CC BY
70
© Регеда М. С., Колшецька М. А., Ковалишин О. А.
УДК 616. 248-07: 616. 155. 3-097. 37 - 07]-085. 274-092. 9
Регеда М. С., Колшецька М. А., Ковалишин О. А.
ВПЛИВ ПРЕПАРАТУ ТЮТРИАЗОЛ1НУ НА ЗРУШЕННЯ ЦИТОК1НОВОГО
СТАТУСУ В СИРОВАТЦ1 КРОВ1 ЗА УМОВ ФОРМУВАННЯ
ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГ БРОНХ1АЛЬНОТ АСТМИ
Львiвський нацiональний медичний унiверситет iм. Данила Галицького (м. Львiв)
Дане дослщження е фрагментом планово! на-уково! роботи кафедри патолог1чно! ф1зюлоги Льв1в-ського нац1онального медичного уыверситету 1м. Данила Галицького «Патогенетичн1 аспекти фор-мування алерг1чних I запальних процес1в, вплив !х на реактивнють орган1зму та фармакокорекц1я», № державно! реестрацп 010611012669.
Вступ. Бронх1альна астма (БА) е одн1ею з най-актуальн1ших проблем сучасно! пед1атри, терапи та алергологп [3,4,8]. Зг1дно даних м1жнародних досл1-джень за останнм час в1дм1чено зростання захворю-ваност1 на бронх1альну астму. Б1льше 100 мтьйоыв людей у св1т1 хвор1ють на бронх1альну астму. Дан1 останых рок1в показують на зростання захворю-ваност1 та смертност1 в1д БА у США, Англи, Австри, Росп, Укра!н1. Результати еп1дем1олог1чних досл1-джень св1дчать про те, що в бтьшост1 кра!н на БА страждають в1д 4 до 8 % дорослого населення, а по-мирають до 250000 ос1б за рк.
На сьогодн1 загальноприйнятим представленням про патогенез БА е теор1я хроычного еозинофть-ного запалення респ1раторного тракту, домшуючу роль в розвитку якого вщграють прозапальн1 ци-ток1ни (ЦК) [1]. Остаными роками активно обгово-рюеться питання про роль порушення цитоюнового статусу в шМацп та прогресуванн запального про-цесу в бронхолегеневм систем! [5]. Скомпромето-ван1 система 1мун1тету та процеси секреци циток1н1в п1д впливом р1зних чинниюв можуть зм1нювати сво! властивост1 й тим формувати важюсть переб1гу за-хворювання, оск1льки 1мунна система за допомогою каскаду циток1н1в зд1йснюе 1мунну в1дпов1дь [3,4].
Циток1ни - глкозильоваы пол1пептиди, що регу-люють та визначають природу 1мунно! в1дпов1д1. Го-стра запальна реакц1я 1н1ц1юеться внаслщок активац1! тканинних макрофаг1в та секреци запальних цитою-н1в, зокрема фактора некрозу пухлин - а (ФНП- а), ш-терлейк1н-1 (1Л-1) та штерлейкш-6 (1Л-6) [1,3], котр1 е причиною багатьох локальних та системних змш, отриманих при розвитку гостро! запально! в1дпов1д1. Переб1г та 1нтенсивн1сть запально! вщповщ контр-олюеться деякими цитоюнами. П1дтип 1Л-1 одним 1з перших включаеться до в1дпов1дно! захисно! реакци при д1! патогенних фактор1в[2,9]. Цей цитоюн Ыду-куе продукц1ю 1Л-2, 1Л-3, 1Л-6, Ытерферону-у (1ФН-у) та ФНП-а. Слщ враховувати, що пперпродукц1я 1Л-1 супроводжуеться симптомами запалення I може
бути центральною ланкою патогенезу нешфекцмних та Ыфекцмних захворювань[6,7]. 1нтерлейюни 4 I 10 (1Л-4, 1Л-10) приймають участь в обмеженн1 р1вня запально! в1дпов1д1 шляхом пригн1чення секреци запальних циток1н1в, зокрема 1Л-1 та ФНП-а [9], регу-люючи таким чином ступшь тканинних пошкоджень. Проте особливост1 циток1нового забезпечення запально! шфекцп при БА залишаються недостатньо вивченими I е вельми актуальними.
