CC BY
15
аппарата и повреждением эпителия извитых канальцев дистрофического характера. Энтеральное заражение животных проявлялось поражением клубочков и эпителия канальцев коркового слоя. Особое внимание следует обратить на то, что при интравезикулярном пути инфицирования патологические измеиения в почках характеризуются в равной степени выраженным поражением коркового и мозгового слоев, при отсутствии признаков пиелита даже после многократного инфицирования в течении 2 нед. Этот факт можно рассматривать как одно из веских доказательств того, что инфицирование почек при различных способах инфицирования животных происходит однотипно — лимфо-гематогенным путём, т. е. «сверху вниз», роль восходящего — уриногенного пути не подтверждается.
47. К.Г.Матьков, Т.И.Бочкарева ПИРИДИНОВЫЕ НУКЛЕОТИДЫ - ПЕРСПЕКТИВЫ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В ПОЧЕЧНЫХ КОНСЕРВАНТАХ г. Чебоксары, г. Самара, Россия
К. G. Matkov, Т. /. Bochkareva
PYRIDIN NUCLEOTIDES - PERSPECTIVES OF USING
IN RENAL PRESERVATIVES
Исследование предпринято с целью поиска соединений превентирующих сдвиги водно-электролитного состава инкубируемых срезов почки. Срезы коркового вещества почки крыс инкубировали в среде Эл-Во-Стат-1 [Матьков К.Г., Аникин Г.Д., 1997] при +4 "С в течение 24 ч. Пиридиновые нуклеотиды (НАД+, НАДН и НАДФ+) добавляли в среду перед опытом (2 ммоль). Содержание тканевой воды определяли весовым методом по разнице между сухой и влажной массой, натрий и калий определяли на пламенном фотометре. Контролем служила ин-тактная ткань и срезы, инкубированные в среде без нук-леотидов. Использованная в опыте среда превентирует сдвиги водно-катионного состава при +4 * и +37 °С в течение 1 ч инкубации, однако через 1 сут при гипотерми-чсской инкубации отмечается набухание ткани до 3,81 кг/кг сухой массы (2,95 кг/кг сухой массы — содержание воды в интактной ткани), что сопровождается повышением содержания тканевого натрия при сохранении интактного уровня калия. Добавление к среде НАД+ полностью превентирует набухание ткани, значительно, но не полностью снижает содержание тканевого натрия. При этом отмечается потеря калия до 44% от уровня интактного органа. При использовании в составе среды НАДФ+ ткань незначительно набухает, что сопровождается более высоким содержанием натрия в случае его применения, однако потери калия также значительны, как и при использовании НАД+. Восстановленная форма пиридинового нуклеотида (НАДН) обладает более слабо выраженным влиянием на исследуемые параметры, чем окисленные нуклеотиды, а его воздействие на содержание тканевого калия идентично с воздействием на этот параметр НАД+ и НАДФ+.
По-видимому, дегидратирующий эффект окисленных пиридиновых нуклеотидов обусловлен их участием в энергетическом обмене, через поддержание гликогеноли-за. НАД+ используется на стадии оксидоредукции, а НАДФ+ — через взаимодействие с клеточным НАДН переводит его в НАД+, который и идет в гликогенолиз. Потери калия, по-видимому, связаны с блокадой К+ каналов. В связи с описанными эффектами можно заключить, что НАД+ и НАДФ+ — перспективные соединения для улучшения консервирующих способностей почечных консервантов.
48. К.Г.Матьков, В.А.Козлов, А.С.Толмачев, Т. А. Степанова
ВЛИЯНИЕ МОЧЕВИНЫ НА ДЕГИДРАТИРУЮЩИЙ ЭФФЕКТ а-КЕТОГЛУТАРОВОЙ КИСЛОТЫ ПРИ ГИПОТЕРМИИ г. Чебоксары, Россия
KG.Matkov, V.A.Kozlov, A.S.Tolmachev, T.A.Stepanova THE INFLUENCE OF UREA ON THE DEHYDRATING EFFECT OF ct-KETOGLUTARIC ACID IN HYPOTHERMIA
Актуальной задачей современной трансплантологии является разработка новых конссрвационных сред, способных в течение длительного времени поддерживать жизнеспособность пересаживаемого органа. Одним из критериев жизнеспособности является способность тканей органа поддерживать водно-электролитный гомеостаз, на что некоторые органы, в частности почка, тратят до трети своих энергетических ресурсов. С целью поддержания водно-электролитного гомеостаза инкубируемых срезов почки нами была разработана среда Эл-Во-Стат-1 [Матьков К.Г., Аникин Г.Д., 1997]. Эта среда поддерживала водно-электролитный гомеостаз инкубируемых срезов коркового вещества почки крысы при +4 ° и +37 °С в течение 1 ч инкубации, однако при длительных сроках, до суток и более, способность раствора поддерживать водно-электролитный гомеостаз заметно снижалась. Добавление к нашему раствору 5 ммоль а-кетоглутарата восстанавливало способность раствора поддерживать содержание воды и натрия на уровне интактного органа и достоверно снижало тканевое содержание калия. Удаление из состава среды Эл-Во-Стат-1 мочевины не влияло на динамику изменений изучаемых параметров (по сравнению с исходной средой), однако при добавлении к безмочевинной среде а-кетоглутарата последний не превен-тировал изменений в тканевом содержании воды. Данные нашего эксперимента свидетельствуют о кооперации мочевины и а-кетоглутарата в механизмах гидратации/дегидратации клетки. Этот эффект может быть реализован следующими способами:
1) обращением глутаматдегидрогеназной реакции, что способствовало бы связыванию аммиака и переходу НАДФН в НАДФ+;
2) возможно частичное окисление а-кетоглутарата через активацию сукцинатоксилазного пути.
