CC BY
40
УДК 636:612 ГРНТИ 34.39; 68.39.18
Шульга Н.Н., д-р ветеринар.наук, доцент, гл.науч.сотр. отдела вирусологии и иммунологии;
Шульга И.С., канд.биол.наук, завотделом микробиологии; Дикунина С.С., мл.науч.сотр. отдела вирусологии и иммунологии; Плавшак Л.П., науч.сотр. отдела вирусологии и иммунологии, ФГБНУ ДальЗНИВИ, г. Благовещенск E-mail: dalznivi@mail.ru
ВЫЯВЛЕНИЕ СТРЕСС - ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ У НОВОРОЖДЕННЫХ ТЕЛЯТ
Значительную роль в возникновении респираторных болезней у телят играет технологический стресс. Во многих хозяйствах признаки ОРВ у телят начинаются через 7-10 суток после перевода животных с индивидуального содержания на групповое. После попадания в группу начинает выстраиваться иерархия — животные конфликтуют между собой, конкурируют за корм и место отдыха. Чем больше группа, тем сильнее выражен стресс, который ведет к снижению общей резистентности организма и ослаблению иммунитета. В результате латентное течение болезни переходит в острое, больные животные заражают здоровых и по истечении инкубационного периода (1-2 недели) начинается массовое клиническое проявление ОРВ у телят. Развивается сложная патология, в которой главным нозологическим звеном являются не отдельные «патогенные агенты», а общая «патогенная ситуация», которая стимулирует неспецифический ответ организма в виде общего адаптационного синдрома, который фактически является клиническим проявлением стресса. Проведенные исследования позволяют в дальнейшем формировать общие группы телят в зависимости от стресс-чувствительности и тем самым снизить влияние стресса перегруппировки (технологического стресса) на организм животных и этим профилактировать возникновение респираторных заболеваний телят. Изучали стрессовую чувствительность новорожденных животных. В результате проведенных исследований был разработан способ выявления стрессовой чувствительности у новорожденных телят, по сформулированной нами формуле. Так, животные, у которых значения условных единиц (У.ед.), по формуле ниже 1,35, отнесены к стресс устойчивым животным, а со значением выше 1,35 — к стресс чувствительным. Установлено различие в содержании общего белка и иммуноглобулинов в сыворотках крови телят в зависимости от стресс — чувствительности, а также в фагоцитарной активности лейкоцитов и лизоцимной активности сывороток крови.
КЛЮЧЕВЫЕ СЛОВА: НОВОРОЖДЕННЫЕ ТЕЛЯТА, СТРЕСС-ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ, ОБЩИЙ АДАПТАЦИОННЫЙ СИНДРОМ
UDC 636:612
Shulga, N.N., Dr Veterinar.Sci., Associate Professor,
Chief Researcher at the Department of Virology and Immunology;
Shulga I.S., Cand.Biol.Sci., head of the department of microbiology;
Plavshak L.P., researcher at the Department of Virology and Immunology;
Dikunina S.S., junior researcher at the Department of Virology and Immunology
Far Eastern Zonal Research Veterinary, Blagoveshchensk
E-mail: dalznivi@mail.ru
IDENTIFICATION OF STRESS - SENSITIVITY IN NEWBORN CALVES
A significant role in the development of calves' respiratory diseases plays a technological stress. In many farms the signs of calves' acute respiratory disease begin to appear in 7-10 days
after animals are transferred_from individual to group keeping. After getting into a group animals begin to line up the hierarchy - animals conflict with each other, compete for food and resting place. The larger the group, the sharper the stress which leads to a decrease of the general resistance of the body and weakened immunity. As a result of it the latent infection turns into acute, sick animals infect healthy and after incubation period (1-2 weeks) there begins mass clinical manifestation of calves' acute respiratory disease. Complex pathology begins to develop, where the main nosologic link are not separate "pathogenic agents" but general "pathogenic situation ", that stimulates the nonspecific response of the body in the _ form ofgeneral adaptation syndrome, which is actually a clinical manifestation of stress. The research conducted allows to form common groups of calves depending on the stress susceptibility and thus reduce the effects of discomfort stress (technological stress) on the animals and prevent the development of calves' respiratory diseases. We studied the stress susceptibility of newborn animals and as a result of the studies we have developed a method of detecting newborn calves' stress susceptibility with a help of our formula. It works in such a way: if according to the formula the animals get figures (standard units) less than 1,35 they are related to the stress-resistant animals. If the figures more than 1,35 — to stress susceptible animals. We have determined the difference in content of general protein and immunoglobulin in calves' blood serum depending on stress susceptibility and also the difference in phagocytic activity of leucocytes and lysozyme activity of blood serum.
