 5116 и 328. В связи с тем что в предварительных опытах нам не удалось установить существенных внутривидовых различий в сроках гибели возбудителей брюшного тифа и дизентерии, дальнейшие исследования проводили со штаммами S. typhi № 675 и Sh. sonnei № 6491. Для приготовления бактериальной суспензии во всех опытах использовали 18-часовые культуры микробов на мясо-пептонном агаре. 1 млрд. взвесь бактерий (в каждом опыте только 1 штамма) в физиологическом растворе в объеме 0,04 мл наносили в виде капель на пластинки изучаемых материалов так, чтобы капли были равномерно распределены на поверхности. Инфицированные тесты оставляли в чашках Петри в условиях естественного освещения при 18—22° и относительной влажности 60—69%. В разные сроки после заражения пластинки (не менее 3 пластинок каждого материала на экспозицию) переносили в широкогорлые пробирки с 10 мл физиологического раствора и встряхивали 5 мин.Отмывную жидкость засевали в чашки по методу Коха. Посевы выдерживали в термостате при 37° "в течение 24—48 ч. По мере отмирания микроорганизмов, когда чувствительность-описанной выше методики не позволяла определять их количество, устанавливали наличие или отсутствие бактерий на пластинках методом отпечатков на соответствующих селективных средах (среды Эндо, Плоскирева, висмут-сульфит агар, молочно-солевой агар). Выделенные микроорганизмы идентифицировали по стандартной методике.
Статистическую обработку полученных данных проводили по И. П. Ашмарииу и А. А. Воробьеву (1962).
Результаты экспериментов по изучению длительности выживания бактерий на полимерных материалах суммированы в таблице.
Как видно из таблицы, различные микроорганизмы могут в течение длительного времени сохранять жизнеспособность на тест-объектах из пластмасс. Наиболее устойчивыми в этих условиях оказались стафилококки; быстрее других бактерий (в течение 3— 5 сут) отмирали сальмонеллы. Материалы на основе амино- и фенолоальдегидных смол
Длительность выживания микроорганизмов на тест-объектах из пластмасс (Р=0,5)
Длительность выживания (в сут)
Материал Марка Номер ГОСТ. МРТУ, ТУ S. typhl Sh. sonnei St. aureus
Е. col i
Полиэтилен 10 702-Ю20 ГОСТ 16337-70 5,32=0,5 25— 1,2 54,22=2,2 80,42:2,9
низкой 10 802—020
плотности 15 802-020
Полиэтилен вы- 20 006—040 ГОСТ 16338-70 5—0,5 22,82=1,2 46,22:2,6 75,82=2.6
сокой плот- 20 806—024
ности 20 906—040
Полипропилен 03—П—10/005 МРТУ 5,2—0,4 21,52=1,3 51,22:1,5 79,62=2,9
04—П—10/010 6-05-1105-67
05—П—10/020
Полистирол Д и Т ГОСТ 9440-60 5,1—0,4 23,42=1 50,42=2 79,62=3,5
блочный
Полистирол ПС—С, МРТУ 5,42=0,3 22,42= 1 51,72=2,9 77,12:2,9
суспензион- ПС-СП 6-05-957-68
ный
Полистирол УМП, УПП, ТУ 6-05-956-70 4,5—0,4 22,32= i 44,62=3,1 72,5^:3,7
ударопроч- УПС, пищевые
ный
Линолеум по- ГОСТ 14632-69 4,92=0,6 22,32= 1 53,32=2,4 72,52:3.2
ливинил-
хлоридный
Фторопласт-4 Б ТУ 6-05-81-71 3,32=0,4 17,92=1 43,62:2 66,22=3,5
Стекло органи- СО ГОСТ 10667-63 5,52=0,3 23,72= 1 53,72=2 82,12=3,5
ческое
Полиформаль- Образцы — — 40,22:2,6 69,62=4,2
дегид НИИПМ и
НИИ Медпо-
Полиамид лимеров П-68 ГОСТ 10589-63 5,3—0,5 18,32=1 48,32=1,5 72,52:3,1
Поликарбонат «Дифлон» ТУ 5-7-68 5,42=0,3 242=0,6 — —
Аминопласт Б ГОСТ 9359-69 0,9—0,1 7,42:0,9 5,92=0,7 8,12:1,1
Фенопласт ГОСТ 5689-66 0,8—0,1 5,52=0,5 7,22:0,4 10,5—0,9
Бумажно-слои- ТУ 400-1- 42=0,5 18,32=0,7 40,12=2,4 64,22=3,5
стый плас- 420-71
тик
Стекло оконное 4,7—0,4 21,22=0,7 53,12=2 77,12=4
Обозначение: — исследование не проводили.