В обоих случаях дегидратирующий эффект а-кетоглутарата обусловлен как снижением клеточного содержания NH4+, так и увеличением выработки АТФ, необходимого для поддержания активного транспорта ионов. Мочевина среды, возможно, способствует поступлению а-кетоглута-рата в клетки.
49. Н.Н.Мелиди, Т.Г.Амстиславская, К.С.Науменко ВОВЛЕЧЕНИЕ СЕРОТОНЕРГИЧЕСКИХ МЕХАНИЗМОВ МОЗГА В ОСМО- И ВОЛЮМОРЕГУЛЯЦИЮ
г. Новосибирск, Россия
N.N.Melidi, T.G.Amstislavskaya, K.S.Naumenko
INVOLVEMENT OF SEROTONERGIC MECHANISMS OF THE BRAIN INTO OSMO- AND VOLUME REGULATION
В системе поддержания водного баланса у млекопитающих ведущая роль принадлежит гормону нейрогипофиза ва-зопрессину, регулирующему водовыделительную функцию почки. В последние годы появились работы, указывающие на возможное участие серотонина в регуляции секреции ва-зопрессина. Однако роль этого медиатора в коррекции водно-солевого гомеостаза остается невыясненной. В связи с этим на крысах Вистар было исследовано влияние пара-хлорфенилаланина (блокатора синтеза серотонина) на ос-
морсгулируюшие реакции. Установлено, что 48-часовая водная депривация сопровождается значительным нарастанием активности ключевого фермента синтеза серотонина триптофапгидроксилазы (5-HT) в переднем и среднем отделах гипоталамуса, где локализованы вазопрессин-секрети-рующие нейроны, и повышением уровня 5-НТ и его метаболита (5-HIAA) в среднем мозге и гипоталамусе. Ингиби-рование синтеза серотонина (внутрибрюшинное введение 300 мг/кг п-хлорфенилаланина) на фоне водной деприва-ции, стимулирующей секрецию вазопрсссина, вызывало более выраженную антидиуретическую реакцию. Снижение уровня серотонина приводило к более эффективному выведению водной нагрузки, в то же время резко замедлялась реакция на изотоническую и гипертоническую нагрузку. Полученные результаты позволяют предполагать участие серотонергической системы мозга в регуляции осмотического и объемного гомеостаза.
Работа выполнена при поддержке РФФИ, грант № 98-04-49641 и грантом «Ведущие научные школы» № 00-15-97974.
50. А.В.Мишарин, А.Б.Ресненко, И.Г.Акмаев, В.В.Гринввич
КОНЦЕНТРАЦИОННАЯ СПОСОБНОСТЬ ПОЧКИ ПРИ ОСТРОМ ВОСПАЛЕНИИ Москва, Россия
A.V.Misharin, A.B.Resnenko, I.G.Akmaev, V.V.Grinevich
THE CONCENTRATION ABILITY OF THE KIDNEY IN ACUTE INFLAMMATION
Воспалительная реакция y млекопитающих сопровождается потерями воды с выдыхаемым воздухом, потом и диареей. Поэтому адекватная регуляция концентрационной способности почки в этих условиях представляется жизненно важной. Одним из основных факторов этого процесса является вазопрессин (ВП), который контролирует финальный этап реабсорбции воды в собирательных трубочках (СТ). Действие ВП на СТ опосредуется рецепторами второго типа (ВП-Р2) и системой белков водных каналов — аквапоринов (АКП). Учитывая отсутствие в литературе данных о состоянии медуллярного аппарата почки при воспалении, мы предприняли комплексное изучение экспрессии гена рецептора ВП (ВП-Р), его аффинности, уровней АКП-2, локальной экспрессии провоспалительных цитоки-нов (ИЛ-1 и -6), а также осмолярности мочи и содержания ВП в плазме крови после инъекции бактериального эндотоксина, липополисахарида (ЛПС, 200—250 мкг на 100 г, интраперитонеально). Как и следовало ожидать, ЛПС вызывает стойкое и значимое снижение осмолярности мочи, вплоть до 24 ч (на 50%, р<0,01) после инъекции. При этом в СТ происходит выраженное подавление синтеза ВП-Р2: через 3 ч после введения ЛПС снижение уровней мРНК ВП-Р2 было 4-кратным (р<0,001) и оставалось 2-кратным через 12 ч (р<0,001). Использование агонистов ВП-Р2 показало, что инъекция ЛПС вызывает существенное снижение их связывающей способности. Параллельно подавлению синтеза ВП-Р2 и снижению их аффинности происходит закономерное уменьшение содержания АКП-2: через 6 ч — на 50% для 36-45 кДа изоформы и на 30% — для 29 кДа изоформы. Поскольку значимых изменений концентраций ВП в крови отмечено не было, регуляция синтеза ВП-Р2 и его аффинности скорее осуществляется через новый ВП-независимый механизм. Пусковым моментом этого механизма, вероятно, служит локальная экспрессия в мозговом веществе почки цитокинов, ИЛ-1 и ИЛ-6, динамика нарастания мРНК которых четко коррелирует с подавлением синтеза ВП-Р2 и другими признаками угнетения функциональной активности почки.
