16https://doi.org/10.29296/2618723X-2021-02-06
Возможности регуляции численности дофаминергических нейронов
в профилактике гепатокарцином
О.А. Бочарова1, доктор биологических наук, профессор, заведующая лабораторией иммунофармакологии;
ORCID 0000-0002-6365-2888 А.В. Ревищин2, кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник лаборатории нейрогенетики
и генетики развития; ORCID 0000-0002-6007-6440 Е.В. Бочаров1, кандидат медицинских наук, старший научный сотрудник лаборатории иммунофармакологии;
ORCID 0000-0003-2342-9881 Р.В. Карпова1, кандидат биологических наук, старший научный сотрудник лабораториииммунофармакологии;
ORCID 0000-0003-4893-1472 В.Г. Кучеряну3, доктор медицинских наук, профессор, главный научный сотрудник лаборатории общей патологии
нервной системы; ORCID 0000-0002-5071-3581 М.В. Уткина1 - кандидат биологических наук, младший научный сотрудник лаборатории иммунофармакологии; В.Б. Матвеев1 - доктор медицинских наук, профессор, член-корреспондент РАН, заместитель директора по научной и инновационной работе ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России; ORCID 0000-0001-7748 Г.В. Павлова2 - доктор биологических наук, профессор, заведующая лабораторией нейрогенетики и генетики
развития; ORCID 0000-0002-6885-6601 1ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России,
Россия, 115478, Москва, Каширское шоссе, д. 24; 2ФГБУН «Институт высшей нервной деятельности и нейрофизиологии» РАН, 117485, Москва, ул. Бутлерова, д. 5А 3ФГБНУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии» РАН, Россия, 125315, Москва, ул. Балтийская, д. 8 E-mail: imufarm@rambler.ru
Резюме. Целью работы явилось изучение возможности регуляции численности дофаминергических нейронов у высокораковых мышей-самцов СВА (сублиния CBA/LacY) при спонтанном гепатоканцерогенезе. Мыши профилактически получали стандартизованный комплексный фитоадаптоген (КФА), включающий компоненты 40 водноспиртовых растительных экстрактов, в том числе адаптогенов женьшеня, лимонника, родиолы розовой, а также соединения фенольной природы. КФА обладает антимутагенными, антиоксидантными, иммуномодулирующими, противоопухолевыми свойствами. Опытные животные получали 10% раствор КФА с питьевой водой в течение 1-го месяца постнатального онтогенеза, включая период (5-15-й день жизни), соответствующий завершению дифференцировки нормальной ткани печени. Уровень дофаминергических нейронов определяли имму-ногистохимически по количеству тирозингидроксилаза-позитивных клеток в среднем мозге. Уровень молодых нейронов определяли иммуногистохимически по количеству Ю67-позитивных клеток в субгранулярном слое зубчатой фасции гиппокампальной формации. Применение КФА в профилактическом режиме способствует сохранению высокой численности дофаминергических нейронов головного мозга в позднем онтогенезе мышей-самцов линии СВА. Предотвращение потери дофаминергических нейронов при воздействии КФА согласуются с предыдущими данными, полученными у мышей C57BL с индуцированным паркинсонизмом. В этом случае КФА предупреждал гибель дофаминергических нейронов головного мозга по типу апоптоза, подавляя уровень каспазы-3, при этом двигательная активность животных восстанавливалась. Учитывая возможность регуляции численности дофаминергических нейронов головного мозга, экспрессии лейкоцитарных интегринов на клетках периферической крови, сывороточного содержания цитокинов-6 и -10, стресс-гормона кортикостерона, уровня опухолеобразования, а также выживаемости и качества жизни мышей-самцов СВА, можно полагать роль центральных нейрональных и периферических иммуноадгезионных механизмов в контроле развития экспериментальных гепатокарцином. Вместе с тем следует учесть, что модуляция центрального и периферического дофаминов, которые напрямую связаны друг с другом, позволяет детализировать механизмы усиления опухолевого роста при хроническом стрессе.
Ключевые слова: спонтанный канцерогенез,мыши СВА, профилактика рака,дофаминергические нейроны,адаптогены.