KEY WORDS: NEWBORN CALVES, STRESS SUSCEPTIBILITY, GENERAL ADAPTATION SYNDROME
Одним из наиболее признанных определений термина «болезнь» является: повреждение структуры и функции организма под влиянием внешних и внутренних факторов при реактивной мобилизации его компенсаторно-приспособительных механизмов, а также совокупность неспецифических изменений в организме, являющихся результатом его нейрогумо-ральной реакции на внешние раздражители. Это Г. Селье назвал стрессом [3]. Совокупность же изменений в организме, вызванных раздражителями, он назвал общим адаптационным синдромом. В развитии общего адаптационного синдрома Г. Селье выделили три стадии: 1 стадия тревоги; 2 стадия резистентности или адаптации; 3 стадия истощения. Г. Селье отмечал не только адаптивную, но и патологическую природу стресса и ввел понятие дистресса, который рассматривал как патологию [4].
Ответная реакция организма на действие стресс фактора многогранна и подвержена влиянию факторов, характеризующих индивидуальные особенности. В зависимости от стресс - чувствительности
организма она может существенно отличается и проявляется в виде адаптации или истощения [3].
Поэтому перед нами ставилась задача разработать способ выявления стресс- чувствительности у новорожденных животных. Известно, что по типу нейрогумо-ральной деятельности животные существенно отличаются друг от друга, это одновременно означает, что реакция на действие одинакового по силе стрессора у разных организмов будет различной. Реакция тревоги на действие стрессора у животных может характеризоваться стресс чувствительностью, в свою очередь стресс чувствительность, в зависимости от особенностей организма животных, может быть повышенной либо пониженной. В связи с этим изучение стресс чувствительности у новорожденных животных является актуальной проблемой, требующей скорейшего решения.
Все вышеперечисленные причины нарушают гомеостаз, в результате развивается сложная патология, в которой главным нозологическим звеном являются не отдельные «патогенные агенты», а общая «патогенная ситуация», которая стимулирует неспецифический ответ организма в виде общего адаптационного синдрома,
который фактически является клиническим проявлением стресса.
Материалы и методы исследования
Эксперименты по изучению стресс-чувствительности проводили на новорожденных телятах, содержащихся в индивидуальных клетках.
Методика проведения экспериментов заключается в следующем - у новорожденных телят перед опытом измеряли частоту сердечных сокращений и частоту дыхания. Затем на животных воздействовали резким одиночным звуком, силой звукового давления 90-100 ДБ. Опять измеряли частоту сердечных сокращений и частоту дыхания. По разработанной нами формуле (ноу-хау), вычисляли условные единицы [2].
Стрессовую чувствительность оценивали по формуле (ноу-хау)
П2* Д2 У.ед = -—— П1*Д1
где П1-частота пульса до звукового воздействия; П2-частота пульса после звукового воздействия; Д1-частота дыхания до звукового воздействия; Дг-частота дыхания после звукового воздействия.
Данные, полученные от 16 телят (в у.ед.), группировали в таблицу, определяли среднее арифметическое число и его
отклонения. По полученным цифрам разделяли телят на животных с повышенной и пониженной стресс - чувствительностью. Затем по принципу аналогов были сформированы две группы телят по 18 животных в каждой в зависимости от стресс чувствительности. Первая - собраны стресс устойчивые телята, вторая - стресс зависимые. У телят обоих групп была взята кровь и проведены гематологические и биохимические исследования: определено количество эритроцитов и гемоглобина; лейкоцитов, выведена лейкоформула и определена фагоцитарная активность нейтрофилов (ФАН), общепринятыми методами в сыворотках крови определяли общий белок с помощью рефрактометра и белковые фракции с помощью электрофореза в геле ага-розы по методике Чекишева В.М. (1977) [5], а также количество иммунных белков в ЦСТ (цинк-сульфатный тест) по методике Блинова Н.И. (1982) [1].
