CC BY
42
ки. Методика оценки ворот печени при лапароскопической ультразвуковой томографии предусматривает дифференциацию очагов между истинным поражением ворот печени, включая опухоль Клатцкина и увеличенные лимфоузлы
Таблица 4
Информативность методов диагностики (ЛсУЗТ, ТУЗТ) при панкреатите
Критерии Методы диагностики
ЛсУЗТ ТУЗТ
Чувствительность 80% 55,6%
Специфичность =99,7% 98,01%
Точность 90,8% 94,5%
Методика выполнения лапароскопической ультразвуковой томографии ворот печени позволяла выявлять увеличенные от 3 до 30 мм лимфатические узлы в 97,5% случаев, подтвержденных на операции.
Таблица 5
Статистическая оценка вероятности возникновения диагностической ошибки сравниваемых методов (на урвне р < 0,05)
Метод исследования Вероятность ошибки (p*,^) Доверительный интервал [pm,n, pmax]
ЛсУЗТ 0,118 [0,098; 0,12]
ИХГ 0,588 [0,571; 0,059]
ТУЗТ 0,882 [0,86; 0,9]
Вероятность возникновения диагностической ошибки при холедохолетиазе (p=0.01)
Патология Вероятность ошибки Доверительный интервал
Холедохолитиаз 0,118 0,098; 0,1201
Панкреатит 0,0188 0,015; 0,0197
Водянка, эмпиема ЖП 0,0098 [0,0073; 0,01]
Фактические значения и вероятности возникновения диагностической ошибки и доверительные интервалы для ЛсУЗТ (р=0.05)
Патология Вероятность ошибки Доверительный интервал
Холедохолитиаз 0,882 [0,861; 0,9]
Панкреатит 0,036 [0,031; 0,039]
Водянка, эмпиема ЖП 0,055 [0,050; 0,057]
Фактические значения и вероятности возникновения диагностической ошибки и доверительные интервалы для ТУЗТ (р=0.05)
Выводы:
1. Информативность лапароскопической ультразвуковой томографии в диагностике заболеваний желчного пузыря достигает -100%, а в выявлении дилятации желчных протоков - 98,2%. Чувствительность и специфичность в определении холедохоли-тиаза при лапароскопической ультразвуковой томографии составляют 92,3 и 98,9% соответственно, при интраоперационной холангиографии эти показатели составляют 53,8 и 96% соответственно, а при трансабдоминальной ультразвуковой томографии - 13,3 и 96% соответственно (табл. 5).
2. Лапароскопическая ультразвуковая томография позволяет оценивать структуру органов и тканей во время лапароскопических операций, выполняя своеобразную роль «руки» хирурга, не подвергая в отличие от холангиографии больного и операционную бригаду воздействию ионизирующего излучения. При
данной методике значительно лучше, чем при трансабдоминальной ультразвуковой томографии визуализируются элементы ге-патодуоденальной связки (общий желчный проток, печеночная артерия, воротная вена), их топографическое расположение и изменения этих структур при патологических состояниях.
3. Достигнуто сокращение длительности интраоперацион-ных диагностических мероприятий с использованием лапароскопической ультразвуковой томографии на 20-30 мин.
4. Информативность лапароскопической ультразвуковой томографии превалирует над информативностью интраопераци-онной холангиографии, однако эти методы не следует противопоставлять, поскольку они дополняют друг друга, предупреждая возможность диагностических ошибок. Этот метод диагностики позволяет не только поставить точный диагноз, но и помогает хирургу определить объем оперативного вмешательства с предоперационной морфологической верификацией диагноза. Для повышения диагностической эффективности методами требуется четкая стандартизация процедуры с применением режима дуплексного сканирования с оценкой гемодинамики магистральных сосудов данной зоны.
Литература
1. Иванов, В.А. Ультразвуковая диагностика заболеваний органов билиопанкреатодуоденальной зоны / В.А.Иванов, В.И.Малярчук.- М.: КАМЕРОН, 2004.- С. 40-41.
2. Лапароскопическая холецистэктомия при холедохолитиа-зе и стриктуре терминального отдела общего желчного протока / В.П. Стрекаловский [и др.] // Хирургия.- 2000.- № 9.- С. 4-7.
3. Роль интраоперационной диагностики при лапароскопическом лечении желчнокаменной болезни / В.П. Стрекаловский [и др.] // Эндоскопическая хирургия.- 2001.- № 1.- С. 16-20.
