CC BY
13УДК 619: [616.988:576.31]: 636.52 /.58
ВЛИЯНИЕ ВАКЦИНАЦИИ ПРОТИВ НЬЮКАСЛСКОЙ БОЛЕЗНИ НА МОРФОМЕТРИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ И СТРУКТУРУ ИММУННЫХ ОРГАНОВ У ЦЫПЛЯТ
Лукашик Г. В., кандидат ветеринарных наук, доцент;
Академия биоресурсов и природопользования ФГАОУ ВО «КФУ имени В. И. Вернадского»
Проводили морфометрические и морфологические исследования иммунных органов цыплят кросса Хайсекс 3-, 35- и 70-суточного возраста до и после проведения первого этапа аэрозольной и второго этапа внутримышечной вакцинации против Ньюкаслской болезни. Материал для исследований отбирали через 12-суток после первой вакцинации и спустя 13 суток после второй. Первый этап вакцинации проводили с использованием сухой лиофилизированной вакцины из штамма «С1оп-30», второй -с использованием инактивированной эмульгированной вакцины против Нью-каслской болезни (НБ), инфекционного бурсита кур (ИБК), и синдрома снижения яйценоскости (ССЯ-76). Морфологически исследовали клоакальную сумку, селезёнку, тимус. Использовали морфологические методики: анатомическое препарирование, морфометрию, изготовление гистологических срезов, окрашенных гематоксилином и эозином с последующей световой микроскопией. Установили закономерное возрастное увеличение живой массы цыплят, абсолютной массы клоакальной сумки,
INFLUENCE OF VACCINATION AGAINST NEWCASTLE ILLNESS ON MORPHOMETRIC PARAMETERS AND STRUCTURE OF IMMUNE ORGANS IN CHICKENS
Lukashik G. V., Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor; Academy of Life and Environmental Sciences FSAEI HE «V. I. Vernadsky Crimean Federal University»
Conducted morphometric and morphological researches of immune organs of chickens of a cross-country of Haseks of the 3-, 35- and 70-day age before carrying out the first stage aero-solic and the second stage of intramuscular vaccination against illness of Newcastle. Material for researches was selected in 12 days after the first vaccination and 13 days later after the second. The first stage ofvaccination was carried out with use of the dry lyophilized vaccine from the strain "Clon-30", the second - with use of the inactivated emulsified vaccine against the illness of Newcastle (IN), the infectious bursitis of hens (IBK), and a syndrome of depression of a yaytsenoskost (CCYA-76). Morphologically investigated a kloakalny bag, a lien, a thymus. Used morphological techniques: anatomic preparing, a morphometry, production of the microscopic sections painted by a hematoxylin and eosine with the subsequent light microscopy. Established natural age augmentation of live mass of chickens, absolute mass of a kloakalny bag, lien, thymus. Appreciable
селезёнки, тимуса. Выявлены значительные колебания морфометрических и морфологических параметров иммунных органов цыплят и чёткие реактивные сдвиги в поствакцинальный период. Установлено повышение индексов иммунных органов. Наблюдали увеличение длины лимфоидных узелков клоакальной сумки и толщины её корковой зоны, утолщение корковой зоны тимуса, сужение мозгово-коркового соотношения и соответственно и повышение индекса иммунных органов.
Ключевые слова: цыплята, тимус, клоакальная сумка, селезёнка, Ньюкаслская болезнь, вакцинация, морфометрия, морфология.
fluctuations of morphometric and morphological parameters of immune organs of chickens and accurate reactive shifts during the postvaccinal period are taped. Rising of indexes of immune organs is established. The augmentation of length of lymphoid nodules of a kloakalny bag and thickness of its cortical zone, a thickening of a cortical zone of a thymus, narrowing of a cerebral and cortical ratio and respectively and rising of an index of immune organs is observed.
Keywords: chickens, thymus, kloakalny bag, lien, illness of Newcastle, vaccination, morphometry, morphology.
