CC BY
31
картину с накоплением желчных кислот, которые обычно хорошо связывают осмий, нитрат свинца, что и придает им высокую электронную плотность. Мы отметили также неоднородность материала внутри канальцев по сравнению с холестазом, описанным на ультраструктурном уровне у
В.В. Серова, К. Лапиша [12]. Длительное хранение привело к вымыванию этого материала из просветов желчных канальцев. В единичных канальцах удалось обнаружить пристеночные мелкие глыбчатые скопления материала высокой электронной плотности. В цитоплазме гепатоцитов формировались пустоты с четкими границами (Рис. 3). Вымывание внутриклеточных патологических включений было неполным, сохранились их краевые фрагменты, характеризующиеся высокой электронной плотностью. Массы неоднородной умеренной электронной плотности и растворившиеся внутрицитоплазматические включения овоидной формы окаймлялись закладками разнонаправленных коллагеновых волокон. Это позволило думать об инородной природе данного материала, неравномерно накапливающего пигмент.
Известно, что в патогистологии универсальных фиксирующих веществ и фиксирующих смесей в настоящее время нет. Один и тот же фиксатор может дать совершенно пр отив опо ложный р езультат при иссле дов ании различных компартментов клеток и тканей, исказить морфологическую картину, привнести артефициальные изменения [1]. Формалин хорошо сохраняет форму, окраску и структуру препарата, обладает хорошей диффузионной способнос-
тью, относительно быстро проникает в глубокие отделы крупных органов [2, 5, 6, 8, 10].
Фрагменты тканей и органов могут сохраняться в формалине годами, не теряя способности к гистологическому окрашиванию [10]. Для исследования нарушений пигментного обмена этот простой фиксатор мало предпочтителен [5]. Установлено, что под влиянием формальдегида белковые коллоиды микроскопических структур становятся кислее, следовательно - базофильнее при гистологическом окрашивании [10]. Влияние 10% водного раствора формалина на катиониты, к которым относится ПГМГ-ГХ, не описано. Нужно отметить, что ПГМГ-ГХ при охлаждении до 24°С приобретает стекловидную плотность, существует в кристаллоидном и аморфном виде. По мнению А.Г. Сапожникова и А.Е. Доросевича [10], для лабильных структур, которые при жизни находятся в состоянии обратимых гелей, золей или промежуточных между ними состояниях, пока не известно ни одной жидкости, способной сохранить их.
Таким образом, общепринятый для фиксации и хранения в государственных судебно-экспертных учреждениях РФ 10% водный раствор формалина не является предпочтительным в случаях отравления спиртсодержащими жидкостями на основе ПГМГ-ГХ. При длительном хранении гистологического материала происходит вымывание патологических пигментсодержащих включений в печени, что стирает гистоморфологические особенности картины токсического гепатита с холестазом.
Литература:
1. Витер В.И., Пермяков A.B. Судебно-медицинская гистология:руководство для врачей - Ижевск-Новосибирск, 2005. - 214 с.
2. Волкова О.В. Елецкий Ю.К. Основы гистологии с гистологической техникой. -М.: Медицина, 1982. -304с.
3. Крамаренко В.Ф. Токсикологическая химия. - К.: Выща шк., Головное изд-во, 1989. -447 с.
4. КучинаЕ.В. Судебно-медицинская диагностика отравлений некоторыми суррогатами алкоголя: автореф. дисс. ... к.м.н. - Москва, 2009.
5. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия. - Москва, 1969. - 645 с.
6. Меркулов Г.А. Курс патологогистологической техники. - Ленинградское отделение, «Медицина», 1969. - 423 с.
7. Мусийчук Ю.И. Куценко С.А., Бушуев Е.С., Рыбалко В.М. Врачебная экспертиза при отравлениях химическими веществами.
- СПб: ООО «Издательство ФОЛИАНТ», 2007. - 208 с.
8. Пирс Э. Гистохимия теоретическая и прикладная: пер. с англ. /Подред. В.В. Португалова. - М.: Изд. иностр. лит., 1962. - 925 с.
9. Приказ №346н от 12.05.10 г. «Об утверждении порядка организации и производства судебно-медицинских экспертиз в государственных судебно-экспертныхучреждениях Российской федерации» //Росс, газета, от 20.08.2010 г.
10. СапожниковА.Г.,Доросевич А.Е. Гистологическая имикроскопическая техника:руководство. - Смоленск, «SAU», 2000. - 476 с.
11. Сафрай А.Е. Судебно-медицинские аспекты отравлений некоторыми спиртсодержащими жидкостями: автореф. дисс. ... канд. мед. наук. - СПб, 1996.
12. Серов В.В., Лапиш К. Морфологическая диагностика заболеваний печени. - М.: Медицина, 1989. - 336 с.