4. Ochiai, T. Is drip infusion cholecystocholangiography (DIC) an acceptable modality at cholecystectomy for cholecystolithiasis, considering the frequency of bile duct maljunction and intraoperative bile duct injury? / T.Ochiai, S.Yamazaki, K. Ohta // Journal of Hepa-to-Biliary-Pancreatic Surgery.- 2004.- Vol. 11.- № 2.- Р. 135-139.
5. Sicklick, J.K. Surgical management of bile duct injuries sustained during laparoscopic cholecystectomy: perioperative results in 200 patients / J.K. Sicklick, M.S. Camp // BMJ.- 2005.- Vol. 241, Issue 5.- Р. 786-796.
6. Cholelithiasis and choledocholithiasis: diagnostic imaging /
J.-M. Bruel // Abdominal Imaging.- 2001.- Vol. 26.- Р 1-2.
7.Ardengh, J.C. Endoscopic ultrasound (EUS) in the diagnosis of gallbladder microlithiasis with idiopatic acute pancreatitis / J.C. Ardengh, C.A. Malheiros, A.S. Ganc // Digestion.- 1998.-Vol. 59.- Suppl. 3.- P. 40.
8. Common bile duct exploration and laparoscopic cholecystectomy: role of intraoperative ultrasonography / R. Santambrogio [et al.] // J Am Coll Surg.- 1997.- Vol. 185.- N 1.- P 40^8.
УДК 546.815-612.017.1
ВОЗМОЖНОСТИ РЕГУЛЯТОРНЫХ ВЛИЯНИЙ СЕЛЕНА НА ФУНКЦИОНАЛЬНУЮ АКТИВНОСТЬ НЕЙТРОФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ В УСЛОВИЯХ СВИНЦОВОЙ ИНТОКСИКАЦИИ
А.И. ОВСЯННИКОВА, Л.З. БОЛИЕВА, А.С. ЦОГОЕВ
ГБОУ ВПО «Северо-Осетинская государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения и социального развития
Российской Федерации, ул. Пушкинская, 40, г. Владикавказ, 362019
Аннотация: целью настоящего исследования явилось изучение возможности коррекции токсического влияния ацетата свинца на систему нейтрофильных гранулоцитов при помощи селенита натрия. В результате проведенного эксперимента показано, что при действии ацетата свинца у экспериментальных животных достоверно снижается количество активно фагоцитирующих нейтрофилов, фагоцитарное число и коэффициент фагоцитарного числа. При оценке кислородзависимого фагоцитоза в группе животных, получавших ацетат свинца, выявлено значимое угнетение процессов захвата и восстановления нитросинего тетразолия в стимулированном тесте. Добавление в рацион животных селенита натрия эффективно препятствовало повреждающему действию свинца на систему нейтрофильных гранулоцитов, сохраняя их функциональную активность. Исходя из полученных нами данных, представляется перспективным дальнейшее изучение профилактической активности селенита натрия с целью внедрения в клиническую практику в качестве средства профилактики иммунотоксиче-ского действия свинца.
Ключевые слова: ацетат свинца, селенит натрия, система нейтрофильных гранулоцитов, фагоцитоз.
PROTECTIVE EFFECTS OF SELENIUM AGAINST LEAD TOXICITY ON THE FUNCTIONAL ACTIVITY OF NEUTROPHILIC
GRANULOCYTES IN THE RATS
A.I. OVSYANNIKOVA, L.Z. BOLIEVA, A.S. TSOGOEV
North-Ossetian State Medical Academy, Vladikavkaz
Abstract: the aim of the experiment was to study the potential protective activity of sodium selenite against lead immunotoxicity. It was shown that lead acetate causes significant reduction of the phagocytotic index, phagocytotic number and phagocytotic coefficient and some parameters of NBT-test. Sodium selenite in a dose of 4 ppm effectively prevented the immunodeficiency development. The results of this study provide the basis for further investigations of sodium selenite preventive properties against immunotoxic effects of lead.
Key words: lead acetate, sodium selenite, neutrophilic granulocytes, phagocytosis.
Распространенность загрязнения окружающей среды соединениями тяжелых металлов диктует необходимость разработки эффективных методов защиты. Свинец включен в список загрязняющих веществ ВОЗ и ЮНЕП как токсичный металл I класса опасности [1,8,14]. Доказано, что высокая токсичность свинца и способность к кумуляции могут приводить к поражению практически всех органов и систем организма. Имеются данные, свидетельствующие о том, что соли свинца способны вызывать нарушения в иммунной системе, которые клинически проявляются повышенной восприимчивостью к бактериальным и вирусным инфекциям, а также способствуют росту аллергической патологии [3,9,11]. Показано, что повреждающее действие свинца может реализовываться на разных уровнях функционирования системы иммунитета, в том числе на уровне факторов естественной резистентности [3,4]. Ключевыми клетками доиммунной резистентности организма человека и животных являются нейтро-фильные гранулоциты, важнейшим проявлением функциональной активности которых является резкая перестройка кислород-зависимого метаболизма, получившая название метаболического или респираторного взрыва.
