CC BY
33
Физиология и иммунология Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского, 2012, № 2 (3), с. 271-274
УДК 577.27
ВЛИЯНИЕ ВАКЦИНЫ «ПНЕВМО 23» НА СПЕКТР И ПРОДУКЦИЮ РАСТВОРИМЫХ ФАКТОРОВ АУТОИММУНИТЕТА
© 2012 г. А.В. Матвеичев1, Е.В. Мохонова1, З.И. Никитина1,
В.Н. Коптелова1, Е.А. Коршунова2
1 Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной 2 Нижегородский областной центр крови им. Н.Я. Климовой
aleksei_matveichev@list.ru
Поступила в редакцию 03.04.2012
Оценено влияние вакцины «Пневмо 23» на спектр и продукцию растворимых факторов аутоиммунитета у вакцинированных. Использовались методы твердофазного иммуноферментного анализа и реакции пассивной гемагглютинации. Обнаружена повышенная продукция ^М к нативной ДНК, ^М и IgG к кардиолипину при отсутствии признаков клинически значимых аутоиммунных патологий.
Ключевые слова: иммунология, вакцинация, аутоиммунитет, антитела.
Введение
Искусственная индукция иммунитета к инфекционным агентам с помощью введения вакцин является одним из подходов, в корне изменивших практическое здравоохранение. Вакцинация позволяет заранее «проинструктировать» иммунную систему реципиента, фактически запустив первичный иммунный ответ на патоген до встречи с его носителем. Таким образом, в случае успеха вакцинации, к моменту контакта человека с болезнетворным микроорганизмом формируется полноценная иммунологическая память, позволяющая пресечь развитие заболевания. Особенно актуальной является вакцинация для организованных коллективов, где постоянное нахождение большого числа людей в близком контакте друг с другом создает благоприятные условия для распространения инфекционных заболеваний.
Однако именно потому, что вакцинация является мощным стимулирующим сигналом для иммунной системы, требуется особенно тщательная проверка безопасности вакцин. На данный момент известны отдельные клинические случаи, когда у ранее здоровых лиц, получивших вакцины, развивались патологические состояния аутоиммунного генеза, а также экспериментальные животные модели, в которых показана принципиальная возможность индукции аутоиммунитета в связи с вакцинацией [1, 2]. Указанные данные ни в коем случае не подвергают сомнению ценность вакцин как эффективнейшей меры профилактики инфекционных заболеваний, однако не позволяют недооценивать важность критической оценки эффектив-
ности и безопасности вакцинных препаратов, а также вызываемых ими изменений аутоиммунитета [3].
Среди организованных коллективов широко и полно охватываются вакцинацией воинские коллективы, особенно учебные для молодого пополнения и выполняющие служебные обязанности на территориях, имеющих подтвержденные очаги инфекционных заболеваний. Эффективность и важность вакцинации таких коллективов доказана исследованиями как отечественных, так и зарубежных авторов [4, 5], однако существует ряд новейших работ, в которых предполагается, что введение большого числа вакцин за короткий период времени, что характерно для вакцинации военнослужащих, может иметь ряд негативных последствий [2]. Таким образом, исследование статуса аутоиммунитета именно воинских коллективов становится особенно актуальным.
Цель нашей работы - оценка спектра и уровня продукции растворимых факторов аутоиммунитета у лиц, вакцинированных вакциной «Пневмо 23».
Материалы и методы
Объектами исследования стали сыворотки крови клинически здоровых лиц организованного военного коллектива (средний возраст 19.48±0.2 лет, п = 54), получивших вакцинацию вакциной «Пневмо 23». В качестве контроля использовались сыворотки лиц, не получавших как «Пневмо 23», так и любых других вакцин в течение последних 2 лет, клинически здоровых, ранее не служивших в вооруженных силах, имеющих воз-
Рис 1. Общее содержание растворимых факторов аутоиммунитета в сыворотках крови контрольной группы и вакцинированных. Обозначение столбцов - согласно легенде
- достоверные отличия между группами вакцинированных и невакцинированных,р < 0.05
раст, соответствующий возрасту исследуемых военнослужащих (средний возраст 20 лет, п = 24).
В сыворотках опытной и контрольной групп оценивали содержание следующих факторов аутоиммунитета: аутоантител к нативной ДНК (анти-ДНК) классов 1§М и IgG, аутоантител к кардиолипину (анти-КЛ) классов ^М и IgG, ревматоидного фактора (РФ) и аутоантител к тиреоглобулину (анти-ТГ). Содержание анти-ДНК и анти-КЛ оценивали с помощью экспериментальных серий ИФА-диагностикумов, разработанных коллективом лаборатории, результат выражали в виде индекса: ОБ
образца/ОБ внутреннего контроля (средняя ОБ клинически здоровых доноров крови различных возрастных групп, п = 100), содержание РФ и анти-ТГ определяли с помощью экспериментальных серий РПГА-диагностикумов, результат выражали как логарифм титра, при котором выявлялись исследуемые факторы. Проводилась оценка как общего содержания данных факторов, так и их изменения в динамике, в зависимости от времени, прошедшего с момента вакцинации.
