CC BY
20
ISSN 2221-7711 Национальные приоритеты России. 2014. № 3 (13)
Туребеков Нуркельды Айтмуханбетович, PhD. - г. Мюнхен. Университет им. Людвига Максимилиана. Шапиева жанна жакановна - кандидат биологических наук, заведующая паразитологическим отделом Научно-практического центра санитарно-эпидемиологической экспертизы и мониторинга Агентства РК по защите прав потребителей, г. Алматы Кыраубаев Какимжан Кыраубаевич - главный специалист отдела особо опасных инфекций Научно-практического центра санитарно-эпидемиологической экспертизы и мониторинга Агентства РК по защите прав потребителей, г.Алматы
© Коллектив авторов, 2014 Статья поступила в редакцию 12 октября 2014 г.
УДК 579.61: 616.993-002.942.1
ВЫЯВЛЕНИЕ ПАТОГЕННЫХ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА МИКРООРГАНИЗМОВ В КЛЕЩАХ, ОТЛОВЛЕННЫХ НА ТЕРРИТОРИИ РЕСПУБЛИКИ БЕЛАРУСЬ В СЕЗОН 2014 Г.
О.Р. Князева, А.Г. Красько Республиканский научно-практический центр эпидемиологии и микробиологии,
г. Минск, Республика Беларусь Республика Беларусь, 220114 г. Минск, ул. Филимонова, 23 тел.: (+375-17) 267-32-67; [email protected]
Целью данной работы являлось изучение присутствия в клещах, снятых с людей в различных регионах Республики Беларусь в сезон 2014г., наиболее актуальных патогенов, таких как Borrelia burgdorferi sensu lato, вирус клещевого энцефалита, Anaplasmaphagocytophylum, Ehrlichia chaffeensis/ Ehrlichia muris. В результате исследований выявлены ДНК Borrelia burgdorferi sensu lato (37,33 % случаев), Anaplasma phagocytophylum (4 %), РНК вируса клещевого энцефалита(11,33 %). ДНК Ehrlichia chaffeensis/ Ehrlichia muris в исследуемых образцах не выявлена.
Ключевые слова: Borrelia burgdorferi sensu lato, вирус клещевого энцефалита, Anaplasma phagocytophylum, Ehrlichia chaffeensis/ Ehrlichia muris, ПЦР.
INVESTIGATION OF TICK-BORNE PATHOGENS IN TICKS REMOVED FROM PATIENTS IN
BELARUS
O.R. Kniazeva, A.G. Krasko Republican Research and Practical Center for Epidemiology and Microbiology,
Minsk, Belarus
The aim of our study was to investigate the presence of pathogens Borrelia burgdorferi sensu lato, Tickborne encephalitis virus, Anaplasma phagocytophylum, Ehrlichia chaffeensis/ Ehrlichia muris, in ticks removed from patients in Belarus. The studies revealed the presence of DNA Borrelia burgdorferi sensu lato (37,33%), Anaplasma phagocytophylum (4%) and RNA of the tick-borne encephalitis virus (11,33 %). DNA of Ehrlichia chaffeensis / Ehrlichia muris in the samples was not detected.
Keyworlds: tick borne pathogens, Borrelia burgdorferi sensu lato, Tick-borne encephalitis virus, Anaplasma phagocytophylum, Ehrlichia chaffeensis/ Ehrlichia muris, PCR.
Клещи являются основными переносчиками инфекционных заболеваний человека и животных в природных условиях Беларуси и способны передавать больше патогенов, чем любые другие членистоногие (болезнь Лайма, клещевой энце-
фалит, анаплазмоз, риккетсиозы, туляремия, Ку-лихорадка и др.) [1]. Циркуляция патогенных микроорганизмов поддерживается, как правило, в стабильных природных циклах, связанных с клещами, дикими животными и/или домашни-
Эпидемиология, экология, специфическая диагностика, профилактика
ми животными, в то время как люди являются случайными хозяевами. В 2013 г. в учреждения здравоохранения страны с жалобами на присасывание иксодовых клещей обратилось более 54 тысяч пациентов. Повсеместное распространение на территории страны и относительный рост численности клещей делают весьма актуальным мониторинг их заражённости на наиболее распространённые инфекции. Природно-очаговые трансмиссивные клещевые инфекции, такие как болезнь Лайма, клещевой энцефалит и др. представляют серьезную проблему для здравоохранения Республики Беларусь. В последнее десятилетие заболеваемость этими инфекциями неуклонно растет. Наличие смешанных природных очагов КЭ, ЛБ, риккетсиоза и анаплазмоза увеличивает риск заражения людей одновременно несколькими патогенами, усложняет их диагностику и профилактику и требует комплексного подхода [2, 3].