Значительное количество исследований посвящено разработке методов фармакологической коррекции токсического действия свинца [5,6,12,13], при этом возможности профилактики и лечения иммунотоксического действия свинца изучены недостаточно. В этой связи, изучение профилактической активности эссенциальных микроэлементов, обладающих иммуномодулирующей активностью, в частности селена, может быть достаточно перспективным направлением в разработке эффективных способов защиты иммунной системы от повреждающего действия свинца.
Цель исследования — изучение регуляторных влияний селенита натрия на функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов в условиях свинцовой интоксикации.
Материалы и методы исследования. Исследование проведено на 40 крысах линии Вистар с исходной массой 120-140 г. Животные содержались по 5-6 крыс в клетке в стандартных условиях при температуре 20-22°С и естественном световом режиме на стандартном рационе вивария и получали питьевую воду без ограничений. Для индукции свинцовой интоксикации животные получали ацетат свинца ежедневно через зонд в дозе 10 мг/кг веса в течение 3 месяцев [7,10]. С целью фармакологической коррекции свинцовой интоксикации использовали селенит натрия в дозе 4 мг/л с питьевой водой в течение всего эксперимента.
Животных разделили на три группы. I группа служила ин-тактным контролем и получала ежедневно через зонд 0,9% раствор хлорида натрия; животные II группы получали ацетат свинца в дозе 10 мг/кг веса через зонд ежедневно в течение 3 месяцев; III группа получала наряду с ацетатом свинца селенит натрия в дозе 4 мг/л в течение всего эксперимента.
Продолжительность опыта составила 3 месяца. По истечении этого срока у животных под фторотановым наркозом проводили забор крови для исследования функциональной активности нейтрофилов.
Состояние системы нейтрофильных гранулоцитов оценивали до начала введения ацетата свинца и спустя 3 месяца в тесте с дрожжевыми грибами Saccharomyces cerevisiae и в НСТ-тесте. Определяли фагоцитарный индекс (ФИ), фагоцитарное число (ФЧ), коэффициент фагоцитарного числа (КФЧ). Кислородзави-симую бактерицидную активность оценивали в спонтанном и стимулированном НСТ-тесте, с подсчетом процента клеток, содержащих включения диформазана, среднего цитохимического коэффициента (СЦК) и индекса стимуляции (ИС) [2]. Об эффективности модифицирующего воздействия судили по изменению
исследуемых параметров в группе, получавшей свинец с селенитом натрия, по сравнению с группой, получавшей свинец.
Для статистической обработки полученных данных использовался пакет прикладных программ Statistica 6.0. Все результаты выражались как значения среднего±стандартное отклонение. Для оценки статистической значимости различий использовали критерии Стьюдента или Манна-Уитни. Различия средних показателей считались достоверными, если величина коэффициента достоверности соответствовала уровню значимости p<0,05.
Результаты и их обсуждение. В результате проведенного опыта получены следующие данные (табл. 1).
В группе получавшей ацетат свинца, наблюдалось отчетливое угнетение процессов фагоцитоза, проявлявшееся достоверным снижением количества активно фагоцитирующих нейтрофи-лов, снижением их переваривающей активности. Процент ней-трофилов, вступивших в фагоцитоз после SO минутной инкубации (ФИ30) с суспензией дрожжей, в группе, получавшей ацетат свинца, составил 44,7±5,39%, что было ниже показателя в группе интактных животных на 41,5% (р<0,05). После 120 минутной инкубации данный показатель составил 47,7%, т.е. был на 32,5% (р<0,05) ниже, чем в группе интактного контроля. В группе, получавшей наряду с ацетатом свинца селенит натрия, процент нейтрофилов вступивших в фагоцитоз, после 30 минутной инкубации (ФИ30) составил 64,3%, а после 120 минутной инкубации (ФИ120) - 62,0% (p>0,05). При сравнении процента активно фагоцитирующих нейтрофилов во II и III группах животных нами получены данные о статистически достоверных различиях, как в показателях ФИ30 (р<0,05), так и ФИ120 (р<0,05).
