CC BY
26
№ 6 - 2013 г.
14.00.00 медицинские и фармацевтические науки УДК 618.145-007.61:575.174.015.3
ВОВЛЕЧЕННОСТЬ ГЕНЕТИЧЕСКИХ ПОЛИМОРФИЗМОВ ЦИТОКИНОВ В ПОДВЕРЖЕННОСТИ К РАЗВИТИЮ ГИПЕРПЛАСТИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ
ЭНДОМЕТРИЯ
Н. А. Демакова
ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский
университет» (г. Белгород)
Приведены некоторые результаты распределения полиморфных вариантов генов цитокинов среди пациенток с гиперпластическими процессами эндометрия в зависимости от их возраста. При сравнительном анализе частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров генов цитокинов среди больных с гиперпластическими процессами эндометрия разных возрастных групп, а также в контрольной группе установлены статистически достоверные различия по локусам +36 A/G TNFR1 и A/G I-TAC (rs4512021). Следует отметить, что критерием исключения из исследования явились рецидивирующие гиперпластические процессы эндометрия среди пациенток пери- и постменопаузального периодов.
Ключевые слова: гиперпластические процессы эндометрия, полиморфизм генов цитокинов.
Демакова Наталья Александровна — аспирант кафедры медико-биологических дисциплин медицинского факультета ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», рабочий телефон: 8 (4722) 30-13-83, e-mail: demakova05@gmail.com
Введение. Гиперпластические процессы эндометрия (ГПЭ) представляют собой совокупность морфологических и биологических гетерогенных изменений эндометрия, которые варьируют от обратимой избыточной пролиферации до начинающегося рака эндометрия [8]. Гиперпластические процессы эндометрия составляют 15-50 % среди всех существующих гинекологических заболеваний [3], в последние годы отмечен рост патологии эндометрия среди женщин всех возрастных групп [5]. На сегодняшний день известно, что частота гиперпластических процессов эндометрия существенно увеличивается к периоду возрастных гормональных перестроек в перименопаузе [3]. Однако до 40 % женщин молодого возраста с гиперпластическими процессами
эндометрия подвергаются хирургическому лечению, что зачастую приводит к потере репродуктивной функции.
Согласно общепринятой точке зрения, ведущее значение в патогенезе гиперпластических процессов эндометрия отводится избыточной эстрогенной стимуляции эндометрия, сочетающейся с недостаточностью прогестерона [6]. Однако гиперплазию эндометрия необходимо рассматривать как совокупность сложных биологических процессов, затрагивающих все звенья нейрогуморальной регуляции, обуславливающих переход нормальных клеток эндометрия в трансформированные [7]. К таким процессам относят гормон-независимую пролиферацию, воспаление, сниженный апоптоз, патологический неоангиогенез, а также нарушение иммунного статуса [1]. Ключевыми звеньями реализации каскада данных механизмов являются процессы взаимодействия широкого спектра цитокинов на местном уровне [2, 4].
Цель исследования: изучение вовлеченности молекулярно-генетических маркеров цитокинов в подверженность к гиперпластическим процессам эндометрия.
Задачи исследования. Провести анализ распределения полиморфных вариантов генов цитокинов (+36 A/G TNFR1, A/GI-TAC (rs4512021) среди больных гиперпластическими процессами эндометрия разных возрастных групп и в популяционном контроле; изучить роль генетических факторов в формировании гиперпластических процессов эндометрия среди женщин различных возрастных групп.
Материалы и методы исследования. Материалом для исследования послужила ДНК, выделенная из цельной венозной крови методом фенол-хлороформной экстракции 206-ти пациенток с ГПЭ и 248-ми женщин популяционного контроля русской национальности, не имеющих родства между собой. Генотипирование изучаемых локусов проводили с помощью методов полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров с последующим анализом полиморфизма генов +36 A/G TNFR1 и A/G I-TAC (rs4512021) методом детекции TaqMan зондов с помощью real-time ПЦР. Для сравнения частот аллелей и генотипов между исследуемыми группами использовали критерий х2 с поправкой Йетса на непрерывность. Вычисления производили в таблицах сопряженности 2 х 2. Для решения проблемы множественных сравнений, связанной с получением ложноположительных результатов (ошибка 1-го рода), вводили поправку Бонферрони, т. е. производили перерасчет уровня значимости р для множественных парных сравнений по формуле: рсог = р х n, где р — полученный уровень статистической значимости, n — количество парных сравнений. За статистически значимый уровень принимали рсог < 0,05.