Введение. Птицеводство во всех странах мира развивается стремительными темпами и возрастает не только по объёмам производства мяса и птицы, но требуется и обеспечение новой качественной основы, необходимой для определения им-мунорезистентного состояния птицы на ограниченной площади с целью прогнозирования и предупреждения заболеваний [1]. Для исследования иммунного ответа организма кур на вакцинацию против Ньюкаслской болезни необходимо прежде всего сведения о морфо-функциональном состоянии имммунных органов [2, 3].
Гибель и выбраковка кур от Ньюкаслской болезни в настоящее время незначительны, но однако существует высокая потенциальная опасность её возникновения и распространения, которая может способствовать огромным экономическим потерям не только в хозяйстве, но и в регионе. Экономический ущерб, наносимый данным заболеванием, в значительной мере уменьшается при условии разработки схемы и сроков последовательных профилактических мероприятий поголовья кур против Ньюкаслской болезни [4].
Ньюкаслской болезнь - опасное контагиозное заболевание, характеризующееся острым течением и быстрым распространением с поражением органов дыхания, аппарата пищеварения и центральной нервной системы, вызывая массовую гибель кур. У вакцинированных кур с ослабленным иммунитетом течение болезни может быть без чёткого выражения клинических и патологоа-натомических признаков [1-3].
Материал и методы исследований. Объект исследований - цыплята 3-, 35- и 70-суточного возраста яйценосной породы кросса Хайсекс.
Для морфометрических и морфологических исследований иммунных органов проводили убой цыплят: 3-суточного возраста до проведения вакцина-
ции против Ньюкаслской болезни (n=7), 35 - до осуществления первого этапа вакцинации (n=7), 35 - после иммунизации (n=7), 70 - до второго этапа вакцинации (n=7) 70 - после второго этапа внутримышечной вакцинации (n=7). Материал отбирали через 12 суток после первой вакцинации и спустя 13 суток -после второй. Первый этап вакцинации проводили аэрозольно, используя сухую лиофилизированную вакцину из штамма «С1оп-30»; второй - внутримышечно, вводя инактивированную эмульгированную вакцину против НБ, ИБК и ССЯ-76. Всего для исследования было вынужденно убито 35 цыплят. Определяли живую массу с анатомическим препарированием органов: клоакальная сумка, селезенка, тимус. Устанавливали абсолютную массу, измеряли длину, ширину и толщину селезенки и клоакальной сумки, а также длину тимуса. Изготавливали гистотопограммы, окрашивали гематоксилином и эозином и использовали световую микроскопию с помощью микроскопа «Микмед - 5. Определяли индексы абсолютной массы иммунных органов по формуле:
I = m/M *100,
где I - индекс исследуемого органа;
m - масса органа в мг;
М - масса тела цыплят в г.
Вычисляли морфофункциональный потенциал (МФП) лимфоидных узелков клоакальной сумки путем умножения длины лимфоидных узелков на ширину их коркового слоя и далее делением полученной величины на 100. Рассчитывали соотношение величины мозгового вещества к корковому веществу (МКС) в тимусе.
Результаты и обсуждение. Комплексом методик установили, что средняя масса 3-суточных цыплят составляет 75,23±4,21 г, в 35 - контрольной группы 99,00±2,42 г (увеличивается на 24,10%). Масса клоакальной сумки у цыплят контрольной группы 35-суточного возраста значительно отличается от таковой у 3-суточных цыплят, Масса органа увеличивается на 63,30%, длина на 49,80%, однако - ширина уменьшается на 21,80%. Абсолютная масса селезенки 35-суточных цыплят (до проведения вакцинации) составляет 0,32±0,04 г, что на 28,20% больше, чем у 3-суточных, а ширина на 16,70%, в то время как длина напротив уменьшается на 29,90%. Показатели абсолютной массы тимуса у цыплят контрольной группы 35-суточного возраста птицы выше на 66,60%, по сравнению с 3-суточными.