Для цитирования: Бочарова О.А, Ревищин А.В., Бочаров Е.В., Карпова Р.В., Кучеряну В.Г., Уткина М.В., Матвеев В.Б., Павлова Г.В. Возможности регуляции численности дофаминергических нейронов в профилактике гепатокарцином. Лабораторные животные для научных исследований. 2021; 2:47-53. https://doi.org/10.29296/2618723X-2021-02-06
2021 LABORATORY ANIMALS FOR SCIENCE №2
Possibility of dopaminergic neurons number regulation in the hepatocarcinomas prevention
O.A. Bocharova, ORCID 0000-0002-6365-2888 A.V. Revishchin, ORCID 0000-0002-6007-6440 E.V. Bocharov, ORCID 0000-0003-2342-9881 R.V. Karpova, ORCID 0000-0003-4893-1472 V.G. Kucheryanu, ORCID 0000-0002-5071-3581 M.V. Utkina V.B. Matveev, ORCID 0000-0001-7748 G.V. Pavlova, ORCID 0000-0002-6885-6601 Е-mail: imufarm@rambler.ru
Abstract. The aim of the work was to study the possibility of regulating the number of dopaminergic neurons in high-cancer CBA mice-males (CBA/LacY subline) during spontaneous hepatocancerogenesis. The mice were prophylactically treated with a standardized phytoadaptogene complex (PAC) consisting components of 40 water-alcohol plant extracts including adaptogens Panax ginseng, Schisandra chinensis, Rhodiola rosea as well as compounds of a phenolic nature. PAC has antimutagenic, antioxidant, immunomodulating properties. Experimental animals received 10% PAC solution with drinking water during the first month of postnatal ontogenesis including the period (5-15 days of life) corresponding to the termination of normal liver tissue differentiation. The level of dopaminergic neurons was determined by the immunohistochemical method according to the number of tyrosinehydroxylase-positive cells in the midbrain. The level of young neurons was determined by the immunohistochemical method according to the number of Ki67-positive cells in the subgranular layer of the hippocampal formation dentate fascia. The use of PAC in early postnatal ontogenesis (as a preventive application) promotes the preservation of the dopaminergic neurons high number in the brain during the late ontogenesis of males CBA correlating with a decrease in the incidence of tumour formation and an increase of the animals lifespan. The prevention of dopaminergic neurones loss in this study follows the previous data in C57BL mice with induced parkinsonism. PAC prevented the death of brain dopaminergic neurones by the type of apoptosis suppressing the level of caspase 3 in C57BL mice also. At the same time the motor activity of the animals was restored. Taking into account the possibility of regulating in the brain of CBA males the number of dopaminergic neurons, the expression of leukocyte integrins on peripheral blood cells, cytokines -6, -10 and stress hormone corticosterone serum levels, tumour formation, as well as the survival and quality of life we can expect the role of central neuronal and peripheral immune adhesion mechanisms in the control of experimental hepatocarcinomas development. At the same time it should be noted that the modulation of central and peripheral dopamine levels which are directly related to each other makes it possible to detail the tumour growth acceleration mechanisms of chronic stress.
Key words: spontaneous carcinogenesis, CBA mice, cancer prevention, dopaminergic neurons, adaptogens, herbal formula
For citation: Bocharova O.A., Revishchin A.V., Bocharov E.V., Karpova R.V., Kucheryanu V.G., Utkina M.V., Matveev V.B., Pavlova G.V. Possibility of dopaminergic neurons number regulation in the hepatocarcinomas prevention. Laboratory Animals for Science. 2021; 2:47-53. https://doi.org/10.29296/2618723X-2021-02-06
Введение
В ранее проведенных исследованиях у мышей-самцов СВА, генетически предрасположенных к развитию гепатокарцином, при профилактическом воздействии (в раннем постна-тальном онтогенезе) комплексного фитоадапто-гена (КФА) наблюдали снижение частоты опухолеобразования на 32%, числа и размеров опухолей. При этом выживаемость увеличилась на 16%. Противоопухолевый эффект КФА сопровождался повышением двигательной активности мышей, сохранением стабильной массы тела, удовлетворительным качеством волосяного покрова. Это сочеталось с повышением экспрессии лейкоцитарных интегринов LFA-1 и Мас-1 на клетках периферической крови, инфильтрацией гепатом лейкоцитами и деструкцией опухолевых узлов, снижением сывороточного уровня интерлей-кинов-6 и -10 [1-5]. Полученные результаты по уве-
личению продолжительности жизни послужили основанием для оценки динамики численности дофаминергических нейронов (ДА-нейронов) в головном мозге мышей СВА и определения возможности ее регуляции с помощью КФА.