Згщно сучасним уявленням, при даному брон-холегеневому захворюванн1 у дихальних шляхах вщбуваються значн1 змши механ1зм1в п1дтримання гомеостазу - системи перекисного окиснення л1п1-д1в - антиоксидантного захисту та балансу циток1н1в [6,7]. За останы роки експериментатори I кл1н1цис-ти привертають увагу досл1дженням, як1 стосують-ся впливу препарат1в, що мають 1мунокоригуюч1 та антиоксиданты властивост1. У зв'язку з цим заслу-говуе на увагу проведення дослщження впливу т1о-триазолшу на л1кування експериментально! БА I на показники цитоюнового статусу зокрема.
Метою даного дослщження стало визначен-ня характеру порушень вмюту р1вня прозапальних штерлейкшу-6 (IЛ-6) I фактору некрозу пухлин-а (ФНП-а) та протизапальних циток1н1в 1нтерлейк1-ну-10 (1Л-10) у сироватц1 кров1 морських свинок та встановлення впливу препарату тютриазолшу на цитоюновий проф1ль за умов формування експериментально! бронх1ально! астми.
Об'ект I методи досл1дження. Експеримен-тальн1 досл1дження проводились на 72 морських свинках (самц1) масою 180 - 220 г, подтених на 6 груп по 12 тварин у кожн1й. До I групи (контроль) вщ-носили 1нтактн1 морсью свинки, до II- тварини з екс-периментальною БА (5-а доба), до III - морсью свинки на 19-у добу модельного процеса, до IV - тварини з експериментальною БА (26-а доба), до V - мурча-ки на 33-ю добу БА до лкування I VI- морсью свинки з БА на 33-ю добу пюля л1кування тютриазол1ном, який вводився внутр1шньом'язово у доз1 100мг/кг маси протягом 10 дн1в. Експериментальна модель БА вщтворювалась на морських свинках за методом В. I. Бабича (1979). Евтаназю тварин проводили шляхом декап1тацп з дотриманням бвропейсько! конвенци про захист хребетних тварин, як1 викорис-товуються для експериментальних та Ыших науко-вих цтей (Страсбург, 1985). Ус1м групам морських
%
до лшування теля лшування □ контроль В1Л-6 □ ФНП-а ШЛ-10
Рис. Вплив тютриазолшу на р1вень ФНП-а, 1Л-6 та 1Л -10у Kpoei морських свинок у динамщ1 формування БА.
свинок здмснювали визначення концентрацм цито-Kiнiв: ФНП-а, IJ1-6 та IJ1-10 в сироватц1 Kpoßi за до-помогою твердофазного ¡муноферментного анал1зу (ELISA) з викориотанням тест-систем ф1рми «Dia-clone» (Франтя).
Цифров1 результати опрацьоваш статистичним методом з використанням критер1ю Стюдента.
