УДК616.15:636.5
Вахуткевич I. Ю., асистент © Сштинський В. В., академш НААНУ, д. б. н., професор
Льв\вськый нацюнальный аграрныйутеерсытет
ВПЛИВ ВАЖКИХ МЕТАЛ1В ТА КЛИНОПТИЛОЛ1ТУ НА АКТИВШСТЬ ЕНЗИМ1В У СИРОВАТЦ1 КРОВ1 ПТИЦ1
У статт1 наведено результаты дослгджень вплыву йоте хрому, кадмт та клыноптылолту на актывтстъ аспартатамтотрансферазы, алантам1нотрансферазы та лужног фосфатазы в сыроватыг кровг птыыг. Встановлено, то введенняурацюн курей сулъфат1в хрому г кадмт тдвыщувало актывтстъ ензым1в. У птыт другог групы з хромовым навантаженням отрымалы выщ1 показныкы аспартатамтотрансферазы на 11,7%, в1дпов1дно алантам1нотрансферазы та лужног фосфатазы - на 21,9 та 5,2% пор1вняно з показныкамы контрольног групы. В1рог1дне тдвытення актывност1 ензым1в в сыроватт кров/ выявлено у птыт третъог тддослгдно! групы отруеног кадмгем в\дпов\дно на 29,3 (Р<0,05), 34,4 (Р<0,05) та 35,7% (Р<0,001) вгдносно показныка контролю. Суматя токсычных ефект1в обох метал1в не прызвела до тдвыт^ння актывност1 ензым1в.
Збыъшення актывност1 АлАТ та АсАТ у сыроватт кров/ вказуе на порушення цтсност1 плазматычных мембран ргзных оргатв, у першу чергу печткы, а збагачення рацюну куреы клыноптылолтом спрыяе зныженню актывност1 ензым1в у всгх тддослгдных групах птыт до норматывных показныюв.
Ключое1 слова: птыця, Хром, Кадмт, аспартатамтотрансфераза, алантам1нотрансфераза, лужна фосфатаза, клыноптылолт.
УДК 616.15:636.5
Вахуткевич И. Ю., ассистент Лъвовскыы нацыоналъныы аграрныыуныверсытет
ВЛИЯНИЕ ТЯЖЕЛЫХ МЕТАЛЛОВ И КЛИНОПТИЛОЛТА НА АКТИВНОСТЬ ЭНЗИМОВ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ ПТИЦЫ
В статье прыведены результаты ысследованыы влыяныя ыонов хрома, кадмыя ы клыноптылолыта на актывностъ аспартатамынотрансферазы, аланынамынотрансферазы ы телочн°й фосфатазы в сыворотке кровы птыц. Установлено, что введете в рацыон кур сульфатов хрома ы кадмыя повышало актывностъ энзымов. У птыцы второй группы с хромовым отравленыем получылы высокые показателы аспартатамынотрансферазы на 11,7%, соответственно аланынамынотрансферазы ы т^лочноы фосфатазы - на 21,9 ы 5,2% по сравненыю с показателямы контрольной группы. Достоверное повышеные актывносты энзымов в сыворотке кровы выявлено у птыцы третьей подопытной группы отравленной кадмыем соответственно на 29,3 (Р <0,05), 34,4 (Р <0,05) ы 35,7% (Р <0,001) по сравненыю с показателем контроля. Сумацыя токсыческых эффектов металлов не проызвела к повышеныю актывносты энзымов
Увелыченые актывносты АлАТ ы АсАТ в сыворотке кровы указывает на нарушеные целостносты плазматыческых мембран разлычных органов, в первую
© Вахуткевич I. Ю., Сттинський В. В., 2014
30
очередь печени, а обогащение рациона кур клиноптилолитом способствует снижению активности ферментов во всех подопытных группах птицы к нормативным показателям.
Ключевые слова: птица, Хром, Кадмий, аспартатаминотрансфераза, аланинаминотрансфераза, щелочная фосфатаза, клиноптилолит.