(аминопласт, фенопласт) обладали сравнительно выраженной бактерицидной активностью Выживаемость возбудителей брюшного тифа на этих материалах сокращалась до 1 сут шигелл — до 5—7, кишечной палочки — до 6—7 и стафилококка — до 8—10 сут.
Изучение длительности выживания дизентерийных бактерий в условиях естественного освещения при 20—22° на аминопласте, мелалите, фенопласте и бумажно-слоистом пластике в зависимости от сроков изготовления материала показало, что бактерицидность материалов на основе амино- и фенолоальдегидных смол со временем снижается. Полученные различия в сроках выживания дизентерийных бактерий статистически достоверны.
Длительность выживания микроорганизмов на поверхности ряда материалов зависит от температуры окружающего воздуха. Так,-при 32° кишечная палочка выживает на аминопласте, мелалите, фенопласте, полиформальдегиде и фторопласте менее 24 ч, тогда как на полипропилене, блочном полистироле, поливинилхлоридном линолеуме, полиамидной смоле 68 и стекле — до 4—8 сут. Напротив, при сравнительно низкой температуре в помещении (суточные колебания в пределах 12—18°, причем большую часть суток температура не превышала 14—15°)^ Наблюдали максимальные сроки выживания микроорганизмов на поверхности тест-объектов. Кишечная палочка в этих условиях сохраняла жизнеспособность 60—69 сут, золотистый стафилококк — 90—101 сут.
Исследования показывают, что динамика отмирания микроорганизмов на пластмассах сходна с той, которая отмечается на стекле. В процессе отмирания можно совершенно четко выделить три периода, характеризующиеся различной скоростью гибели бактерий: период наибольшей интенсивности отмирания продолжительностью 24 ч на полиэтилене и 6—12 ч на стекле, в течение которого гибнет до 99,98% микробов; переходный период продолжительностью 8—9 сут на полиэтилене и 5—6 сут на стекле, характеризующийся замедлением скорости гибели бактерий; последний, самый продолжительный период, —
15 сут — на полиэтилене и 17 сут на стекле, характеризующийся малой, практически постоянной скоростью отмирания. 4
Морфологические, культуральные и серологические свойства бактериальных штаммов были практически стабильными на протяжении всей экспозиции. У субкультур от выживших дизентерийных бактерий только в отдельных случаях наблюдалась потеря агглютинабельности.
Ферментативные свойства (ферментация углеводов) дизентерийных бактерий претерпевали некоторые изменения: значительно удлинялось время сбраживания лактозы и сахарозы (на 3—5 и 6—10 сут соответственно). Для кишечной палочки было характерно удлинение времени ферментации лактозы.
Выжившие в условиях естественного освещения на поверхности полиэтилена низкой плотности, ударопрочного полистирола и поливинилхлоридного линолеума (экспозиция 6 сут) брюшнотифозные микробы (субкультуры) сохранили вирулентность для белых мышей — Del и LD5o были те же, что и у исходного штамма. Таким образом, длительность выживания микроорганизмов на пластмассах зависит, с одной стороны, от биологических особенностей микроба, а с другой — от свойств материала.