Потеря ДА-нейронов играет существенную роль при старении и стрессе. Нейромедиатор дофамин, содержащийся в ДА-нейронах, является центральным регулятором продолжительности жизни, антидепрессантом и противоопухолевым агентом. Дофамин синтезируется как в центральной нервной системе, так и в периферическом организме (вне головного мозга). Наблюдается прямая корреляция между уровнями центрального и периферического дофамина. Дофамин также способствует дифферен-цировке цитотоксических CD8+лимфоцитов периферической крови, конъюгации их с опухолевыми клетками, участвуя в активных фазах иммунного ответа [6, 7].
Таблица 1. Численность дофаминергических нейронов среднего мозга у мышей-самцов СБА под воздействием КФА в раннем онтогенезе
Группы Количество дофаминергических нейронов у мышей в возрасте:
3-4 мес 21-22 мес
Контроль 11 в24,0±479,6 3460,0±343,4*
КФА, профилактическое воздействие - 11 236,21554.7**
Примечание: * - статистически значимое различие по отношению к данным в возрасте 3-4 мес (р=0,0002); ** - статистически значимое различие по отношению к контрольной группе (р = 0,001).
Целью настоящей работы явилось изучение возможности регуляции численности дофаминергических нейронов у высокораковых мышей-самцов СВА (сублиния CBA/LacY) при спонтанном гепатоканцерогенезе.
Материалы и методы
В исследование включены 230 мышей-самцов линии СВА. Источник получения мышей: локальная колония ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России. Животных содержали и выводили из эксперимента в соответствии с требованиями Европейской директивы по охране животных, используемых в научных целях. Мыши I контрольной группы (n = 90) получали в качестве питья воду. Поскольку КФА является водно-спиртовым экстрактом, мыши II контрольной группы (n = 60) получали 3% раствор этанола в воде (что соответствует концентрации этанола в получаемом животными препарате). Результаты определения изучаемых параметров в обеих контрольных группах не имели достоверных различий, поэтому мыши этих групп были объединены в одну контрольную группу (n = 150). Мыши опытной группы (n = 80) получали 10% раствор КФА с питьевой водой в профилактическом режиме - в течение 1-го месяца постнатального онтогенеза, включая период (515-й день жизни), соответствующий завершению дифференцировки нормальной ткани печени. КФА получали самки, начиная с последних сроков беременности, до отъема детенышей в возрасте 3 нед. Затем в течение 1 нед детеныши-самцы пили воду с препаратом самостоятельно.
В исследовании применили воздействие нетоксичного природного иммуномодуля-тора - комплексного фитоадаптогена (КФА), стандартизованного биологическим и химическим методами, и включающего компоненты 40 водноспиртовых растительных экстрактов, в том числе адаптогенов женьшеня (Panax ginseng), лимонника (Schisandra chinensis), ро-диолы розовой (Rhodiola rosea), а также соединения фенольной природы (флавоноиды, три-
Рис. 1. Микрофотография среза мозга мыши, окрашенного на тирозингидроксилазу, с наложенным тестовым квадратом. Сплошными стрелками помечены ядра тирозингидроксилаза-позитивных клеток, включенных в подсчет, пунктирной стрелкой - ядро исключенной из подсчета клетки
терпеновые гликозиды и др.) [8-11]. КФА обладает иммуномодулирующими, в том числе адгезио-генными, антиоксидантными, антимутагенными, гормономодулирующими, нейропротек-торными свойствами [12-16].
Уровень ДА-нейронов определяли иммуноги-стохимическим методом по количеству тирозин-гидроксилаза-позитивных клеток в среднем мозге. Уровень молодых нейронов определяли иммуногистохимическим методом по количеству К1б7-позитивных клеток в субгранулярном слое зубчатой фасции гиппокампальной формации. Показатели оценивали ввозрасте животных 3-4 и 21-22 мес. Статистический анализ результатов проводили с использованием одно-факторного дисперсионного анализа ООТ-WAYANOVA программы Statistica 6,0, достоверными считали различия при р<0,05.
