CC BY
68
© Грабовський С. С. , *Грабовська О. С.
УДК 636. 52/. 58:519. 11:612. 176 Грабовський С. С., *Грабовська О. С.
ВПЛИВ 1МУНОМОДУЛЯТОР1В ПРИРОДНОГО ПОХОДЖЕННЯ
НА ВМ1СТ Б1ЛКОВИХ ФРАКЦ1Й, КОРТИЗОЛУ ТА ГЛУТАТ1ОНУ В КРОВ1
КУРЧАТ-БРОЙЛЕР1В ЗА УМОВ СТРЕСУ
Львiвський нацюнальний унiверситет ветеринарноГ медицини та бiотехнологiй
iменi С. З. ^жицького (м. Львiв) *1нститут бюлопГ тварин НААН (м. Львiв)
Робота е фрагментом науково-дослщно! роботи «Структура i властивост неорганiчних та органiчних сполук», № держ. реестрацп 0112и000761.
Вступ. Розробка фiзiологiчно обфунтовано! технологiI утримання, годiвлi, експлуатацiI стьсько-господарських тварин ^ зокрема птицi в умовах про-мислових комплексiв неможлива без врахування таких бюлопчних категорiй, як гомеостаз, стрес I адапта^я. Особливо актуальним це стае перед забоем тварин, коли виникае невщповщнють мiж бю-логiчною природою та фiзiологiчними можливостя-ми органiзму. За дм стрес-факторiв в органiзмi птицi вiдбуваються гематологiчнi та бiохiмiчнi змiни: ютот-не збiльшення у кровi тварин ктькост еритроци^в, лейкоцитiв, зокрема сигментоядерних нейтроф^в, моноцитiв, що може бути пов'язане iз посиленням функцiI кровотворних оргаыв. Однак, кiлькiсть лiм-фоци^в у кровi при цьому зменшуеться. Вiдмiчено також зменшення кiлькостi холестеролу, що було виявлено i в наших дослщженнях [4], концентрацii, загального бтка та збiльшення кiлькостi продукпв розщеплення бiлка (сечовини i залишкового азоту), а також концентрацiI глюкози, калiю, натрiю та хло-ридiв [2]. Клiнiчною ознакою стресу у птиц е задиш-ка i опускання крил. 1снуе двi найбтьш важливi фiзi-ологiчнi вiдповiдi на стрес: стимуля^я симпатично, нервово! системи i активацiя зв'язку ппоталамус-п-пофiз-кора наднирникiв. Стресор збуджуе ппотала-мус, продукуеться речовина, що дае сигнал гiпофiзу видiляти у кров адренокортикотропний гормон, пщ впливом якого корковий шар надниркових залоз се-кретуе кортико!ди [26, 31].
За багатьох стресових ситуацм у сироватц1 кровi може змiнюватися спiввiдношення бiлкових фракцм, хоча загальний вмiст бiлка залишаеться стабiльним. Основна маса бiлкiв плазми кровi син-тезуеться у печЫц - це альбумiни (10-16 г / добу), а-глобулЫи, частина р-глобутыв, фiбриноген, ком-поненти системи згортання кровi (II, V VII, IX, X, XI фактори). У клггинах iмунноI системи синтезуеться бiльша частина р- та у-глобутыв. Визначення вмю-ту бiлкових фракцiй кровi е показовим, осктьки мае велике значення для дiагностики багатьох за-хворювань. Альбумiни становлять найбiльшу части-ну бтюв кровi, вiдiграють важливу роль у пщтримц1 онкотичного тиску кров^ беруть участь у транспорт!
багатьох бюлопчних речовин: вуглеводiв, лт^в, окремих гормоыв, а також мiкроелементiв (Купрум, Цинк, Магнiй тощо) [27]. Вмют альбумiну у сироват-цi кровi мае дiагностичне значення, його зниження вказуе на дисфунк^ю печiнки, нирок або шших орга-нiв. Зазвичай цей показник знижений при цукровому дiабетi, важюй алергiI, запальних процесах. Рiвень альбумiну у кровi е показником бток-синтетично! функцiI печшки [11].
