CC BY
18
DOI: 10.20514/2226-6704-2021-11-5-359-369 УДК 616.61-002.2-085.357+
616.379-008.64-085.357
С.С. Попов1, Е.И. Ануфриева2, Е.Д. Крыльский*3, А.Н. Веревкин3, К.К. Шульгин3
1 — ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России, кафедра Организации фармацевтического дела, клинической фармации и фармакогнозии, Воронеж, Россия
2 — ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко» Минздрава России, кафедра Организации сестринского дела, Воронеж, Россия
3—ФГБОУ ВО «Воронежский государственный университет» Минобрнауки России, кафедра Медицинской биохимии и микробиологии, Воронеж, Россия
ВОЗДЕЙСТВИЕ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ С МЕЛАТОНИНОМ НА ФЕРМЕНТАТИВНОЕ ЗВЕНО ГЛУТАТИОНОВОЙ СИСТЕМЫ И УРОВЕНЬ ТРАНСФОРМИРУЮЩЕГО ФАКТОРА РОСТА- pi У ПАЦИЕНТОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА И ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ ПОЧЕК
S.S. Popov1, E.I. Anufrieva2, E.D. Kryl'skii*3, A.N. Verevkin3, K.K. Shulgin3
1 — Voronezh State Medical University named after N.N. Burdenko, Department of Organization of Pharmaceutical Business, Clinical Pharmacy and Pharmacognosy, Voronezh, Russia
2 — Voronezh State Medical University named after N.N. Burdenko, Department of Nursing Organization, Voronezh, Russia
3 — Voronezh State University, Department of Medical Biochemistry and Microbiology, Voronezh, Russia
The Effect of Combination Therapy with Melatonin on the Enzymes of Glutathione System and the Level of Transforming Growth Factor- pi in Patients with Type 2 Diabetes Mellitus and Chronic Kidney Disease
Резюме
Цель работы. Целью работы являлась оценка воздействия комбинированной терапии с мелатонином на клинико-биохимические показатели развития хронической болезни почек (ХБП) и сахарного диабета (СД) 2 типа, функционирование ферментативного звена глутатионовой антиоксидантной системы и активность ферментов — поставщиков NADPH, а также уровень трансформирующего фактора роста-pi и ли-пидный профиль пациентов. Материалы и методы. В исследовании принимало участие 60 пациентов (19 мужчин и 41 женщина, средний возраст — 65,6±9,3 года) с ХБП и СД 2 типа. Пациенты были разделены на 2 группы. Первая группа пациентов находилась на базисном лечении (n=30, 8 мужчин и 22 женщины, средний возраст — 64,1±7,9 года); вторая группа участников (n=30, 11 мужчин и 19 женщин, средний возраст — 69,0±10,5 года) дополнительно к базисной терапии получала 2 мг мелатонина. Контрольную группу составили 65 практически здоровых лиц (30 мужчин и 35 женщин, средний возраст — 42,3±17,7 года) с нормальными показателями общего и биохимического анализов крови. В ходе работы был осуществлен анализ клинико-биохимических показателей и липидного профиля в сыворотке крови, уровня транс-
"Контакты: Евгений Дмитриевич Крыльский, е-mail: evgenij.krylsky@yandex.ru "Contacts: Evgeniy D. Kryl'skii, е-mail: evgenij.krylsky@yandex.ru ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-8855-5515
формирующего фактора роста-pi методом иммуноферментного анализа, активности ферментов глутатионовой антиоксидантной системы и NADPH-генерирующих ферментов спектрофотометрическим методом. Результаты. Применение мелатонина на фоне базисного лечения по сравнению со стандартной терапией способствовало снижению протеинурии (p=0,01), гипергликемии (p=0,019), концентрации мочевины (p=0,043), гликированного гемоглобина (p=0,045) и трансформирующего фактора роста-pi (p=0,020) у пациентов с ХБП. Кроме того, использование данного препарата оказывало воздействие на липидный профиль и приводило к возрастанию активности ферментов глу-татионовой антиоксидантной системы, ферментов — поставщиков NADPH, что отражает эффективность формирования компенсаторного ответа в условиях активации свободнорадикального окисления на фоне гипергликемии. Заключение. Наблюдаемые в ходе исследования различия, очевидно, были вызваны действием мелатонина, для которого характерен нефропротекторный и гипогликемический эффекты, способность нейтрализовывать свободные радикалы и активизировать функционирование компонентов антиоксидантной системы. Ключевые слова: хроническая болезнь почек, сахарный диабет 2 типа, окислительный стресс, антиоксидантная система, мелато-нин, трансформирующий фактор роста — 61
Конфликт интересов
Авторы заявляют, что данная работа, её тема, предмет и содержание не затрагивают конкурирующих интересов
Источники финансирования
Авторы заявляют об отсутствии финансирования при проведении исследования Статья получена 27.01.2021 г. Принята к публикации 28.07.2021 г.
Для цитирования: Попов С.С., Ануфриева Е.И., Крыльский Е.Д. и др. ВОЗДЕЙСТВИЕ КОМБИНИРОВАННОЙ ТЕРАПИИ С МЕЛАТО-НИНОМ НА ФЕРМЕНТАТИВНОЕ ЗВЕНО ГЛУТАТИОНОВОЙ СИСТЕМЫ И УРОВЕНЬ ТРАНСФОРМИРУЮЩЕГО ФАКТОРА РОСТА-pi У ПАЦИЕНТОВ С САХАРНЫМ ДИАБЕТОМ 2 ТИПА И ХРОНИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ ПОЧЕК. Архивъ внутренней медицины. 2021; 11(5): 359-369. DOI: 10.20514/2226-6704-2021-11-5-359-369
Abstract
Aim. The aim of the work was to assess the effect of combination therapy with melatonin on the clinical and biochemical parameters of chronic kidney disease (CKD) and type 2 diabetes mellitus (DM), the level of transforming growth factor-p1, lipid profile, activity of the glutathione antioxidant system enzymes and the activity of NADPH-generating enzymes in patients. Materials and methods. The study involved 60 people (19 men and 41 women, average age 65.6 ± 9.3 years) with chronic kidney disease associated with type 2 diabetes. The patients were divided into 2 groups. The first group of patients received basic treatment (n = 30, 8 men and 22 women, mean age 64.1 ± 7.9 years); the second group of participants (n = 30, 11 men and 19 women, mean age 69.0 ± 10.5 years) received 2 mg of melatonin in addition to the basic therapy. The control group consisted of 65 apparently healthy individuals (30 men and 35 women, average age 42.3±17.7 years) with normal indicators of general and biochemical blood tests. In the course of the work, the analysis of clinical and biochemical indicators and lipid profile in blood serum, the level of transforming growth factor-p1 by enzyme immunoassay, the activity of enzymes of the glutathione antioxidant system and NADPH-generating enzymes by the spectrophotometric method were carried out. Results. The use of melatonin additionally with basic treatment compared with standard therapy led to a decrease in proteinuria (p=0.010), hyperglycemia (p=0.019), urea concentration (p=0.043), glycated hemoglobin (p=0.045) and transforming growth factor-p1 levels (p=0.020) in patients with CKD. In addition, the use of this drug led to a changing of the lipid profile, and the activity of glutathione antioxidant system enzymes and NADPH-generating enzymes. Conclusion. The differences observed during the study were apparently caused by the action of melatonin, which has nephroprotective and hypoglycemic properties, the ability to neutralize reactive oxygen species and activate the antioxidant system functioning. Key words: chronic kidney disease, type 2 diabetes mellitus, oxidative stress, antioxidant system, melatonin, transforming growth factor-61
Conflict of interests
The authors declare no conflict of interests
Sources of funding