Результаты исследования
Результаты воздействия на организм новорожденных телят звуковым давлением силой 90-100 ДБ отражены в таблице 1.
Таблица 1
Сводные данные по изучению звукового воздействия на новорожденных телят
№ теленка До звукового воздействия После звукового воздействия Условные единицы
Частота пульса Частота дыхания Произведение Частота пульса Частота дыхания Произведение
6532 108 48 5184 128 56 7168 1,38
6541 124 40 4960 136 52 7072 1,43
6543 124 48 5952 140 60 8400 1,41
6549 128 44 5632 136 56 7616 1,35
6550 124 48 5952 136 64 8704 1,46
6544 124 44 5456 140 52 7280 1,33
6542 124 45 5580 140 52 7280 1,30
6540 104 48 4992 124 56 6946 1,39
6556 112 56 6272 124 64 7936 1,27
6557 96 56 5376 108 72 7776 1,45
6555 92 40 3680 100 48 4800 1,30
6563 104 72 7488 108 80 8640 1,15
6568 120 52 6240 128 76 9728 1,56
6567 108 64 6912 128 80 10240 1,48
6569 128 72 9216 136 80 10880 1,18
6566 104 72 7488 120 76 9120 1,22
Среднее У.ед. 1,35±0,03
В соответствии с таблицей 1, получено среднее значение У.ед. 1,35 с отклонениями тах=1,38 и тт=1,32. В результате новорожденные телята у которых значение У.ед равно или превышает 1,35, считать животными с повышенной стресс чувствительностью, а телят со значениями
Показатели крови телят в зави
У.ед. ниже 1,35 считать животными с пониженной стресс чувствительностью. Для более глубокой характеристики состояния их организма были проведены гематологические исследования (табл.2).
Таблица 2
ти от стресс-чувствительности
Показатели Норма Стресс чувствительность
высокая Низкая
Общий белок,г/л 50,0-67,0 54,5±0,7 59,6±0,9
Иммуноглобулины, г/л 20,0-40,0 24,2±0,3 26,4±0,1
% иммуноглобулинов к уровню общего белка 22,0-42,0 44,4±0,3 45,1±0,2
Эритроциты х1012/л 5,0-7,5 5,1±0,3 5,4±0,1
Лейкоциты х109/л 7,0 7,0±0,3 7,4±0,1
Гемоглобин, г/л 90,0-110,0 89,0±1,0 90,0±0,5
Нейтрофилы , % 22,0-45,0 40,9±0,8 41,3±0,7
Эозинофилы, % 5,0-8,0 2,5±0,2 6,0±0,4
Лимфоциты,% 40,0-65,0 56,6±0,3 53,7±0,3
Лизоцимная активность сыворотки крови, % (ЛАС) 20,0-30,0 25,3±0,2 29,2±0,4
Фагоцитарная активность лейкоцитов,% (ФАЛ) 30,0-60,0 45,3±0,5 51,1±0,6
В соответствии с таблицей 2 телята с повышенной стресс чувствительностью имеют худшие показатели резистентности, чем телята с пониженной стресс чувствительностью. Прослеживаются достоверные различия в ЛАС (р<0,001) и ФАЛ (р<0,001), а также в количестве эозинофи-лов (р<0,001), в содержании общего белка и иммуноглобулинов (р<0,001).
Проведенные исследования позволяют в дальнейшем формировать общие группы телят в зависимости от стресс - чувствительности, тем самым снизить влияние стресса перегруппировки или другого (технологического стресса) на организм животных и этим профилактировать возникновение банальных техногенных заболеваний телят.