При анализе распределения генотипов изучаемых полиморфных маркеров генов цитокинов установлено, что для всех рассмотренных генетических полиморфизмов в популяционной выборке и для большинства маркеров в группе пациенток с ГПЭ эмпирическое распределение генотипов соответствует теоретически ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга (p > 0,05).
Полученные результаты и их обсуждение. При проведении данного исследования изучаемая выборка женщин с ГПЭ (n = 206) была разделена на следующие группы: первая группа включала 68,93 % пациенток, находящиеся в репродуктивном периоде (n = 142), во вторую группу вошло 20,39 % женщин с ГПЭ, находящихся в периоде перименопаузы (n = 42), третью группу составили 10,68 % пациенток в постменопаузальном периоде (n = 22). Возраст исследуемых женщин с ГПЭ варьировал от 21 года до 69 лет и в среднем составил в I группе — 34,1 ± 6,2 года; во II группе — 48,4
± 3,5 года; в III группе — 59,8 ± 5,6 года.
При изучении распределения полиморфных генетических маркеров цитокинов среди больных с ГПЭ разных возрастных групп, а также в контрольной группе установлены статистически достоверные различия в частотах генотипов и аллелей по локусам +36 A/G TNFR1 и A/G I-TAC (rs4512021).
Установлено, что среди пациенток с ГПЭ репродуктивного периода выявлена минимальная концентрация генотипа +36 A/G TNFR1 (61,77 %), что статистически достоверно ниже показателя контрольной группы (46,75 %, р = 0,0008, рсог = 0,0024). Следует отметить, что частоты этого генетического варианта у больных с ГПЭ пери-и постменопаузального периодов соответствуют аналогичному показателю среди пациенток репродуктивного периода (66,66 и 73,68 % соответственно) (см. табл.).
Распределение генотипов и аллелей полиморфных маркеров генов цитокинов среди больных ГПЭ и в популяционном контроле
Полиморфизм Аллели, генотипы Контрольная группа (n = 248) Больные репродуктивного периода (n = 142) Больные пери-менопау-зального периода (n = 42) Больные постменопаузального периода (n = 22)
ni % n. % n, % n, %
+36A/G TNFR1 +36A 245 49,80 64 47,06 22 52,38 9 47,37
+36G 247 50,20 72 52,94 20 47,62 10 52,63
+36AA 65 26,42 22 16,18 8 19,05 2 10,53
+36AG 115 46,75 84 61,77 28 66,66 14 73,68
+ 36GG 66 26,83 30 22,05 6 14,29 3 15,79
A/G I-TAC (rs4512021) G 214 44,21 49 35,77 15 36,59 9 42,86
A 270 55,79 88 64,23 26 63,41 12 57,14
AA 75 30,99 54 39,42 15 36,58 6 28,57
GA 120 49,59 68 49,64 22 53,66 12 57,14
GG 47 19,42 15 10,94 4 9,76 3 14,29
Установлено, что в группе больных с ГПЭ репродуктивного периода концентрация аллеля А I-TAC составила 64,23 %, что превышало аналогичный показатель группы популяционного контроля, где он равнялся 55,79 % (х2 = 4,81; p = 0,03; OR = 1,42; 95 % CI 1,04-1,96) и соответствовал данным по пациенткам с ГПЭ пери- (63,41 %; х2 = 0,01; р = 0,99) и постменопаузального (57,14 %; х2 = 0,18; р = 0,68) периодов.
Несмотря на то, что частоты генотипов и аллелей изучаемых генетических полиморфизмов +36 A/G TNFR1 и A/G I-TAC(rs4512021), встречающиеся среди пациенток с ГПЭ репродуктивного возраста, достоверно отличаются от аналогичных показателей контрольной группы, они не являются «специфическими» для больных данной группы, так как их частоты идентичны с показателями других возрастных групп (р > 0,05).
Выводы. Таким образом, проведенный сравнительный анализ частот сочетаний генетических вариантов цитокинов позволяет заключить, что рассмотренные генетические полиморфизмы не являются «специфическими» маркерами для пациенток
с ГПЭ репродуктивного периода.
Статья подготовлена при поддержке внутривузовского конкурса грантов «Инициатива».
Список литературы
1. Ищенко А. И. Доброкачественные заболевания матки : социальные аспекты проблемы /
A. И. Ищенко, Е. А. Кудрина, И. В. Станоевич // Врач. — 2008. — № 8. — С. 14-16.
2. Киселев В. И. Молекулярные механизмы регуляции гиперпластических процессов /
B. И. Киселев, А. А. Ляшенко. — М. : Димитрейд График Групп, 2005. — С. 348.
3. Кузнецова И. В. Гиперпластические процессы эндометрия / И. В. Кузнецова // Вопр. гинекологии, акушерства и перинатологии. — 2007. — Т. 6, № 5. — С. 68-77.
