CC BY
67
УДК 616.34
Б.С.Сейдуалиева, Ф.А.Ауельбекова, М.А.Акылова, С.М.Суйенбаева
Центральная клиническая больница Медицинского центра Управления делами Президента Республики Казахстан
г. Алматы
ВНУТРИВИДОВОЕ ТИПИРОВАНИЕ МИКРООРГАНИЗМОВ ПРИ ИНФЕКЦИОННОМ КОНТРОЛЕ В ОТДЕЛЕНИЯХ МНОГОПРОФИЛЬНОГО
СТАЦИОНАРА
АННОТАЦИЯ
Использование в ходе микробиологического мониторинга проспективного эпидемиологического наблюдения различных микробиологических и молекулярно-биологических подходов к внутривидовому типированию штаммов, выделенных из внешней среды стационара, позволяет установить эпидемиологические связи между пациентами с ВБИ, определиться с временными и пространственными границами эпидемических очагов, определить источники и резервуары возбудителя инфекции, пути и факторы передачи и максимально обосновать комплекс противоэпидемических мероприятий, направленных на локализацию эпидемических очагов и профилактику внутрибольничных инфекций.
Ключевые слова: внутрибольничные инфекции, микробиологический мониторинг, инфекционный контроль, внутривидовое типирование микроогрганизмов.
Микробиологический мониторинг в системе эпидемиологического надзора за внутрибольничными инфекциями (ВБИ), является основой изучения микроорганизмов как одного из биологических факторов эпидемического процесса. Установление этиологической природы случаев ВБИ с определением вида микроорганизма и его чувствительности к антимикробным препаратам определяет эффективность их терапии и профилактики [2].
Как известно, присутствующие в стационарах микроорганизмы при определенных условиях формируют так называемые внутрибольничные популяции, наиболее адаптированные к условиям существования в больничной среде. Именно эти госпитальные штаммы и определяют уровень заболеваемости ВБИ в медицинском учреждении. Между тем активная циркуляция в стационаре большого количества однотипного генетического и фенотипического материала, штаммов внебольничного и вну-трибольничного происхождения от пациентов, сотрудников и из внешней среды, существенно затрудняет проведение эпидемиологической диагностики с определением интенсивности, временных и пространственных границ эпидемических очагов, выявлением возбудителей инфекции, путей и факторов передачи [1].
Эффективное выполнение противоэпидемических мероприятий в стационарах невозможно без участия бактериологической лаборатории. Ведущими направлениями микробиологического мониторинга являются исследования биологических материалов от пациентов и с объектов окружающей среды, что позволяет выявить этиологическую природу ВБИ, ведущего биологического фактора эпидемического процесса, провести качественную эпидемиологическую диагностику, определить группы риска по развитию ВБИ. Последнее возможно лишь в том случае, когда лабораторная диагностика ВБИ и изучение циркулирующих в больничной среде микроорганизмов осуществляется на высоком технологическом уровне с учетом последних достижений медицинской науки и современных представлений о молекулярно-генетической природе возбудителя [4].
Расшифровка видового состава актуальных возбудителей в стационаре позволит на более качественном уровне изучить факторы их па-тогенности (вирулентности), провести эпидемиологическое типирование (маркирование), определить место в экосистеме стационара [5].
Цель работы - оценка типирования видового состава микроорганизмов, выделенных из внешней среды, при проведении внутриболь-
АГИУВ
ничного микробиологического мониторинга с применением новых технологий.
В ходе микробиологического мониторинга в течение 12 месяцев (октябрь 2012 г. по октябрь 2013 г.) за объектами внешней среды клинических подразделений проведено 8942 санитарно-бактериологических исследования. При этом внутривидовое типирование применялось к выделенным эпидемиологически значимым микроорганизмам: бактерии группы кишечных палочек (БГКП), нефер-ментирующие грамотрицательные палочки (ИГОБ), золотистый стафилококк (Б.аигеиБ). Штаммы были изолированы со среды Эндо, желточно-солевого агара. Исследования по идентификации микрорганизмов и определению их чувствительности к антимикробным препаратам проводились на автоматическом бактериологическом анализаторе «\/1ТЕК 2-сотрасЪ> (ЫоМепеих, Франция).