Показатели фагоцитарного числа после 30 минутной инкубации (ФЧ30) снизились в группе животных, получавшей свинец, на 28,0% (р<0,05), в группе, получавшей дополнительно селенит натрия, на 20,8% (р<0,05) по сравнению с интактным контролем. Значимых отличий показателя ФЧ30 между II и III группами животных не выявлено. При изучении фагоцитарного числа после 120 минутной инкубации (ФЧ120) не обнаружено статистически достоверных различий между группами.
КФЧ, отражающий завершенность фагоцитоза и способность нейтрофилов переваривать захваченные частицы, у крыс, получавших свинец, был статистически достоверно на 28,6% (р<0,05) ниже по сравнению с показателем в контрольной группе. В группе животных, получавшей одновременно с ацетатом свинца селенит натрия, КФЧ также был несколько ниже показателя интактного контроля, однако различия не были статистически достоверны. При сравнении данного параметра в опытных группах животных, показано, что КФЧ был на 27,2% выше (р<0,05) в группе получавшей одновременно о свинцом селенит натрия.
Результаты исследования кислородзависимого фагоцитоза представлены в табл. 2. При исследовании метаболической активности нейтрофилов в спонтанном НСТ-тесте достоверных отличий относительного количества формазан позитивных клеток между изучаемыми группами не наблюдалось. Отчетливое угнетение процессов захвата и восстановления нитросинего тет-разолия в стимулированном тесте, проявлявшееся достоверным снижением процента формазан позитивных нейтрофилов, наблюдалось в группе, получавшей ацетат свинца (60,0±7,3% при действии свинца против 74,6±5,2%, р<0,05). Следовательно, при действии ацетата свинца наблюдалось снижение готовности ней-трофильных гранулоцитов к завершенному фагоцитозу и снижение функционального резерва нейтрофилов.
Таблица 1
Влияние селена на показатели функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов крыс в условиях свинцовой интоксикации
"V. Группы Показатели* Группа I (n=10) Группа II (n=10) Группа III (n=10)
ФИ30 (%) 76,33±6,14 44,66±5,39* 64,33±5,46*##
ФИ120(%) 70,62±5,63 47,66±8,4*,*** 62,00±2,7#
ФЧ30 2,21±0,15 1,59±0,16** 1,75±0,24*
ФЧ120 1,71±0,35 1,61±0,15 1,63±0,29
КФЧ 1,29±0,04 0,92±0,03* 1,17±0,04#
Примечание: Различия с группой I достоверны: * - р<0,05; ** - р<0,01 Различия с группой II достоверны: # - р<0,05; ## - р<0,01
При дополнительном введении животным селена процент позитивных клеток был значимо выше по сравнению с группой, получавшей только ацетат свинца.
Основные параметры кислородзависимого фагоцитоза в группе животных, получавших селен, достоверно не отличались от таковых у интактных животных, за исключением достоверного повышения показателей СЦК в спонтанном тесте (р<0,05).
Таблица 2
Показатели функционально функционально-метаболической активности нейтрофильных гранулоцитов крыс
~ Группы Показатели Группа I (n=10) Группа II (n=10) Группа III (n=10)
НСТ позитивные клетки в спонтанном тесте, % 42,1±3,0 47,6±4,8 44,8±8,0
НСТ позитивные клетки в стимулированном тесте, 74,6±5,2 60,0±7,3* 73,3±7,5#
СЦК в спонтанном тесте 0,69±0,1 0,58±0,2 0,96±0,2***
СЦК в стимулированном тесте 1,48±0,2 1,15±0,2* 1,51±0,3*
ИС 1,77±0,2 1,39±0,3* 1,66±0,2"
Примечание: различия с группой I достоверны: * - р<0,05; различия с группой II достоверны: # - р<0,05; ## - р<0,01
Выводы. Результаты проведенного исследования свидетельствуют о способности свинца приводить к нарушениям процессов кислородзависимого и кислороднезависимого фагоцитоза, проявляющихся снижением поглотительной и нарушением переваривающей способности нейтрофильных гранулоцитов, снижением функционального резерва нейтрофилов. Селенит натрия обладает антагонизмом в отношении иммунотоксического действия ацетата свинца и достоверно препятствует реализации его иммуносупрессивной активности. Результаты эксперимента подтверждают имеющиеся в литературе данные об иммуномодулирующей активности селена и позволяют рекомендовать его дальнейшее изучение с целью внедрения в клиническую практику в качестве средства фармакологической коррекции иммунотокси-ческого действия свинца.