Результаты и обсуждение
Результаты подсчета численности ДА-нейронов, иммунопозитивных по тирозингидроксилазе, представлены в табл. 1. На рис. 1 показана микрофотография среза мозга мыши, окрашенного на тирозингидроксилазу.
Таблица 2. Численность пролиферирующих нейронов (К167-позитивных клеток) в субгранулярном слое зубчатой фасции гиппокампа у мышей-самцов СБА под воздействием КФА в раннем онтогенезе
Группы Количество Ю67-позитивнык клеток у мышей в возрасте:
3-4 мес 21-22 мес
Контроль 116,2+8,3
КФА, профилактическое воздействие - 13,2+1,8
Примечание: * - статистически значимое различие по отношению к данным в возрасте 3-4 мес (р=0,0001).
SO рт
50 рт
Рис. 1. Микрофотография участка зубчатой фасции гиппокампальной формации, содержащего клетку с Ю67-иммунопозитивным ядром (а, белая стрелка) в субгранулярном слое. То же ядро отмечено стрелкой на микрофотографии б в свете люминесценции бисбензимида при ультрафиолетовом освещении
Как следует из табл. 1, количество ДА-нейронов среднего мозга у молодых половозрелых (3-4 мес) мышей-самцов контрольной группы составило 11 824±480. При увеличении возраста и на фоне спонтанного опухолеобразования наблюдали статистически достоверное снижение данного показателя на 29% (до 8460±343; р=0,0002).
Профилактическое воздействие КФА препятствовало снижению ДА-нейронов по сравнению с этим показателем у контрольных животных в возрасте 21-22 мес (11 236,2±554,7; р=0,001).
Таким образом, кратковременное введение КФА в раннем онтогенезе приводит к предупреждению возрастного снижения количества ДА-нейронов головного мозга у мышей СВА. В данном случае мы имеем дело не только с процессом старения, но и со спонтанным гепатоканцерогенезом. Поэтому указанный эффект может быть опосредован влиянием КФА как на процессы старения, как на механизмы канцерогенеза, так и на то и другое одновременно.
В результате показана высокая положительная корреляция между численностью ДА-нейронов в позднем онтогенезе и продолжительностью жизни мышей (Я = +0,93±0,02). Вместе с тем выявлена высокая обратная зависимость между численностью ДА-нейронов и частотой спонтанных гепатокарцином у мышей-самцов СВА (Я = - 0,91±0,03).
Результаты подсчета количества пролифериру-ющих молодых нейронов представлены в табл. 2. На рис. 2 показана микрофотография среза мозга мыши, окрашенного на К167 белок. Из данных табл. 2 следует, что численность молодых нейронов, экспрессирующих К167, у высокораковых мышей СВА в возрасте 3-4 мес составила 116,0±8,3. В возрасте 22 мес у этих мышей изучаемый показатель снизился до 13,9±1,6 (р<0,00014). Количество пролиферирующих нейронов при профилактическом воздействии КФА у старых мышей не изменилось в сравнении с контрольными животными в этом же возрасте (13,2±1,8; р = 0,97). На нейро-генез КФА не повлиял. Полученные результаты согласуются с данными литературы о том, что дофамин ингибирует нейрогенез во взрослом гиппо-кампе. Предупреждение потери ДА-нейронов может снижать необходимость их восполнения. Поэтому усиление пролиферации молодых нейронов не является оправданным, что и подтверждают полученные данные.
Результаты предупреждения потери ДА-нейронов при воздействии КФА согласуются с ранее полученными данными у мышей C57BL с индуцированным паркинсоническим синдромом, где выявлено, что КФА предотвращает гибель ДА-нейронов головного мозга по типу апоп-
тоза, подавляя уровень каспазы-3. При этом нарушенная двигательная активность животных восстанавливалась [14].