UDC 616.15:636.5
I. Vahutkevych, assistant Lviv National Agrarian University
EFFECT OF HEAVY METALS AND CLINOPTILOLITE ON THE ACTIVITY OF ENZYMES SERUM POULTRY
The results of studies of the effect of ions of chromium, cadmium and clinoptilolite on the activity of aspartate aminotransferase, alanine aminotransferase and alkaline phosphatase in serum of poultry. The introduction in the diet of chickens sulfate chromium and cadmium increased the activity of enzymes. In the second group of poultry chrome load got higher scores aspartate 11,7%, respectively, alanine aminotransferase and alkaline phosphatase - by 21,9 and 5,2% compared to the control group. Significant increase in the activity of enzymes in serum were found in three experimental groups of birds poisoned by cadmium, respectively, 29,3 (P <0,05), 34,4 (P <0,05) and 35.7% (P <0,001) relative to index control. Sumatsiya toxic effects of metals are not made to increase the activity of enzymes
The increased activity of ALT and AST in serum indicates a violation of the integrity of plasma membranes of various organs, especially the liver, and enrich the diet of chickens clinoptilolite helps reduce the activity of enzymes in all experimental groups of birds in their regulatory targets.
Key words: poultry, chromium, cadmium, aspartataminotransferase, alaninaminotransferase, alkaline phosphatase, clinoptilolite.
Постановка проблеми. При вивченш токсичного впливу важких метал1в на оргашзм, поряд з ф1зюлопчними, гематолопчними, ¿мунолопчними, широко використовують 6ioxiMi4Hi методи дослщжень. Кров, як об'ект дослщження, використовуеться для вивчення впливу на оргашзм р1зних фактор1в навколишнього середовища завдяки шформативносп параметр1в i доступности метод1в !х визначення [5,6].
Потрапивши до оргашзму, метали i3 кров'ю через ворону вену надходять в печшку, де накопичуються в гепатоцитах та порушують цшсшсть i'x мембран. Ураження печшки важкими металами проявляеться зростанням у кров1 активност1 ряду фермешгв, зокрема аспартатамшотрансферази (АсАТ), аланшамшотрансферази (АлАТ) та лужно! фосфатази (ЛФ) [9]. Накопичення Кадмш та Хрому також призводить до розвитку ряду бюх1м1чних зм1н в орган1зм1 тварин i людини, а пер1од i'x виведення з орган1зму е досить тривалим.
В1домо, що за участю ферментних систем реал1зуеться спадкова шформащя в онтогенез!, п1дтримуеться гомеостаз, забезпечуеться регуляц1я росту i розвитку, формування продуктивних якостей. Проте досл1дження фермент1в у тканинах i органах сшьськогосподарсько! птиц1 нечисленн1. Найб1льш перспективними для оцшки ф1з1олог1чного стану особини представляються системи алан1нам1нотрансферази (АлАТ) i аспартатамшотрансферази (АСТ)[6].
31
Для ел1мшаци важких метал1в з оргашв i тканин ефективними е природш цеол1ти (клиноптилол1т). Встановлено ix позитивну дш у виведенш надлишку важких металАв до ГДК, не викликаючи зм!н клш!чних показнимв, нормал!заци обмшу бшюв, вуглевод!в, лшадв, мшеральних речовин в opraHi3Mi, що вказуе на можливкть широкого використання в якост! детоксиканта i профшактичного засобу [1-3,8].
В зв'язку з цим, для поглиблення уявлень про мехашзми впливу важких металАв на оргашзм важливим е дослщження 6ioxiMi4HHx показниюв кровА, а саме визначення активност! АсАТ, АлАТ та ЛФ в сироватщ кров! курей-несучок за умов введения йошв хрому та кадмш, а також i'x елАмАнацА! клиноптилол^ом.