Параметры иммунных органов цыплят в 70-суточном возрасте существенно превышают данные показатели 35-суточных цыплят контрольной группы. Живая масса тела увеличивается на 85,50%, абсолютная масса клоакальной сумки - на 69,40%, тимуса - 86,60%, селезёнки - на 89,60% (табл. 1).
Клоакальная сумка у 35- и 70-суточных цыплят на дорсальной поверхности имеет продольную борозду. Стенка ее состоит из слизистой, мышечной и серозной оболочек. Слизистая оболочка образует 20 больших, средних и малых складок. В складках клоакальной сумки располагаются лимфоидные узелки. Количество лимфоидных узелков увеличивается с размером складок.
Периферическая часть лимфоидных узелков формирует корковую зону, заполненную образующимися малыми и средними лимфоцитами, которые располагаются циркулярно, и центральную - мозговую. Мозговая зона - светлее, с наличием здесь больших и средних лимфоцитов. Между лимфоидными узелками проходит рыхлая соединительная ткань. Длина лимфоидных узелков клоакальной сумки у 35-суточных цыплят увеличивается на 33,90% (с 165,80±8,00 до 221,0±8,13 мкм), а ширина уменьшается на 15,20% (с 42,70±2,26 и до 36,40±0,91 мкм). К 70-суточному возрасту у птиц по сравнению с 35 - параметры клоакальной сумки возрастают: длина лимфоидных узелков и ширина корковой зоны на 9,30% и 22,60% (табл. 2).
Таблица 1. Морфометрические параметры иммунных органов цыплят
Название органа Показатели Цыплята (возраст, сутки)
3- 35- 70-
Масса, цыплят, г 75,23±4,21 99,0±2,92 682,0±12,23
Клоакальная сумка Масса, г 0,18±0,01 0,49±0,03 1,6±0,09
Длина, см 0,85±0,05 1,69±0,10 1,81±0,13
Ширина, см 0,55±0,06 0,43±0,11 0,92±0,06
Тимус Масса, г 0,27±0,05 0,8±0,18 5,93±0,64
Длина левой доли, см 1,93±0,40 2,3±0,08 7,04±0,43
Длина правой доли,см 1,75±0,29 1,91±0,93 7,07±0,51
Селезёнка Масса, г 0,23±0,05 0,32±0,04 3,02±0,03
Длина, см 0,87±0,05 0,56±0,03 2,29±0,06
Ширина, см 0,65±0,05 0,78±0,09 1,37±0,18
Таблица 2. Особенности гистоархитектоники иммунных органов цыплят
Показатели Цыплята (возраст, сутки)
3- 35- 70-
Длина лимфоидных узелков клоакальной сумки, мкм 165,8±8,00 221,0±8,13 241,54±13,18
Ширина корковой зоны лимфоидных узелков клоакальной сумки, мкм 42,7±2,26 36,4±0,91 45,93±0,64
Ширина корковой зоны тимуса, мкм 74,12±2,02 50,15±0,74 56,14±0,21
Ширина мозговой зоны тимуса, мкм 19,62±0,68 35,92±1,20 34,18±0,24
Тимус у цыплят образован дольками из лимфоидной ткани, которые размещены на дорсолатеральной поверхности трахеи с 3 шейного позвонка до бифуркации плечеголовного ствола артерий. Каждая долька тимуса покрыта капсулой. От капсулы внутрь каждой дольки отходят соединительнотканные тяжи. В дольках различают корковую и мозговую зону.
К 35-суточному возрасту, ширина мозговой зоны увеличивается на 83,10% (19,62±0,68 и 35,92±1,20 мкм), а ширина корковой зоны уменьшается на 32,30%
(74,12±2,02 и 50,15±0,74 мкм). Через 35 суток ширина корковой зоны возрастает на 11,90% по сравнению с 35-суточными цыплятами, а ширина мозговой зоны тимуса уменьшается на 12,40%.