Литература
1. Корбакова, А.И. Свинец и его действия на организм / А.И. Корбакова, А.Е. Ермоленко, Н.Н. Молодкина и соавт.- Медицина труда и промышленная экология.- 2001.- № 5.- С. 29-34.
2. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под общей редакцией члена-корреспондента РАМН, профессора Р.У. Хабриева.-2-е изд., перераб. и дополн..- М.: ОАО «Издательство «Медицина», 2005.- 832 с.
3. Borowska, J. Effects of heavy metals on insect immunocompetent cells / J. Borowska, E.J. Pyza.- Insect. Physiol.- 2011.- Vol. 57(6).- P. 760-770.
4. Bussolaro, D. The immune response of peritoneal macrophages due to exposure to inorganic lead in the house mouse / D. Bussolaro, N.F. Filipak, R. Gargioni et al.- Toxicol In Vitro.-2008- Vol. 22(1).- P. 254-260.
5. Cerklewski, F.L. Influence of dietary selenium on lead toxicity in the rat / F.L. Cerklewski, R.M. Forbes- J. Nutr.- 1976.-Vol. 106(6).- P. 778-783
6. Cerklewski, F.L. Influence of dietary zinc on lead toxicity in the rat / F.L. Cerklewski, R.M. Forbes.- J. Nutr.- 1976а.- Vol. 106(5).- P. 689-696.
7. Dhawan, M. Preventive and therapeutic role of vitamin E in chronic plumbism // Dhawan M., Flora S.J., Tandon S.K.- Biomed. Environ. Sci.- 1989.- Vol. 2(4).- P. 335-340.
8. Falk, H. Environmental- and Injury-related Epidemic-Assistance Investigations, 1946-2005 // Falk H., Briss P.- American Journal of Epidemiology.- 2011.- Vol. 174.- P. 65-79.
9. Fernandez-Cabezudo, J. Alpha tocopherol protects against immunosuppressive and immunotoxic effects of lead // J. Fernandez-Cabezudo, M.Y. Hasan, N. Mustafa [et al.].- Free Radic. Res.- 2003-Vol. 37(4).- P. 437-445.
10. Flora, S.J. Beneficial effect of combined administration of some naturally occurring antioxidants (vitamins) and thiol chelators in the treatment of chronic lead intoxication // S.J. Flora, M. Pande,
A. Mehta.- Chem. Biol. Interact.- 2003.- Vol. 15.- N. 145(3).-P. 267-280.
11. Gidlow, D.A. Lead toxicity // D.A. Gidlow.- Occupational Medicine.- 2004.- Vol. 54.- P. 76-81.
12. Latta, DM. Lead toxicity in chicks: interactions with dietary methionine and choline // D.M. Latta, W.E. Donaldson.- J. Nutr.-1986.- Vol. 116(8).- P. 1561-1568.
13. Nagaraja, H. Protective effect of Etlingera elatior (torch ginger) extract on lead acetate- induced hepatotoxicity in rats // H. Nagaraja, J. Tan, Ch.-J. / Srikumar of Toxicol. Sci.- 2010.-Vol. 35.- N. 5.- P. 663-671.
14. Heavy metals (Zn, Pb, Cd and Cr) in fish, water and sediments sampled form Southern Caspian Sea, Iran // S. Tabari [et al.].-Toxicology and Industrial Health 2010.- Vol. 26(10).- P. 649-656.
УДК 616.316.1-002
УЛЬТРАЗВУКОВОЕ ИССЛЕДОВАНИЕ ПРИ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЯХ У ДЕТЕЙ
В. Г.САПОЖНИКОВ
ФГБОУВПО «Тульский государственный университет», пр-т Ленина, д. 92, г. Тула
Аннотация: с целью изучения ультразвуковых параметров при различных острых кишечных инфекциях было эхографически исследовано 536 детей в возрасте от 1 года до 11 лет. В результате исследования выявлены такие эхографические параметры при острых кишечных инфекциях у детей, как нарушение послойности стенки желудка, наличие усиленной перистальтики и антиперистальтики кишечника, избыток жидкости в разных отделах кишечника в зависимости от уровня поражения пищеварительного тракта детей.
Ключевые слова: ультразвуковая диагностика, острая кишечная инфекция, дети.
ECHOGRAPHY IN THE CHILDREN WITH ACUTE INRESTINAL INFECTIONS V. G. SAPOZHNIKOV
Tula State University
Abstract: during echography the 536 children aged 1-11 years were investigated. The main purpose was to study echographycal criteria in the case of different acute intestinal infections. As the result of study the frequency of identification echographical parameters among children with acute intestinal infections was revealed.
Key words: echography, intestinal infection, children.