Методика дослвджень. Дослщження проводились в xiMiKO-токсиколопчнш лаборатори кафедри ЛьвАвського национального аграрного ушверситету i в лабораторп шструментальних методАв контролю ДНДК1 ветпрепаратсв та кормових добавок. За принципом аналопв було сформовано 4 пщдослщш групи курок-несучок (по 4 голови в кожнш), яких утримували в умовах в!варш ДНДК1 ветпрепараив та кормових добавок. Протягом дослщжуваного перюду куркам-несучкам nepmoi' групи (контрольно!) згодовували стандартний комбжорм i випоювали воду. Птиця дослщних груп KpiM комб!корму отримувала воду, насичену солями важких металАв (друга група - 2 мг/кг Cr2(S04)3-6H20, третя група - 3 мг/кг CdSÜ4-8H20, четверта група - поеднання сульфаив хрому (III) та кадмш, 2 мг/кг i 3 мг/кг). Для корекци важких металАв в оргашзм! птиц! пщдослщним групам до корму вводили 3% вщ його маси природну мшеральну добавку клиноптилол!т (КП) Сокирницького родовища Закарпатсько! облает!, який мктить 85-90 % (масово! частки) цеол^у.
У кшщ дослщу проведено забш птиц! та взяття кров! для дослщжень активностА ензим!в, а саме аспартатамшотрансферази, аланшамшотрансфера та лужно! фосфатази. Визначення активное^ АлАТ та АсАТ проводили за методом Райтман-Френкеля. [4]
Результата дослщжень. Про актившеть ензимАв в сироватщ кров! курок-несучок за впливу йошв хрому та кадмш евщчать результата таблищ 1, (рис.13) ¿з яко! видно, що у сироватщ кров! птиц! дослщних груп виявлено i'x зростання. Так, у птищ з друго! групи з хромовим навантаженням отримали вищ! показники аспартатамшотрансферази на 11,7%, вщповщно аланшамшотрансферази та лужно! фосфатази - на 21,9 та 5,2% пор!вняно з показниками контрольно! групи.
Однак BiporiflHe шдвищення активност! ензимАв в сироватщ кров! виявлено у птищ третьо! пщдослщно! групи отруено! Кадм!ем вщповщно на 29,3 (Р<0,05), 34,4 (Р<0,05) та 35,7% (Р<0,001) в1дносно показника контролю. Cyмaцiя токсичних eфeктiв обох мeтaлiв не призвела до пiдвищeння aKTHBHOCTi
eH3HMiß.
В четвертш дocлiднiй rpyni BiporiflHO вищою була тiльки лужна фосфатаза на 21,1% (Р<0,01) nopißHroro4H з аналогами контрольно! групи.
Збшьшення активност! АлАТ та АсАТ у сироватщ кров! вказуе на порушення цшсносп плазматичних мембран р!зних opraHiß, у першу чергу печ!нки.
Констатуемо, що при хромовому навантаженш за введения мшерально! добавки клиноптилол!ту знижуеться активн!сть ензим!в до норм для курей-
32
несучок, а саме: аспартатамшотрансферази та аланшамшотрансферази вщповщно на 6,4 % \ 10,3% та лужно! фосфатази на 3,0% вщносно показника без мшералу (рис.1-3).
Таблиця 1
Актившсть ензим1в в сироватщ кров! птищ за впливу йошв хрому
та кадм1ю (М±т, п=4)
Показники Групи птищ
перша контрольна дослщш
друга третя четверга
АсАТ ммоль/г/л 4,37±0,28 4,88±0,38 5,65±0,37* 5,06±0,33
% до контролю 100 111,7 (+11,7) 129,3 (+29,3) 115,8 (+15,8)
АлАТ ммоль/г/л 0,32±0,03 0,39±0,04 0,43±0,03* 0,40±0,05
% до контролю 100 121,9 (+21,9) 134,4 (+34,4) 125,0 (+25,0)
ЛФ од/л 381,94±8,60 401,99±14,24 518,13±17,33** * 462,43±19,21**
% до контролю 100 105,2 (+5,2) 135,7 (+35,7) 121,1 (+21,1)
Примтка: в1рогщшсть р1зниць м1ж контрольною \ дослщною трупами враховували * - Р<0,05; ** - Р<0,01; *** - Р<0,001.