Фракцiя гамма-глобулiнiв головним чином скла-даеться з iмуноглобулiнiв [7, 14, 32]. Збтьшення вмiсту альфа-глобутыв спостерiгаеться при запальних процесах в органiзмi (травми, опки, iнфаркт мiокарда), а також при деяких хроычних захворю-ваннях, злоякюних новоутвореннях та при стресах [30]. У той час як зниження вмюту альфа-глобутыв вiдзначаеться при пригычены !х синтезу у печiнцi за умов рiзних патологiчних процесiв, зростання вмюту бета-глобутыв спостертаеться при атероскле-розi, цукровому дiабетi, нефротичному синдромi. Змiна рiвня гамма-глобутыв характерна для захво-рювань, пов'язаних iз виснаженням, пригнiченням iмунноI системи [6].
При до^дженнях фракцiй кровi у курей-несучок [24] та японсько! перепiлки виявлено зниження концентраци глобулiнiв вже через 30-60 хв. пюля дИ гострого стресового чинника [9, 13]. Найбтьш де-тальне вивчення було проведено на горобцях, де показано що ыяких змЫ у концентрацiI глобулiнiв у вщповщь на позбавлення iжi не було н через 1, 2 або 6 годин; лише пюля 18 годин були помiченi вщмш-ност [16].
Вiдновлений глутатiон (ОБИ) присутнм у цен-тральнiй нервовiй системi вивiльняеться у великих кiлькостях як i окисненний глутатiон (ОББО), при деполяризаци астроцитiв [8, 12]. В останн роки по-являються докази того, що ОБИ i ОББО можуть бути вiднесенi до нейромедiаторiв глiального походжен-ня. Змiни у синтезi ОБИ та збiльшене використання у реак^ях детоксикацii порушуе функцюнування не-йронiв [15]. Глутатiон забезпечуе захист кттин вiд багатьох видiв стресу. М'який стрес зазвичай збть-шуе рiвнi глутатiону, а тривалий призводить до зниження його концентраци у рядi тканин [17].
1нтоксика^я тетрахлорметаном (СС1_4) та радю-активне опромiнення викликало значне пщвищення
вмюту глутатюну [5, 22]. Деякими авторами вста-новлено вищий piBeHb глутатюну у пацieнтiв з ви а-женою подагрою та субсиндромальних хворих [28]. Концентра^я глyтaтiонy може служити бюмаркером окиснювально стресу [29].
Мета дослщження полягала у вивченнi ^în вмiстy фрaкцiй бiлкiв, кортизолу та глутатюну у к^в1 кyрчaт-бройлерiв перед забоем i ïx корек^я бiол о-гiчно активними речовинами природного походжен-ня (екстракт селезшки).
Об'ект i методи дослiдження. Дослщ провели на 15 курчатах-бройлерах, якi утримувалися на стандартному рацюы ТзОВ «Великолюбiнське» смт Великий Любшь Городоцького району Львiвськоï область Для дослiдження було сформовано три групи курчат одномюячного вiкy (по 5 курчат у кожнм).
Як бюлопчно aктивнi речовини у передзабмний перiод (за п'ять дiб до забою) до корму курчат-брой-лерiв аерозольним методом вводили екстракт се-лезiнки, одержаний iз застосуванням ультразвуку (I дослщна група) та без використання ультразвуку (II дослщна група). Екстракти наносили на комбг корм аерозольним методом (70°спиртовий розчин об'емом 1,4 мл на курча). Птиц1 контрольно! групи (III група) таким же чином додавали до корму 70°спир-товий розчин в аналопчному об'емг Контроль за пощанням комбкорму здмснювали щоденно. Кур-чата-бройлери корм пощали повнютю. Забм птиц1 проводили у ранковий час.
При експериметт yci бюетичы норми згщно з бвропейською конвенц1ею «Про захист хребетних тварин, яю використовуються для експерименталь-них i наукових цтей» (Страсбург, 1986 p.) i «Загаль-них етичних принцип1в експеримент1в на тваринах», ухвалених Першим Нацюнальним конгресом з 6io-етики (Ки!в, 2001)тадотриманням принцип1в гуман-HOCTi, викпаденими у директив! бвропейсько! Спть-ноти [23] були збереженг
Роздтення протешових фракцм сироватки кров1 проводили методом горизонтального електро-форезу у пол1акриламщному гел1 (ПААГ). Концен-трац1я акриламщу становила 7,5%. У плазм1 кров1 визначали кортизол за стандартною методикою. Концентрац1ю глутатюну у кров1 визначали пюля вiдновлення глутатюну за змшою оптич-но'!' активности викликаною утворенням aнiонy тiонiтро-бензоaт-диaнiонy у реак-ци DTNB (5,5'-дитюбю(2-ытро-бензойно'! кислоти) з вщновленним глyтaтiоном. [3].
