CC BY
12
ВЕТЕРИНАРНЫЕ НАУКИ
УДК: 616-036.882-08-089.583.29 Д Ц СЕМОЧКИН
Омский государственный аграрный университет
ВЛИЯНИЕ ГЛУБОКОЙ КРАНИОЦЕРЕБРАЛЬНОЙ ГИПОТЕРМИИ НА СОСТОЯНИЕ УГЛЕВОДНОГО ОБМЕНА В ВОССТАНОВИТЕЛЬНОМ ПЕРИОДЕ ПОСЛЕ ДЛИТЕЛЬНОЙ ОСТАНОВКИ КРОВООБРАЩЕНИЯ_
В работе показано, что в постреанимационном периоде ипоксические нарушения висцеральных функций в значительной степени нивелируются при глубокой краниоцереб-ральной гипотермии вследствие менее выраженного анаэробного окисления.
Важную роль в случаях неблагоприятного исхода зующих степень гипоксии, в постреанимационном
реанимации играют метаболические нарушения в периоде.
головном мозге, лимитирующие в конечном итоге Особенности углеводного обмена изучались на восстановление функций ЦНС. Возникающая пост- исследовании содержания в венозной крови (забор гипоксическая энцефалопатия является органи- производили из нижней полой вены) глюкозы, мо-ческой частью болезни оживленного организма и лочной и пировиноградной кислот — показателей, реализуется целым рядом неврологических и пси- нашедших широкое применение в клинике в качест-хических нарушений, наблюдаемых на всех этапах ве диагностических и прогностических тестов поствосстановительного периода после оживления. В свя- реанимационного периода, так как в раннем пострези с этим представляло интерес изучить влияние глу- анимационном периоде происходит активация бокой краниоцеребральной гипотермии на дина- гликолиза и накопление недоокисленных продуктов мику показателей углеводного обмена, характери- обмена. В основу исследования положены результа-
ты экспериментов, выполненных на 80 взрослых беспородных собаках обоего пола массой 8-15 кг.
Перед проведением эксперимента обеспечивалось ночное голодание без ограничения доступа воды. В качестве средства премедикации нами применялся калипсол (кетамин) в дозе 20 мг-кг'1 массы. Последующую наркотизацию проводили этаминалом натрия (10 мг-кг"1) внутримышечно. Такая комбинация обеспечивала наркоз достаточной глубины и продолжительности.
В ходе эксперимента животные были разделены на следующие основные группы:
I. Собаки, перенесшие 7-или 10-минутную клиническую смерть с последующим оживлением и восстановительным периодом, протекающим в нормо-термических условиях.
II. Контрольные (без воспроизведения клинической смерти и реанимации) животные с искусственно созданной глубокой КЦГ.
III. Собаки, которым после 10-минутной клинической смерти и проведенных реанимационных мероприятий в восстановительном периоде создавали глубокую КЦГ.
Животные каждой группы дополнительно разделялись на погибших в течение первых суток и выживших по окончании эксперимента (третьи сутки).
Кроме этого, эксперимент был разделен на следующие этапы:
1) исход (до начала кровопотери)
2) охлаждение до уровня средней гипотермии
3) охлаждение до уровня глубокой гипотермии
4) согревание до уровня средней гипотермии
5) согревание до исходной температуры
6) первые сут. постреанимационного периода
7) третьи сут. постреанимационного периода.
После наркотизации у животных обнажали бедренные артерию и вену, через которые катетеризировали гибкими полихлорвиниловыми катетерами брюшную аорту и заднюю полую вену. Для предотвращения свертывания крови в ходе эксперимента внутривенно вводили гепарин (500 ЕД/кг массы).
При изучении показателей углеводного обмена использовали методы, являющиеся наиболее точными и высокоспецифичными. Концентрацию глюкозы определяли ортотолуидиновым методом [2]. Фотометрически регистрировали интенсивность окрашивания раствора вещества, образующегося при нагревании ортотолуидина с глюкозой в присутствии уксусной кислоты. Значения концентрации глюкозы (ммоль-л ') находили на калибровочном графике, построенном с использованием стандартных растворов [5].
Концентрацию молочной кислоты определяли энзиматическим методом [6], основанном на дегидрировании лактаталактатдегидрогеназой в присутствии никотинамидадениндинуклеотида (НАД), О количестве молочной кислоты судили по оптической плотности восстановленного НАД.