Обсуждая полученные результаты, следует отметить, что, с одной стороны, снижение численности ДА-нейронов у старых мышей СВА по сравнению с молодыми подтверждает данные литературы о возрастном уменьшении количества ДА-нейронов и, соответственно, уровня дофамина. Действительно, с одной стороны, потерю ДА-нейронов считают ключевым центральным фактором старения [6]. С другой стороны, предупреждение уменьшения числа ДА-нейронов под воздействием КФА коррелирует со снижением уровня гепатокарцином, повышением жизнеспособности и качества жизни высокораковых животных [5]. Учитывая известные из литературы геропротек-торные, антидепрессантные и противоопухолевые свойства дофамина, можно полагать единую логику событий (объединенную комплексом активности этого катехоламина), демонстрирующую протекторное действие КФА на дофаминергиче-скую систему головного мозга.
Заключение
Применение КФА кратковременно в раннем онтогенезе способствует сохранению высокой численности ДА-нейронов головного мозга в позднем онтогенезе мышей-самцов линии СВА. Учитывая возможности регуляции численности ДА-нейронов головного мозга, экспрессии лейкоцитарных интегринов на клетках периферической крови, сывороточного содержания цитокинов-6 и -10, стресс-гормона кортикостерона, уровня опу-холеобразования, а также выживаемости и качества жизни мышей-самцов СВА, можно полагать роль центральных нейрональных и периферических иммуноадгезионных механизмов в контроле развития экспериментальных гепатокарцином. Вместе с тем следует учесть, что модуляция центрального и периферического дофаминов, которые напрямую связаны друг с другом, позволяет детализировать механизмы усиления опухолевого роста при хроническом стрессе.
По результатам исследования сделаны следующие выводы:
Спонтанный гепатоканцерогенез у мышей-самцов линии СВА сопровождается снижением в позднем онтогенезе численности дофами-нергических нейронов и пролиферирующих молодых нейронов зубчатой фасции гиппокампа головного мозга, что сочетается со снижением экспрессии лейкоцитарных интегринов LFA-1 и Мас-1 на лимфоцитах периферической крови и концентрацией сывороточного тестостерона,
а также повышением сывороточного уровня ин-терлейкинов-6 и -10 и стресс-гормона кортикосте-рона.
Кратковременное в раннем онтогенезе (профилактическое) воздействие КФА предупреждало потерю
ДА-нейронов в головном мозге высокораковых мышей СВА в позднем онтогенезе.
Определена высокая положительная корреляция между численностью ДА-нейронов в позднем онтогенезе и продолжительностью жизни мышей-самцов СВА (R = +0,93±0,02), а также высокая обратная зависимость между численностью ДА-нейронов и частотой спонтанных гепато-карцином у мышей-самцов СВА (R = - 0,91±0,03).
Вклад авторов
О.А. Бочарова - дизайн исследования, редактирование текста рукописи (research design, editing of the manuscript text).
A.В. Ревищин - проведение экспериметов, описание методов (performing experiments, methods description).
Е.В. Бочаров - проведение экспериментов, обработка результатов, написание текста рукописи, (performing experiments, processing results, writing the text of the manuscript).
Р.В. Карпова - написание текста рукописи, подбор литературы (writing the text of the manuscript, selection of literature).
B.Г. Кучеряну - проведение экспериментов, подбор литературы (performing experiments, selection of literature).
М.В. Уткина - обработка результатов (processing results).
В.Б. Матвеев - консультативный анализ исследования и рукописи (consultative analysis of the research and the manuscript).
Г.В. Павлова - дизайн исследования, редактирование текста рукописи (research design, editing of the manuscript text).
Сведения о конфликте интересов
Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Conflict of interest
The authors declare no conflicts of interest.
Литература
1. Bocharova O.A., Karpova R.V., Bocharov E.V., Solov'yov Yu.N. Effects of Phytoadaptogen on Hepatoma Development in Cancer-Prone CBA Mice. // Bull Exp Biol Med. 2015; 159 (5): 655-657. doi: 10.1007/s10517-015-3040-4.
2. Bocharov E.V., Karpova R.V., Bocharova O.A., Kucheryanu V.G., Shprakh Z.S. Effect of Phytoadaptogen Administration during Early Ontogeny on Lifespan and Somatic Status of CBA Mice with High Incidence of Tumors. // Bull Exp Biol Med. 2017; 163 (6): 789-792. doi: 10.1007/s10517-017-3904-x.
3. Bocharova O.A., Bocharov E.V., Karpova R.V., Il'enko V.A., Kazeev I.V., Baryshnikov A.Y. Integrins LFA-1 and Mac-1 and cytokines IL-6 and IL-10 in high-cancer mice under the influence of phytoadaptogen. // Bull Exp Biol Med. 2014; 157 (2): 258-260 doi: 10.1007/s10517-014-2539-4.