Математичну обробку резyльтaтiв тварин опрацьовували статистично за до-помогою пакету програм Statistica 6. 0 i Microsoft Excel for Windows XP. Вiрогiднiсть рiзниць оцiнювaли за t-критерiем Стью-дента. Результати вважали вiрогiдними при P < 0,05.
Результати дослщжень та обгово-рення. Крове дзеркалом адаптивнихпро-
UeciB, ЯК| рОЗВИВЭЮТЬСЯ В OpraHi3Mi ПТИЦГ Примггка Тому МИ проводили ОЦШКу СП|ВВЩНОШеННЯ контролю.
Рис. 1. Електрофореграма бткових фракцiй плазми кровi курчат-бройлерiв.
бiлкових фракцiй плазми кровi курчат-бройлерiв, якимдодатково до корму згодовували бюлопчно активы речовини природного походження.
Електрофоретичне роздтення бткових фракцш плазми кровi експериментальних тварин методом електрофорезу в ПААГ наведено на рис. 1.
Проведен доогмдження показали, що порiвня-но з курчатами контрольно! групи виявлено деяк зм1ни у вщсотковому значенн1 концентрацП бткових фракцм.
У курчат-бройлер1в обох дослщних груп дещо знизилась концентрац1я преальбумш1в та альбу-м1н1в, у той час як збтьшився вмют у-глобулш1в на 54% - I дослщна група та 46% - II дослщна група, вщповщно (рис. 2).
Збтьшення концентрацП глобулшово! фракци можна пояснити впливом пол1ам1н1в (путресцину, спермшу та спермщину), як1 мютяться в екстракт! селезшки I впливають на продукування !х оргаыз-мом [10, 20].
У плазм1 кров1 курчат, як1 додатково з кормом отримували екстракт селезшки (I дослщна група), р1вень кортизолу був в1рогщно нижчим (Р<0,05) по-р1вняно з контролем, що може свщчити про змен-шення стресу перед забоем (табл.).
У наших дослщженнях вщм1чено зменшення концентрацП кортизолу у плазм1 кров1 курчат-бройлер1в дослщних груп за умов стресу, що сп1впадае з дослг дженнями [18]. Деяю автори не вщм1чали змш [1], а
■ 1 Дослщна
□ 2 Дослщна
□ Контрольна група
Рис. 2. Сшввщношення бткових фракцш плазми KpoBi курчат-бройлерт (%; M ±m; n = 5).
статистична в1ропднють р1зниць: * - Р<0,05; ** - Р<0,01 порюняно до
Таблиця
PiBeHb кортизолу у плазмi KpoBi та глутатiону у KpoBi курчат-бройлерiв перед забоем (M ± m, n = 5)
Групи Кортизол, нг/мл Глутатюн, Нмоль/ мг бтка
I Дослщна 7,88 ± 1,201* 24,002 ± 0,81*
II Дослщна 11,04 ± 1,403 27,618 ± 2,9
Контрольна 12,92 ± 1,404 28,542 ± 1,252
Примггка: статистична вiрогiднiсть |^зниць: * - Р<0,05 порiвняно до контролю.
шип вказують, що такi змiни показниюв потребують годин, якщо не юлька днiв [16, 19, 33]. Правдопо-дiбно, що гостра стресова реакцiя-вiдповiдь може стосуватися фiзiологiчних або еколопчних умов г зокрема передзабiйного стресу.
Зменшення концентрацiI вiльного кортизолу у плазмi кровi курчат I дослщно! групи, яким додатко-во згодовували екстракт селезiнки, пов'язано з пщ-вищення вмiсту глобулiновоI фракцiI, що совпадав з доогмдженнями на щурах пщ час стресу (вимушено-го плавання). Автори вщзначають надзвичайно ди-намiчну роль глобулiнiв, якi регулюють концентрацiю глюкокортикоIдiв пiд час гострого стресу [21, 25].
