Literatura
1. Zachem nuzhno delat' analiz mocheviny v moloke? // The DairyNews. - 18.06.2014. -[elektronnyj resurs]. Rezhim dostupa: http://www.dairynews.ru/dairyfarm/zachem-nuzhno-delat-analiz-mocheviny-v-moloke .html (02.07.2017).
2. GOST R 52054. Moloko korov'e syroe. Tekhnicheskie usloviya (s Izmeneniem №1) // [Elektronnyj resurs]. Rezhim dostupa: http://docs.cntd.ru/document/gost-r-52054-2003 (02.10.2017).
3. Gorbatova K. K. Biohimiya moloka i molochnyh produktov. - SPb.: GIORD, 2003. - 320 s.
4. Ule A., Prepadnik H., Klopcic M. The freezing point of bulk tank milk in Slovenia // Acta agriculturae Slovenica, Supplement 5, 2016, 84-88.
5. Kuznecov A., Kuznecov S. O tekhnologicheskih svojstvah moloka // Molochnoe i myasnoe skotovodstvo. - 2010. - № 2. - S. 5-7.
6. Henno M., Ots M., Joudu I., Kaart T., Kart O. Factors affecting the freezing point stability of milk from individual cows // International Dairy Journal, 2008, 18, 210- 215.
7. Otwinowska-Mindur A., Ptak E., Grzesiak A. Factors affecting he freezing point of milk from Polish Holstein-Friesian cows. // Ann. Anim. Sci., Vol. 17, №.3 (2017) 873-885.
УДК 619:636.2:577.1 Б01 10.24411/2078-1318-2019-11097
Канд. с.-х. наук В.И. ТУРЛЮН (А^агСошик, victor.turlyun@gmail.com)
ВНЕДРЕНИЕ ЭКСПРЕСС-МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЕТОЗА У КОРОВ В ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ ПРОЦЕСС ПРОИЗВОДСТВА МОЛОКА
У высокопродуктивных животных, обладающих ценным генетическим потенциалом, особенно таких, как коровы голштинской породы, в связи с недостаточно сбалансированным кормлением в условиях современных крупных комплексов по производству молока часто наблюдается нарушение обмена веществ. Одним из распространенных заболеваний этой категории является кетоз, который, как правило, наиболее часто проявляется у лактирующих коров в первые 10-40 дней после отела [1]. Это обусловлено недостаточным потреблением корма в период раздоя, что создает в организме коровы условия для отрицательного энергетического баланса. Последствиями нарушения белкового, углеводно-жирового и витаминно-минерального обменов является изменение гормонального статуса организма коровы, что негативно сказывается на воспроизводительной функции и приводит к потере молока [2].
Наибольшему риску возникновения кетоза подвержены животные в условиях интенсивной технологии производства молока. Согласно научным исследованиям, проведенным в условиях российских предприятий, количество высокопродуктивных животных, подверженных заболеванию кетозом, составило от 23 до 80%, но также не исключены случаи возникновения кетоза в сухостойный период.
Поскольку скот, проявляющий высокую молочную продуктивность, отличается относительно низкой физиолого-биохимической устойчивостью организма [2], даже создание оптимальных условий кормления этих животных в группе не может полностью гарантировать отсутствие кетоза. Поэтому очень важным фактором эффективного менеджмента в условиях интенсивной технологии производства молока является своевременное выявление таких животных и принятие мер.
За счет того, что кетоз обусловлен накоплением в крови, моче и молоке кетоновых тел, большинство методов выявления больных животных основаны на лабораторном или экспресс-анализе образцов этих жидкостей. Однако проблемой в данном случае является то, что кетоз проявляется двумя формами: клинической и субклинической. Количество кетоновых тел также может колебаться в зависимости от времени взятия образца. До 90%
случаев заболевания субклиническим кетозом установлено в первые два месяца после отела [3]. При этой форме кетоза коровы производят ежесуточно на 1-3,3 кг молока меньше, что может составить до 300 кг за 305 дней лактации [4]. Клиническая форма приводит к ожирению печени [1]. Исследованиями также установлена корреляция между повышенным содержанием бета-гидроксимасляной кислоты (BHBA) с клинической формой кетоза при ее концентрации >1,1 ммоль/л, метритом (>1,4 ммоль/л), ламинитом (>1,5 ммоль/л), смещением сычуга (>1,2 ммоль/л). В европейской литературе приводятся данные о том, что затраты, суммируемые с потерями в случае возникновения кетоза, находятся в пределах от 600 до 1000 евро [5].
