Вміст вільних ароматичних амінокислот у крові за умов розвитку гепатостеатозу та дії екзогенних чинників Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

Уда 619:616.935:636.2:577.115.3

Си^р-Басараб I.M. 1-3, aспipaнт;

Кaлaчнюк Л.Г.1' 2 д.б.н., доцент;

Mельничук Д.О. \ д.б.н., професор, aкaдемiк НЛНУ i HAAHy, Mельничук С.Д. \ д.б.н., професор, член-кор. HAAHy Кaлaчнюк Г.1. 1 2, д.б.н., професор 1Haцioнaльнuй yнiверcumеm бioреcyрciв i прuрoдoкoрucmyвaння Укрaïнu 2НД1 бiomехнoлoгiчнuх ocнoв пiдвuщення прoдyкmuвнocmi mвaрuн ЛHУBMmaБT

iменi. С. З. îжuцькoгo 31нcmumym фiзioлoгiï i генеmuкu mвaрuн 4e^mïAH, Прaгa, Че^ш Реcnyблiкa

BMICT В1ЛЬНИХ АРОМАТИЧНИХ АМ1НОКИСЛОТ У КРОВ1 ЗА yMOB РОЗВИТКУ ГЕПАТОСТЕАТОЗУ ТА ДП ЕКЗОГЕННИХ ЧИННИК1В

Ha екcперuменmaльнiй мoделi 3a yмoв рoзвumкy aлкгoльiндyкoвaнoгo cmeamo3y печтш пoкaзaнo, щo в плaзмi крoвi щyрiв вiрoгiднo знuжyemьcя вмкт вшьнш aрoмamuчнuх aмiнoкucлom (BAAK) - Tyr, Phe, Trp ma ixmoi' cyмaрнoï кiлькocmi. Biдcomкoве зшження знaхoдumьcя в межaх 18, б -23,1, щo прямo вкaзye нa пoрyшення меmaбoлiчнuх шляхiв aренiв, знaчнa чacmuнa реaкцiй якш oчевuднo зaлежumь вiд пoшкoджень мембрaн гепamoцumiв. Це yзгoджyemьcя i3рaнiше omрuмaнuмu дaнuмu. Buкoрucmaння фocфoлiпiдвмicнuх кoмплекcнuх бioлoгiчнo aкmuвнuх дoбaвoк (EAff) рocлuннoгo i mвaрuннoгo пoхoдження дoзвoляe вiднoвumu вмкт дocлiджyвaнuх BAAK y крoвi.

Ключовi слова: вшьт aрoмamuчнi aмiнoкucлomu, печтш, еmaнoл, крoв, щyрi, бioлoгiчнo aкmuвнi дoбaвкu, фocфoлiпiдu мoлoкa.

В експериментольних моделях aлкогольiндyковaного гепaтостеaтозy покaзaно не тшьки зтачш змши бaгaтьох покaзникiв внутршньокл^инного метaболiзмy в печшщ i кров^ aле й вiдмiчено своерщш порушення в обмш бшюв тa aмiнокислот (AK) [1 - 9]. Виявлено, що суттевих змш зaзнaють aмiнокислоти з pозгaлyженими кapбоновими лaнцюгaми тa ряд вaжливих глюкогенних AK [3, 4]. Щгавим е те, що вмют тaких AK, як Val, Leu, Ile тa ïx сyмapнa кiлькiсть вipогiдно спaдae, тодi як Ala, Glu i Gln тa ïx сyмa, нaвпaки, зpостae [3, 4]. Хpонiчне вживaння етaнолy (EtOH) по-piзномy впливae нa вмiст шших вiльниx AK тa ïx груп. Це тaкож чiтко видно i та пpиклaдi зрушень вмiстy тaкиx apомaтичниx aмiнокислот, як Tyr, Phe, Trp тa ïxньоï суми, що таведено нaми y цьому повщомленш

Maтерiaли i методи. Дослiдження проводили та 25 щypax-сaмцяx живою мaсою 130-150 г, якi були роздшеш нa п'ять груп, по 5 твapин y кожнiй. Щypi 1~т групи (контpольноï) y склaдi paцiонy одеpжyвaли iзокaлоpiйний розчин глюкози (40 %-ний розчин), 2-, 3-, 4- i 5~o1 груп, окpiм глюкози, -aлкоголь (30 %-ний розчин; v/v) по В г/кг живо].' мaси per os. Kpiм цього твapини 3-oï, 4~т i 5~o1 груп зa 1 год до введення EtOH i глюкози додaтково отpимyвaли