Нами виявлено вищi рiвнi глутатiону у кровi кур-чат-бройлерiв контрольно! групи, що може бути проявом окиснювального стресу або гальмуванням транспорту амшокислот у клггини за рахунок зни-ження активной у-глутамтьного циклу.
На завершальнм стадiI вiдгодiвлi птицi слiд вра-ховувати передзабiйний стрес та застосовувати бю-логiчно активнi речовини природного походження, якi сприятимуть зменшенню негативного впливу такого стресу на якють продукци.
Висновки.
1. Додаткове введення екстракту селезш-ки супроводжувалось пiдвищенням концентрацii, у-глобул^в у плазмi кровi курчат-бройлерiв.
2. У плазмi кровi курчат-бройлерiв, якi з кормом отримували екстракт селезшки, встановлено вiро-гiдно нижчий рiвень кортизолу порiвняно з контролем, що може свщчити про зменшення стресу перед забоем.
3. Екстракт селезшки сприяе зменшенню впливу стресу перед забоем та пщвищенню якост м'яса курчат-бройлерiв.
Перспективи подальших дослiджень. У по-
дальшому буде дослiджено вплив екстракту селезшки на бiлковi фракци плазми кровi свиней з метою пщвищення природно! резистентностi та поперед-ження передзабiйного стресу.
Л^ература
1. Азарова Т. О. Динамика стресс-ассоциированных гормонов и показателей антиоксидантной защиты у молодняка кросса «Шейвер белый» / Т. О. Азарова, Л. Л. Осипова, С. Ю. Зайцев [и др.] // Птица и птицепродукты. - 2013. - № 1.
- С. 25-29.
2. Байдевлятов А. Б. Методические рекомендации по профилактике стрессов в птицеводстве / А. Б. Байдевлятов, В. П. Николаенко, Л. А. Ольховик. - Харьков, 1979. - 13 с.
3. Вл1зло В. В. Лабораторш методи досл1джень у бюлогп, тваринництв1 та ветеринаршй медицин! : довщник / В. В. Вл1зло. Р. С. Федорук, I. Б. Ратич [та ¡н.]; За ред. В. В. Вл1зла. - Льв1в : Сполом, 2012. - 764 с.
4. Грабовський С. С. Вмют окремих кпаав л1пщ1в у кров1 курчат-бройлер1в при передзабмному стрес1 / С. С. Грабовський // Бюлопя тварин. - 2013. - Т. 15. - № 4. - С. 24-31.
5. Заводник И. Б. Изменения во времени параметров респираторной активности и системы антиоксидантной защиты митохондрий печени крыс при острой интоксикации и диабете. Кислород и свободные радикалы : материалы Республиканской научно-практической конференции / И. Б. Заводник, Е. А. Лапшина, В. Т. Черевик [и др.] // Под ред. В. В. Зинчука. - Гродно : ГрГМУ, 2014. - 228 с.
6. Кшмова О. Змша стввщношення бткових фракцм сироватки кров1 у експериментальних тварин р1зного вку п1сля 1мушзаци цитотоксичною сироваткою хворих з ауто1мунним захворюванням - м1астен1ею / О. Кл1мова, О. Звяпнцева, А. Малишев // Вюн. Льв1в. ун-ту. Сер. бюл. - 2011. - Вип. 55. - С. 27-33.
7. Alberghina D. Changes in serum total proteins, protein fractions and albumin-globulin ratio during neonatal period in goat kids and their mothers after parturition / D. Alberghina, C. Giannetto, I. Vazzana [et al.] // Annals of Animal Science. - 2011. -Vol. 11(2). - P. 251-260.
8. Aoyama K. Regulation of neuronal glutathione synthesis / K. Aoyama, W. Masahiko, N. Toshio // Journal of pharmacological sciences. - 2008. - Vol. 108. 3. - P. 227-238.
9. Breuner C. W. Plasma binding globulins andacute stress response / C. W. Breuner, S. E. Lynn, G. E. Julian [et al.] // Hormones and Metabolic Research. - 2006. - Vol. 38. - P. 260-268.
10. Chowhan R. K. Polyamines in modulating protein aggregation / R. K. Chowhan, L. R. Singh // Journal of Proteins & Proteomics.
- 2013. - Vol. 3(2). - P. 160-162.