The authors declare no funding for this study Article received on 27.01.2021 Accepted for publication on 28.07.2021
For citation: Popov S.S., Anufrieva E.I., Kryl'skii E.D. et al. The Effect of Combination Therapy with Melatonin on the Enzymes of Glutathione System and the Level of Transforming Growth Factor- p1 in Patients with Type 2 Diabetes Mellitus and Chronic Kidney Disease. The Russian Archives of Internal Medicine. 2021; 11(5): 359-369. DOI: 10.20514/2226-6704-2021-11-5-359-369
Г6ФДГ — глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, ГП — глутатионпероксидаза, ГР — глутатионредуктаза, ГТ — глутатионтрансфераза, ИА — индекс атерогенности, ЛПВП — холестерин липопротеинов высокой плотности, ЛПНП — холестерин липопротеинов низкой плотности, ОХС — общий холестерин, СД — сахарный диабет, СКФ — скорость клубочковой фильтрации, ХБП — хроническая болезнь почек, GSH — восстановленный глутатион, NADP-ИДГ — NADP-зависимая изоцитратдегидрогеназа, TGF-|31 — трансформирующий фактор роста-^1
Введение
Известно, что к основным этиологическим факторам в развитии хронической болезни почек (ХБП) относят сахарный диабет (СД) и артериальную
гипертензию [1]. Важным предиктором прогрессирующего повреждения почек выступает протеинурия, которая приводит к повреждению тубулоинтерстициаль-ной ткани почек, и, как следствие, снижению скорости
клубочковой фильтрации, ведущей к терминальной стадии почечной недостаточности. Почка является метаболическим органом, в котором активно протекают реакции митохондриального окисления. Согласно исследованиям, повышенное образование активных форм кислорода и снижение антиоксидантной защиты организма негативно влияют на течение ХБП [2].
Окислительный стресс активизирует митоген-акти-вируемые протеинкиназы, различные цитокины и факторы транскрипции, что, в конечном итоге, приводит к фиброзу и терминальной стадии почечной недостаточности. Одним из факторов, активируемых в результате протеинурии и окислительного стресса, является трансформирующий фактор роста-^1 (TGF-^1), который выступает важным медиатором множества процессов, протекающих в клубочках и канальцах почек. Кроме того, высокая концентрация глюкозы повышает уровень мРНК и белка TGF-^1 в культивируемых проксимальных канальцевых клетках, эпителиальных и ме-зангиальных клетках почечных клубочков [3]. Многочисленные исследования показали, что TGF-^1 играет центральную роль в развитии фиброза. TGF-^1 увеличивает митохондриальную продукцию активных форм кислорода в различных типах клеток, которые опосредуют TGF-в-индуцированный апоптоз, а также многие из TGF-в-индуцированных про- и фибротических эффектов [4].
Патогенному действию свободных радикалов противостоит антиоксидантная система, работа которой направлена на подавление процессов свободноради-кального окисления. Одним из главных звеньев анти-оксидантной защиты является глутатионовая система, в состав которой входят ферменты глутатионперокси-даза (ГП), глутатионредуктаза (ГР), глутатионтранс-фераза (ГТ) и трипептид глутатион, играющий роль восстановительного кофактора в глутатионперокси-дазной реакции. ГП является ключевым ферментом, осуществляющим утилизацию активных форм кислорода и продуктов пероксидного окисления липидов. ГР обеспечивает восстановление глутатиона, окисленного в ходе глутатионпероксидазной реакции, без усиления его синтеза de novo. ГТ осуществляет деток-сикацию продуктов пероксидного окисления липидов, генерируемых при метаболизме ксенобиотиков в эндо-плазматическом ретикулуме. Для функционирования глутатионовой антиоксидантной системы необходим постоянный приток кофермента NADPH. Основными источниками данного соединения являются ферменты глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа (Г6ФДГ) и NADP-зависимая изоцитратдегидрогеназа (NADP-ИДГ) [5].
Клинические рекомендации по лечению ХБП включают в себя контроль артериального давления, гликемии, липидного обмена, а также использование нефропротективной терапии [6]. В связи с этим, целесообразным представляется изучение естественных метаболитов организма, обладающих нефропротек-тивным действием и направленных как на подавление окислительного стресса, так и TGF-^1. К одному из таких метаболитов относится гормон мелатонин [7].
Известно, что мелатонин связывает свободные радикалы, одновременно индуцируя естественную систему антиоксидантной защиты организма.
Таким образом, целью настоящей работы явилась оценка клинико-биохимических показателей ХБП, липидного профиля, уровня ТОБ-^1, активности глу-татионовой антиоксидантной системы и NADPH-генерирующих ферментов у пациентов с ХБП и СД 2 типа, при проведении базисного лечения и комбинированной терапии с мелатонином.
Экспериментальная часть
Настоящее клиническое исследование было рандомизированным открытым контролируемым. На проведение научного исследования было получено одобрение этического комитета ФГБОУ ВО «Воронежский государственный медицинский университет им. Н.Н. Бурденко», выписка из протокола № 4 от 29.09.2016г. Все пациенты дали информированное согласие на участие в исследовании. Клиническое исследование проводилось в эндокринологических отделениях БУЗ ВО «Воронежский областной клинический центр специализированных видов медицинской помощи» и БУЗ ВО «Воронежская городская клиническая больница скорой медицинской помощи № 10». В исследование было включено 60 пациентов (29 мужчин, средний возраст 65,6±9,3 лет) с СД 2 типа и ХБП. Длительность ХБП составила 13,2±6,3 месяца. 2 стадия ХБП наблюдалась у 6 (10 %), 3а стадия — у 42 (70 %), 3б стадия — у 12 (20 %) пациентов. Диагноз ХБП был установлен согласно клиническим рекомендациям [8]. Из сопутствующих заболеваний (таблица 1) чаще всего регистрировались артериальная гипертензия (100 %), диабетическая ретинопатия (100 %), ожирение (69 %), хроническая сердечная недостаточность (66 %). Критериями исключения из исследования являлись: СД 1 типа, вирусные гепатиты, острые инфекционные заболевания, острый инфаркт миокарда, злокачественные новообразования, острое нарушение мозгового кровообращения. После поступления в стационар всем пациентам была проведена корректировка терапии. Первая группа пациентов (п=30, 8 мужчин и 22 женщины, средний возраст — 64,1±7,9 года) получала базисное лечение. Вторая группа пациентов (п=30, 11 мужчин и 19 женщин, средний возраст — 69,0±10,5 года) дополнительно к аналогичной базисной терапии получала препарат, содержащий 2 мг мелатонина (таблица 2). У всех пациентов второй группы, находящихся на стационарном лечении, имелись жалобы на нарушение сна. Таким образом, за исключением назначения мелатонина, различия в лечении участников первой и второй группы отсутствовали. Продолжительность базисной терапии и комбинированного лечения с мелатонином, проводимых в стационаре, составляла 2 недели. Клинико-био-химические показатели липидного профиля, уровня ТОБ-^1, активности глутатионовой антиоксидантной системы и NADPH-генерирующих ферментов анализировались при поступлении пациентов в стационар
и перед выпиской. Контрольную группу составили 65 практически здоровых лиц (30 мужчин и 35 женщин, средний возраст — 42,3±17,7 года) с нормальными показателями общего и биохимического анализов крови, проходивших плановый профилактический медицинский осмотр в БУЗ ВО «Воронежская городская поликлиника № 10».