Целью данного исследования было изучить присутствие в клещах, снятых с людей в различных регионах Республики Беларусь, наиболее актуальных патогенов, таких как Borrelia burgdorferi sensu lato, вирус клещевого энцефалита, Anaplasma phagocytophylum, Ehrlichia chaffeensis/ Ehrlichia muris.
Материалы и методы
С использованием метода ПЦР в реальном времени исследовано 300 клещей Ixodes ricinus, снятых с пациентов в период с мая по июль 2014 г. Определение видовой принадлежности клещей велось по таблицам Померанцева и Филипповой.
Выделение днК и ПЦр-амплификации
Каждого клеща сначала промывали в 70% спирте, затем в стерильном фосфатно-солевом буфере, высушивали стерильной фильтровальной бумагой для того, чтобы избежать загрязнения. Клещей гомогенизировали в 150 мкл фосфатно-солевого буфера. Выделение ДНК-РНК проводили с помощью комплекта реагентов Рибо-преп (ФГУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Россия) в соответствии с инструкциями изготовителя.к-ДНК получали с использованием набора Реверта-L. Все клещи были проанализированы на наличие вируса клещевого энцефалита, боррелий, анаплазм и эрлихий, с использованием набора реагентов для выявления РНК/ДНК возбудителей инфекций, передающихся иксодовыми клещами методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с гибридизационно-флуоресцентной детекцией «АмплиСенс® TBEV, B.burgdorferi s.l., A.phagocytophillum, E.chaffeensis/E.muris-
FL», или аналогичным набором, разработанным в РНПЦ эпидемиологии и микробиологии, в соответствии с инструкцией производителя.
результаты и обсуждения
С целью оказания профилактической помощи пациентам, обращающимся по поводу присасывания клещей, в РНПЦ эпидемиологии и микробиологии организовано исследование клещей на присутствие, возбудителей трансмиссивных инфекций (ЛБ, КЭ, анаплазмоз, эрлихиоз).
Методом ПЦР амплификации диагностически значимых участков геномов (ОТ-ПЦР для КЭ) показано, что из 300 обследованных клещей в 37,33 % случаев (112 проб) определялось наличие ДНК Borrelia burgdorferi sensu lato, в 11,33 % (34 пробы) случаев детектировалось РНК вируса клещевого энцефалита, в 4 % (12 проб) - ДНК Anaplasma phagocytophylum. ДНК Ehrlichia muris не обнаружена.
Исследования на возможность смешанного инфицирования переносчиков несколькими патогенами одновременно показали, что сочетание боррелий с вирусом клещевого энцефалита встречалось в 17 пробах (5,6 % случаев), сочетание бор-релий и анаплазм выявлено в 3 пробах (1 % случаев), вируса клещевого энцефалита и анаплазм - в 1 пробе (0,33 % случаев).
Таким образом, основную угрозу населению страны в первой половине сезона 2014 г. представляли возбудители болезни Лайма и клещевого энцефалита. Всем пациентам, в клещах от которых было выявлено присутствие боррелий и анаплазм, рекомендован профилактический курс химиотерапии.