Осуществляли идентификацию более 400 видов таксонов (порядка 30биохимических тестов) и определяли чувствительность к антибиотикам при помощи фотометрии. Достоверность и надежность результатов обеспечивала встроенная экспертная система [3].
За период исследования с объектов внешней среды выделено 98 (1,1 %) культур микроорганизмов, структура которых представлена на рис. 1.
Объектами микробиологического мониторинга клинических подразделений были: руки персонала, спецодежда, кухонный инвентарь, сантехоборудование, медоборудование, медицинская мебель. Сравнительные данные объектов контроля по удельному весу высеваемости культур микроорганизмов показаны на рис.2.
Руки персонала Спецодежда Кухонный инвентарь Сант ехоборудо к ан не Медоборудование Мед. мебель
□ Ряд 1
« « « f «j4S\S\\4\
SVs^Ww-, \\\SSSSSSS\V>. \\\SSSS\SV4\\\\Vv ч\ч\\\\\ч\чч\ччч\чч, чч\\\\\чч\ччч\ч\чччч^
S\\SS\SSSSN\\\4\\\S\\\4
SS\\\SS\\\\\\\\\\\4\\\\\\
SS\\\\\\4S44\\\\\\4\\4\\4^
ч\\\ч\\\ччччч\\\чч\чч\\\ччч ч\\чч\\\ччч\ч\ч\\\ч\ч\\\\\\ч
\SSS\SS\4\\\S\SSSS4\S4S4V4\\4
\ч\\\\\чч\чч\\чч\\чч\ч\ч\ччч^,
\Ч\\Ч\Ч\Ч\ЧЧЧ\\\ЧЧ\\Ч\\ЧЧЧ\Ч\^ S\\N\\SS4S\4\\44S\\\\\\4\\4wJ
\\\\\чч\\\ч\\\\\\\чч\ччч\\\чч%| \\\\\\\чч\чч\ч\\\\чч\\\ч\\ч\ч\
Ч\\\Ч\\\Ч\ЧЧЧ\\\ЧЧЧЧЧ\\\ЧЧЧЧЧ"у ЧЧ\ЧЧ\Ч\Ч\\Ч\\Ч\\Ч\ЧЧ\Ч\ЧЧ\\\Ч ss\\\ss\\\\\4\4\\\\\\\\\\\\vV \ч\\\\\чч\чч\ч\\\\чч\\\ч\\ч\ч \\\\ч\\\ччччч\\\чч\чч\\\чч\у \ч\\\ч\чччч\ч\\ч\\\\\\\\ч\\у' ччч\\\чч\\\\\ч\ч\\\ч\\\\\\у ччч\\\\ч\\\\\\\\\\\ч\\ч\\у \чч\ч\\\\\\чччччччч\чч\у .\чч\\\\чччччч\\чч\ч\у
.ч\\\ччччт\ч\чу
«NSWSNNNNNNW^
О БГКП
0НГОБ И S.aureus прочие
Рис.1. Структура микробного пейзажа внешней среды больницы
Так, в структуре микробного пейзажа наибольшее количество занимает БГКП (50), что составило 51,0%. Чуть меньше было выделено НГОБ(32) - 32,7%, Б.аигеиБОЗ)- 13,3%, прочие (Ра$1еиге11а рпеито1:гор1са, Аеготопаэ $а1топ1ас!а, АеготопаБ Ьус1горЫ1а)- по 3,1 %.
Рис.2. Сравнительные данные объектов контроля по высеваемости
Как видно, объектами наибольшего риска в эпидемическом процессе внутрибольничной инфекции могут быть руки персонала (29,5%), спецодежда (22,1 %), кухонный инвентарь (20,0%). В ходе дальнейших исследований на анализаторе «\/1ТЕК 2-сотрасГ» была произведена идентификация довидов и определение чувствительности к антимикробным препаратам 29культур БГКП, 32 культур ИГОБ, выделенных из внешней среды отделений высокого риска внутрибольничного инфицирования (реанимации и интенсивной терапии, хирургии, уронефрологии, гинекологии, гемокоррекции и гемодиализа, офтальмологии, травматологии).