Расчетную скорость клубочковой фильтрации (СКФ) определяли по формуле CKD-EPI (2011). Определение суточной протеинурии в моче проводили фотоколориметрическим методом с красителем пирогаллоловым красным и методом Брандберга-Робертса-Стольникова.
Уровень глюкозы натощак и постпрандиальный уровень глюкозы оценивали гексокиназным ферментативным методом и с помощью глюкометра «Сателлит Плюс» («ЭЛТА», Россия). Для оценки липидного обмена определяли концентрацию общего холестерина (ОХС), холестерина липопротеинов высокой плотности (ЛПВП) в сыворотке при помощи наборов реагентов (Био-Ла-Тест) ферментативным фотоколориметрическим методом на биохимическом анализаторе Klima 15MC (Испания). Индекс атерогенности (ИА) определяли как отношение разности ОХС и ЛПВП к ЛПВП [ИА = (ОХС — ЛПВП)/ЛПВП], который в норме должен быть <3.
Таблица 1. Сопутствующие патологии участников исследования, получавших базовое лечение (1-ая группа, n=30), и пациентов, получавших мелатонин дополнительно к базисной терапии (2-ая группа, n=30)
Table 1. Comorbidities of study participants who received basic treatment (group 1, n=30) and patients who received melatonin in addition to basic therapy (group 2, n=30)
Патология/ 1-ая группа/ 2-ая группа/
Comorbidities, n (%) Group 1, n=30 Group 2, n=30
Артериальная гипертензия/ Arterial hypertension
Диабетическая ретинопатия/ Diabetic retinopathy
Ожирение/ Obesity
Хроническая сердечная недостаточность/ Chronic heart failure
Ишемическая болезнь сердца/ Coronary artery disease
Острые нарушения мозгового кровообращения в анамнезе/ Acute disorders of cerebral circulation
Инфаркт миокарда в анамнезе/ Myocardial infarction
Хроническая обструктивная болезнь легких/ Chronic obstructive pulmonary disease
Заболевания периферических артерий/
Peripheral artery disease
Расчет показателей гликированного гемоглобина производили референсным методом с использованием анализатора D 10 фирмы «Bio-Rad» (США).
Концентрацию мочевины и креатинина анализировали с помощью диагностических наборов фирмы Оль-векс (Россия).
Содержание мелатонинсульфата в моче пациентов измеряли методом иммуноферментного анализа с помощью набора фирмы Buhlmann (Германия).
Активность исследуемых ферментов определяли на спектрофотометре Hitachi U-1900 (Япония). Измерение активности ГП проводили в среде спектрофотометри-рования следующего состава: 50 мМ калий-фосфатный буфер (pH 7,4), содержащий 1,0 мМ ЭДТА, 0,12 мМ NADPH (AppliChem, Германия), 0,85 мМ восстановленного глутатиона (GSH) (AppliChem, Германия), 0,37 мМ Н2О2, 1 ед/мл ГР (Sigma Aldrich, США). Контрольная проба не содержала GSH [9]. Активность ГР оценивали в 50 мМ калий-фосфатном буфере (pH 7,4), содержащем 1,0 мМ ЭДТА, 0,16 мМ NADPH и 0,8 мМ GSH [9]. Активность ГТ измеряли в 0,1 М калий-фосфатном буфере (рН 7,4), содержащем 1,0мМ ЭДТА, 1,0 мМ 1-хлор-2,4-динитробензол, 5,0 мМ GSH [10]. Измерение активности Г6ФДГ проводили в 50 мМ трис-НС1-буфере (pH 7,8), содержащем 3,0 мМ глюкозо-6-фосфат (Sigma Aldrich, США), 0,25 мМ NADP (AppliChem, Германия), 1,0 мМ МпС12 [11]. Оценку активности NADP-ИДГ осуществляли в 50 мМ трис^О-буфере (рН 7,8), содержащем 1,5 мМ изоцитрат (Sigma Aldrich, США), 2,0 мМ MnCl2, 0,4 мМ NADP [11]. О скорости ферментативной реакции судили по изменению оптической плотности при 340 нм. За единицу ферментативной активности (Е) принимали количество фермента, катализирующее образование 1 мкмоль продукта реакции за 1 мин при 25 0С. Активность ферментов выражали в ферментативных единицах в расчете на мл сыворотки. Концентрацию GSH определяли с помощью реакции с 5,5-дитио-бис-(2-нитробензойной) кислотой (Sigma Aldrich, США) [11]. Концентрацию белка в сыворотке крови оценивали биуретовым методом.
Уровень TGF-ß1 в сыворотке крови измеряли имму-ноферментным методом с использованием набора фирмы RayBiotech (США).
Статистическую обработку материала проводили с применением программы «SPSS 23.0» и стандартных методов вариационной статистики (расчёт средних значений, стандартной ошибки среднего, стандартного отклонения, медианных значения и интерквартильного размаха). Нормальность распределения в группах оценивалась с помощью критерия Колмогорова-Смирнова, достоверность отличий анализировалась с использованием t-критерия Стьюдента и непараметрического теста Манна-Уитни. Для выявления корреляционных взаимосвязей между изучаемыми показателями использовали коэффициент ранговой корреляции Пирсона или Спирмена, в зависимости от распределения. В настоящей работе приводятся значения средней (0,30-0,69) и сильной (>0,70) степени корреляции. Статистически значимыми считали различия при р <0,05.