Заключение
В результате проведенных исследований был разработан способ выявления стрессовой чувствительности у новорожденных телят по сформулированной нами формуле (ноу-хау). Такие животные, у которых значения У.ед. по формуле ниже 1,35, отнесены к стресс устойчивым, а со значением выше 1,35 - к стресс чувствительным. Установлены различия в содержании общего белка и иммуноглобулинов в сыворотках крови телят в зависимости от стресс - чувствительности, а также в фагоцитарной активности лейкоцитов и лизо-цимной активности сывороток крови.
Список литературы
1. Блинов, Н.И. Методические рекомендации по определению неспецифической резистентности у новорожденных телят/ Н.И. Блинов. - М.: МВА. 1982.
2. Патент на изобретение № 2538128 РФ, МПК А61Б99/00. Способ оценки стрессовой чувствительности новорожденных телят/ Н.Н.Шульга, В.А. Рябуха, Д.А. Желябовская, Д.В. Дудкина; заявитель и патентообладатель ФГБНУ ДальЗНИВИ. - № 2013121160/13; заявл. 07.05.2013; опубл. 10.01.2015, Бюл. № 1.- 4 с.
3. Селье, Ганс. Очерки об адаптационном синдроме / Ганс Селье. - М.: МЕДГИЗ, 1960. - С.
253.
4. Селье, Ганс «Стресс без дистресса» / Ганс Селье. - М.: МЕДГИЗ, 1970. - 336 с.
5. Чекишев, В.М. Количественное определение иммуноглобулинов в сыворотках крови животных: метод. Рекомендации / В.М. Чекишев.- Новосибирск, 1977. - 20 с.
6. Шульга, Н.Н. Способ профилактики респираторных болезней телят. Пат. 2555140 Российская Федерация, МПК A01K1/00. /Н.Н. Шульга, В.А. Рябуха, И.С. Шульга, С.С. Дикунина, Г.Б. Штенникова; патентообладатель ФГБНУ ДальЗНИВИ. - № 2014105001/13; заявл. 11.02.2014; опубл. 10.07.2015. - 3 с.
Reference
1. Blinov, N.I. Metodicheskie rekomendatsii po opredeleniyu nespetsificheskoi rezistentnosti u no-vorozhdennykh telyat (Methodical Recommendations on Determination of Non-Specific Resistance of Newborn Calves), N.I. Blinov, M.: MVA, 1982.
2. Patent na izobretenie № 2538128 RF, MPK A61D99/00. Sposob otsenki stressovoi chu-vstvitel'nosti novorozhdennykh telyat (Patent for invention No 2538128 РФ, МПК A61D99/00. Method of Assessment of Stress Susceptibility of Newborn Calves), N.N.Shul'ga, V.A. Ryabukha, D.A. Zhel-yabovskaya, D.V. Dudkina; zayavitel' i patentoobladatel' FGBNU Dal'ZNIVI, No 2013121160/13; zayavl. 07.05.2013, opubl. 10.01.2015, Byul. No 1, 4 p.
3. Sel'e, Gans. Ocherki ob adaptatsionnom sindrome (Essays on Adaptation Syndrome), Gans Sel'e, M.: MEDGIZ, 1960, P. 253.
4. Sel'e, Gans «Stress bez distressa» («Stress without Distress»), Gans Sel'e. M.: MEDGIZ, 1970, 336 p.
5. Chekishev, V.M. Kolichestvennoe opredelenie immunoglobulinov v syvorotkakh krovi zhivotnykh: metod. Rekomendatsii (Quantitative Determination of Immunoglobulin in Animals' Blood Serum: methodological recommendations), Novosibirsk, 1977, 20 p.
6. Shul'ga, N.N. Sposob profilaktiki respiratornykh boleznei telyat (Method of Prophylaxis of Calves' Respiratory Diseases), Pat. 2555140 Rossiiskaya Federatsiya, MPK A01K1/00. /N.N. Shul'ga, V.A. Ryabukha, IS. Shul'ga, S.S. Dikunina, G.B. Shtennikova; patentoobladatel' FGBNU Dal'ZNIVI, No 2014105001/13, zayavl. 11.02.2014, opubl. 10.07.2015, 3 p.