4. Bocharov E.V., Bocharova O.A., Solov'ev Y.N., Karpova R.V., Kucheryanu V.G. Morphological Studies of Hepatocellular Carcinomas in Male CBA Mice with High Liability to Cancer under the Effect of Phytoadaptogen. // Bull Exp Biol Med. 2016; 161: 727-730. doi: 10.1007/s10517-016-3495-y.
5. Бочаров Е.В., Карпова Р.В., Бочарова О.А., Куче-ряну В.Г., Казеев И.В., Мисюрин В.А., Соловьев Ю.Н. Иммуноадгезивные механизмы профилактического действия фитоадаптогена на спонтанный гепато-канцерогенез. // Лабораторные животные для научных исследований. 2019; 1: 2-14. https//doi.org/10.29 296/2618723X-2019-01-01. [Bocharov E.V., Karpova R.V., Bocharova O.A., Kucheryanu V.G., Kazeev I.V., Misyurin V.A., Solov'ev YU.N. Immunoadgezivnye mekhanizmy profilakticheskogo deistviya fitoadaptogena na spontannyi gepatokantserogenez. // Laboratornye zhivotnye dlya nauchnykh issledovanii. 2019; 1: 2-14. (In Russ.)].
6. Бочарова О.А., Бочаров Е.В., Кучеряну В.Г., Карпова Р.В., Вершинская А.А. Дофаминергическая система: стресс, депрессия, рак (часть 1). // Российский биотерапевтический журнал. 2019; 18 (3); 6-14. [Bocharova O.A., Bocharov E.V., Kucheryanu V.G., Karpova R.V., Vershinskaya A.A. Dofaminergicheskaya sistema: stress, depressiya, rak (chast' 1). // Rossiiskii bioterapevticheskii zhurnal. 2019; 18 (3); 6-14. (in Russ.)]. doi: 10.17650/1726-9784-2019-18-3-6-14.
7. Бочарова О.А., Бочаров Е.В., Кучеряну В.Г., Карпова Р.В., Вершинская А.А. Дофаминергическая система: стресс, депрессия, рак (часть 2). // Российский биотерапевтический журнал. 2019; 18 (4): 2533. [Bocharova O.A., Bocharov E.V., Kucheryanu V.G., Karpova R.V., Vershinskaya A.A. Dofaminergicheskaya sistema: stress, depressiya, rak (chast' 2). // Rossiiskii bioterapevticheskii zhurnal. 2019; 18 (4): 25-33. (In Russ)]. doi: 10.17650/1726-9784-2019-18-4-25-33.
8. Bocharova O.A., Lyzhenkova M.A., Mezentseva M.V., Semernina V.V., Knyazhev V.A. Phytoadaptogen for preventive oncology: immunobiological criteria of composition. // Bull Exp Biol Med. 2003; 136 (6): 591-594. doi: 10.1023/b:bebm.0000020213.10150.27.