30(100) 30(100)
30(100) 30(100)
21(70) 20(67)
22(73) 18(60)
13 (43) 13 (43)
5 (17) 4 (13)
5 (17) 4 (13) - 2 (7)
6 (20) 8 (27)
Таблица 2. Назначенные лекарственные препараты участникам исследования Table 2. Prescribed drugs to study participants
Назначенные
лекарственные 1-ая группа/ 2-ая группа/
препараты/ Group 1 Group 2
Prescribed drugs
Гипогликемические
пероральные
препараты/
Oral hypoglycemic
drugs
Бигуаниды (метформин — 500-1500 мг 1 раз вечером) Препараты сульфонилмочевины (Гликлазид — 30-90 мг
1 р/д)
Ингибиторы дипептидилпептидазы-4 (Вилдаглип-тин — 50-100 мг 1-2 р/д, Алоглиптин — 12,5-25 мг 1 р/д) Biguanides (metformin — 500-1500 mg once in the evening) Sulfonylurea preparations (Gliclazide — 3090 mg once a day) Inhibitors of dipeptidyl peptidase-4 (Vildagliptin — 50-100 mg 1-2 times a day, Alogliptin — 12.5-25 mg once a day )
Антигипертензивные АПФ-блокаторы (Эналаприл -5-20 мг 1-2 р/д, Лизино-препараты/ прил 5-20 мг 1 р/д),
Antihypertensive В-адреноблокаторы (Бисопролол — 2,5-10 мг 1 р/д, Ме-
drugs топролола сукцинат — 50-100 мг 1 р/д)
ACE blockers (Enalapril -5-20 mg 1-2 times a day, Lisinopril 5-20 mg once a day), В-blockers (Bisoprolol — 2.5-10 mg 1 once a day, Metoprolol succinate — 50-100 mg once a day)
Гиполипидемические Статины (Аторвастатин — 20-40 мг 1 р/д) препараты/ Statins (Atorvastatin — 20-40 mg once a day)
Lipid-lowering drugs
Диуретики/ Diuretics
Мелатонин/ Melatonin
Результаты и обсуждение
Исходная клинико-лабораторная характеристика пациентов представлена в таблице 3.
Биохимические показатели, уровень ТОБ-^1 и ли-пидный профиль участников исследования представлены в таблице 4.
Уровень суточной протеинурии в первой и второй группах пациентов до проведения терапии составлял 0,540 и 0,781 г/сут, соответственно. После проведенного лечения данный показатель снижался в обеих группах, однако комбинированная терапия с мелатонином достоверно более существенно уменьшала уровень протеину-рии (р=0,010). Кроме этого, комбинированное лечение с мелатонином приводило к понижению концентрации глюкозы натощак, постпрандиальной гипергликемии (р <0,001) и уровня гликированного гемоглобина (р=0,010) относительно показателей до лечения. Оценка содержания мелатонинсульфата в моче подтвердила, что у пациентов второй группы в ходе терапии происходило повышение уровня данного гормона в ходе проводимого лечения (р=0,010). Как известно, мелатонин оказывает протекторное действие по отношению к органам и тканям при гипергликемии, что обусловлено его антиокси-дантным, противовоспалительным и антиапоптотиче-ским эффектами. Данный гормон оказывает позитивное воздействие на углеводный обмен, благодаря способности ингибировать глюконеогенез в печени, повышать секрецию инсулина и чувствительность тканей к нему, а также восстанавливать дисфункцию митохондрий
Бигуаниды (метформин — 500-1500 мг 1 раз вечером) Препараты сульфонилмочевины (Гликлазид 30-90 мг
1 р/д)
Ингибиторы дипептидилпептидазы-4 (Вилдаглип-тин — 50-100 мг 1-2 р/д, Алоглиптин — 12,5-25 мг 1 р/д) Biguanides (metformin — 500-1500 mg once in the evening) Sulfonylurea preparations (Gliclazide — 3090 mg once a day) Inhibitors of dipeptidyl peptidase-4 (Vildagliptin — 50-100 mg 1-2 times a day, Alogliptin — 12.5-25 mg once a day )
АПФ-блокаторы (Эналаприл -5-20 мг 1-2 р/д, Лизино-прил 5-20 мг 1 р/д),
В-адреноблокаторы (Бисопролол — 2,5-10 мг 1 р/д, Ме-топролола сукццинат — 50-100 мг й р/д) ACE blockers (Enalapril -5-20 mg 1-2 times a day, Lisinopril 5-20 mg once a day), В-blockers (Bisoprolol — 2.5-10 mg
1 once a day, Metoprolol succinate — 50-100 mg once a day)
Статины (Аторвастатин — 20-40 мг 1 р/д) Statins (Atorvastatin — 20-40 mg once a day)
Тиазидные диуретики (Индапамид 2,5 мг 1 р/д) Thiazide diuretics (Indapamide 2.5 mg once a day)
2 мг внутрь, по 1 таблетке 1 р/день, после приема пищи, вечером, за 1-2 ч перед сном
2 mg orally, 1 tablet once a day, after meals, in the evening, 1-2 hours before bedtime
при сахарном диабете [12]. Кроме того, в эксперименте на животных было показано, что мелатонин обеспечивает нормализацию формы и организации крист митохондрий при метаболической дисфункции почечных канальцев, снижает количество клеток с повышенным индексом апоптоза в проксимальных канальцах [13]. Таким образом, характерные для мелатонина антиокси-дантный и антиапоптотический эффекты способствовали, по-видимому, более выраженному изменению показателей гликемии и протеинурии у пациентов, по сравнению со стандартным лечением. Помимо прочего, комбинированное лечение с мелатонином по сравнению со стандартной терапией снижало уровень ТОБ-в1 (р=0,001). В последнее время ТОБ-^1 рассматривают как многофункциональный цитокин, участвующий в клеточном росте, дифференцировке и миграции, формировании и деградации компонентов внеклеточного ма-трикса, хемотаксических процессах и апоптозе, а также в иммунной регуляции. Ключевым медиатором фиброза почек является ТОБ-^1 [14]. Поддержание физиологического уровня ТОБ-в необходимо для нормального функционирования большинства тканей и поддержания органов. В то же время, повышенная экспрессия ТОБ-в1 связана с патологическими изменениями в тканях при различных заболеваниях, таких как фиброз легких, спинальная мышечная атрофия и заболевания почек [15]. Концентрация ТОБ-в1 повышена в сыворотке крови пациентов при таких патологиях, как диабетическая нефропатия, иммуноглобулин А-нефропатия,
Тиазидные диуретики (Индапамид 2,5 мг 1 р/д) Thiazide diuretics (Indapamide 2.5 mg once a day)
фокально-сегментарный гломерулосклероз, быстро-прогрессирующий гломерулонефрит и волчаночный нефрит. TGF-^1 также опосредует заболевания почек, индуцируя эпителиально-мезенхимальный переход с участием эпителиальных клеток канальцев, которые, как предполагается, вносят вклад в патогенез канальце-вой атрофии [15].
В ходе лечения у пациентов в нашем исследовании происходили позитивные изменения показателей липидного профиля в сыворотке крови. Так, у обеих групп пациентов наблюдалось снижение концентрации холестерина, ЛПНП и индекса атерогенности (p <0,05). Кроме того, у пациентов, получавших дополнительно мелатонин, достоверно уменьшалась концентрация триглицеридов (p <0,001) и возрастал уровень ЛПВП (p=0,003). Как известно из литературных данных, ежедневное введение мелатонина способствует снижению избыточной массы тела. Кроме того, соотношение концентрации мелатонина и инсулина в крови людей отрицательно коррелирует с уровнем ЛПНП и положительно — с концентрацией ЛПВП [16]. Вазорегулирующие эффекты мелатонина достаточно сложные и могут
включать как центральные, так и периферические механизмы. Так, мелатониновые рецепторы МТ1 отвечают за вазоконстрикцию, а МТ2 — за вазодилатацию, и зависят от циркадного времени, продолжительности и режима воздействия эндогенного или экзогенного мелатонина, а также от функциональной чувствительности рецепторов [17].