Содержание пировиноградной кислоты (ПВК) определяли по описанному методу [ 1 ]. Принцип метода заключается в реакции пировиноградной кислоты с 2,4-динитрофенилгидразином (ДНФГ), в результате которой образуется гидразон, дающий со щелочью соединения коричнево-красного цвета. Интенсивность окраски определяли фотометрически. Содержание ПВК (ммоль-л1) рассчитывали по калибровочной кривой, построенной на стандартных растворах пирувата натрия.
Об активности ЛДГ, определяемой колориметрически, судили по степени образования ПВК в щелоч-
ной среде. Полученные в эксперименте данные обработаны методами вариационной статистики с использованием персонального компьютера и программ CCS и Statistikal Graphics System. Сравнение экспериментальных групп проводили по t-крите-рию Стьюдента. Поскольку применение параметрических критериев при выраженной асимметрии распределения результатов может привести к ошибочным выводам, в экспериментальной реаниматологии важно определить форму распределения индивидуальных признаков, что позволяет выбрать адекватные статистические тесты математической обработки и установить основные причины, оказывающие влияние на их колебания. В связи с этим в нашем исследовании также использовались непараметрические критерии Вилконсона-Манна-Уитни (U), точного метода Фишера (ТМФ), Розенбаума (О), Вальда-Вольфовица (Z). В ряде случаев проводилось определение линейной или ранговой корреляции [3, 4].
Результаты исследований показателей углеводного обмена представлены в таблицах 1-3.
Максимальное увеличение содержания глюкозы наблюдалось во всех группах на момент средней гипотермии, затем происходило постепенное снижение концентрации. Однако у погибших животных этот процесс протекал более медленно и уровень глюкозы на этапе окончательного согревания превышал таковой у выживших животных в I группе на 13% (р = 0,282), а в III группе на 19% (р = 0,068). При этом концентрация глюкозы у выживших животных в I и III группах на этом этапе превышала данный показатель II группы с достоверностью р = 0,066 и р = 0,011 соответственно. На третьи сутки концентрация глюкозы в I группе достоверно превышала исходные показатели (р = 0,028) и показатели II группы (р = 0,003). Концентрация глюкозы у животных III группы практически не отличалась как от исходных величин, так и от данных II группы.
Содержание молочной кислоты у животных I группы (как у выживших, так и у погибших) максимально увеличилось к этапу средней гипотермии, составив соответственно 294% и 304% от исходных величин. В последующем наблюдалось снижение уровня МК, однако на момент окончательного согревания его уровень превышал исходные значения у выживших на 74% (р<0,001), а у погибших на 109% (р<0,001). На первые и третьи сутки постреанимационного периода концентрация МК в этой группе существенно не отличалась от исходной. Во II группе максимальное увеличение наблюдалось на момент согревания до + 29 °С и составило 285% от исходного (р<0,001). В дальнейшем содержание МК снижалось, превышая, однако, исходный уровень к окончанию эксперимента на 17% (р<0,001). В III группе животных наблюдались изменения, подобные таковым во II группе. Однако к окончанию эксперимента концентрация МК превышала исходный уровень на 32% (р<0,001). Причем содержание молочной кислоты у погибших животных превысило таковое у выживших на первые сутки постреанимационного периода на 69% (р = 0,002).
