Высокоаффинные а1-адренорецепторы (a1-AR) молекулярная мишень специфического связывания терафтала Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

42

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЕ ИЗУЧЕНИЕ ПРЕПАРАТОВ

ной резорбции и деструкции как поверхностно расположенной, так и интрамуральной части опухоли при минимальных повреждениях окружающей нормальной ткани. Основным условием для ПрФДТ является использование фотосенсибилизатора, способного длительно удерживаться в опухолевой ткани (фотосенс). В течение последних двух лет для потенциирования ПрФДТ используется ИК лазер-индуцированная термотерапия. С использованием данных методик, проведено лечение 161 больного (480 опухолей) с множественным опухолевым поражением кожи (базальнок-леточный рак с поражением всех слоев дермы - 73 пациента; плоскоклеточный рак - 3; метастатическое поражение кожи - 85 (метастазы меланомы - 21, метастазы рака молочной железы - 64). Полная регрессия получена при ПрФДТ базальноклеточного рака кожи в 68% наблюдений, метастазах меланомы - в 42%, метастазах рака молочной железы - в 21%), частичная регрессия - в 22%, в 28% и в 48%) соответственно. Срок наблюдения от 1 до 7 лет.

При МкФДТ введение фотосенсибилизатора и сеанс светового воздействия повторяются с интервалом от 1 недели до 3 месяцев в зависимости от типа препарата и выраженности терапевтического эффекта предшествующего курса ФДТ. Цель МкФДТ: у больных с ранней и малой опухолевой патологией - полная регрессия; у инкурабельных больных с распространенными опухолями - частичная деструкция опухоли, стимуляция апоптоза и ряда факторов

противоопухолевого иммунитета, которые могут приводить к стабилизации опухолевого процесса. Для МкФДТ используются преимущественно фотосенсибилизаторы, которые быстро метаболизируются и выводятся из организма (фотогем, протопорфирин IX, радахлорин). При применении МкФДТ в группе больных с остаточной опухолью после первого курса ФДТ рака I ст. (44 пациента с опухолями головы и шеи (7), бронхов (3), пищеварительного тракта (32), свода влагалища (2)) удалось добиться полной регрессии у 39%о пациентов (срок наблюдения от 1 до 9 лет); при использовании адьювантной МкФДТ (33 больных раком мочевого пузыря) удалось достичь удлинения сроков безрецидивного периода у всех пациентов; в группе больных с местно-распространенными опухолями (13 больных раком пищевода) применение МкФДТ привело к стабилизации опухолевого процесса и улучшению качества жизни.

Наши исследования и многолетние наблюдения за больными не выявили усиления или появления токсических реакций, связанных с многократным введением фотосенсибилизатора, либо с продолжительным световым воздействием на опухоль и окружающие ткани. Таким образом, полученные результаты ФДТ с использованием указанных методик показывают целесообразность продолжения их дальнейшей разработки и клинического применения.

ВЫСОКОАФФИННЫЕ АгАДРЕНОРЕЦЕПТОРЫ (ArAR) -МОЛЕКУЛЯРНАЯ МИШЕНЬ СПЕЦИФИЧЕСКОГО СВЯЗЫВАНИЯ ТЕРАФТАЛА

Т.И. Солнцева, Т. А. Сидорова, Г. К. Герасимова. Российский онкологический научный центр РАМН им. H.H. Блохина

Исследование фармакологических свойств терафтала -натриевая соль окси-4,5 карбокси фталоцианина Со+2(Т) в эксперименте и клинике выявило наряду с его противоопухолевым эффектом ряд дополнительных свойств и, в частности, гипотензивное действие. Это позволило нам предположить, что эффект терафтала реализуется в клетке через рецепторы нейромедиаторов плазматической мембраны путем вмешательства в регуляцию сигнальных путей и внутриклеточный метаболизм. Для проверки данной гипотезы было необходимо идентифицировать на мембране клеток терафтал-связывающие сайты, определить их кинетические параметры и доказать возможную принадлежность этих сайтов к одному из классов природных рецепторов нейромедиаторов: a-AR, b-AR, м-холино-R (mAChR).

Материалы. В работе была использована культура клеток гепатомы крысы McARA7777. Терафтал-лио (ФГУП "ГНЦ "НИОПИК", РОНЦ РАМН); DL-пропранояол (Pro), празозин (Pz), хинуклидинилбензилат (QNB) - специфические блокаторы (b,-b2)AR; a,-AR и mAChR, соответственно. 3Н-терафтал (0,4мК/мг); 3Н-дигидроальпренелол (3Н-DHA,70 К/ммоль);

3Н- Pz (ЗОК/ммоль); 3Н- QNB(12,3 К/ммоль).

Методы. Кинетические параметры связывания терафтала с плазматической мембраной опухолевых клеток определяли радиолигандным методом по конкуренции меченого и холодного терафтала. Константу диссоциации (Kd) и максимальное число рецепторов на клетку (Втах) расчитывали по методу Скэтчарда, исходя из предположения, что один рецептор связывает 1 молекулу лиганда. О наличии общих мест связывания терафтала и нейромедиаторов судили по отсутствию аддитивности при их совместном

добавлении к клеткам.

Результаты. На поверхности клеток гепатомы обнаружено несколько популяций терафтал-связывающих сайтов, характеризующихся значениями Kd и Втах в диапазонах:

Kd = (5х10"9-2х10"б)М и Втах= (2-20)х105мест/клетку. По конкуренции 3Н-терафтала с холодными лигандами-нейроблокаторами и отсутствию аддитивности в их связывании установлено, что эти места одновременно являются местами связывания адренергических и мускарино-вых холинергических блокаторов, а сродство этих сайтов к терафталу, Pz, Pro и QNB примерно одинаково. Показано, что терафтал в условиях насыщения мечеными лигандами высокоаффинных адренергических и холинергических рецепторов конкурирует только с 3Н- Pz (не уступая последнему в сродстве к aa,-AR). Кинетические характеристики связывания терафтала и Pz следующие:

2xl0""M<Kd Pz~KdT£2xlO-IOM;

9х 103мест/клетку<Втах£25х103мест/клетку.

Выводы. 1. Специфическими высокоаффинными сайтами связывания терафтала с поверхностью клеток гепатомы 7777 являются природные aa,-AR со следующими характеристиками :

2xlO"nM<Kd Pz~KdT£2xlO-10M,

9х103мест/клетку<Втах£25х103мест/клетку.

2. Места связывания терафтала с Kd в даипазоне (5х10"9-2х10"6)М лишены избирательности в отношении специфических блокаторов aa,-AR, (b,-b2)AR и mAChR и связывают их с тем же сродством, что и терафтал.

Работа поддержана грантом Правительства г.Москвы

№1/том1/2003