CC BY
20Проблемы медицинской микологии. 2020, Т.22. №3
лимеразной цепной реакции в режиме реального времени.
Результаты. Вагинальные инфекции выявлены у 71 женщины (31,8%). Общая частота встречаемости АВ составила 15,2% (34 из 223), БВ - 16,1% (36 из 223), КВВ - 10,3% (23 из 223). Наиболее характерными предикторами нормоцено-за были доминирование L. crispatus и повышение уровней экспрессии мРНК генов IL18, GATA3 и CD68. АВ и БВ характеризовались значительным снижением L. crispatus, L. jensenii и L. vaginalis, при этом АВ был ассоциирован с повышенным уровнем экспрессии IL1b и IL10, БВ - сниженным уровнем экспрессии IL18 и GATA3. Для КВВ были характерны преобладание L. gasseri и L. vaginalis и повышенные уровни экспрессии IL1b и TLR4.
Выводы. Наряду с оценкой вагинального микробиоценоза, включающей определение лактобацилярных профилей, изучение локального иммунитета слизистой оболочки влагалища дает возможность повысить информативность диагностики вагинальных инфекций, предсказать рецидив вагинального дисбиоза и проследить за выздоровлением после лечения.
СРАВНИТЕЛЬНЫЕ ОСОБЕННОСТИ ПРОТЕОЛИЗА БЕЛКА Р4 ВИРИОНА РОДА CHRYSOVIRUS С ПОМОЩЬЮ ФЕРМЕНТОВ И ОРГАНИЧЕСКИХ КИСЛОТ
Бузмакова А.Л., Потапова А.В. (научный руководитель: Рябинин И.А.)
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия
COMPARATIVE FEATURES OF PROTEOLYSIS OF P4 VIRION PROTEIN OF THE GENUS CHRYSOVIRUS USING ENZYMES AND ORGANIC ACIDS
Buzmakova A.L., Potapova A.V. (scientific supervisor: Ryabinin I.A.)
North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - сравнение количества фрагментов белка Р4 вириона рода Chrysovirus, получаемых с помощью ферментативного и неферментативного протеолиза.
Материалы и методы. Для анализа использовали последовательность белка Р4 №Q8JVB9, включающую 847 аминокислотных остатков. Поиск и анализ последовательности провели с помощью баз данных UniProtKB, PDBsum и редактора PeptideCutter.
Результаты. Все ферменты, катализирующие реакции протеолиза данного белка, по количеству получаемых фрагментов были разделены на 3 группы: более 100, от 50 до 100 и менее 50 фрагментов. К первой группе относятся про-теинкиназа К (405 фрагментов), термолизин (240), пепсин при pH&2 (i96), химот-рипсин низкой специфичности (iB5), пепсин при pH=1,3 (138), Asp-N эндопептида-за + N-концевой Glu (i0B). Вторая группа включает следующие ферменты: трипсин (9i), химотрипсин высокой специфичности (65), ппутамилэндопептидазу (5B), стафилококковую пептидазу I (52), клострипан, Asp-N эндопептидазу и Arg-C протеиназу (по 50 фра™ентов). Наименьшее число фрагментов было получено с помощью LysC лизилэндопептидазы и LysN Пептидил-Lys металлоэндопептидазы (по 45 фра™ентов), пролинэндопептидазы (4), каспазы i (2) и энтерокиназы (i). При моделировании протеолиза органическими кислотами установлены следующие результаты: муравьиная кислота - 50 фрагментов, бромистый циан - 46, NTCB (2-нитро-5-тиоцианобензойная кислота) - 16, BNPS-скатол (3-бром-3-метил-2-(2-нитрофенил)-сульфанилиндол) и йодобензойная кислота - по i2.
Заключение. Ферменты в среднем имеют большее число сайтов протеолиза, чем неферментативные катализаторы (органические кислоты). Данный факт может помочь в разработке новых лекарственных препаратов из группы антими-котиков, а также средств для борьбы с возбудителями микозов в объектах внешней среды.
НОВЫЕ МЕТОДЫ В ДИАГНОСТИКЕ АУТОИММУННОЙ КРАПИВНИЦЫ
Бурыгина Е.В., Козлова Я.И., Фролова Е.В., Учеваткина А.Е., Филиппова Л.В., Аак О.В., Мельникова А.В., Захваткина М.А., Васильева Н.В., Климко Н.Н.
Северо-Западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова, Санкт-Петербург, Россия
NEW METHODS IN THE DIAGNOSIS OF AUTOIMMUNE URTICARIA
Burygina E.V., Kozlova Y.I., Frolova E.V., Uchevatkina A.E., Filippova L.V., Aak O.V., Melnikova A.V., Zakhvatkina M.A., Vasilyeva N.V., Klimko N.N.
North-Western State Medical University named after I.I. Mechnikov, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - оценка диагностической значимости непрямого теста активации базофилов для диагностики аутоиммунной формы хронической крапивницы.