9. Карпова Р.В., Шевченко В.Е., Бочаров Е.В., Шей-ченко О.П., Бочарова О.А., Кучеряну В.Г., Быков В.А. Возможности использования высокоэффективной
жидкостной хроматографии в сочетании с тандем-ной масс-спектрометрией для количественного и качественного определения биологически активных веществ женьшеня в фитоэкстрактах. // Российский биотерапевтический журнал. 2016; 15 (2): 36-46. [Karpova R.V., Shevchenko V.E., Bocharov E.V., SHeichenko O.P., Bocharova O.A., Kucheryanu V.G., Bykov V.A. Vozmozhnosti ispol'zovaniya vysokoeffektivnoi zhidkostnoi khromatografii v sochetanii s tandemnoi mass-spektrometriei dlya kolichestvennogo i kachestvennogo opredeleniya biologicheski aktivnykh veshchestv zhen'shenya v fitoekstraktakh. // Rossiiskii bioterapevticheskii zhurnal. 2016; 15 (2): 36-46. (In Russ.)]. doi :10.17650/1726-9784-2016-15-2-36-46
10. Казев И.В., Бочарова О.А., Шевченко В.Е., Карпова Р.В., Бочаров Е.В., Уютова Е.В., Шейченко О.П., Кучеряну В.Г., Барышникова М.А. Тандемная масс-спек-трометрия в технологии определения аралозидов композиции фитоадаптогенов. // Теоретические основы химической технологии. 2020; 54 (6): 733-737. [Kazev I.V., Bocharova O.A., SHevchenko V.E., Karpova R.V., Bocharov E.V., Uyutova E.V., SHeichenko O.P., Kucheryanu V.G., Baryshnikova M.A. Tandemnaya mass-spektrometriya v tekhnologii opredeleniya aralozidov kompozitsii fitoadaptogenov. // Teoreticheskie osnovy khimicheskoi tekhnologii. 2020; 54 (6): 733-737. (In Russ.)]. Doi: 10.31857/S0040357120050085
11. Шейченко О.П., Бочарова О.А., Крапивкин Б.А., Уютова Е.В., Карпова Р.В., Казеев И.В., Бочаров Е.В., Быков В.А. Исследование комплексного фитоадаптогена методом ВЭЖХ. // Вопросы биологической медицинской и фармацевтической химии. 2012; 10: 52-59. [SHeichenko O.P., Bocharova O.A., Krapivkin B.A., Uyutova E.V., Karpova R.V., Kazeev I.V., Bocharov E.V., Bykov V.A. Issledovanie kompleksnogo fitoadaptogena metodom VEZHKH. // Voprosy
12. Бочарова О.А., Пожарицкая М.М., Чекалина Т.Л., Мезенцева М.В., Карпова Р.В., Семернина В.В., Княжев В.А. Роль адгезионных нарушений в патогенезе лейкоплакии и возможности их коррекции неспецифическим иммуномодулятором. // Иммунология. 2004; 25 (1): 36-43. [Bocharova O.A., Pozharitskaya M.M., CHekalina T.L., Mezentseva M.V., Karpova R.V., Semernina V.V., Knyazhev V.A. Rol' adgezionnykh narushenii v patogeneze leikoplakii i vozmozhnosti ikh korrektsii nespetsificheskim immunomodulyatorom. // Immunologiya. 2004; 25 (1): 36-43. (In Russ.)].
13. Бочков Н.П., Бочарова О.А., Аксенов А.А., Го-рожанская Э.Г., Матвеев В.Б., Карпова Р.В., Катосова Л.Д., Косякова Н.В., Платонова В.И., Чеботарев А.Н. Частота хромосомных аберраций в лимфоцитах пациентов с доброкачественной гиперплазией предстательной железы. // Медицинская генетика. 2005; 4 (1): 15-19. [Bochkov N.P., Bocharova O.A., Aksenov A.A., Gorozhanskaya E.G., Matveev V.B., Karpova R.V., Katosova L.D., Kosyakova N.V., Platonova V.I., CHebotarev A.N. CHastota khromosomnykh aberratsii v limfotsitakh
2021 LABORATORY ANIMALS FOR SCIENCE №2
patsientov s dobrokachestvennoi giperplaziei predstatel'noi zhelezy. // Meditsinskaya genetika. 2005; 4 (1): 15-19. (In Russ.)].
14. Bocharova O.A.. Matveev V.B., Karpova R.V., Aksyonov A.A. et al. Phytoadaptogen correction of clinical and immunobiological parameters in patients with benign prostatic hyperplasia. // Bull Exp Biol Med. 2006; 141 (5): 616-619. doi: 10.1007/s10517-006-0235-8.
15. Bocharov E.V., Kucheryanu V.G., Kryzhanovskii G.N., Bocharova O.A., Kudrin V.S., Belorustseva S.A. Effect of complex phytoadaptogen on MPTP-induced Parkinson's syndrome in mice. // Bull Exp Biol Med. 2006; 141 (5): 560-563. doi: 10.1007/s10517-006-0220-2.
16. Bocharova O.A., Davydov M.I., Klimenkov A.A., Baryshnikov A.Y. et al. Prospects ofusing phytoadaptogen in the treatment of diffuse stomach cancer. // Bull Exp Biol Med. 2009; 148 (1): 82-85. doi: 10.1007/s10517-009-0652-6.
2021 LABORATORY ANIMALS FOR SCIENCE №2