Результаты работы также показали, что комбинированное лечение с мелатонином способствовало возрастанию активности антиоксидантных ферментов глута-тионового звена в направлении контрольных значений, что имело более выраженную тенденцию по сравнению с соответствующими изменениями на фоне базисной терапии. В частности, применение мелатонина способствовало более значимому увеличению активности ГР (р=0,031, по сравнению с базисным лечением) и ГТ (р <0,0001, по сравнению с базисным лечением), а также возрастанию активности ГП (р <0,0001), в то время как у пациентов первой группы активность данного фермента в ходе лечения снижалась (р=0,034) (рис. 1). Антиокислительная активность мелатонина способствует более существенному увеличению активности
Таблица 3. Исходные клинико-лабораторные характеристики обследованных пациентов Table 3. Baseline clinical characteristics of patients-
Показатель Контрольная группа 1-ая группа 2-ая группа
n=65 n=30 n=30
Пол м/ж / Sex, m/f, n (%) Возраст, лет / Age, years
Средняя длительность сахарного диабета, лет/ Average duration of diabetes mellitus, years
ИМТ / BMI
АД систолическое, мм рт.ст./ BP systolic mm Hg
АД диастолическое, мм рт.ст./ BP diastolic mm Hg
ЧСС уд/мин / Heart rate beats / min
Стадии ХБП / Stages of CKD С2 / G2, n/%
С3а / G3a, n/% С3б / G3b, n/%
СКФ, мл/мин GFR, ml / min
Концентрация креатинина, мкМ/ Concentration of creatinine, |iM
Концентрация мочевины, мМ/ Concentration of urea, mM
Уровень суточной протеинурии, г/сут/ Daily proteinuria level, g / day
Уровень гликированного гемоглобина, %/ Glycated hemoglobin level, %
Концентрация глюкозы натощак, мМ/ Fasting glucose concentration, mM
Постпрандиальная концентрация глюкозы, мМ/ Postprandial glucose concentration, mM
30/35 (46 % мужчин) 42,0 (27,5-51,0)
26,0 (23,5-27,4) 115,0 (109,0-124,0)
71,0 (68,0-73,0)
71,0 (66,0-73,0)
102,0 (95,7-108,3) 87,3 (79,2-90,1) 5,2 (4,6-5,5) 0,01 (0,007-0,015) 5,0 (4,6-5,5) 4,8 (3,5-5,2) 5,5 (4,1-6,2)
8/22 (27 % мужчин) 63,0 (59,0-69,0)*
9,2 (7,8-10,9)
31,3 (26,4-34,4)
160,0 (155,0-165,0)*
90,0 (85,0-90,0)*
78,0 (75,0-80,0)*
3 (10 %) 20 (67 %) 7 (23 %)
53,5 (45,8-58,0)* 114,0 (98,3-120,8)*
6,5 (5,4-8,4)* 0,40 (0,24-0,65)* 8,0 (6,8-9,7)* 9,9 (7,9-12,2)* 12,3 (8,9-14,5)*
11/19 (37 % мужчин) 69,0 (59,0-74,5)*
10,1 (8,3-11,7)
30,5 (26,0-35,6)
160,0 (151,3-170)*
90,0 (85,0-95,0)*
82,0 (76,5-87,5)*
3 (10 %) 22(73 %) 5 (17 %)
54,0 (47,0-57,0)* 104,5 (94,5-124,8)* 7,7 (5,7-10,4)* 0,54 (0,31-1,18)* 8,4 (7,0-9,8)* 10,4 (9,7-12,6)* 12,3 (8,9-14,5)*
Примечания: ИМТ — Индекс массы тела, АД — Артериальное давление, ЧСС — Частота сердечных сокращений, ХБП — Хроническая болезнь почек
Данные представлены в виде медианного значения (Q1-Q3); * — отличия от контрольной группы, p <0,05.
Note: BMI — Body mass index, BP — Blood pressure, CKD — Chronic kidney disease
Data are presented as median value (Q1-Q3); * — differences from the control group, p <0.05.
глутатионовой системы, играющей одну из ключевых ролей в реализации компенсаторного ответа на окислительный стресс, индуцированный в условиях гипергликемии [18]. Известно, что дисфункция компонентов антиоксидантной системы представляет собой важный фактор развития осложнений при широком ряде заболеваний, включая СД 2 типа. В частности, было показано, что уровень маркеров окислительного стресса
повышается в почках при диабете, а у мышей с отсутствием основного цитозольного и митохондриального антиоксидантного фермента ГП 1 моделирование диабета приводит к более существенному усилению окислительного стресса и прогрессированию заболевания почек [19]. Изменения удельной активности ферментов глутатионовой антиоксидантной системы носили схожий характер (см. рис. 1).