© Бaсapaб I., Kaлaчнюк Л., Мельничук Д., Мельничук С., Kaлaчнюк Г., 2010

139

фосфолшщвмкний препарат i3 со! EPL ("Есенщале", 25 мг/1 кг живо! маси ), FLP-MD (фосфолшщвмкний препарат на 0CH0Bi вiдходiв молока; 25 мг/1 кг живо! маси) i LP FLP-MD, тобто препарат у лшосомальнш формi у кшькост 10 мг/1 кг живо! маси, вщповщно. Детальний опис методики подано рашше [5 - 9]. Плазму кровi депроте!шзували сульфасалiциловою кислотою i супернатант використовували для амшокислотного аналiзу iонообмiнною хроматографieю HPLC (model 6300, Beckman Instruments, Fullerten, CA). Оптичну густину вимiрювали при 440 i 570 нм пiсля постколоночно! обробки нiнгiдрином. У якостi внутршнього стандарту використовували (<5)-2-амшоетил^-цистеш. Отриманi цифровi данi обробляли статистично з використанням критерiю Стьюдента «t».

Результати i обговорення. Отриманi результати дослiджень наведеш у табл. 1 i рис. 1.

Таблиця 1

BMicT (мкмоль/л) вiльних ароматичних амiнокислот (ВААК) у плазмп KpoBi щурiв за умов розвитку алкоголындукованого стеатозу печiнки i впливу

фосфолшщвмкних комплексних добавок (M±m; n=5-15)

Групи тварин Амшокислоти

Tyr Phe Trp Ураак

1 (К; контроль) 108±4,1 84±4,3 97±3,2 289±14

2 (K+EtOH) 83±3,7* 62±3,1* 79±3,3* 224±6,2*

3(K+EtOH+EPL) 98±3,4# 75±3,2# 91±3,1# 264±10#

4(K+EtOH+FLP-MD) 99±3,5# 77±3,8# 94±3,3# 270±9,5#

5(K+EtOH+LP FLP-MD) 102±3,8# 81±3,5# 99±3,2# 282±12,7#

Тут i дал1 : *р1зниця в1ропдна у пор1внянш з контролем, р1зниця в1ропдна у пор1внянш з 2 ою групою

1з даних табл. 1 i рис. 1 видно, що пiд впливом екзогенного алкоголю в плазмi кровi тварин майже на 23 % знижуеться вмiст ароматичних АК. Це вказуе на значне порушення метаболiзму згаданих аренiв пiд впливом екзогенного EtOH. Гальмування етанолом окремих ланок обмшних процесiв можна прослiдкувати на спещальних схемах метаболiзму Туг, РИе i Тгр [10].

1з наведених схем i конкретних даних видно, що тд дieю екзогенного EtOH, можливо, порушуються цитоплазматичнi й субкл^инш мембрани печiнки i в результат цього багато важливих сполук не може вчасно i вдосталь транспортуватися до мiсця синтезу аренiв, або ж навпаки, паралельно посилюються процеси деградаци 1х та iнших АК. Тому, очевидно, понижеш кiлькостi таких амшокислот спостерiгаються в плазмi кров1

140

120

■ 1 ■ 2

□ 3 04 Об

Туг Phe Trp BAAK

Рис. 1. Bíícotkobí змши BMicTy ВААК у плязмп кров1 щyрiв 3a умов розвитку aлкогольiндyковaного CTeaT03y печшки i впливу фосфолтщвмпсннх комплексних добявок (M±m; n=5-15).

141

5-оксишдолтоцтова кислота

4

Метабол1зм Тгр

Важливо зазначити, що згаданi порушення вiрогiдно зникають при застосуванш фосфолiпiдвмiсних комплексных бiологiчно активних добавок рослинного й тваринного походження. При цьому найвищий бiологiчний ефект проявляв лшосомальна форма БАД ЬР БЬР-МБ, одержана iз фосфолiпiдiв молока.

Висновки:

1.За умов розвитку алкоголындукованого гепатостеатозу в плазмi кровi щурiв вiрогiдно знижуеться вмiст вiльних ароматичних амшокислот - Tyr, Phe, Trp та 1хньо1 сумарно! кiлькостi.

2.Використання фосфолiпiдвмiсних комплексних добавок рослинного (EPL - «Есенщале») й тваринного (FLP-MD i FLP-MD) походження, виготовлених на основi лiпiдiв молока, пщвищуе вмiст ароматичних кислот у кров1 Причому найвищий ефект проявляв лшосомальна форма БАД - LP FLP-MD.

3.Ушкоджуюча дiя EtOH i л^вальний вплив нових фосфолiпiдвмiсних БАД пов'язуеться iз порушеннями та вiдновленням структурно-функцiонального стану мембран клiтин печшки.