Результаты и обсуждение
Оценка общего содержания исследуемых факторов показана на рис. 1. Как можно видеть из рисунка, в содержании аутоантител к кар-диолипину и нативной ДНК выявлялись достоверные различия: индекс содержания ^М к нативной ДНК у вакцинированных был выше в 1.13 раза (р < 0.05), чем у контрольной группы, индексы содержания ^М и IgG к кардиолипину
- в 1.26 и 1.27 раза соответственно (р < 0.01). Различия не были выявлены только в индексе содержания 1§0 к нативной ДНК. Содержание
ревматоидного фактора и аутоантител к тиреоглобулину у контрольной группы и группы вакцинированных лиц было равным: РФ в контрольной группе - медиана 0, 25-й процентиль -
0, 75-й процентиль - 1.602, в группе вакцинированных - медиана 1.301, 25-й процентиль - 0, 75-й процентиль - 1.602; анти-ТГ в контрольной группе - медиана 0, 25-й процентиль - 0, 75-й процентиль - 1, в группе вакцинированных
- медиана 0, 25-й процентиль - 0, 75-й процен-тиль - 1. Учитывая асимметричность распределения, для оценки статистической значимости различий был использован критерий Манна-Уитни.
Во второй части исследования группа вакцинированных лиц была разбита на подгруппы по времени, прошедшему с момента введения вакцины. Были выделены 4 временных интервала: 20 суток (п = 16), 55-75 суток (п = 8), 96109 суток (п = 12) и 153 дня (п = 13) с момента вакцинации. Лица, вакцинированные в сроки, отличные от указанных, в состав групп не вошли. Данные по изменениям содержания исследуемых факторов во времени представлены на рис. 2.
Как можно видеть, содержание антител класса ^М к нативной ДНК испытывало определенную тенденцию к повышению со временем, которая, тем не менее, не была статистически подтверждена. Статистически достоверные различия, как указывалось, были отмечены лишь при анализе всей выборки вакцинированных, не разбитой на группы. В содержании аутоантител класса IgG, наоборот, выявлялись четко видимые различия с контрольными значениями, выражавшиеся в достоверном повышении значения индекса содержания, начиная со срока 96-109 дней после вакцинации
ё
ч
дней
дней
І
дней
дней
Рис. 2. Динамика изменения уровней анти-ДНК и анти-КЛ: а - изменение уровней анти-ДНК; б - изменение уровней анти-КЛ.
▲ - содержание ^М в контрольной группе, - содержание в контрольной группе, ♦ - содержание ^М в группе вакцинированных, ■ - содержание в группе вакцинированных. ■&- достоверные отличия вакцинированных и не-вакцинированных, р < 0.05, - достоверные отли-
чия вакцинированных и невакцинированных, р < 0.01
(р < 0.05). К сроку 153 дня с момента вакцинации содержание аутоантител сохранялось на прежнем повышенном уровне (М = 2.2±0.07 в группе вакцинированных, М = 1.91±0.18 в группе контроля, р < 0.05) (рис. 2а).
Заметные изменения отмечались в содержании аутоантител против кардиолипина. Как ^М, так и ^О-аутоантитела, начиная с первой временной точки (20 суток), содержались у вакцинированных лиц в повышенной концентрации (индекс содержания 1.94±0.045 для 1§М и 1.8±0.07 для в группе вакцинированных против 1.65±0.09 и 1.56±0.09 группы контроля, р < 0.05). В дальнейшем уровень обоих классов аутоантител сохранялся у вакцинированных на таком же уровне вплоть до конечной точки измерения, испытывая некоторые отклонения.
Отличия от значений контрольной группы были достоверны для всех 3 остальных временных точек, при этом уровень значимости повышался до p < 0.01 (рис. 2б).
Как можно видеть из приведенных данных, вакцинированные участники эксперимента ответили на вакцинацию активацией иммунной системы, и в том числе - изменением аутоиммунного гомеостаза. По данным последних исследований, подобный феномен не является уникальным
- так, в работах Perdan-Pirkmaer et al. [б] и Vista et al. [1] показано, что введение вакцины против штамма гриппа H1N1 и сезонного гриппа может приводить к временному повышению уровня антител против фосфолипидов как у здоровых лиц, так и у лиц, страдавших на момент вакцинации аутоиммунными заболеваниями. Не умаляя достоинств вакцинации, авторы исследования [6] рекомендуют тщательное наблюдение за лицами, у которых было отмечено повышение факторов аутоиммунитета. Механизм индукции авторы связывают с возможным действием адьювантов.