51. Я.Л.Муравьева, Л.К.Великанова КОРРЕЛЯЦИОННО-РЕГРЕССИОННЫЙ АНАЛИЗ ПОКАЗАТЕЛЕЙ ФУНКЦИЙ ПОЧЕК С СОХРАНЕННОЙ И НАРУШЕННОЙ ИННЕРВАЦИЕЙ У КРЫС РАЗНОГО ВОЗРАСТА г. Новосибирск, Россия
Ya.L.Muravjeva, L.K.Velikanova THE CORRELATION-REGRESSION ANALYSIS OF THE PARAMETERS OF RENAL FUNCTIONS WITH THE INTACT AND IMPAIRED INNERVATION IN RATS OF DIFFERENT AGE
Ранее было показано, что в условиях спонтанного мочеотделения денервация почек вызывает повышение скорости клубочковой фильтрации (F), абсолютной реабсорбции жидкости (RH2q) и экскреции натрия (UNaV) только у 25-дневных крысят. В настоящей работе проанализированы взаимосвязи показателей функций интактных и денервиро-ванных почек у 25- (п=33), 35- (п=28), 65- (п=27) и 185-дневных (п=21) крыс (соответственно, 25К, 25Д, 35К, 35Д, 65К, 65Д, 185К, 185Д).
У 25Д, как и у 25К, между F и % RHl0 существует положительная корреляция, а между % Rj^o и диурезом (V) — отрицательная. Лишь у 25К между экскрецией ионов, их экскретируемыми фракциями и UNa/UK существуют многочисленные положительные корреляции. Денервация устраняет корреляции UNaV с % EFNa, а также этих показателей с калийуретическими. Кроме того, у 25Д изменения F приводят к меньшим, чем у 25К, изменениям % EFNa (25Д: у=—0,47х+13,37; 25К: у=-0,86х+14,57). Это может говорить о снижении чувствительности механизма клубоч-ково-канальцевого равновесия в денервированной почке. В отличие от 25К, у 25Д нет отрицательной корреляции %RH)0 с UNaV, что может свидетельствовать об уменьшении роли процессов проксимальной реабсорбции в выведении натрия у 25Д. С возрастом взаимосвязи показателей функций почки изменяются. Так, у 35К отсутствуют корреляции F с % RH2q, % EFNa и % EFK; а V, % RH20, UNaV у них не коррелируют с UKV и % EFK. Эти изменения, возможно, говорят об уменьшении зависимости интенсивности канальцевых процессов от фильтрационной загрузки нефрона и об увеличении специфичности выведения натрия и калия. У 35Д отмечается появление многочисленных корреляций между гидро- и натрийуретическими показателями, с одной стороны, и калийуретическими, с другой. У 65К взаимосвязи рассматриваемых показателей изменяются мало. Для 65Д характерно исчезновение корреляций между V и % EFNa, UNaV и UKV и появление связей F и RH о с UKV и % EFNa, а также UKV и % EFK с UNa/UK. У I85K по сравнению с 65К характер взаимосвязей вновь изменяется, что выражается, главным образом, в увеличении количества связей между калий- и натрийуретическими показателями. Денервация в этом возрасте приводит к исчезновению большинства этих взаимосвязей и к уменьшению количества корреляций между гидро- и калийуретическими показателями.
Таким образом, при спонтанном мочеотделении денервация влияет на взаимосвязи показателей функций почки как молодых, так и взрослых крыс. У животных разного возраста это влияние различно. Наиболее устойчивым в возрастном аспекте эффектом денервации является ослабление связей между показателями натрий- и калийуретиче-ской функции почек.
