CC BY
25
ВЛИЯНИЕ УЛЬТРАФИОЛЕТОВОГО ИзЛУЧЕНИЯ НА КЛЕТКИ ЛИМФОСАРКОМЫ ПЛИССА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ IN VITRO
С.В. ТРОФИМОВА, о.о. сошникова, о.е. бурхина, д.и. Князев, и.п. Иванова
Нижегородская государственная медицинская академия НИИ прикладной и фундаментальной медицины, г. Нижний Новгород
Актуальность. Из физических факторов, способных вызывать малигнизацию клеток, особое значение придается ионизирующему и ультрафиолетовому излучениям, оказывающим выраженное мутагенное действие на ДНК клеток. УФ излучение является одной из важных причин злокачественных новообразований кожи. УФ излучение, особенно с длинными волнами 280-320 нм, вызывает значительные структурно-функциональные изменения и у других клеток - эритроцитов, лимфоцитов и др. Известно, что УФ излучение является источником активных форм кислорода и, соответственно, способно активировать свободнорадикальные процессы в клетках. Однако в отечественной и зарубежной литературе публикации о влиянии УФ излучения на функциональное состояние опухолевых клеток практически не встречаются.
Цель исследования. Изучить влияние УФ излучения на мембранные структуры и метаболическую активность клеток лимфосаркомы Плисса. В задачи исследования входили оценка уровня спонтанной хемилюминесценции кле-токи изучение концентрации сиаловых кислот и уровня молочной кислоты после воздействия УФ излучением на клетки лимфосаркомы Плис-са in vitro.
Материал и методы. Эксперимент проведен на клетках лимфосаркомы Плисса. Взвесь опухолевых клеток получали после измельчения опухолевой ткани в растворе Хенкса, конечная концентрация 5*106. Обработку взвеси клеток, объемом 6 мл, проводили в течение 150, 300, 600, 900 сек, использовали ультрафиолетовый бактерицидный облучатель ОУФб-04. Уровень свободнорадикальных процессов, протекающих после обработки УФ излучением, оценивали методом спонтанной хемилюминесценции. Измерения проводили на биохемилюминометре
БХЛ-6 (Н. Новгород) непосредственно после обработки. Концентрацию сиаловых кислот и уровень метаболической активности клеток оценивали после инкубации клеток при 37°С в среде 199 в течение 1 и 4 ч. Изучение концентрации сиаловых кислот в надосадочной жидкости проводили после центрифугирования при 3 тыс./ об.мин набором реагентов для определения содержания сиаловых кислот «СиалоТест». Уровень метаболической активности оценивали по концентрации молочной кислоты в надосадоч-ной жидкости через 1 ч после инкубации клеток и по изменению окраски индикатора фенолового красного через 4 ч. Контролем служила взвесь опухолевых клеток без воздействия.
Результаты. Показано, что уровень спонтанной хемилюминесценции, а соответственно, и свободнорадикальных процессов постепенно возрастал с увеличением времени обработки. После обработки клеток в течение 900 сек уровень хемилюминесценции возрос в 2 раза по сравнению с контролем. Наибольшая концентрация сиаловых кислот наблюдалась после воздействия в течение 150 сек. После обработки УФ излучением в течение 900 сек цвет индикатора среды 199 (фенолового красного) не изменялся, поэтому можно предположить, что метаболическая активность клеток лимфосаркомы Плисса снижалась. Основным метаболитом неопластических клеток является молочная кислота, которая активно выводится. В надосадочной жидкости концентрация молочной кислоты постепенно снижалась с увеличением времени воздействия и при обработке в течение 900 сек была в 1,8 раза ниже относительно контроля.
Выводы. С увеличением времени воздействия УФ излучения наблюдается возрастание свободнорадикальных процессов и торможение метаболической активности клеток лимфосар-комы Плисса в эксперименте in vitro.
СИБИРСКИЙ ОНКОЛОГИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ. 2011. Приложение № 1