13. Швайкова М.Д. Судебная химия. - М., Медгиз, 1959. -410 с.
© С.А. Фрисс, 2010 УДК 340.6
С.А. Фрисс
ВОЗМОЖНОСТИ МЕТОДА ПОЛЯРИЗАЦИОННОЙ МИКРОСКОПИИ В ЭКСПЕРТИЗЕ ОТРАВЛЕНИЙ СУРРОГАТНЫМ АЛКОГОЛЕМ НА ПОЛИМЕРНОЙ ОСНОВЕ
ОГУЗ «Челябинское областное бюро судебно-медицинской экспертизы» (нач. - к.м.н. Е.Ф. Швед) Представлено патоморфологическое исследование печени и почек при отравлении спиртовыми растворами полигексаметиленгуанидина гидрохлорида. Отражены возможности метода поляризационной микроскопии.
Ключевые слова: отравление, полигексаметиленгуанидина гидрохлорид, печень, почки, поляризационная микроскопия.
POSSIBILITIES OF A METHOD OF POLARISING MICROSCOPY AT EXAMINATION OF POISONINGS BY SUBSTITUTE ALCOHOL ON A POLYMERIC BASIS
S.A. Friss
Pathomorphological research of the poisoning spirit solution of the polyhexamethylenguanidine hydrochloride in Cheljabinsk region is presented. Posibilities of polarising microscopy of a kidney and a liver are revealed.
Key words: a poisoning, polyhexamethylenguanidine hydrochloride, a liver, a kidney, polarising microscopy.
В последнее время усилился интерес к возможности низмами, создания антибактериальных, антивирусных
использования полимеров для борьбы с микроорга- и противогрибковых полимерных препаратов, среди
которых активно внедряется полигексаметиленгуанидина гидрохлорид (ПГМГ-ГХ) [1, 4, 8]. Влияние содержащих полимеры биоцидных препаратов на организм человека изучено недостаточно, не смотря на создание различных экспериментальных моделей [6].
В сентябре 2006 года в Челябинской области произошло массовое отравление населения при пероральном приеме спиртсодержащих средств, не рекомендуемых для внутреннего применения. Установлено, что в состав этих жидкостей, входили этиловый спирт 93±0,5%, денатурирующая добавка (диэтилфталат) и биополимерная добавка (ПГМГ-ГХ). Наличие этанола высокой концентрации, выступающего в качестве одного из токсических ингредиентов, не объясняло отличия клинического течения данного отравления от отравления этанолом и алкогольной болезни печени [2, 5, 6, 10, 11]. У пострадавших развивался токсический гепатит с обязательным содружественным поражением почек, что перекликалось с результатами предшествующих исследований действия других спиртсодержащих жидкостей [7]. До настоящего времени токсикант оставался не установленным, предполагалось, что причиной отравления могла быть смесь спиртов [2].
Изучение клинико-морфологической картины отравления, секционного материала позволило установить, что синдромы холестаза, цитолиза и желтухи при токсическом поражении печени протекали с нарушением пигментного, жирового и белкового обменов как в печени, так и в почках. Персистенция интралобулярного холестаза с вторичным повреждением клеточно-тканевых структур печени, почек, вероятнее всего, была обусловлена формированием соединений, содержащих соли желчных кислот. Наличие данного трудно метаболизируемого материала внутри лизосом, фаголизосом, в цитоплазме макрофагов, гепатоцитов, эпителия почечных канальцев было выявлено нами при электронной микроскопии печени пострадавших [11]. Отмечена своеобразная реакция клеток Купфера на желчные цилиндры, пигментированные включения в III зоне печеночных ацинусов [10]. Гистохимическое позитивное окрашивание на полимеры, железо, липофусцин в сочетании с другими находками позволили предположить, что патологические включения в печени, вероятнее всего, могли содержать ПГМГ-ГХ.
Многие полимеры, в частности биологические, к которым относится и ПГМГ-ГХ, обладают дихроизмом. Дихроизм - это различное поглощение веществом света в зависимости от его поляризации (анизотропии поглощения) [3]. Дихроизм открыт П. Кордье (P.Cordier) в 1809 году на минерале, названном кордиеритом. [9]. Это свойство тканевых структур и патологических образований, включений используется при гистологическом изучении микропрепаратов в практической деятельности судебномедицинского эксперта и патологоанатома.
Целью данного исследования стало установление дихроизма патологических включений в ткани печени и почек при отравлении спиртовым раствором полигекса-метиленгуанидина гидрохлорида.
Материалы и методы
Использовался секционный материал умерших от отравления с применением метода поляризационной микроскопии и последующей фотосъемкой микропрепаратов. В группу сравнения вошли лица с алкогольной болезнью печени.