Видовая расшифровка БГКП, выделенных из внешней среды, по удельному весу типи-рованных микроорганизмов представлена в табл.1 и на рис.3.
Таблица 1
Видовая расшифровка БГКП, выделенных из внешней среды
Вид микроорганизма
Удельный вес, %
Enterobacter cloacae 34,5
Klebsiella pneumoniae 24,1
Pantoea spp. 20,7
E.coli 17,2
Enterobacter aerogenes 3,4
Enterobacter aerogenes
Sphingomonas paucimobilis
Рис.3. Структура БГКП, выделенных из внешней среды
Согласно приведенным данным (табл.2), наибольший удельный вес в структуре БГКП имели Enterobacter cloacae (34,5%), Klebsiella pneumonia (24,1 %), Pantoea spp (20,7), четвертое ранговое место заняли E.coli (17,2%).
Видовая расшифровка НГОБ, выделенных из внешней среды, по удельному весу типи-рованных микроорганизмов представлена в табл.2 и на рис.4.
Таблица 2
Видовая расшифровка НГОБ, выделенных из внешней среды
Вид микроорганизма
Удельный вес, %
Acinetobacter baumanii 28,1
Stenotrophomonas maltofilia 21,9
Pseudomonas aeruginosae 12,5
Pseudomonas putida 12,5
Sphingomonas paucimobilis 6,3 Прочие:
Delftia acidovorans 3,1
Pseudomonas alcaligenes 3,1
Acinetobacter junii 3,1
Moraxella 3,1
Pseudomonas luteola 3,1
Burkholderia cepacia 3,1
Установлено, что наибольший удельный вес в структуре НГОБ имели Acinetobacter baumanii (28,1%), Stenotrophomonas maltofilia (21,9%), Pseudomonas aeruginosae и putida (по 12,5), четвертое ранговое место заняли Sphingomonas paucimobilis (6,3%). В группу «прочие» вошли НГОБ, удельный вес которых составил по 3,1 %.
Acinetobacter baumanii
Pseudomonas aeruginosae
\ Pseudomonas putida
Stenotrophomonas maltofilia
Рис.4. Структура НГОБ, выделенных из внешней среды: Прочие® Delftia acidovorans ES Pseudomonas alcaligenes SS Acinetobacter junii ■ Moraxella И Pseudomonas luteola □ Burkholderia cepacia
Кроме того, в ходе исследований определена чувствительность к антибиотикам 34 культур из обеих эпидемиологически значимых групп микроорганизмов, выделенных из внешней среды клинических подразделений.
Таблица 3
Чувствительность к антибиотикам культур, выделенных из внешней среды
Вид культуры
Антибактериальный препарат Pseudomonas putida Acinetobacter baumanii Enterobacter cloacae Klebsiella pneumoniae E.coli
Ампициллин У У Ч У У
Пиперациллин Ч У/Ч Ч У У
Цефазолин У У У У/Ч Ч
Цефокситин У У У У/Ч Ч
Цефуроксим У У У Ч Ч
Цефотаксим У У Ч Ч Ч
Цефподаксим У У У Ч Ч
Нитрофурантоин У/Ч У/Ч У/Ч У/Ч Ч
Сульфаметоксазол У Ч Ч У/Ч Ч
Ципрофлоксацин Ч Ч Ч Ч У
Левофлоксацин Ч Ч Ч Ч У
Гентамицин Ч Ч Ч Ч У
Амоксициллин Ч У/Ч У/Ч Ч У/Ч
Примечание: 4 - чувствительные; У/Ч - умеренно-чувствительные: У - устойчивые.
Как видно из табл.3, определение чувствительности показало, что санитарно-значимые виды НГОБ (Pseudomonas aeruginosae, Pseudomonas putida, Acinetobacter bauma-nii) характеризуются полирезистентностью.