Цель исследований - изучить проявление субклинической и клинической форм кетоза в первые месяцы после отела голштинских коров импортного происхождения, а также протестировать наиболее оптимальную методику диагностики в производственных условиях.
Материалы, методы и объекты исследования. Исследования были выполнены в условиях МТФ №4 АО «Агрообъединение «Кубань» Краснодарского края в период с 2012 по 2016 гг. На данной ферме разводится голштинский скот, завезенный из Канады и Австралии, а также их потомство. В хозяйстве принята беспривязная система содержания с круглогодовым однотипным кормлением полнорационной кормосмесью. Все процессы на ферме механизированы и выполняются согласно стандартам, принятым в «АгроХолдинге».
Для определения содержания бета-гидроксимасляной кислоты в молоке использовались тестовые полоски двух производителей. Первые два исследования были проведены с использованием тест - полосок Keto-TestTM Elanco Animal Health (производитель SKK Japan) (рис. 1).
Рис. 1. Тест-полоски для анализа молока Keto-TestTM
Третий этап исследования молока выполнялся с применением тестовых полосок PortaBHB™ Milk-Ketone-Test (PortaCheck, Inc., USA). Оба варианта тестовых полосок работают по одному принципу и имеют одинаковую оценочную шкалу. Отличительной особенностью тест-полосок Elanco Animal Health является то, что их в упаковке необходимо хранить в холодильнике, в то время как тестовые полоски PortaBHBTM можно хранить при комнатной температуре. Данный метод основан на энзиматическом изменении цвета.
Средние пробы молока отбирались индивидуально от каждого животного в течение утреннего доения в 5 ч. В каждую пробу опускалась тестовая полоска на 3 минуты, после чего она извлекалась, и с нее стряхивались остатки молока. По истечении одной минуты ее прикладывают к цветовой шкале и сравнивают результаты. Интенсивность окраски цветового поля свидетельствует о концентрации BHBA в пробе молока (табл. 1).
Таблица 1. Схема исследований молока тест-полосками
№ исследования Дата отбора проб n Тест-полоски
1 25.04.2013 38 Keto-Test™
2 30.05.2013 24 Keto-Test™
3 20.08.2013 81 PortaBHB™
В табл. 2 приведены значения, используемые для интерпретации данных, полученных в ходе проведения теста проб молока.
Таблица 2. Шкала оценки результатов определения содержания BH в молоке
Интерпретация результатов Условное обозначение Содержание BH [^mol/l]
В пределах нормы (-) Н 0-99
Зона риска (+/-) ЗР 100-199
Субклиническая форма (+) СФ 200-499
Клиническая форма (++) КФ 500+
Определение содержания BHBA в крови проводилось при помощи портативного устройства «Precision Xtra Meter» (Abbot Laboratories, USA), представленного на рис. 2.
Рис. 2. Устройство «Precision Xtra Meter» для анализа содержания глюкозы и BHBA в крови
Для проведения анализа кровь, взятую из хвостовой вены, наносили непосредственно на тест-полоску, вставленную в прибор. По истечении 10 секунд на дисплее устройства появлялось изображение результата теста (ммоль/л). Анализ крови на протяжении всего периода исследования проводился в 14 часов, после возвращения животных с обеденного доения. Исследование проводилось с 1 по 31 августа 2013 года.
Оценка результатов, полученных в ходе анализа крови, проводилась в соответствии со следующими значениями: концентрация BHBA до 1,2 ммоль/л - в пределах нормы, от 1,3 до 2,9 ммоль/л - при субклиническом кетозе и > 3,0 ммоль/л - при клинической форме кетоза [6].
Для сравнительного анализа у 10-ти животных одновременно были проведены экспресс-тесты проб молока и крови.
Результаты исследований. Результаты сравнительного анализа на содержание бета-гидроксимасляной кислоты в молоке и крови исследуемых животных приведены в табл. 3.