Результаты исследований и их обсуждение
При поляризационной микроскопии установлено наличие светящихся анизотропных включений в цитоплазме гепатоцитов и клеток Купфера (Рис. 1 Цв. вкл.). Подобные включения в форме зерен и коротких палочек обнаружены в составе макрофагальных гранулем печени, в окружении пигментных цилиндров (Рис. 2 Цв. вкл.). Вещества с двойным лучепреломлением локализованы в почечных клубочках, просветах сосудов, строме почек и эпителии почечных канальцев (Рис. 3 Цв. вкл.). В других органах при отравлении суррогатным алкоголем на полимерной основе анизотропных патологических включений нам встретить не удалось. Нужно отметить, что в группе сравнения не отмечено гранулематозной реакции и патологических анизотропных включений как в печени, так и в почках.
Поскольку поглощение зависит и от длины волны, дихроичные вещества в печени и почках оказались различно окрашенными при наблюдениях по разным направлениям. Мы наблюдаем подобную картину в своей практической деятельности и при других отравлениях: разноцветные кристаллы оксалатов кальция - в почечных канальцах при отравлении этиленгликолем, внутрисосу-дистые кристаллоидные разноцветные массы - в легком наркоманов. Известно, что за счет внутреннего напряжения полимеры приобретают в поляризованном свете радужную окраску [3]. По мнению отдельных авторов, этот феномен можно назвать «плеохроизмом» [9].
Таким образом, при отравлении суррогатным алкоголем на полимерной основе и применении метода поляризационной микроскопии секционного материала установлено наличие анизотропных включений в печени и почках в виде светящихся разноцветных зерен и коротких палочек. Учитывая особенности клинико-морфологической картины отравления, результатов химической экспертизы спиртсодержащих жидкостей, можно с большой долей вероятности предположить, что патологические включения в печени и почках имеют в своем составе ПГМГ-ГХ. Выступая в роли токсиканта, ПГМГ-ГХ способен образовывать ионные связи, связывать железо, желчные кислоты, поддерживая холестаз, гипербилиру-бинемию, желтуху, гепаторенальный синдром и общую интоксикацию организма.
Литература:
1. Афиногенов Г.Е., Панарин Е.Ф. Антимикробные полимеры. - Гиппократ, СПб, 1993. - 264 с.
2. Бенеманский В.В., Солодун Ю.В., Юшков Г.Г., Бун М.М., Пискарева ТА. Сравнительная морфологическая характеристика изменений в печени у людей при отравлении спиртсодержащими жидкостями и у животных после подострого воздействия этиловым, пропиловым спиртами, этиленгликолем и их смесью // Суд,-мед. экспертиза. - 2010. - Т5, №3.-С. 14-16.
3. Гайсенок В.А., Саржевский А.М. Анизотропия поглощения и люминесценции многоатомных молекул. - Минск: изд-во МГУ, 1986.
- 315 с.
4. Ефимов К.М., Гембицкий П.А., Снежко А.Г. Полигуанидины - класс малотоксичных дезсредств пролонгированного действия // Дезинфекционное дело. - 2000. -№4.
5. Ивашкин В.Т., Буеверов А.О. Токсический гепатит, вызванный отравлением суррогатами алкоголя // РЖГГЕ. - 2007. - №1.
- С. 4-8.
6. Проблемы стандартизации и внедрения современных диагностических и лечебных технологий в практической токсикологической помощи пострадавшим от острых химических воздействий: Тезисы Российской научной конференции. Екатеринбург, 2008. -138 с.
7. Сафрай А.Е. Судебно-медицинские аспекты отравлений некоторыми спиртсодержащими жидкостями: автореф. дисс. ... к.м.н.
- СПб, 1996.
8. СветловД.А. Биоцидные препараты на основе производных полигексаметиленгуанидина //Жизнь и безопасность. - 2005. - № 3-4.
9. Физическаяэнциклопедия. www.femto.com.ua
10. Фрисс С.А. Роль иммуногистохимического -исследования печени в экспертизе смертельных отравлений суррогатным алкоголем // Морфологические ведомости. - 2008. -№ 3-4. - С. 220-222.
11. Фрисс С.А., Карауловский А.Н., Косарев Д.Н., Костин Е.Ф., Мильченко И.В., Сапрыкин К.А., Оришич А.Н., Сорокин М.Г., Та-рабцев М.В., Трифонов А.Г. Электронномикроскопическое -исследование клеток Купфера при отравлении спиртовым раствором полигексаметиленгуанидина гидрохлорида //Проблемы экспертизы в медицине. - 2010. - № 1-2. - С. 18-19.