Максимальная концентрация пировиноградной кислоты в сыворотке крови у животных I группы наблюдалась у выживших на этапе глубокой гипотермии, а у погибших на этапе согревания до +29 °С. К этапу окончательного согревания содержание ПВК снизилось в той и другой подгруппах, но оставалось достоверно выше исходной (р<0,001 ир<0,001 соответственно). На первые и третьи сутки количество ПВК уменьшилось до значений ниже исходных,
Показатели Этапы эксперимента
исходные средняя гипотермия глубокая гипотермия
I группа II группа III группа I группа II группа III группа I группа 11 группа III группа
Глюкоза 6,81±0,03 6,74±0,03 0,78+0,03 10,21±0,14 9.09±0,30 11,80+0.28 9,85±0,19' 8.90±0,40' 11,4410,32
6,6010,11 ; 6,7710,05 11,0±0,2' 11,810,3' 10.7±0,2 11,410.3
Лактат 1,62+0,02 1,72±0,02 1,76±0,04 4,76±0,07* 2,8110,08 6,19+0,11' 4,55±0,08 3,77+0,03 6,4810,09
1,82+0,03 1,89x0,12 5,5410,1* 6,910,1' 5,5210,06' 6,4810,1
Пируват 0,118±0,003 0,117±0,002 0,121±0,003 0,19510,005 0,129±0,00В 0,22710,005' 0,217±0,009' 0,180±0,007' 0,243+0,004
0,130±0,002 0,12810.005 0,223:0,003 0,229+0 007' 0,23610,003 0,227+0,008'
МК/ПВК 13,7±0,2 14,7±0,3 14,6±0,3 24,510,4* 22,412,2 27,2±0,3' 21,1 ±0,6' 21,1±0,7' 26,310,4
; 14,0±0.14 - 14.810,64 ■ 24.910,3 30,211.6 23,410,3" 31,4+2,0'
лдг 2,069±0,64 2,04±0.44 2,78±0,38 6,3010,92 3,66±0,58 5.72+0,69 6,51±0,99' 2,96±0,78 8,74±1,36'
3,3510,86 3.87*1,58 10,2±1,74' 88912.28 10,312,3 13,413,7
Таблица2
Показатели Этапы эксперимента
исходные согревание до + 29 °С согревание до + 36 °С
I группа II группа III группа I группа II группа III группа I группа II группа III группа
Глюкоза 6,В1±0,03 6,74+0,03 6,7810,03 8,9210,39' 8,4510,50" 10,1210,30' 8.75±0,22' 7,9610,40' 9,04+0,36
6,6010,11 6,7710 05 10,110,2' , 10,510,6' 9,710,3 9,810,6'
Лактат 1.6210,02 1,7210,02 1.7610,04 4,2810,07 4,9010,04 6,57±0,26 2,8210,04' 4,5810,04 5,9110,28
1,81210,03 1.8910,12 5.2710,07' 7,5010,21' 3,8110,08' :. 6,9010,18'
Пируват 0.11810,003 0,11710,002 0,121+0,003 0,205+0,004 0,18910,002 0,25610,004 0,14610,001 0,23310.003 0,25710,003
0,13010,002 0.12810.005 0,23910,004' 0,24710,016' 0,19210,004 0,25410,022
МК/ПВК 13,7+0,2 14,710,3 14,610,3 20,910,2' 25,910,3' 25,810,3 19,310,1' 19,410,2' 22,810.3
14,0+0,1 14,810,6 22,010,3' 30,912.8' 19,8+0,2' 27,812,4'
лдг 2,06910,64 2.0410,44 2,7810,38 5,1610,55 3,2310,58 6.2310.87' 5.5510,81' 3,52+0,40 6,9610.05
3,3510,86 3,8711,58 : 10,412,1' 12,813,9 10,212,2' 11,513,5
Таблица 3
Показатели Этапы эксперимента
исходные первые сутки третьи сутки
I группа II группа III группа I группа II группа III группа I группа 11 группа III группа
Глюкоза 6,8110.03 6,7410,03 6,78+0,03 7,5710,20' 6.6510.16 7,4910.29' 6.96+0.05' 6,6510,006 6,90+0.14
6,6(Н0,1Г 6,7?±0,05 8,8410,7'
Лактат 1,6210,02 1,7210,02 1,7610,04 1,5210,12 2,8010,05 3,69+0,19' 1,5510,03 2,0110,03' 2,3210,04
1,8210,03 1,8910,12- 5,2710.16'
Пируват 0,118+0,003 0,11710,002 0,12110,003 0,104+0,008 0,22310,003' 0,21710,011' 0,11010,002' 0,16810,002' 0,16410,040
0.13010,002 0,12810,005 0,23210,008
МК/ПВК 13,710,2 14,710,3 14,610,3 14,710,4 12,610,3' 17,0+0,4' 14,110,2' 11,910.3' 14,2+0,4'
14010,1 14,В±0,6 22.811,1'
ЛДГ 2,06910,64 2,04+0,44 2,7810,38 4,5710,72 3,521,056 4,54+0,08 4,0710,7В 3,5211,76 5,7510,79'
. 3,3510,86 3,87+1,58 5.5210,71
Выжившие животные Погибшие животные
составив к окончанию эксперимента 93% (р = 0,040). Во II группе максимум содержания ПВК наблюдался на этапе окончательного согревания (199% от исходного), в дальнейшем произошло понижение концентрации, однако на третьи сутки концентрация ПВК превышала исходный уровень на 41% (р<0,001). В опытной группе после максимального увеличения на этапе окончательного согревания (в обеих подгруппах) некоторое снижение произошло на первые сутки, а на третьи сутки уровень ПВК остался выше исходного на 36% (р <0,001).