Л1тература

1. Островский Ю.М. Аминокислоты в патогенезе, диагносттике и лечении алкоголизма / Ю.М. Островский, С.Ю. Островский. - Минск: Наука и техника, 1995. - 280 с.

2. Влияние композиции аминокислот с разветвленной углеводородной цепью, триптофана и таурина на обмен аминокислот в экспериментальных моделях алкоголизма / В.Ю. Смирнов, Ю.Е. Разводовский, Е.М. Дорошенко [и др.] // Укр. биохим. журн. - 2003. - Т. 75, № 4. - С. 101 - 107.

3.Вщновлення рiвня вшьних амшокислот iз розгалуженими «С»-ланцюгами в кровi за ди токсичних i нейтралiзуючих речовин / . Калачнюк, I.

142

Сидiр-Басараб, Д. Мельничук, Г. Калачнюк // Наук. вкник ЛНУВМтаБТ iM. С.З. Гжицького, Львш, 2010. - Т. 12, № 2 (44), Ч. 2. - С. 99 - 103.

4. Корекщя обсяпв глюкогенних амiнокислот у KpoBi за умов розвитку алкоголындукованого стеатозу печiнки / Л. Калачнюк, I. Сидip-Басаpаб, Д. Мельничук, Г. Калачнюк // Вкник Львiвського ун-ту. Сеpiя Бiол. 2010. - (у друщ).

5.Калачнюк Л.Г., Мельничук Д.О., Калачнюк Г.1. Регуляцiя метаболiзму жирних кислот та iнших лiпiдних сполук у жуйних тварин / // Укр. 6^xiM. журн. - 2007. - Т. 79, № 1. - С. 22 - 45.

6. Змши активност внутршньокл^инних ензимiв за дп токсиканта i протектора / Л.Г. Калачнюк, I.M. Сидip-Басаpаб, Г.1. Калачнюк, Д.О. Мельничук // Наук. вкник ЛНУВМтаБТ iM. С.З. Гжицького, Л^в, 2009. - Т. 11, № 2 (41), Ч. 2. - С. 105 - 109.

7. Змши активност лшогенних ензимiв у клггиш за да екзогенних фактоpiв / Л.Г. Калачнюк, Д.О. Мельничук, 1.М. Сидip-Басаpаб [та ш.] // Наук. вiсник ЛНУВМтаБТ iM. С.З. Гжицького, Львiв, 2009. - Т. 11, № 3 (42), Ч. 2. - С. 76 - 80.

8.Антиоксидантна здатшсть фосфолшщвмшних комплекав за умов розвитку алкоголындукованого гепатичного стеатозу / Л.Г. Калачнюк, Д.О. Мельничук, 1.М. Сидip [та ш] // Наук. вiсник ЛНУВМтаБТ iм. С.З. Гжицького, Львiв, 2008. - Т. 10, № 3 (38), Ч. 1. - С. 99 - 105.

9.Змши бiохiмiчних показниюв кpовi за екзогенно! дп алкоголю та фосфолiпiдвмiсних комплексiв / Л.Г. Калачнюк, Д. О. Мельничук, 1.М. Сидip [та iн.] // Наук. вюник НАУ, Кшв, 2008. - Вип. 127. - С. 117 - 120.

10. J.M. Berg, J.L. Tymoczko, L. Stryer Biochemistry : [5th ed.]. - New York: W.H. Freeman and Co., 2002. - 572 p.

Summary

I. Sydir-Basarab1-3, L. Kalachnyuk12, D. Mel'nychuk1, S. Mel'nychuk1,

G. Kalachnyuk1,2

CONTENT OF FREE AROMATIC AMINO ACIDS IN THE BLOOD UNDER CONDITIONS OF HEPATIC STEATOSIS DEVELOPMENT AND EFFECT

OF EXOGENOUS FACTORS

On the experimental model, under conditions of alcohol-induced hepatic steatosis development, it has been shown that content of free aromatic amino acids (Tyr, Phe, Trp and sum of their amounts) is significantly decreased in the blood plasma of rats. Their percentage decrease is at boundary-line of 18,6 to 23,1% that directly show on alteration of metabolic aromatic amino acids pathways with most of reactions depending obviously on breaches of membranes of hepatocytes. It is coordinated with data obtained previously. Use of phospholipids containing complex biologically active additives of plant and animal origin permits recovery of the investigated free aromatic amino acids content in the blood.

Key words: free aromatic amino acids, liver, ethanol, blood, rats, biologically active additives, milk phospholipids, liposome.

Стаття надшшла доредакцИ 17.09.2010

143