Динамика отмирания микроорганизмов на полимерных материалах и стекле оказалась сходной. В основе замедления скорости отмирания бактерий могут лежать по меньшей мере две причины. Во-первых, бактерии, находящиеся в глубине конгломерата микробных тел и различных частиц, всегда присутствующих в бактериальной суспензии (частицы питательной среды, образующиеся при смывании микробов с поверхности агара, частицы, образующиеся при автолизе бактерии и др.), теряют жизнеспособность значительно медленнее, чем клетки, расположенные на поверхности. Определенное защитное действие оказывает пыль, осевшая на пластинки в процессе длительного экспонирования, а также, вероятно, кристаллы поваренной соли. Во-вторых, бактериальная популяция неоднородна по клеточному составу, небольшая часть клеток обладает повышенной устойчивостью к воздействию факторов внешней среды.
Микроорганизмы, переживающие в высушенном состоянии на поверхности полимерных материалов, способны длительное время сохранять основные биологические свойства.
ЛИТЕРАТУРА. Ашмарин И. П., В'оробьев А. А. Статистические методы в микробиологических Исследованиях. Л., 1962.
Поступила 17/IV 1974 г.
УДК 615.9:632.95:613.12(23.03)
А. М. Юсупов
ТОКСИЧЕСКОЕ ДЕЙСТВИЕ НЕКОТОРЫХ ПЕСТИЦИДОВ НА ТЕПЛОКРОВНЫХ ЖИВОТНЫХ В УСЛОВИЯХ ВЫСОКОГОРЬЯ
Таджикский медицинский институт, Душанбе
Нашей задачей явилось изучение степени токсичности фосфамида, ГХЦГ, гамма-изомера ГХЦГ и гранозана (с пересчетом на этилмеркурхлорид-ЭМХ) на организм животных в условиях высокогорья. С этой целью в 1970 и 1971 гг. была организована высокогорная экспедиция Таджикского медицинского института на Памир (поселок Мургаб, высота 3640 м над уровнем моря), где исследовали токсичность пестицидов на лабораторных животных. Перед началом острого эксперимента животные находились на карантине в Душанбе в течение 2 нед, а затем 15 дней в условиях высокогорья.
Для определения среднесмертельной дозы (ЬО50) при неоднократном введении ГХЦГ, гамма-изомера ГХЦГ, фосфамида и ЭМХ в желудочно-кишечный тракт были взяты в опыт 210 белых мышей и 210 белых крыс, привезенных из Душанбе (высота 820 м над уровнем моря). Животным вводили перорально ГХЦГ, гамма-изомер ГХЦГ (1%) и ЭМХ (0,25%) в виде масляной эмульсии и фосфамид в виде 1% водного раствора. Основным критерием оценки токсичности изучаемых веществ было установление их £-О60, которое вычисляли по методу В. Б. Прозоровского. Наибольшей токсичностью в условиях высокогорья обладал ЭМХ, меньшей — фосфамид и гамма-изомер ГХЦГ и еще меньшей — ГХЦГ (табл. 1).
Для изучения кумулятивных свойств препаратов в опыт было взято 40 белых крыс. Животные были разбиты на 4 группы, по 10 особей в каждой. 1-я группа крыс получала ежедневно фосфамид на уровне 1/10 ЬО50 (17,2 мг/кг), 2-я — гамма-изомера ГХЦГ налуров-не 1/10 ЬО80 (20 мг/кг), 3-я ЭМХ на уровне V10 ЬО50 (5 мг/кг)1, 4-я группа служила контролем.
Данные о токсичности фосфамида, гамма-изомера ГХЦГ и ЭМХ при ежедневном введении показаны в табл. 2.
1 Доза ЬОм для крыс взята нами из литературных источников, посвященных исследованию токсичности этих препаратов в условиях равнины.