11. Das S. K. Effects of long term ethanol consumption on cell death in liver / S. K. Das, S. Mukherjee, D. M. Vasudevan // Clin. Biochem. - 2011. - Vol. 26, № 13. - P. 84-87.
12. Dringen R., Hirrlinger J. Glutathione pathways in the brain / R. Dringen, J. Hirrlinger // Biol. Chem. - 2003. - Vol. 384. - P. 505-516.
13. Fokidis H. B. Corticosterone and corticosteroidbinding globulin in birds: relation to urbanization in a desert city / H. B. Fokidis, M. Orchinik, P. Deviche // General and Comparative Endocrinology. - 2009. - Vol. 160. - Р. 259-270.
14. Kaneko J. J. Serum proteins and the dysprotidemias. In : Clinical biochemistry of domestic animals. 5th Ed. / J. J. Kaneko.
- London, UK : Academic Press, 1997. - Р. 117-138.
15. Keelan J. Quantitative imaging of glutathione in hippocampal neurons and glia in culture using monochlorobimane / J. Keelan, N. J. Allen, D. Antcliffe [et al.] // J. Neurosci. Res. - 2001. - Vol. 66(5). - P. 873-884.
16. Lynn S. E. The effects of short-term fastingon activity, corticosterone, and corticosterone binding globulin in amigratory songbird, Gambel's white-crowned sparrow (Zonotrichia leucophrys gambelii) / S. E. Lynn, C. W. Breuner, J. C. Wingfield [et al.] // Hormones and Behavior. - 2003. - Vol. 43. - Р. 150-157.
17. Maher P. The effects of stress and aging on glutathione metabolism / P. Maher // Ageing research reviews. - 2005. - Vol. 4.2. - Р. 288.
18. Malisch J. L. How acute is the acute stress response? Baseline corticosterone and corticosteroid-binding globulin levels change 24h after an acute stressor in Japanese quail / J. L. Malisch, D. G. Satterlee, J. F. Cockrem [et al.] // General and comparative endocrinology. - 2010. - Vol. 165(2). - Р. 345-350.
19. Marti O. Inhibition of corticosteroid-binding globulin caused by a severe stressor is apparently mediated by the adrenal but not by glucocorticoid receptors / O. Marti, M. Martin, A. Gavalda // Endocrine. - 1997. - Vol. 6. - Р. 159-164.
20. Matti V. Interaction of polyamines with proteins of human plasma: a preferential aggregation of fibrinogen and fibronectin (cold insoluble globulin) / V. Matti, S. Eija, R. Pekka // Biochimie. - 1980. - Vol. 62. - Р. 99-104.
21. Minni A. M. Critical role of plasma corticosteroid-binding-globulin during stress to promote glucocorticoid delivery to the brain: impact on memory retrieval / A. M. Minni, R. Dorey, C. Picard [et al.] // Endocrinology. - 2012. - Vol. 153(10). -Р. 4766-4774.
22. Navarro J. Blood glutathione as an index of radiation-induced oxidative stress in mice and humans / J. Navarro, E. Obrador, J. A. Pellicer [et al.] // Free Radical Biology and Medicine. - 1997. - Vol. 22(7). - Р. 1203-1209.
23. Official Journal of the European Union L276/33. DIRECTIVE 2010/63/EU OF THE EUROPEAN PARLIAMENT AND OF THE COUNCIL of 22 September 2010 on the protection of animals used for scientific purposes. 86/609/EC. 20. 10. 2010.
24. Poosuwan K. Long-term feeding effects of dietary protein levels on egg production, immunocompetence and plasma amino acids of laying hens in subtropical condition / K. Poosuwan, C. Bunchasak, C. Kaewtapee // Journal of animal physiology and animal nutrition. - 2010. - Vol. 94. 2. - Р. 186-195.
25. Qian X. A rapid release of corticosteroid-binding globulin from the liver restrains the glucocorticoid hormone response to acute stress / X. Qian, S. K. Droste, M. GutiMrrez-Mecinas [et al.] // Endocrinology. - 2011. - Vol. 152(10). - Р 3738-3748.
26. Reeder D. M. Stress in free-ranging mammals:integrating physiology, ecology, and natural history / D. M. Reeder, K. M. Kramer // J. Mammal. - 2005. - Vol. 86. Р. 225-235.