Результати дослщжень та Тх обговорення. При вивченнi системи цитокiнiв при експеримен-тальнiй БА було встановлено, що в yci дослiджуванi доби експерименту мали мюце вiрогiднi змiни концентрацм як прозапальних, так i протизапальних ци-токiнiв у порiвняннi з групою iнтактних тварин. Також нами проводилось порiвняння одержаних даних не лише груп тварин з БА i здорових морських свинок, але й мiж рiзними дослщними групами тварин, якi пiддавались впливу антигенного чинника та зокре-ма тривалост його дií. Пiд час дослщження проза-пального ЦК 1Л-6 було виявлено збiльшення його концентрацм однаково на 34,7% (р<0,05), як на 19-у, так i на 26-у доби експерименту в порiвняннi з мур-чаками II групи. Дал^ на 33-ю добу БА встановлено ще активнiше його зростання на 58,9% (р<0,05) проти 5-i доби модельного процесу БА. Подiбна тен-денцiя спостерiгалась i з боку наступного цитокiна - ФНП-а, який с типовим прозапальним цитоюном i одним iз маркерiв неспецифiчного генералiзова-ного запалення. Вiдмiчасмо поступове пiдвищення даного показника в залежност вiд тривалостi пато-лопчного процесу: на 19-у, 26-у i 33-ю доби ФНП-а
збтьшусться вщповщно на 12,7% (р<0,05), 23,9% (р<0,05) \ 47,6% (р<0,05) вщносно групи мурчаюв на 5-у добу експерименту. Отже, результати доот-джень цитоюнового профтю в сироватц1 кров1 за умов експериментальноУ БА встановили збтыиення р1вня пулу прозапальних ЦК в залежносл в¡д трива-лост1 алерпчного процесу, особливо найбтыие ви-ражене в тварин п'ятоТ групи.
Анал1з р1вня протизапального цитоюна 1/1-10 на 19-у добу БА показали його зменшення на 24,7% (р<0,05) при пор1внянш з 5-ю добою експерименту. Суттеве зменшення 1/1-10 фксували по м1р1 розви-тку експериментальноУ БА. Зменшення даного ЦК спостер1галося на 26-у добу на 32,8% (р<0,05) \ на 33-ю добу на 53,2% (р<0,05) напроти п'ятоУ групи мурчаюв.
Таким чином, дослщження цитоюшв (ФНП-а, 1/1-6 та 1/1-10) показало пщвищення прозапальних та зни-ження протизапальних ¡нтерлейюшв, що вказус на порушення р1вноваги м1ж про- \ протизапальними ЦК.
Введения тютриазолЫу призводило до зниження 1Л-6 на 43, 7% (р<0,05), ФНП-а на 41,9% (р<0,05) та ¡стотного пщвищення 1Л-10 на 86,1% (р<0,05) в по-рiвняннi з групою тварин, як не пщдавалися впливу цього препарату (рис.).
Висновки. Оцнюючи результати дослщжень, можна зробити висновок про суттеву перевагу про-запальноТ активност цитокiнiв, яка зростае по мiрi розвитку патологiчного процесу, i, водночас, зниження протизапального 1Л-10. Застосування iмуно-коригувального, антиоксидантного i мембранопро-текторного препарату тiотриазолiну впродовж 10 дшв позитивно вплинуло на цитоюновий профiль i сприяло суттевому пщвищенню рiвня Ытерлейю-ну-10, бiологiчнi ефекти якого направлен на супре-аю як продукцií моноцитами ЦК 1Л-1, 1Л-6, ФНП-а , так i макрофагальноТ цитотоксичноТ активностi [9].
Перспективи подальших дослiджень. Отри-манi данi свiдчать про доцiльнiсть призначення ти отриазолiну в комплекснiй терапií, що пов'язано з коригуючою дiею його на порушений стан iмунноТ системи морських свинок за умов розвитку експе-риментальноТ бронхiальноí астми, та диктуе необ-хiднiсть проведення подальших як експерименталь-них, так i клiнiчних дослiджень.
Лiтература
1. Абатуров О. Е. Вмют прозапальних штерлейюшв 1Л-1в та 1Л-6 у сироватц кровi дiтей з повторними та тривалими го-стрими респiраторними захворюваннями / О. Е. Абатуров, I. Л. Височина // Укр. медичний часопис. - 2002. - № 9-10.
- С. 122-124.
2. Демьянов А. В. Диагностическая ценность исследований уровней цитокинов в клинической практике / А. В. Демьянов, А. Ю. Котов, А. С. Симбирцев // Цитокины и воспаление. - 2003. - Т. 2, №3. - С. 20-33.
3. Дудка П. Ф. Ктшчш аспекти порушення на рiвнi опозицмних цитоюшв у хворих на хрошчш обструктивш захворювання легень / П. Ф. Дудка, Д. В. Добрянський, Н. Г. Бичкова // Лкарська справа. - 2009. - № 5-6. - С. 27-31.