Анализ экспресс-методов определения концентрации BHBA в молоке и крови животных показал, что, согласно результатам теста по молоку, животные 113, 275 и 1002 находятся в зоне риска, в то время как результат анализа крови свидетельствует о наличии явно выраженной субклинической формы кетоза (значения содержания BHBA колеблются в пределах от 1,3 до 2,9 ммоль/л). Корова 484, согласно результатам двух тестов, находится в зоне риска. Животное 792 по значению BHBA в молоке располагается в зоне риска
заболевания субклинической формой кетоза, что не подтверждается тестом крови, значение BHBA в которой составило 0,8 ммоль/л. Также выявлено несовпадение в результатах коровы 873, тест молока которой свидетельствует о субклинической форме кетоза, однако тест крови четко выявляет наличие клинической формы (3,1 ммоль/л). У животного 563, наоборот, тест молока выявил наличие клинической формы кетоза, однако тест крови показал субклиническую форму (2,1 ммоль/л). У коров 610, 619 и 1077 оба теста подтверждают наличие клинической формы кетоза.
На основе сравнительного анализа видно, что тест на содержание BHBA в молоке является менее точным по сравнению с тестом крови, однако однозначно можно сказать, что оба теста позволяют в производственных условиях быстро выявить животных в зоне риска, а также той или иной форме заболевания кетозом.
Таблица 3. Данные сравнительного анализа результатов концентрации BHBA в молоке и крови исследуемых животных (п=10)
№ животного Молоко Кровь [ммоль/л]
113 (+/-) 2,0
275 (+/-) 1,8
484 (+/-) 1,2
792 (+/-) 0,8
1002 (+/-) 2,3
873 (+) 3,1
563 (++) 2,1
610 (++) 4,1
619 (++) 3,1
1077 (++) 3,7
Результаты анализа молока на содержание BHBA в первом измерении (апрель) (рис. 3) показали, что 39,5% животных I фазы лактации имели статус здоровых, 28,9% проанализированных проб показали нахождение животных в зоне риска, такое же количество имело субклиническую форму кетоза. Из всех проанализированных проб только у 2,6% выявлена клиническая форма кетоза. Второе измерение (май) (рис. 4), проводимое в группе после отела фазы «Транзит II», позволило установить, что 8,3% животных имели статус здоровых, 62,5% были в зоне риска, 12,5% с субклинической и 16,7% с клинической формами кетоза. Третье измерение содержания BHBA в пробах молока коров I фазы лактации, выполненное в августе, выявило 9,9% животных с показателями BHBA в норме, у 81,5% животных этот показатель находился в зоне риска, 3,7% - со значениями, соответствующими субклинической форме кетоза, и 4,9% - клинической.
2,6%
Рис. 3. Распределение коров I фазы лактации в зависимости от содержания ВНВА
в молоке (измерение 1)
Рис. 4. Распределение коров фазы «Транзит II» (слева, измерение 2) и коров I фазы лактации (справа, измерение 3) в зависимости от содержания ВНВА в молоке
Результаты анализа проб молока в разные временные периоды колеблются за счет увеличения количества животных в зоне риска, когда точно нельзя отнести их к здоровым или условно больным с клинической формой кетоза. Данные измерения 1 и 2 показывают, что около 30% изученных животных имеют субклиническую или клиническую форму кетоза. В третьем измерении лишь 8,6% животных имеют выраженную форму заболевания, однако количество коров, находящихся в зоне риска в этом измерении, составило 81,5%, что означает невозможность отнести их к здоровым или больным при помощи теста молока. Для более достоверного сравнительного анализа на рис. 5 представлены результаты тестов крови.
1,3-3,0 >3,0 ммоль/л
Рис. 5. Результат анализа содержания ВНВА в крови коров фазы «Транзит II» и I фазы лактации
Анализ крови при помощи тест-полосок показал, что 69% животных имеют статус здоровых, 9% находятся в зоне риска, 20% имеют субклиническую и 2% клиническую форму кетоза.