Селезенка птиц отличается по строению от селезенки млекопитающих. Орган покрыт соединительнотканной капсулой. Соединительнотканная строма селезенки развита очень слабо, образуя лишь наружную оболочку. Сравнительные данные по структурным изменениям иммунных органов представлены в табл. 3. Таблица 3. Иммуноморфологические показатели тимуса и клоакальной сумки цыплят
Группы цыплят, сутки Тимус Клоакальная сумка
Индекс абсолютной массы МКС (мозгово-корковое соотношение) Индекс абсолютной массы МФП (морфофункциональный потенциал)
3- 3,85±0,18 0,26±0,07 2,39±0,03 70,79±4,06
35- 8,08±0,24* 0,71±0,06* 4,94±0,08* 80,44±4,94
70- 8,69±1,02* 0,56±0,01* 2,34±0,05 110,93±12,05*
Примечание: * - разница достоверна с Р<0,05 по сравнению с цыплятами 3-суточного возраста
Исследования свидетельствуют, что у 35-суточных цыплят возрастают параметры всех установленных показателей в 1,10-3,00 раза по сравнению с 3-суточными цыплятами.
В течение последующих 35 суток также сохраняется тенденция к увеличению показателя индекса абсолютной массы тимуса на 7,50% (8,08±0,24 и 8,69±1,02 мкм) и МФП клоакальной сумки на 37,90% (80,44± 4,94 и 110,93± 12,05 мкм). Параметры МКС тимуса и индекс абсолютной массы клоакальной сумки у 70-суточных цыплят снижаются на 47,40% и 21,10%.
Параметры и масса иммунных органов 35-суточных цыплят после проведения аэрозольной вакцинации против Ньюкаслской болезни отличаются от показателей контрольной группы. Живая масса цыплят опытной группы увеличивается на 3,40%, абсолютная масса клоакальной сумки - на 24,70%. Ширина и длина клоакальной сумки несущественно изменяются у исследуемых цыплят. Абсолютная масса селезенки возрастает на 13,60%, а длина ее уменьшается. Абсолютная масса тимуса значительно превалирует (на 40,00%), а длина на 3,15%: левой с 2,30±0,08 до 2,80±0,65 см. правой с 1,91+0,93 до 1,96±0,17 см.
У цыплят 70-суточного возраста контрольной и опытной группы происходит уменьшение абсолютной массы и параметров отдельных органов: масса тимуса снижается на 5,40%; в селезенке длина и ширина уменьшается на 7,80 и 2,20%, как длина и ширина клоакальной сумки на 11,40% и 29,10%.
После второго этапа вакцинации абсолютная масса 70-суточных цыплят увеличивается на 82,80%, абсолютная масса и длина клоакальной сумки - на 7,70% и 7,00%, масса селезенки - на 88,30%. На дорсальной поверхности клоакальной сумки 35-, 70-суточных цыплят заметна продольная борозда.
При сравнении данных морфометрических показателей иммунных органов 35- и 70-суточных цыплят контрольных групп отмечается тенденция к
повышению всех показателей, за исключением ширины мозгового вещества тимуса, который уменьшается у цыплят 70-суточного возраста на 12,40%.
Индекс тимуса у контрольных 35-суточных цыплят составляет 8,08±0,24, при иммунопрофилактике он достиг 9,10±0,72. МКС в тимусе вакцинированных цыплят заметно снижается, по сравнению, с контрольной группой (42,30%). Индекс клоакальной сумки под действием вирус-вакцины увеличивается с 4,94±0,08 до 6,34±0,27 (на 28,34%). Индекс селезенки в группе иммунной 35-суточной птицы уменьшается на 8,4%. При сравнении показателей иммунных органов цыплят контрольных групп 35-и 70 суточного возраста выяснили, что МКС тимуса уменьшается у 70-суточной птицы на 27,10% по сравнению с 35-дневной и составляет 0,56±0,01. Индекс селезенки, напротив, увеличивается на 13,40% и составляет 4,42±0,56. Индекс клоакальной сумки у 70-суточных цыплят уменьшается с 4,94±0,08 до 2,34±0,05, разница показателей составляет 52,60%. МФП лимфоидных узелков клоакальной сумки увеличивается у 70-дневной птицы по сравнению с 35-дневной на 27,50%.