Таблица 4. Клинические и биохимические показатели и уровень TGF-fi1 обследованных пациентов Table 4. Clinical and biochemical parameters and the level of TGF-fi1 of the examined patients
Показатель/ Indicator Контрольная группа/ Control group 1- ая группа/ Group 1, n=30 2- ая группа/ Group 2, n=30 P2
До лечения/ Before treatment После лечения/ After treatment Pi До лечения/ Before treatment После лечения/ After treatment Pi
Концентрация глюкозы натощак, мМ/ Fasting glucose concentration, mM
Постпрандиальная концентрация глюкозы, мМ/
Postprandial glucose concentration, mM
Уровень гликированного гемоглобина, %
Glycated hemoglobin level, %
Уровень суточной протеинурии, г/сут Daily proteinuria level, g / day
Концентрация мочевины, мМ Concentration of urea, mM
Концентрация креатинина, мкМ Concentration of creatinine, |iM
СКФ, мл/мин GFR, ml / min
ОХ, ммоль/л
total cholesterol, mmol/l
Триглицериды, ммоль/л Triglycerides, mmol/l
ЛПНП, ммоль/л LDL, mmol/l
ЛПВП, ммоль/л HDL, mmol/l
ИА
Atherogenic index
TGF-ß1 нг/мл TGF-ß1 ng/ml
Концентрация мелатонинсульфата в моче, нг/мл
Concentration of melatonin sulfate in urine, ng/ml
АД систолическое мм рт.ст BP systolic mm Hg
АД диастолическое мм рт.ст. BP diastolic mm Hg
ЧСС уд/мин Heart rate beats / min
4,8 (3,5-5,2)
5,5 (4,1-6,2)
9,9 (7,9-12,2)*
12,3 (8,9-14,5)*
7,5 (6,6-8,8)
8,9 (7,2-10,4)
<0,0001
0,002
10,4 (9,7-12,6)*
12,3 (8,9-14,5)*
6,8 (5,3-7,9)
7,9 (6,5-9,3)
5,0 (4,6-5,5) 8,0 (6,8-9,7)* 6,70 (5,7-7,1) 0,020 8,4 (7,0-9,8)* 6,0 (5,2-6,2)
0,01 (0,007-0,015) 0,40 (0,24-0,65)* 0,14 (0,09-0,29) <0,0001 0,54 (0,31-1,18)* 0,13 (0,08-0,48)
5,2 (4,6-5,5) 6,5 (5,4-8,4)** 5,8 (4,8-7,9) 0,052 7,7 (5,7-10,4)* 6,5 (5,1-9,1)
87,3 (79,2-90,1) 114,0 (98,3-120,8)* 98,0 (86,5-114,8) 0,021 104,5 (94,5-124,8)* 97,0 (81,5-105,5)
102,0 (95,7-108,3) 53,5 (45,8-58,0)* 60,0 (55,0-63,8) 0,072 54 (47,0-57,0)* 63,0 (55-67,8)
4,1 (3,3-4,6) 6,4 (5,1-6,8)* 5,0 (4,4-5,6) 0,008 5,8 (5,1-6,7)* 4,6 (3,9-5,2)
1,2 (0,8-1,4) 2,0 (1,4-2,5)* 1,7 (1,2-2,1) 0,29 2,7 (1,4-3,0)* 1,1 (0,9-1,8)
2,2 (1,8-2,4) 2,7 (2,2-3,3)* 1,8 (1,5-2,2) <0,0001 2,6 (2,1-3,4)* 1,8 (1,5-2,2)
2,4 (2,2-2,7) 1,06 (0,75-1,20)* 1,10 (1,01-1,20) 0,114 1,02 (0,86-1,27)* 1,24 (1,10-1,35)
0,70 (0,4-1,0) 5,0 (4,1-5,7)* 3,5 (2,8-4,1) 0,001 5,0 (4,2-5,7)* 2,6 (2,1-3,2)
21,0 (17,3-24,8) 128,0 (100,1-151,7)* 98,0 (80,1-115,2) 0,010 130,5 (108,2-153,6)* 80,0 (64,3-97,7)
9,0 (8,1-9,8) 7,0 (6,0-7,8)* 7,5 (6,7-7,9) 0,326 7,1 (6,3-7,7)* 8,8 (8,0-9,5)
115,0 (109,0-124,0) 160,0 (155-165,0)* 130,0 (121,3-130) <0,0001 160,0 (151,3-170,0)* 125,0 (120-130,0)
71,0 (68,0-73,0) 90,0 (85,0-90,0)* 80,0 (80,0-80,0) <0,0001 90,0 (85,0-95,0)* 80,0 (70,0-80,0)
71,0 (66,0-73,0) 78,0 (75,0-80,0)* 70,0 (66,0-70,0) <0,0001 82,0 (76,5-87,5)* 66,0 (62,5-68,0)
<0,0001 0,019
<0,0001 0,939
0,010 0,005
<0,0001 0,043 0,024 0,159 <0,0001 <0,0001 <0,0001 0,003 <0,0001 <0,0001
0,010 0,301 0,254 0,034 0,321 0,005 0,633 0,203 0,408 0,001
0,010 0,001
<0,0001 0,592
<0,0001 0,309
<0,0001 0,611
Примечания: СКФ — скорость клубочковой фильтрации, ОХ — общий холестерин, ЛПНП — липопротеиды низкой плотности, ЛПВП — Липопротеиды высокой плотности, ИА — Индекс атерогенности, TGF-|31 — трансформирующий фактор роста-|31, АД — артериальное давление, ЧСС — Частота сердечных сокращений Данные представлены в виде медианного значения (Q1-Q3); * — отличия от контрольной группы, p <0,05
Note: GFR — Glomerular filtration rate, LDL — Low density lipoproteins, HDL — High density lipoproteins, TGF-|31 — Трансформирующий фактор роста-|31, Transforming Growth
Factor-|31, BP — Blood pressure, ЧСС — Частота сердечных сокращений
Data are presented as median value (Q1-Q3); * — differences from the control group, p <0.05
Рисунок 1. Активность глутатионпероксидазы (ГП), глутатионредуктазы (ГР) и глутатионтрансферазы (ГТ) у людей контрольной группы (К), пациентов, получающих базисную терапию (Баз после) на фоне показателей до лечения (Баз до), а также пациентов, получающих комбинированную терапию с мелатонином (Мел после) на фоне показателей до лечения (Мел до)
Примечание: * — отличия от контрольной группы достоверны, p <0,05; Pj — уровень значимости отличий между показателями до и после лечения в группах; p2 — уровень значимости отличий между произошедшими в ходе лечения изменениями показателей у второй группы по сравнению с первой группой
Figure 1. Activity of glutathione peroxidase (GP), glutathione reductase (GR) and glutathione transferase (GT) in people of the control group (C), patients receiving basic therapy (Bas after) against the indicators before treatment (Bas before), as well as patients receiving combination therapy with melatonin (Mel after) against the indicators before treatment (Mel before)
Note: * — differences from the control group are significant, p <0.05; p1 — the level of significance of differences between the indicators before and after treatment in groups; p2 — the level of significance of the differences between the changes in indicators that occurred during treatment in the second group compared to the first group
На фоне комбинированной терапии с мелатонином наблюдалось также возрастание активности NADP-ИДГ в сыворотке крови, по сравнению с показателями до лечения (р <0,0001), в то время как на фоне базисной терапии достоверных отличий данного показателя выявлено не было (рис. 2). По-видимому, увеличение активности NADP-ИДГ связано с возрастанием потребности в NADPH глутатионовой антиоксидантной системой в условиях активизации её функционирования. Другим поставщиком NADPH выступает пентозо-фосфатный путь, ключевым ферментом которого является глюкозо-6-фосфат дегидрогеназа (Г6ФДГ). Однако, как показали результаты исследования, проведение
как базисного лечения, так и комбинированной терапии с мелатонином, приводило к разнонаправленному изменению активности данного фермента у пациентов. В частности, после применения мелатонина у 10 (33,3 %) пациентов наблюдалось уменьшение активности Г6ФДГ в сыворотке крови, а у 20 (66,7 %) — возрастание, по сравнению с показателями до лечения. Имеются данные, что при окислительном стрессе важным механизмом защиты от действия активных форм кислорода является взаимодействие в ядре гемоксигена-зы-1 с транскрипционным фактором №£2, что способствует усилению экспрессии ферментов детоксикации второй фазы, к которым относится также Г6ФДГ [20].