Полученные данные обоих тестов свидетельствуют о частом заболевании кетозом (около 30%) коров после отела до 120-го дня лактации в данном хозяйстве на момент проведения опыта. Согласно результатам анализа крови, субклиническую и клиническую формы кетоза имеют 22% животных. Это подтверждается и ранее проведенными в этом хозяйстве академиком В.Г. Рядчиковым исследованиями, которые установили, что 21% коров, закупленных в Канаде, выбыли по причине цирроза печени (кетоза) [7].
Выводы: Проведенные исследования показали, что одной из причин неполного проявления высокопродуктивными животными их генетического потенциала является кетоз, наиболее часто встречающийся в его субклинической форме (20% согласно результатам анализа крови) и лишь 2% животных имели клиническую форму. Хозяйству были даны рекомендации по внедрению экспресс-анализа крови для проведения регулярных тестов каждого животного за одну неделю до отела и 2 раза в неделю в течение первых трех недель
после отела, поскольку в этот период наиболее часто возникают случаи субклинической и клинической форм кетоза. Это позволит принимать своевременные управленческие решения как зоотехнической службе для контроля изменений рациона животных, так и ветеринарной - для быстрого реагирования и предотвращения выбытия животных и потерь молока.
Литература
1. Тёвс А. Краткий справочник консультанта / Под общ. ред. А. Тёвса. - Мекенхайм: «DCM Druck Center Meckenheim GmbH», 2010. - 159 с.
2. Ярован Н.И., Новикова И.А. Окислительный стресс у высокопродуктивных коров при субклиническом кетозе в условиях промышленного содержания // Вестник Орел ГАУ. -2012. - №5(38). - С. 146-148.
3. Geishauser T., Leslie K., Tenhag J., Bashiri A. Evaluation of eight cow-side ketone tests in milk for detection of subclinical ketosis in dairy cows // Journal of dairy science. - 2000. - V.83.
- P.296-299.
4. Duffield T.F., Lissemore K.D., Mcbride B.W., Leslie K.E. Impact of hyperketonemia in early lactation dairy cows on health and production // Journal of dairy science. - 2009. - V.92. -P.571-580.
5. Martens H. Ketose und die (Homeorhetische) Regulation des Energiestoffwechsels // Nutztierpraxis Aktuell. - 2013. - P. 52-56.
Literaturа
1. Tyovs A. Kratkij spravochnik konsul'tanta / Pod obsh. red. A. Tyovsa. - Mekenhajm: «DCM Druck Center Meckenheim GmbH», 2010. - 159 s.
2. YArovan N.I., Novikova I.A. Okislitel'nyj stress u vysokoproduktivnyh korov pri subklinicheskom ketoze v usloviyah promyshlennogo soderzhaniya // Vestnik Oryol GAU. -2012. - №5(38). - S. 146-148.
3. Geishauser T., Leslie K., Tenhag J., Bashiri A. Evaluation of eight cow-side ketone tests in milk for detection of subclinical ketosis in dairy cows // Journal of dairy science. - 2000 - V.83.
- P. 296-299.
4. Duffield T.F., Lissemore K.D., Mcbride B.W., Leslie K.E. Impact of hyperketonemia in early lactation dairy cows on health and production // Journal of dairy science. - 2009. - V.92. -P.571-580.
5. Martens H. Ketose und die (Homeorhetische) Regulation des Energiestoffwechsels // Nutztierpraxis Aktuell. - 2013. - P. 52-56.
УДК 636.03
DOI 10.24411/2078-1318-2019-11102
Доктор ветеринар. наук О.К. СУХОВОЛЬСКИЙ (ФГБОУ ВО СПбГАУ, sokvet@mail.ru)
ЗНАЧЕНИЕ БИОТЕХНОЛОГИИ В СОВРЕМЕННОМ ЖИВОТНОВОДСТВЕ
В настоящее время в разных странах на животноводство приходится более трети валового внутреннего продукта и ожидается, что этот показатель будет продолжать расти. Животноводство играет значимую роль в жизни людей, предоставляя не только продовольствие, но и другую необходимую продукцию. Предполагается, что спрос на животный белок удвоится к 2050 году, поэтому эти продукты должны производиться максимально эффективно с учетом площадей пахотных земель и ограниченных водных и растительных ресурсов, а также реальности изменения климата, которая оказывает неблагоприятное воздействие на современные производственные системы. Это представляет