4. Макаров И. О. Молекулярно-биологический профиль при гиперпластических процессах эндометрия / И. О. Макаров, Н. А. Шешукова, А. С. Федотова // Гинекология. — 2012.
— Т. 14, № 1. — С. 17-19.
5. Подзолкова Н. М. Гиперпластические процессы эндометрия / Н. М. Подлозкова, И. В. Кузнецова. — М., 2007. — С. 31.
6. Свиридова Н. И. Дифференцированный подход к лечению рецидивирующих гиперпластических процессов эндометрия в перименопаузе / Н. И. Свиридова // Мать и дитя : материалы Х Всерос. форума. — М., 2009. — С. 401.
7. Слукина Т. В. Системные эффекты гормонального воздействия на процессы пролиферации и апоптоза при гиперпластических процессах эндометрия / Т. В. Слукина, К. А. Хадарцева, Г. Е. Чернуха // Вестн. новых медицинских технологий.
— 2008. — № 15 (2). — С. 222-223.
8. Чернуха Г. Е. Гиперплазия эндометрия : перспективы развития проблемы / Г. Е. Чернуха // Акушерство и гинекология. — 2009. — № 4. — С. 11-16.
INVOLVEMENT OF GENETIC POLYMORPHISMS OF CYTOKINES IN SUSCEPTIBILITY TO DEVELOPMENT OF HYPERPLASTIC PROCESSES OF ENDOMETRIUM
N. A. Demakova
FSAEIHPE «Belgorod State National Research University» (Belgorod c.)
Some results of distribution of polymorphic options of genes of cytokines among patients with hyperplastic processes of endometrium depending on their age are presented. In the comparative analysis of frequencies of alleles and genotypes of polymorphic markers of cytokines genes among patients with hyperplastic processes of endometrium of different age groups, and also in control group statistically reliable differences on locuses +36 A/G TNFR1 and A/G I-TAC (rs4512021) are established. It is necessary to notice that criterion of exception of research were relapsing hyperplastic processes of endometrium among patients peri- and the post-menopausal periods.
Keywords: hyperplastic processes endometrium, polymorphism of genes of cytokines.
About authors:
Demakova Natalya Aleksandrovna — post-graduate student of medicobiological disciplines chair of medical faculty at FSAEI HPE «Belgorod State National Research University», office phone: 8 (4722) 30-13-83, e-mail: demakova05@gmail.com
List of the Literature:
1. Ishchenko A. I. Benign diseases of uterus: social aspects of a problem / A. I. Ishchenko, E. A. Kudrin, I. V. Stanoyevich // Doctor. — 2008. — № 8. — P. 14-16.
2. Kiselyov V. I. Molecular mechanisms of regulation of hyperplastic processes / V. I. Kiselyov, A. A. Liashengko. — M.: Dimitrade Graphic of Groups, 2005. — P. 348.
3. Kuznetsova I. V. Hyperplastic processes of endometrium / I. V. Kuznetsova // Quest. of gynecologies, obstetrics and perinatologiya. — 2007. — V. 6, № 5. — P. 68-77.
4. Makarov I. O. Molecular and biological profile at hyperplastic processes of Endometrium / I. O. Makarov, N. A. Sheshukova, A.S. Fedotova // Gynecology. — 2012. — T. 14, № 1. — P. 17-19.
5. Podzolkova N. M. Hyperplastic processes of endometrium / N. M. Podlozkov, I. V. Kuznetsov. — M, 2007. — P. 31.
6. Sviridova N. I. The differentiated approach to treatment of relapsing hyperplastic processes of endometrium in peri-menopausal period / N. I. Sviridova // Mother and the child: materials of X Allrus. forum. — M, 2009. — P. 401.
7. Slukina T. V. Systemic effects of hormonal impact on proliferation and apoptosis processes at hyperplastic processes of endometrium / T. V. Slukina, K. A. Hadartseva, G. E. Chernukha // Bul. of new medical technologies. - 2008. - № 15 (2). - P. 222-223.
8. Chepnukha G. E. Hyperplasia of endometrium: prospects of development of a problem / G. E. Chepnukha // Obstetrics and gynecology. — 2009. — № 4. — P. 11-16.