Рисунок 2. Активность NADP-зависимой изоцитратдегидрогеназы (NADP-ИДГ) и глюкозо-6-фосфатдегидро-геназы (Г6ФДГ) у людей контрольной группы (К), пациентов, получающих базисную терапию (Баз после) на фоне показателей до лечения (Баз до), а также пациентов, получающих комбинированную терапию с мелатонином (Мел после) на фоне показателей до лечения (Мел до)
Примечание: * — отличия от контрольной группы достоверны, p <0,05; pj — уровень значимости отличий между показателями до и после лечения в группах; p2 — уровень значимости отличий между произошедшими в ходе лечения изменениями показателей у второй группы по сравнению с первой группой
Figure 2. Activity of NADP-dependent isocitrate dehydrogenase (NADP-IDH) andglucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PDH) in people of the control group (C), patients receiving basic therapy (Bas after) against the indicators before treatment (Bas before), and also patients receiving combination therapy with melatonin (Mel after) against the indicators before treatment (Mel before)
Note: * — differences from the control group are significant, p <0.05; p1 — the level of significance of differences between the indicators before and after treatment in groups; p2 — the level of significance of the differences between the changes in indicators that occurred during treatment in the second group compared to the first group
По-видимому, приём мелатонина способствовал увеличению содержания в ядерной фракции транскрипционного фактора Nrf2 и увеличивал экспрессию гемоксигеназы-1 у пациентов с ХБП, что, как было показано, может снижать окислительный стресс [21]. У пациентов, для которых было характерно снижение активности Г6ФДГ, вероятно, в высокой степени наблюдалось угнетение функционирования пентозофос-фатного пути, и принимаемых доз мелатонина оказалось недостаточно для изменения данного показателя в сторону увеличения. Подавление функционирования данного фермента может происходить в условиях развития СД на фоне угнетения синтеза глюкокиназы и индукции глюкозо-6-фосфатазы в печени, вследствие чего уменьшается доступность глюкозо-6-фосфата для Г6ФДГ [22].
Анализ связей между биомаркерами развития ХБП, СД 2 типа и показателями функционирования компонентов глутатионовой антиокислительной защиты в группах представлены в таблице 5. Результаты показали, что у пациентов первой группы наблюдалась отрицательная корреляция между изменением постпрандиальной концентрации глюкозы и сдвигами активности NADP-ИДГ в ходе лечения. Данная корреляция подтверждает, что степень развития окислительного стресса, вызванного хронической гипергликемией при ХБП, соотносится со степенью истощения пула GSH и угнетения активности одного из важнейших поставщиков NADPH для его восстановления — NADP-ИДГ. Кроме того, для пациентов первой группы была характерна положительная корреляция изменения активности ГП с изменением концентрации мочевины и креатинина, а также отрицательная — с изменением скорости клубочковой фильтрации. Возможно, наблюдаемое негативное явление могло быть обусловлено тенденцией к уменьшению активности ГП в ходе
Таблица 5. Взаимосвязи между изменениями (А)
исследуемых показателей в ходе лечения в группах
участников
Table 5. Corrélation between changes (А) of the studied
parameters during treatment in groups of participants
Участники первой группы/ Members of the first group
А постпрандиальной концентрации глюкозы A postprandial glucose concentration
А концентрации мочевины А urea concentration
А концентрации креатинина А creatinine concentration
А скорости клубочковой фильтрации A glomerular filtration rate
А NADP-ИДГ A NADP-IDH r=-0,390 p=0,033
А ГП A GP r=0,476 p=0,029
А ГП А GP r=0,548 p=0,007
А ГП А GP r=-0,571 p=0,004
стандартного лечения. В то же время, для пациентов второй группы не было установлено достоверно значимых взаимосвязей между сдвигами анализируемых показателей. По-видимому, данный факт связан с более выраженным активирующим влиянием комбинированной терапии с мелатонином на активность компонентов глутатионовой антиоксидантной системы, обеспечивающим более эффективный компенсаторный ответ при ХБП.
Уровень ТОБ-в1 положительно коррелировал с показателями протеинурии (г=0,800, р <0,0001), концентрацией глюкозы натощак (г=0,532, р <0,0001) и общего холестерина (г=0,681, р <0,0001).
Таким образом, позитивные эффекты мелатони-на, введенного в схему лечения пациентов с СД 2 типа и ХБП, способствовали улучшению показателей окси-дативного статуса в сыворотке крови пациентов, что отражалось на более существенном изменении большинства клинико-биохимических показателей, уровня ТОБ-в1 и липидного профиля, по сравнению с участниками, получавшими базисное лечение.
Заключение
Полученные данные свидетельствуют о том, что комбинированная терапия с мелатонином по сравнению с базисным лечением обеспечивает более выраженное антиоксидантное, гипогликемическое и ги-полипидемическое действие, с чем, по-видимому, взаимосвязан нефропротекторный эффект данного гормона. Мелатонин способствует активизации компенсаторного ответа на окислительный стресс, выступающий в качестве одного из ключевых факторов патогенеза осложнений при СД 2 типа. Применение ме-латонина приводило к более значимому возрастанию активности ферментов глутатионовой антиоксидант-ной системы, а также активности NADP-ИДГ — одного из основных поставщиков NADPH. Наблюдаемые различия в эффективности анализируемых терапевтических подходов обусловлены гипогликемической активностью и прямым антиоксидантным эффектом мелатонина, а также его способностью поддерживать и индуцировать функциональную активность других антиоксидантов.
Вклад авторов:
Все авторы внесли существенный вклад в подготовку работы, прочли и одобрили финальную версию статьи перед публикацией Попов С.С. (ORCID Ю: https://orcid.org/0000-0002-4438-9201): концепция и дизайн исследования, отбор пациентов, интерпретация результатов, написание текста, окончательное утверждение рукописи
Ануфриева Е.И. (ORCID Ю: https://orcid.org/0000-0001-8380-4765): отбор пациентов, сбор и обработка материалов, лабораторные исследования, анализ полученных данных, статистический анализ, подготовка публикации
Крыльский Е.Д. (ORCID Ю: https://orcid.org/0000-0002-8855-5515): анализ полученных данных, подготовка публикации
Веревкин А.Н. (ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-7412-9988):
лабораторные исследования, анализ полученных данных Шульгин К.К. (ORCID ID: https://orcid.org/0000-0001-9234-8124):
лабораторные исследования, анализ полученных данных
Author Contribution:
All the authors contributed significantly to the study and the article, read and approved the final version of the article before publication Popov S.S. (ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-4438-9201): study concept and design, patient selection, interpretation of results, text writing, final approval of the manuscript
Anufrieva E.I. (ORCID ID: https://orcid.org/0000-0001-8380-4765):
selection of patients, collection and processing of materials, laboratory research, analysis of the data obtained, statistical analysis, preparation of a publication
Kryl'skii E.D. (ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-8855-5515):
analysis of the data obtained, preparation of the publication
Verevkin A.N. (ORCID ID: https://orcid.org/0000-0002-7412-9988):
laboratory research, analysis of the data obtained
Shulgin K.K. (ORCID ID: https://orcid.org/0000-0001-9234-8124):
laboratory research, analysis of the data obtained
Список литературы/ References:
1. Hwang S.J., Tsai J.C., Chen H.C. Epidemiology, impact and preventive care of chronic kidney disease in Taiwan. Nephrology (Carlton). 2010; 15(S2): 3-9. doi: 10.1111/j.1440-1797.2010.01304.x.