© С.А. Фрисс, 2010 УДК 340.6
С.А. Фрисс
МАКРОСКОПИЧЕСКИЙ ПРОФИЛЬ ТОКСИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА ПРИ ОТРАВЛЕНИИ СУРРОГАТНЫМ АЛКОГОЛЕМ НА ПОЛИМЕРНОЙ ОСНОВЕ
ОГУЗ «Челябинское областное бюро судебно-медицинской экспертизы» (нач. - к.м.н. Е.Ф. Швед)
В работе представлено патоморфологическое макроскопическое исследование 50 погибших от отравления спиртовым раствором полигексаметиленгуанидина гидрохлорида в Челябинской области. Выявлены характерные качественные и количественные изменения печени, отличные от алкогольной болезни. Отражена информативность исследования трупного материала при аутолизе.
Ключевые слова: отравление, суррогатный алкоголь, полигексаметиленгуанидина гидрохлорид, токсический гепатит, патоморфология.
MACROSCOPIC PROFILE OF TOXIC HEPATITIS IN CASE OF A POISONING WITH SUBSTITUTE ALCOHOL ON A POLYMERIC BASIS
S.A. Friss
In work it is presented 50 pathomorphological macroscopic research of the victims at the poisoning spirit solution of thepolyhexamethylenguanidine hydrochloride in Cheljabinsk region. Characteristic distinctive qualitative and quantitative changes of a liver are revealed. Information of the autopsy with an autolysis it is reflected.
Key words: a poisoning, substitute alcohol, polyhexamethylenguanidine hydrochloride, toxic hepatitis, pathomorphology.
В последние два десятилетия усиливается интерес к изучению отравлений этиловым спиртом, его заменителями и жидкостями, изготовленными на основе этанола. К единому мнению о названии продукции, содержащей технический этиловый спирт и различные примеси (аце-тальдегид, метиловый, пропиловый, изоамиловый спирты, различные металлы, полимерные добавки и т.д.), не пришли. Ведущими экспертами предлагаются различные определения, а именно: истинные «суррогаты алкоголя», «суррогатный алкоголь», «суррогатные алкогольные напитки» [3, 4, 5, 8, 9, 15, 16]. Последние годы все активнее используется групповое понятие «спиртсодержащие жидкости» [2, 11, 17]. Мы в своих работах употребляем название суррогатный алкоголь на полимерной основе.
Если на конец столетия доля пострадавших, поступивших в специализированные токсикологические центры с отравлениями спиртсодержащими жидкостями, составляет 5,9-49,3% [9], то в 2004 году - в Свердловской области, а в 2006 году - в 21 регионе России отравление не предназначенной для приема внутрь алкогольной продукцией приобретает массовый характер. По данным РосПотребНадзора (от 09.02.07 г.) с сентября 2006 года по 01.02.2007 на территории Российской Федерации регистрируется 20074 случая отравлений, из них 1074 (5,4%) - с летальным исходом. Среди пострадавших оказываются и жители Челябинской области, также употреблявшие через рот спиртсодержащие средства «Можжевельник», «Кристалл-1», «Перца стручкового настойку», «Боярышник», в состав которых входят этиловый спирт, диэтилфталат, антисептик - полимер полигексаметиленгуанидина гидрохлорид (ПГМГ-ГХ). Только в сентябре по городу Челябинску регистрируется 233 эпизода отравлений, в том числе и со смертельным исходом.
Обобщая литературные и документальные источники периода 2007-2010 гг., можно сказать, что исследовательские работы в области экспертизы отравлений не установленным гепатотропным ядом приобретают различную направленность. Однако, в выводах отмечается общая закономерность: обязательно развивается токсическое поражение печени с медленно разрешающимся холеста-зом, желтухой, токсической нефропатией; компоненты отравляющего вещества определяются только в вещественных доказательствах с места происшествия; методики изолирования и обнаружения ПГМГ-ГХ в биологических жидкостях и тканях человека не разработаны; каждый из компонентов отравляющей смеси изучен в эксперименте и не объясняет развития токсического гепатита у пострадавших; клиническая и морфологическая картина является отличительной для данного вида отравления, и как предполагают авторы работ, может быть результатом усиления гепатотоксического эффекта при совместном действии этанола и технических спиртов [2, 6, 8, 11, 17].
При анализе морфологической картины отравления сделан акцент на гистологическое исследование [2, 6, 8, 11], особенностям макроскопической характеристики печени не уделяется должного внимания.
Целью данной работы стало создание целостного представления о макроскопической картине токсического гепатита при отравлении спиртовым раствором ПГМГ-ГХ.
Материалы и методы
Работа выполнена на практическом экспертном материале Челябинского областного бюро судебно-медицинской экспертизы. Проанализированы направительные документы, акты судебно-медицинского исследования секционного материала, результаты гистологического исследования, судебно-химического анализа крови и мочи,