Иностранные авторы на данный момент считают введение полисахаридной пневмококковой вакцины безопасным [8], не ассоциированным с повышением продукции растворимых факторов аутоиммунитета [9]. Однако стоит отметить, что данные работ выполнены с вовлечением людей, страдающих аутоиммунными заболеваниями (ревматоидный артрит и системная красная волчанка). Данные о безопасности 23-валентной вакцины для лиц, не имеющих заболеваний аутоиммунного генеза, не включают в себя измерение уровней продукции аутоантител. В проведенном же нами исследовании образование аутоантител как M, так и G классов, направленных против кардиолипина, происходит в течение короткого промежутка времени с момента вакцинации, не превышающего 20 суток, после чего уровни анти-КЛ остаются неизменными. Появление анти-ДНК IgG происходило спустя примерно 2.5 месяца от начала вакцинации, нарастая в указанный срок в 1.15 раза, после чего концентрация сохранялась до последней временной точки исследования включительно. На данный момент мы не можем сделать однозначный вывод о времени сохранения повышенных концентраций анти-ДНК IgG и обоих субклассов антител к кардиолипину, так как по прошествии 6 месяцев (конечная точка наблюдения) с начала исследования военнослужащие выбывали из него в связи с переводом в другие части или увольнением в запас. Тем не менее, срок в 6 месяцев представляется нам достаточным для того, чтобы говорить о долговременном сохранении повышенных концентраций анти-КЛ.
Наблюдаемое нами повышение уровней аутоантител не было ассоциировано со значительными клиническими проявлениями - ни один из исследованных военнослужащих не был госпитализирован после вакцинации и в связи с пост-вакцинальными осложнениями. Таким образом, можно заключить, что, несмотря на наличествующие изменения аутоиммунного гомеостаза, введение «Пневмо 23» не приводит к каким-либо клинически выраженным аутоиммунным реакциям. Также следует отметить, что, несмотря на статистическую значимость, абсолютные значения превышения содержания аутоантител в крови вакцинированных не высоки. Однако выявление данных превышений не позволяет игнорировать затронутую тему и требует продолжения исследований.
Авторы благодарят коллектив лаборатории микробиологии Нижегородского НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной и его руководителя проф. В.А. Никифорова за неоценимую помощь в получении материала, а также коллектив лаборатории клеточной иммунологии и его руководителя проф. В.Ю. Талаева за дружескую поддержку в ходе выполнения работы.
Список литературы
1. Salemi S., D’Amelio R. Vaccinations and autoimmune diseases // Int. Rev. Immunol. 2010. V. 29. P. 239-246.
2. Shonfield Y., Agmon-Levin N. ‘ASIA’ - Autoimmune/inflammatory syndrome induced by adjuvants // J. Autoimmun. 2011. V. 36. P. 4-8.
3. Berkun Y., Mimouni D., Shoenfeld Y. Pemphigus following hepatitis B vaccination-coincidence or causality? // Autoimmunity. 2005. V. 38 (2). P. 117-119.
4. Сабанин Ю.В. Вакцинопрофилактика акту-
альных инфекций в системе противоэпидемических мероприятий во внутренних войсках МВД России. Дис. ... д-ра мед. наук, М.: ГУ НИИЭМ им.
Н.Ф. Гамалеи РАМН, 2009. 283 c.
5. Ziemba R. Directions and opportunities for im-munoprophylaxis development among Polish Army soldiers sent to foreign missions // Med. Sci. Monit. 2011. V. 17 (12), SR. 43-52.
6. Perdan - Pirkmajer K., Thallinger G.G., Snoj N. et al. Autoimmune response following influenza vaccination in patients with autoimmune inflammatory rheumatic disease // Lupus. 2012. V. 21 (2). P. 175-183.
7. Vista E.S, Crowe S.R, Thompson L.F. et al. Influenza vaccination can induce new-onset anticardi-olipins but not p2-glycoprotein-I antibodies among patients with systemic lupus erythematosus // Lupus. 2012. V. 21 (2). P. 168-174.
8. Rahier J-F., Moutschen M., Van Gompel A. et al. Vaccinations in patients with immune-mediated inflammatory diseases // Rheumatology. 2010. V. 49. P. 18151827.
9. Elkayam O., Paran D., Burke M. et al. Pneumococcal vaccination of patients with systemic lupus erythematosus: Effects on generation of autoantibodies // Autoimmunity. 2005. V. 38 (7). P. 493-496.
THE INFLUENCE OF «PNEUMO 23» VACCINE ON THE SPECTRUM AND PRODUCTION OF SOLUBLE AUTOIMMUNITY AGENTS
A. V. Matveichev, E. V. Mokhonova, Z.I. Nikitina,
V.N. Koptelova, E.A. Korshunova
The influence of «Pneumo 23» vaccine on the spectrum and production of soluble autoimmunity agents in vaccinated people has been assessed. The methods used were Elisa and passive hemagglutination reaction. Elevated levels of IgM anti-DNA as well as IgG and IgM anticardiolipin antibodies have been detected in the absence of clinically significant autoimmune pathologies.
Keywords: immunology, vaccination, autoimmunity, antibodies.