4. Лапшин В. Ф. Астма-фенотипы в детском возрасте / В. Ф. Лапшин, Т. Р. Уманец // Здоров'я УкраТни. - 2009. - № 4/1.
- С.12-14.
5. Нктн 6. В. Роль цитоюшв у патогенезi шфекцмних захворювань / 6. В. Нктн, Т. В. Чабан, С. К. Сервецький // 1нфекцмш хвороби. - 2007. - № 1. - С. 51-57.
6. Победьонна Г. П. Системы порушення цитоюнового, оксидантного та стре^млтуючого гомеостазу при загостренш бронхiальноi астми важкого переб^у / Г. П. Победьонна // Астма та алерпя. - 2005. - № 2-4. - С. 22-24.
7. Чернушенко Е. Ф. Актуальные проблемы иммунологии во фтизиатрии и пульмонологии / Е. Ф. Чернушенко // Укр. пульмонол. журн. - 2003. - № 2. - С. 94-96.
8. Aganche I. Untangling asthma phenotypes and endotypes / I. Aganche, C. Akdis, M. Jutel [et al.] // Allergy. - 2012. - Vol. 67, Is. 7. - Р. 835-846.
9. Antunes. G. Systemic cytokine levels in community-acquired pneumonia and their association with disease severity / G. An-tunes, S. A. Evans, J. L. Lordan, A. J. Frew // Eur. Respir. J. - 2002. - Vol. 20. - P. 990-995.
УДК 616. 248-07: 616. 155. 3-097. 37 - 07]-085. 274-092. 9
ВПЛИВ ПРЕПАРАТУ ТЮТРИАЗОЛ1НУ НА ЗРУШЕННЯ ЦИТОК1НОВОГО СТАТУСУ В СИРОВАТЦ1 КРОВ1 ЗА УМОВ ФОРМУВАННЯ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНОТ БРОНХ1АЛЬНОТ АСТМИ
Регеда М. С., Колшецька М. А., Ковалишин О. А.
Резюме. Метою нашого доотдження було визначення характеру порушень вмюту р1вня прозапальних штерлейкшу-6 (1Л-6) i фактору некрозу пухлин-а (ФНП-а) та протизапальних цитоюыв 1нтерлейк1ну-10 (1Л-10) у сироватц кровi морських свинок та оцшка впливу препарату тiотриазолiну на цитоюновий профiль за умов формування експериментально'| бронхiальноi астми (БА).
Встановлено суттеву перевагу прозапальноi активностi цитокiнiв, яка зростае по мiрi розвитку патоло-гiчного процесу, i, водночас, зниження протизапального 1Л-10. Виявлено коригуючу дю тiотриазолiну на до-слiджуванi показники цитоюнового профтю.
Ключовi слова: бронхiальна астма, цитокiни, тiотриазолiн.
УДК 616. 248-07: 616. 155. 3-097. 37 - 07]-085. 274-092. 9
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА ТИОТРИАЗОЛИНА НА СДВИГ ЦИТОКИНОВОГО СТАТУСА В СЫРОВАТКЕ КРОВИ ПРИ УСЛОВИЯХ ФОРМИРОВАНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ БРОНХИАЛЬНОЙ АСТМЫ
Регеда М. С., Колишецкая М. А., Ковалышин О. А.
Резюме. Целью нашей работы было определение характера нарушений содержимого уровня провоспалительныхинтерлейкина-6 (ИЛ-6) и фактора некроза опухолей -а (ФНП-а) и противовоспалительных цитокинов интерлейкина-10 (ИЛ-10) в сыворотке крови морских свинок и установления влияния препарата тиотриазолина на цитокиновий профиль при условиях формирования экспериментальной бронхиальной астмы (БА).
Установлено существенное преимущество воспалительной активности цитокинов, которая растет по мере развития патологического процесса, и, в то же время, снижения противовоспалительного ИЛ-10. Обнаружено корректирующее действие тиотриазолина на исследуемые показатели цитокинового профиля.