2. Chawla L.S., Bellomo R., Bihorac A. et al. Acute kidney disease and renal recovery: consensus report of the Acute Disease Quality Initiative (ADQI) 16 Workgroup. Nat Rev Nephrol. 2017; 13(4): 241-257. doi: 10.1038/nrneph.2017.2.
3. Chang A.S., Hathaway C.K., Smithies O. et al. Transforming growth factor-p1 and diabetic nephropathy. Am J Physiol Renal Physiol. 2016; 310(8): F689-F696. doi: 10.1152/ajprenal.00502.2015.
4. Chung A.C.K., Dong Y., Yang W. et al. Smad7 suppresses renal fibrosis via altering expression of TGF-p/Smad3-regulated microRNAs. Mol Ther. 2013; 21(2): 388-398. doi: 10.1038/mt.2012.251.
5. Крыльский Е.Д., Попова Т.Н., Кирилова Е.М. Активность глута-тионовой антиоксидантной системы и NADPН-генерирующих ферментов при экспериментальном ревматоидном артрите
у крыс. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2015; 160(7): 30-33. doi: 10.1007/s10517-015-3089-0. Kryl'skii E.D., Popova T.N., Kirilova E.M. Activity of Glutathione Antioxidant System and NADPH-Generating Enzymes in Rats with Experimental Rheumatoid Arthritis. Bull Exp Biol Med. 2015; 160(1): 24-27. doi: 10.1007/s10517-015-3089-0 [in Russian].
6. Ruiz-Ortega M., Rayego-Mateos S., Lamaset S. et al. Targeting the progression of chronic kidney disease. Nature Reviews Nephrology. 2020; 16: 269-288. doi: 10.1038/s41581-019-0248-y
7. Горбенко М.В., Попова Т.Н., Шульгин К.К., и др. Влияние мелаксена и вальдоксана на активность глутатионовой антиоксидантной системы и НАДФН-генерирующих ферментов
в сердце крыс при экспериментальном гипертиреозе. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2013; 76(10): 12-15. doi: 10.30906/0869-2092-2013-76-10-12-15. Gorbenko M.V., Popova T.N., Shul'gin K.K., et al. Effects of melaxen and valdoxan on the activity of glutathione antioxidant system and NADPH-producing enzymes in rat heart under experimental
hyperthyroidism conditions. Eksp Klin Farmakol. 2013; 76(10): 12-15. doi: 10.30906/0869-2092-2013-76-10-12-15 [in Russian].
8. Ассоциация нефрологов. Клинические рекомендации «Хроническая болезнь почек». 2019; 169 с.
Association of Nephrologists. Clinical guidelines «Chronic kidney disease». 2019; 169 р. [In Russian].
9. Kryl'skii E.D., Popova T.N., Safonova O.A. et al. Transcriptional Regulation of Antioxidant Enzymes Activity and Modulation of Oxidative Stress by Melatonin in Rats Under Cerebral Ischemia / Reperfusion Conditions. Neuroscience. 2019; 406: 653-666. doi: 10.1016/j.neuroscience.2019.01.046.
10. Iskusnykh I.Y., Kryl'skii E.D., Brazhnikova D.A. et al. Novel Antioxidant, Deethylated Ethoxyquin, Protects against Carbon Tetrachloride Induced Hepatotoxicity in Rats by Inhibiting NLRP3 Inflammasome Activation and Apoptosis. Antioxidants. 2021; 10(1): 122. doi: 10.3390/antiox10010122.
11. Popov S.S., Shulgin K.K., Popova T.N. et al. Effects of Melatonin-Aided Therapy on the Glutathione Antioxidant System Activity and Liver Protection. Journal of Biochemical and Molecular Toxicology. 2015; 29(10): 449-457. doi: 10.1002/jbt.21705.
12. Meng X., Li Y., Li S. et al. Dietary Sources and Bioactivities of Melatonin. Nutrients. 2017; 9(4): E367. doi: 10.3390/nu9040367.
13. Stacchiotti A., Favero G., Giugno L. et al. Mitochondrial and Metabolic Dysfunction in Renal Convoluted Tubules of Obese Mice: Protective Role of Melatonin. PLoS One. 2014;9(10): e111141. doi: 10.1371/journal.pone.0111141.
14. Xavier S., Vasko R., Matsumoto K. et al. Curtailing Endothelial TGF-ß Signaling Is Sufficient to Reduce Endothelial-Mesenchymal Transition and Fibrosis in CKD. Journal of the American Society of Nephrology. 2015;26(4):817-829. doi: 10.1681/ASN.2013101137.
15. Gu Y.Y., Liu X.S., Huang X.R. et al. Diverse Role of TGF-ß in Kidney Disease. Front Cell Dev Biol. 2020; 8: 123. doi: 10.3389/fcell.2020.00123.
16. Obayashi K., Saeki K., Iwamoto J. et al. Exposure to Light at Night, Nocturnal Urinary Melatonin Excretion, and Obesity/Dyslipidemia in the Elderly: A Cross-Sectional Analysis of the HEIJO-KYO Study. The Journal of Clinical Endocrinology & Metabolism. 2013; 98(1): 337-344. doi: 10.1210/jc.2012-2874.
17. Pandi-Perumal S.R., BaHammam A.S., Ojike N.I. et al. Melatonin and Human Cardiovascular Disease. J Cardiovasc Pharmacol Ther. 2017; 22(2): 122-132. doi: 10.1177/1074248416660622.
18. Lindblom R., Higgins G., Coughlan M. et al. Targeting Mitochondria and Reactive Oxygen Species-Driven Pathogenesis in Diabetic Nephropathy. Rev Diabet Stud. 2015; 12(1-2): 134-156.
doi: 10.1900/RDS.2015.12.134.
19. Huang J.Q., Zhou J.C., Wu Y.Y. et al. Role of glutathione peroxidase 1 in glucose and lipid metabolism-related diseases. Free Radical Biology and Medicine. 2018; 127: 108-115. doi: 10.1016/j. freeradbiomed.2018.05.077.
20. Biswas C., Shah N., Muthu M. et al. Nuclear heme oxygenase-1 (HO-1) modulates subcellular distribution and activation of Nrf2, impacting metabolic and anti-oxidant defenses. J Biol Chem. 2014; 189(39): 26882-26894. doi: 10.1074/jbc.M114.567685.
21. Kilic U., Kilic E., Tuzcu Z. et al. Melatonin suppresses cisplatin-induced nephrotoxicity via activation of Nrf-2/HO-1 pathway. Nutr Metab (Lond). 2013; 10(1): 7. doi: 10.1186/1743-7075-10-7.
22. Haeusler R.A., Camastra S., Astiarraga B. et al. Decreased expression of hepatic glucokinase in type 2 diabetes. Molecular Metabolism. 2015; 4(3): 222-226. doi: 10.1016/j.molmet.2014.12.007.