27. Ritchie R. Wellness assessment: Targeted testing for specific problems which are not the measurement of health / R. Ritchie // Serum Proteins in Clinical Medicine. Clinical Section. - Foundation for Blood Research. Publishers: Scarborough. - 1999. -Vol. II. - P. 120. 00-1-120. 00-9.
28. Rosa A. R. Altered plasma glutathione levels in bipolar disorder indicates higher oxidative stress; a possible risk factor for illness onset despite normal brain-derived neurotrophic factor (BDNF) levels / A. R. Rosa, N. Singh, E. Whitaker [et al.] // Psychological medicine. - 2014. - Р. 1-10. - Код доступу http://www. psych. ox. ac. uk/publications/447561.
29. Rossi R. Oxidized forms of glutathione in peripheral blood as biomarkers of oxidative stress / R. Rossi, I. Dalle-Donne, A. Mil-zani, D. Giustarini // Clinical chemistry. - 2006. - Vol. 52(7). - Р. 1406-1414.
30. Sanandam M. R. Impact of endotoxin on physiological responses of rat exposed to textile environment / M. R. Sanandam // International Journal of Pharmaceutical Applications. - 2011. - Vol. 2. 3. - Р. 155-158.
31. Sapolsky R. M. How do glucocorticoids influence stress responses? integrating permissive, suppressive, stimulatory, and preparative actions / R. M. Sapolsky, L. M. Romero, A. U. Munck. - Endocr. Rev. - 2000. - Vol. 21. - Р. 55-89.
32. Thrall M. A. Laboratory evaluation of plasma and serum proteins. In : Veterinary hematology nd clinical chemistry. (Ed.) / M. A. Thrall. - Philadelphia, USA : Lippincott Williams and Wilkins, 2004. - Р. 401-415.
33. Tinnikov A. A. Responses of serum corticosterone and corticosteroid-binding globulin to acute and prolonged stress in the rat / A. A. Tinnikov // Endocrine. - 1999. - Vol. 11. - Р. 145-150.
УДК 636. 52/. 58:519. 11:612. 176
ВПЛИВ 1МУНОМОДУЛЯТОР1В ПРИРОДНОГО ПОХОДЖЕННЯ НА ВМ1СТ Б1ЛКОВИХ ФРАКЦ1Й, КОР-ТИЗОЛУ ТА ГЛУТАТ1ОНУ В КРОВ1 КУРЧАТ-БРОЙЛЕР1В ЗА УМОВ СТРЕСУ
Грабовський С. С. , Грабовська О. С.
Резюме. У статт представлен результати визначення вмюту протешових фракцм, кортизолу та глутатг ону у кровi курчат-бройлерiв, яким додатково до корму згодовували бюлопчно активы речовини природного походження. У якост антистресорiв та iмуномодуляторiв у передзабмний перюд були бюлопчно активы речовини з екстракту селезшки, отриманого iз застосуванням та без використання ультразвуку. Аерозольне введення екстракту селезшки до корму збтышуе концентрацю у-глобул^в та вiрогiдно знижуе рiвень кортизолу у плазмi кровi курчат-бройлерiв порiвняно з контролем, що може свщчити про зменшення стресу перед забоем. Встановлено вищий рiвены глутатюну у кровi курчат-бройлерiв контрольно! групи. Отриман нами результати можуты бути використан у доотдженнях показниюв клмтинного iмунiтету i концентрацп стресо-вих гормоыв, зокрема кортизолу, на стьськогосподарських тваринах з метою пщвищення резистентност1 оргаызму, корекци та ывелювання стресового стану тварин перед забоем та покращення якост продукцп.
Ключовi слова: курчата-бройлери, передзабмний стрес, екстракти селезшки, ультразвук, бiлковi фрак-ци, кортизол, глутатюн.
УДК 636. 52/. 58:519. 11:612. 176
ВЛИЯНИЕ ИММУНОМОДУЛЯТОРОВ ЕСТЕСТВЕННОГО ПРОИСХОЖДЕНИЯ НА СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКОВЫХ ФРАКЦИЙ, КОРТИЗОЛА ГЛУТАТИОНА В КРОВИ ЦЫПЛЯТ-БРОЙЛЕРОВ В УСЛОВИЯХ СТРЕССА
Грабовский С. С.,Грабовская А. С.