Материалы и методы. В исследование включили 29 пациентов с хронической спонтанной крапивницей (ХСК) в возрасте от i9 до 6B лет (средний возраст -42 года), 20 женщин (69%) и 9 мужчин (3i%). Всем больным выполнили кожный
тест с аутологичной сывороткой (ТАС) и непрямой тест активации базофилов (ТАБ). Изучение активации базофилов проводили методом проточной цитометрии с использованием набора Allerginicity kit (Beckman Coulter, США). Идентификацию степени активации базофилов определяли по количеству клеток с высокой экспрессией CD203c. Подсчитывали индекс стимуляции (ИС) как отношение активированных базофилов донора после инкубации с сывороткой крови пациента к числу базофилов, инкубированных с сывороткой другого здорового донора. Для определения активности крапивницы и оценки эффективности терапии применяли бальную систему Urticaria Activity Score 7 (UAS 7). Диагноз ХК устанавливали согласно рекомендациям EAACI/GA2LEN/EDF/WAO/PAA^ 2018.
Результаты. Средняя продолжительность крапивницы составила 4±1 год, средний балл по шкале UAS7 - 24±2 баллов. Аутоиммунные заболевания выявили у 8 пациентов (28%). Внутрикожная проба с аутологичной сывороткой оказалась положительной у 14 (48%), из них in vitro ТАБ был положительный у 9 человек. Отрицательные результаты кожного теста и ТАБ установлены у 13 пациентов. В этой группе больных относительное количество активированных базофилов и ИС были достоверно ниже по сравнению с показателями 9 пациентов с положительными результатами кожного теста и ТАБ 1,14±0,28% vs 33,94±9,65% (p=0,001), 0,61 ±0,10 vs 15,85±4,01 (p<0,001) соответственно. Невысокий показатель ИС базофилов доноров под действием сыворотки больных ХК указывает на низкий уровень гистамин-либерирующих аутоантител в сыворотке обследуемых пациентов, что позволяет исключить аутоиммунный механизм в патогенезе заболевания.
Выводы. Непрямой тест активации базофилов является перспективным методом дифференциальной диагностики аутоиммунной и идиопатической форм хронической крапивницы.
ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ ПАТОГЕННЫХ ЭНТЕРОБАКТЕРИЙ, ВЫДЕЛЕННЫХ В ПСИХИАТРИЧЕСКОЙ БОЛЬНИЦЕ, К СПЕЦИФИЧЕСКИМ БАКТЕРИОФАГАМ
Буторина А.С.1, Тихомирова В.И.1, Куготова Д.А.1, Голубева Ю.В.2, Григорьева Л.Г.2, Козлова Н.С.1
1Северо-западный государственный медицинский университет им. И.И. Мечникова; 2Городская психиатрическая больница №3 им. И.И. Скворцова-Степанова, Санкт-Петербург, Россия
SENSITIVITY OF PATHOGENIC ENTEROBACTERIA ISOLATED IN PSYCHIATRIC HOSPITAL TO BACTERIOPHAGES
Butorina A.S.1, Tikhomirova V.I.1,Kugotova D.A.1, Golubeva Yu.V.2, Grigoryeva L.G.2, Kozlova N.S.1
Worth-Western State Medical University after I.I.Mechnikov; 2Psychiatric hospital №3, St. Petersburg, Russia
Цель исследования - определение чувствительности патогенных энте-робактерий, выделенных в психиатрической больнице, к специфическим бактериофагам.
Материалы и методы. Из фекалий пациентов психиатрической больницы Санкт-Петербурга в 2016-2019 гг. были выделены 74 штамма патогенных энте-робактерий, в том числе 23 культуры шигелл и 51 штамм сальмонелл. Определение чувствительности к бактериофагам проводили spot-методом согласно федеральным методическим рекомендациям 2014 г., результаты интерпретировали по литической активности препаратов. Использовали дизентерийный и сальмонел-лезный АВСДЕ бактериофаги производства НПО «Микроген».
Результаты и обсуждение. Шигеллы, выделенные в психиатрической больнице в течение 2016 г., были представлены двумя видами - Shigella sonnei (91,3%) и Shigella flexneri (8,7%). Все штаммы S. sonnei принадлежали к биовару II, две культуры S. flexneri - к подсеровару 2а. В 2017-19 гг. в стационаре изоляты шигелл отсутствовали. Сальмонеллы были представлены шестью сероварами трех серогрупп: Salmonella Infantis (45,1%), S. Enteritidis (33,3%), S. Typhimurium (13,7%), S. Santpaul (3,9%), S. Derby (2,0%), S. Muenchen (2,0%). Все штаммы шигелл и 80,4% изолятов сальмонелл были устойчивы хотя бы к одному антибиотику. При определении чувствительности шигелл к дизентерийному бактериофагу не выявили среди них фагорезистентных изолятов. Такую же картину наблюдали у сальмонелл - все изученные культуры (как чувствительные к антибиотикам, так и устойчивые) лизировались сальмонеллезным фагом АБС0Е. Это свидетельствует о соответствии вирулентных фагов в составе препаратов циркулирующим штаммам патогенных энтеробактерий.
Выводы. Выявлена высокая чувствительность штаммов шигелл и сальмонелл как чувствительных к антибиотикам, так и антибиотикорезистентных к специфическим бактериофагам производства НПО «Микроген», что подтверждает эффективность использования последних для лечения и экстренной профилактики острых кишечных инфекций, вызванных патогенными энтеробактериями.
ВЫБОР СХЕМЫ ЭМПИРИЧЕСКОЙ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОЙ ТЕРАПИИ ПРИ ЭМПИЕМЕ ПЛЕВРЫ
Валиев Г.В., Суборова Т.Н., Баринов О.В.