Ключевые слова: бронхиальная астма, цитокины, тиотриазолин.
UDC 616. 248-07: 616. 155. 3-097. 37 - 07]-085. 274-092. 9
The Influence of Thiotriazoline on the Cytokine Status Disturbances in the Blood Serum under the Condition of Experimental Bronchial Asthma
Regeda M. S., Kolishetska M. A., Kovalyshyn O. A.
Abstract. Bronchial asthma (BA) is one of the most actual problems of modern paediatrics, therapy and allergology The general representation of its pathogenesis is the chronic eosinophilic inflammation of the respiratory tract theory. The dominant role in its development is played by pro-inflammatory cytokines, which are glycosylated polypeptides. They regulate and determine the nature of the immune response. The acute inflammatory response is initiated as a result of the tissue macrophages activation and secretion of inflammatory cytokines, including tumor necrosis factor - а (TNF-а), interleukin-1 (IL-1) and interleukin-6 (IL-6), which are the reasons of many local and systemic changes obtained during the acute inflammatory response activation. The course and intensity of the inflammatory response is controlled by several cytokines. IL-1 subtype provides an appropriate protective response in case of the pathogenic factors acting. The features of providing an inflammatory infection with cytokine are very actual subject of scientific research.
According to modern ideas, there are some significant changes of maintaining homeostasis mechanisms -a system of lipid peroxidation - antioxidant protection and balance of cytokines during the bronchopulmonary diseases in the respiratory tract. Nowadays, experimentalists and clinicians have attracted the attention with their researches. They are concerning to the influence of medicine that has immune and antioxidant properties. So the research of thiotriazoline influence on the treatment of experimental asthma and on the indicators and cytokine status should be provided.
The aim of our research was to determine the character of the disturbances content level of pro-inflammatory interleukin-6, tumor necrosis factor-а and anti-inflammatory cytokine interleukin-10 (IL-10) in the serum of guinea pigs and estimation of thiotriazoline influence on the cytokine profile in the conditions of formation of experimental bronchial asthma.
Materials and methods. Researches were conducted on guinea pigs, divided into six groups: I - control, II - 5th day of experiment, III - 19th day of bronchial asthma development, IV - 26th day and V - 33 d day of model process, VI- guinea-pigs with BA on 33 days after treatment with thiotriazoline which was administered intramuscularly at a dose of 100 mg weight for 10 days. Experimental model of bronchial asthma was restored on guinea-pigs by the V I. Babych method (1979). Euthanasia of animals was carried out by the way of decapitation followed the European Convention for the protection of vertebrate animals used for experimental and other scientific purposes (1985). The IL-6, IL-10 and TNF-a concentration in the blood serum was defined for all groups of guinea-pigs. It was made using hard-phase immune-enzyme analysis (ELISA), by means of the test-system "Diaclone" (France). Numerical results were adapted with static method using Stjudent's criteria.
Results and discussion. At the study of the system of cytokines it was set at experimental BA, that in all probed days of experiment the reliable changes of concentration of both pro-inflammatory and anti-inflammatory cytokines took place in comparing to the group of intact animals. The increasing of pro-inflammatory activity of cytokines is set, at the same time, decreasing of anti-inflammatory IL-10. The introduction of thiotriazoline result in the decreasing of IL-6 on 43, 7% (р<0,05), TNF-a on 41,9% (р<0,05) and substantial increasing of IL-10 on 86,1% (р<0,05) in as compared to the group of animals which was not added influence of this preparation.
Conclusions. It has been determined significant advantage of pro-inflammatory cytokine activity, which increasing according the development of the pathological process and, simultaneously, reducing the anti-inflammatory IL-10. It has been detected corrective action of thiotriazoline on the investigated indices of cytokine profile.
Key words: bronchial asthma, cytokines, thiotriazoline.
Рецензент - проф. КостенкоВ. О.
Стаття надшшла 18. 04. 2014 р.