Резюме. В статье представлены результаты определения содержания белковых фракцм, кортизо-ла и глутатиона в крови цыплят-бройлеров, которым дополнительно к корму добавляли биологически активные вещества естественного происхождения. В качестве антистрессоров и иммуномодуляторов
в передубойный период служили биологически активные вещества из экстракта селезенки, полученного с использованием и без применения ультразвука. Аэрозольное введение экстракта селезенки к корму увеличивает концентрацию у-глобулинов и снижает уровень кортизола в плазме крови цыплят-бройлеров по сравнению с контролем, что может свидетельствовать о снижении стресса перед убоем животного. Установлено высший уровень глутатиона в крови цыплят-бройлеров контрольной группы. Полученные нами результаты могут быть использованы в исследованиях показателей клеточного иммунитета и концентрации стрессовых гормонов, в частности кортизола, на сельскохозяйственных животных с целью повышения резистентности организма, коррекции и нивелирования стрессового состояния животных перед убоем и улучшение качества продукции.
Ключевые слова: цыплята-бройлеры, передубойный стресс, экстракты селезенки, ультразвук, белковые фракции, кортизол, глутатион.
UDC 636. 52/. 58:519. 11:612. 176
Natural Origin Immunomodulators Influence on Protein Fractions, Cortisol and Glutathione Content in Broiler Chickens Blood under Stress
Grabovskyi S. S. , Grabovska O. S.
Abstract. The results of determination of protein fractions, Cortisol and glutathione content in blood of broiler chickens, which further added to the feed of natural origin biologically active substances are presented in the article.
As an antistressors and immunomodulators in pre-slaughter period are using of spleen extract biologically active substances were obtained with and without ultrasound application.
The purpose of research - determination of changes of protein fractions, cortisol and glutathione content in broiler chickens blood before slaughter and their correction of natural origin biologically active substances (spleen extract).
Object and research methods. The experiment was conducted on 15 broiler chickens with standard diet.
Three groups of broiler chickens one month of age (5 chickens each) was formed for research.
The spleen extract was obtained with (I research group) and without ultrasound application (II research group), were using as an biologically active substances to the feed broiler chickens in pre-slaughter period (five days before slaughter).
The extracts were applied to feed by aerosol method (70 ° alcohol solution of spleen extract volume of 1.4 ml per chicken).
The control group chickens (group III) received to the feed in the same way of 70 ° alcohol solution in the same volume.
The feed eating by broiler chickens was exercised daily. The broiler chickens ate food completely. The broiler chickens slaughter was carried out in the morning.
The blood plasma protein fractions separation was carried out by horizontal electrophoresis in polyacrylamide gel (PAAG).
Cortisol level were determined in broiler chickens blood plasma. Glutathione concentration were determined in broiler chickens blood.
Mathematical treatment of the research results worked statistically using the software package Statistica 6.0 and Microsoft Excel for Windows XP. Probability differences was assessed by Student t-test and results considered likely at P < 0.05.
Results and discussion. We measured the ratio of blood plasma protein fractions of broiler chickens, which in addition to the feed fed of natural origin biologically active substances.
As a result of research was found that aerosol introduction of the spleen extract to the broiler chickens feed increases the y-globulin concentration in broiler chickens blood plasma of the two experimental groups compared to the control.
Cortisol level in broiler chickens (which further added to the feed of spleen extract obtained with ultrasound application (I research group) blood plasma was reliable lower (Р < 0. 05) compared to control, that may to indicate decreasing of stress before slaughter
The free cortisol level decreasing in broiler chickens blood plasma, perhaps, is associated with increasing of globulin fraction content.
The glutathione level was found reliable higher (Р < 0. 05) in the broiler chickens blood of the control group.
On the poultry feeding final stage is necessary to consider a pre-slaughter stress and to apply of natural origin biologically active substances.
The results which obtained can to use in researches of cell immunity indices and stress hormones, such as cortisol, on farm animals for organism resistance increasing, correction and avoid their pre-slaughter stress and improve product quality.
Keywords: broiler chickens, pre-slaughter stress, spleen extract, ultrasound, protein fractions, cortisol, glutathione.
Рецензент - проф. ДубШШ С. I.
Стаття надшшла 25. 07. 2014 р.