Анализ полученных данных у 35-и 70-суточных цыплят опытных групп показал, что происходит увеличение таких показателей, как МФП лимфоид-ных узелков клоакальной сумки и индекс селезенки на 26,60% и 33,60%, в то же время индекс клоакальной сумки и МКС тимуса уменьшаются на 57,70% и 31,70%. У 70-суточных цыплят опытной группы отмечается увеличение практически всех показателей иммунных органов по сравнению с контрольной группой птицы аналогичного возраста. Лишь МКС тимуса цыплят уменьшается с 0,56±0,01 до 0,28±0,04, что соответствует 50,00%.
Выводы. Таким образом, в результате проведенных нами исследований выяснили, что вакцина против Ньюкаслской болезни ИБК и ССЯ-76 оказывает иммуностимулирующее действие [2, 4]. Иммуноморфологические исследования показывают четкие реактивные сдвиги в поствакцинальный период в иммунных органах птицы, характеризующиеся увеличением длины лимфоидных узелков клоакальной сумки и коркового вещества лимфоидных узелков, а также отмечается возрастание параметров ширины коркового вещества тимуса, индексов иммунных органов и снижение МКС тимуса.
Список использованных источников:
1. Смоленський В. И. Эффективность вакцин против вирусных болезней птиц // Ветеринария. - 2001. -№ 7. - С. 23-28.
2. Коломыцев А. Современные средства борьбы при болезни Ньюкасла в странах мира, использованные в 2004-2005 гг. / А. Коломыцев, В. Филоматова, А. Орлов, А. Книзе
References:
1. Smolensk V. I. Effective of vaccines against virus illnesses of birds// Vekterinariya. - 2001. - № 7. - P. 23-28.
2. Kolomytsev A. The modern agents of fight at illness of Newcastle in the
countries of the world used in 20042005 / A. Kolomytsev, V. Filomatova, A. Orlov, A. Kniza // Veterinary pathology. - 2007. - №2. - P. 77-78.
// Ветеринарная патология. - 2007. -№ 2. - С. 77-78.
3. Экви Б. П. Высокопатогенный грипп птиц / Б. П. Экви, Н. И. Рогожина // Российский ветеринарный журнал. - 2006. - Вып. 1. - С. 34-36.
4. Банбо Б. А. Современные методы борьбы с болезнью Ньюкасла в мире в период 2005-2007 / Б. А. Банбо // Ветеринарная патология. - 2008. -Вып. 4. - С. 15-16.
Сведения об авторе:
Лукашик Галина Владимировна -кандидат ветеринарных наук, доцент, доцент кафедры анатомии и физиологии животных Академии биоресурсов и природопользования ФГАОУ ВО «Крымский агротехнологический университет им. В. И. Вернадского», 295492, п. Аграрное, Симферополь, Республика Крым, Россия.
3. Ekv B. P. High-pathogenic avian flu / B. P. Ekvi, N. I. Rogozhin // Russian veterinary magazine. - 2006. - V.1. -P. 34-36.
4. Banbo B. A. Modern methods of fight against illness of Newcastle in the world in the period of 2005-2007 / B. A. Banbo // Veterinary pathology. -2008. - V.4. - P. 15-16.
Information about the authors:
Lukashik Galina Vladimirovna -Candidate of Veterinary Sciences, Associate Professor / Associate Professor of Academy of Life and Environmental Sciences FSAEI HE «V. I. Vernadsky Crimean Federal University», 295492, Agrarnoe, Simferopol, Republic of Crimea.