Klebciella pneumoniae
Pantoea spp.
E.coli
Enterobacter cloacae
АГИУВ
Эпидемиологический мониторинг анти-биотикорезистентности микроорганизмов, циркулирующих в стационаре с выявлением их минимальной ингибирующей концентрации, служит эпидемиологической меткой и необходим для выбора адекватной и эффективной терапии.
Таким образом, применение автоматического бак-анализатора «У1ТЕК 2-сотрас1» для расшифровки микробного пейзажа выделенных культур позволило детально выявить:
• все виды БГКП, ИГОБ, значимых во внутри-больничном эпидемическом процессе;
♦ объекты наибольшего риска в эпидемическом процессе внутрибольничной инфекции;
• полирезистентностные штаммы санитарно-значимые виды ИГОБ.
Использование в ходе микробиологического мониторинга различных микробиологических и молекулярно-биологических подходов к внутривидовому типированию штаммов, выделенных из внешней среды стационара, позволяет установить эпидемиологические связи между пациентами с ВБИ, определиться с временными и пространственными границами эпидемических очагов, определить источники и резервуары возбудителя инфекции, пути и факторы передачи и максимально обосновать комплекс противоэпидемических мероприятий, направленных на локализацию эпидемических очагов и профилактику внутрибольничных инфекций.
ЛИТЕРАТУРА
1 ДудниковаО.Г., Дементьева Л. М. Анализ структуры биоматериала, исследуемого в учреждениях здравоохранения // Инфекция и иммунитет. - 2012 - Т.2, №1-2. - С. 260-261.
2 Концепция профилактики внутрибольничных инфекций / под рук. акад. РАМН В.И.Покровского // Эпидемиология и инфекционные болезни. - 2000. - №5. - С.4-9.
3 ЛабинскаяА.С., Волина Е. Г. Руководство по медицинской микробиологии, общая и санитарная микробиология. - М.: БИНОМ, 2008. - Кн.1. - 1080с.
4 Покровский В. И., АкимкинВ.Г., БрикоН.И. и др. Пути совершенствования лабораторной диагностики инфекций, связанных с оказанием медицинской помощи // Медицинский альманах.-2012. - №2. - С. 12-16.
5 European Centre for Disease Prevention and Control. Antimicrobial resistance sur-veillance in Europe 2009. Annual Report of the European Antimicrobial Resistance Surveillance Network (EARS-Net). - Stockholm: ECDC, 2010. - 208 p.
ТУЙ1Н
Стационардыц сырт^ы ортасынан белшт алынган штамдарды турЫлж типтеуге туря! микробиологиялык жэне молекулярлы-биологиялык тэстмен микробиологиялык мониторинг журпзу барысында проспективл эпидемиялык бакылауды колдану емделу-штер мен А1И арасындагы эпидемиологиялык байланысты орнатуга, эпидемиялык ошак-тардьщ уакытша жэне KenicTiKTi шекараларын аныктауга, инфекция коздыршшыньщ K63i мен орнын, 6epiny жолдары мен факторларын аныктауга жэне эпидемия ошакгарын жоюга жэне ауруханаштж инфекциялардын алдын алуга багытталган эпидемияга карсы ic-шаралар кешежн барынша непздеуге мумюндж бередг
Туй1нд1 сездер: aypyxaHaiujmiK инфекциялар, микробиологиялык мониторинг, инфекциялык бакылау, микроорганизмдерд1 TypiujiniK типтеу.
SUMMARY
The use, in the microbiological monitoring of a prospective epidemiological surveillance, of various microbiological and molecular biological approaches to intraspecific typing of strains isolated from the environment of a hospital, allows to establish epidemiological links between patients with nosocomial infections, to determine the temporal and spatial boundaries of epidemic outbreaks, to identify the sources and reservoirs of pathogen and ways and factors of transmission, and to substantiate the complex epidemiological measures aimed at localising epidemic outbreaks and prevention of nosocomial infections.
Key words: nosocomial infections, microbiological monitoring, infection control, intraspe-cific typing of microorganisms.