Отношение молочной кислоты к пировиноград-ной у выживших и погибших животных I группы максимально увеличилось уже на этапе средней гипотермии (на 79%, р<0,001 ина78%, р<0,001 соответственно). В дальнейшем происходило снижение, составившее на первые сутки 107% (р = 0,054) от исходного, а на третьи сутки 103% (р = 0,184) от исходного. Во II группе соотношение увеличилось на этапе средней гипотермии на 52% (р = 0,006) и оставалось достоверно выше исходного до этапа окончательного согревания (р<0,001). На первые сутки показатель МК/ПВК был ниже исходного на 15% (р = 0,001), ана третьи сутки на 19% (р<0,001). В опытной группе после максимума на этапе средней гипотермии соотношение постепенно снижалось, оставаясь на первые сутки выше исходного у выживших на 17% (р<0,001), а у погибших на 7% (р = 0,001). Причем на этом этапе МК/ПВК у выживших достоверно ниже (р<0,001), чем у погибших. На третьи сутки соотношение вернулось к исходным значениям, хотя остается достоверно выше (р = 0,002), чем у животных II группы.
Активность лактатдегидрогеназы уживотных I группы (выживших и погибших) достигла максимума на этапе глубокой гипотермии (242% и 307% от исходной соответственно). На этапе окончательного согревания у погибших животных активность ЛДГ практически не изменилась (306% от исходной), а у выживших снизилась на 36%, оставаясь достоверно выше исходной (р = 0,011). На третьи сутки активность ЛДГ была выше исходной на 51% (р = 0,181). У животных II группы активность АДГ увеличилась на этапе средней гипотермии на 79% (р = 0,055) и значительно не изменилась до конца эксперимента, составив на третьи сутки 173% от исходной (р = 0,268). Активность
ЛДГ у животных III группы изменялась подобно таковой в I группе, однако к окончанию эксперимента оставаясь достоверно выше исходной (р = 0,005).
Таким образом, гипоксические нарушения, развивающиеся при терминальных состояниях и в восстановительном периоде после оживления, в значительной степени нивелируются при использовании глубокой гипотермии вследствие менее выраженного анаэробного окисления, что ускоряло темпы неврологической реабилитации. Развивающиеся в постреанимационном периоде гипоксические нарушения висцеральных функций в значительной степени нивелируются при глубокой краниоцеребраль-ной гипотермии вследствие менее выраженного анаэробного окисления. Гиперлактацидемия при искусственном охлаждении организма, нормализующем кислотно-щелочное равновесие в постреанимационном периоде, имеет негипоксическую природу.
Библиографический список
1. Бабаскин П.М. Метод определения пировиноградной кислоты в крови // Даб. дело. — 1976. — № 3. — С. 497.
2. Голиков Ю.И. К вопросу об определении сахара крови О-толуидиновым методом // Ааб. дело. — 1975. — № 5. — С. 293-295.
3. Гублер Е В. Вычислительные методы анализа и распознавания патологических процессов. — Л.: Медицина, 1978. — 295 с.
4. Гублер Е.В., Генкин Е.В. Применение непараметрических критериев статистики в медико-биологических исследованиях. - Л.: Медицина, 1973. — 143 с.
5. Колб В.Г., Камышников B.C. Клиническая биохимия. — Минск: Беларусь, 1976. — 311 с.
6. Hohorst H.-J. L — ( + )-Lactat. Bestimmung mit Lactal-dehydrogenase und NAD // Methoden des enzymatischen Analyse / Hrag. H.U.Bergmeyer. - Berlin: Akademie-Verlag. - 1970. -Bd. 2. - S. 1425-1429.
СЕМОЧКИН Анатолий Викторович, кандидат медицинских наук, доцент кафедры химии.
Статья поступила в редакцию 17.05.06 г. © Семочкин А. В.
Книжная полка
Бессарабов В.Ф. Незаразные болезни птиц: Учебник для вузов. -М.: КолосС, 2007. - 175 с. (Учебники и учебные пособия для студ. высш. учеб. заведений).