Полученные результаты несколько отличаются от аналогичных данных сезона активности клещей 2013 г., в котором зараженность клещей боррелиями составила 29,7 %, вирусом клещевого энцефалита - 19,8 %, зараженность клещей анап-лазмами не превысила 3 %. Это позволяет сделать предварительные выводы о некотором увеличении зараженности переносчиков боррелиями и анаплазмами и относительном снижении их зараженности вирусом клещевого энцефалита. По данным проведенного молекулярно-генети-ческого анализа в клещах I. ricinus, отловленных на территории Республики Беларусь в 2013 г. определялась циркуляция четырех видов спирохет рода Borrelia, три из которых являются патогенными для человека (B. burgdorferi s.s., B. garinii, B. afzelii), один вид обладает условной патоген-ностью (B. valasiana). Доминирующий вид на исследуемых территориях представлен B. afzelii (45 %), в меньшей степени распространены
ISSN 2221-7711 Национальные приоритеты России. 2014. № 3 (13)
B. burgdorferi s.s. (32,5%), B. garinii (12,5 %), B. valasiana (2,5 %). Высокий процент выявляе-мости патогенных для человека боррелий в переносчиках обуславливает актуальность исследова-
ния клещей, снятых с людей, с целью назначения своевременной профилактики и снижения заболеваемости населения Республики Беларусь болезнью Лайма.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
1. Балашов Ю. С. Иксодовые клещи — паразиты и переносчики инфекций // СПб.: Наука, 1998. - 287 с.
2. Князева О.Р. Эпидемиологическая ситуация по Лайм-боррелиозу на территории Республики Беларусь в 2011-2013 гг. / О.Р. Князева, А.Г. Красько // Проблемы медицинской микологии. - Спб., 2014. - Т.16. - № 2. - С. 86.
3. Патогенные микроорганизмы, выявленные в клещах Ixodes ricinus, собранных на территории Республики Беларусь / А.Г. Красько, О.Р. Князева, Е.П. Счесленок, П.А. Семижон, А.Л. Веденьков, С.А. Драки-на // Медицинская вирусология. - М., 2013. - Т. XXVII (1). - С. 60.
Князева ольга рашидовна - научный сотрудник лаборатории биобезопасности с коллекцией патогенных микроорганизмов Республиканского научно-практического центра эпидемиологии и микробиологии.
Красько Анатолий Геннадьевич - заведующий лабораторией биобезопасности с коллекцией патогенных микроорганизмов Республиканского научно-практического центра эпидемиологии и микробиологии.
© О.Р. Князева, А.Г. Красько, 2014 Статья поступила в редакцию 16 октября 2014 г.
УДК 616.98:579.834.114:579.881.31:579.881.14+595.42
ЗАРАЖЕННОСТЬ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕИ ВОЗБУДИТЕЛЯМИ ИКСОДОВЫХ КЛЕЩЕВЫХ БОРРЕЛИОЗОВ, АНАПЛАЗМОЗА И ЭРЛИХИОЗА НА КРЫМСКОМ ПОЛУОСТРОВЕ
М.Т. Гафарова, Э.Э. Алиева ГУ «Крымский государственный медицинский университет им. С. И. Георгиевского» Российская Федерация, Республика Крым, 295006, г. Симферополь, бульвар Ленина, 5/7office@csmu.
strace.net
Впервые на территории Крымского полуострова в клещах выявлена ДНК Anaplasma phagocytophilum, Erlichia chaffeensis/muris, Borrelia burgdorferi. Установлено широкое распространение клещей, инфицированных возбудителями ИКБ, ГАЧ и МЭЧ во всех ландшафтных зонах Крымского полуострова и установлен уровень их микст-инфицированности.
Ключевые слова: Крым, иксодовые клещи, боррелии, анаплазмы, эрлихии, ПЦР
THE INCIDENCE OF IXODID BORRELIOSIS, ANAPLASMOSIS AND EHRLICHIOSIS INFECTION AMONG IXODES TICKS ON THE CRIMEAN PENINSULA
M.T. Gafarova, E.E. Alieva SU "S.I. Georgievsky's Crimean State Medical University"
For the first time on the Crimean peninsula DNA of Anaplasma phagocytophilum, Erlichia chaffeensis/ muris, Borrelia burgdorferi was found in ticks. It was found that ticks are infected with ITB, HME and HGA pathogens in all landscaped areas of the Crimean peninsula and the level of mixed infection was assessed.
Keywords: Crimea, Ixodes ticks, Borrelia, Anaplasma, Ehrlichia, PCR