Ганиев М.М., Недрезков В.Д., Шарипов Х.Г. Вредители и болезни зерна и зернопродуктов при хранении: Учеб.пособие для вузов. - Ува: БГАУ, 2007. - 255 с.
Генофонды сельскохозяйственных животных: Генетические ресурсы животноводства России / Отв. ред. И.А. Захаров. - М.: Наука, 2006. -462 с.
Каплин В.Г., Перцева Е.В., Антонов П.В. Скрытоживущие насекомые - вредители злаковых культур. - М.: Наука, 2007. - 231 с.
Криволапчук Н. Собака + целитель: Как воспитать своего домашнего доктора. - СПб.: Невский проспект, Вектор, 2007. - 332 с.
УДК 377:1.619:612.11:613.9:546.24:636.92
Н.А. ПОНОМАРЕВА И. П. СТЕПАНОВА И. В. КОНЕВА
Омский государственный аграрный университет
К ВОПРОСУ
О ТОКСИЧЕСКОМ ДЕЙСТВИИ ТЕЛЛУРА НА ЖИВОТНЫЙ ОРГАНИЗМ_
Показано в эксперименте, что при хронической интоксикации кроликов теллуром нарушается детоксицирующая, белоксинтеэирующая, экскреторная функции печени; осмо-регулирующая, экскреторная функции почек; наблюдаются деструктивные изменения в паренхиматозных органах.
Теллур — микроэлемент, содержащийся в растительных кормах сельскохозяйственных животных, способен в высоких концентрациях оказывать токсическое действие на животный организм. Однако сведений о механизме этого влияния в литературе недостаточно. Так, отсутствуют данные о токсических эффектах теллура на печень и почки — органы, обладающие наибольшей способностью аккумулировать данный элемент. В связи с этим целью исследования явилось изучение влияния токсической дозы теллура на биохимические показатели крови, пато-логоанатомические и гистологические изменения органов кроликов в эксперименте для профилактики заболеваний сельскохозяйственных животных, связанных с избытком или недостатком этого микроэлемента.
Материалы и методы
Научный эксперимент по изучению воздействия высоких концентраций теллура на живой организм проведен на кроликах породы советская шиншилла в возрасте 6 месяцев массой 3,5+3,8 г. Кролики содержались в стандартных условиях вивария на рационе, соответствующем возрасту (овес — 60 г, отруби пшеничные — 25 г, жмых подсолнечника — 40 г, сено кострецовое — 90 г, корнеплоды — 270 г) [А.П. Калашников, 1994]. Животным 1-й группы (п = 5) ежедневно перорально во время утреннего кормления вводилась токсическая доза теллура 1/4 иЭ50 (40 мг на кг массы) в виде оксида теллура (IV), согласно рекомендациям К.Н. Тереверко (1991). Контролем (п - 5) служила 2-я группа кроликов, получавшая тем же путем вместо диоксида теллура воду (рис. 1).
Влияние теллура изучалось в суточной динамике, для чего кровь животных двух групп исследовалась через 7, 14 и 21 сутки после введения токсического агента согласно рекомендациям А.О. Войнера (1960). Кровь для исследования бралась из краевой вены уха кролика утром до кормления. Содержание общего белка, мочевины, креатинина, билирубина сыворотки крови, активность ферментов аспартатами-нотрансферазы (АсАТ) и аланинаминотрансферазы (АлАТ) сыворотки крови определялось с помощью биохимического анализатора «Хумолайзер» (Германия) . Концентрация белковых фракций сыворотки крови исследовалась турбидиметрическим методом [ 1), значения тимоловой пробы определялись по Ху-
эрго и Попперу [1], содержание ионов натрия и калия плазмы крови — с помощью ионоселективного метода.
Состояние свободнорадикальных процессов и антиоксидантной системы изучалось методом пер-оксиджелезозависимой хемилюминесценции с помощью биохемилюминометра БХЛ-06М [4]. Интенсивность пероксидации липидов оценивалась светосуммой вспышки хемилюминесценции сыворотки крови за 30 с (ед./ЗОс), а антиоксидантная активность — относительными единицами тангенса угла наклона кинетической кривой хемилюминесценции (отн.ед).
Также проводилось патологоанатомическое и гистологическое исследование печени, почек, желудка, двенадцатиперстной кишки, селезенки, сердечной мышцы, которые были выполнены совместно с канд. вет. наук, доцентом кафедры патологической
Рис.1. Схема исследований