мм оль/г/л *
б
5
4
3
2
1
0
■ 1К ■ 1К+КП "2Д ■2Д+КП "ЗД "ЗД+КП ■ 4Д 4Д+КП
Рис.1. Актившсть аспартатамшотрансферази за ди йошв важких метал1в
та клиноптилол1ту
Зниження аспартатамшотрансферази виявлено у груш птищ з кадм1евим навантаженням за введения клиноптилол1ту на 11,5%, аланшамшотрансферази - на 16,3% та лужно! фосфатази на 12,7% (Р<0,05) пор1вняно з аналогами без клиноптилол1ту.
Тенденщя до зниження активностей аспартатамшотрансферази та аланшамшотрансферази та лужно! фосфатази виявлена \ у груш з сукупною д1ею йошв хрому, кадм1ю та клиноптилол1ту вщповщно - на 8,9; 5,0 та 7,7%.
33
Рис.2. Актившсть алаишамшотраисферази за дй' йошв важких метал1в та клииоитилолггу
Рис.3. Актившсть лужно*1 фосфатази за ди йошв важких метал1в та
клииоитилол1ту
Збагачення рацюну клиноптилол1том сприяе прискоренню \ збшьшенню ел1мшаци Кадм1ю \ Хрому ¿з оргашзму. Це зумовлено позитивним впливом природного сорбенту - клиноптилол1ту, який мае здатшсть зв'язувати \ утворювати нерозчинш сполуки в травному канал11 виводити 1х з оргашзму.
34
Отже, збагачення рацюну курей клиноптилол1том сприяе зниженню активное^ ензим1в у Bcix пщдослщних трупах птищ до нормативних показниюв.
Висновки. Збшьшення активност! АлАТ та АсАТ у сироватщ кров! вказуе на порушення цшсност! плазматичних мембран р1зних оргашв, у першу черту печшки, а збагачення рацюну курей прпроднпм клпноптплол1том сприяе зниженню активное^ ензим1в у Bcix пщдослщних трупах птищ до нормативних показниюв.
Л1тература
1. Ветеринарна клЫчна 61ох1м1я [Левченко B.I., Вл1зло В.В., Кондрахш 1.П. та ¿н.]; за ред. B.I. Левченка i В.Л. Галяса. - Бша Цервка: Бшоцерювський НАУ, 2002. -400 с.
2. Калачнюк Г.1., Фоменко I.C. Лицур Ю.М. та ш. Бюлопчна д1я сорбент1в в оган1зм1 // Пращ 2-го захщноукрашського симпоз1уму з абсорбц1! та хроматограф11. - Льв!в, 2000. - С.203-208.
3. Кирил!в Я., Ратич I., Стояновська Г. Алуштова руда i цеол!т у кормах для птиц! // Украшський НД1 ф!з!олог!! i 6ioxiMi! с.-г. тварин. - №3. - 2005. -С.51.а
4. Лабораторн! методи досл!джень у б!олог!!, тваринництв! та ветеринарнш медицин!: дов!дник / В. В. Вл!зло, Р. С. Федорук, I. Б. Ратич [та iH.]; заред. В. В. Вл!зла. — Льв!в: СПОЛОМ, 2012. — 764 с.
5. Мельничук Д. О. Токсиколопчний вплив солей свинцю та кадмш на 6ioxiMi4Hi показники у лабораторних тварин / Д. О. Мельничук, I. М. Трахтенберг // Науковий вкник Нац!онального аграрного ушверситету. — 2002.
— Вип. 55. — С. 117-120.
6. Середа Т. И. Оценка роли амшотрансфераз в формировании продуктивности у кур-несушек /Т.И. Середа, М. А. Дерхо // Сельскохозяйственная биология. — 2014 — № 2. — С. 72-77.
7. Ткаченко Т. A. EioxiMi4Hi показники кров! ваптних щур!в за умов отруення ацетатом свинцю / Т. А. Ткаченко, Н. М. Мельникова // Современные проблемы токсикологии: науково-практический журнал. — 2008 — №2 — С. 25-27
8. Olver M. D. The effect of feeding clinoptilolite (zeolite) to laying hens / M. D. Olver // Animal and Dairy Science Research Institute. British Poultry Science
— Irene, South Africa, 1983 — V. 13 (2). — P. 107-110.
9. Wallach S. Clinical and biochemical aspects of chromium deficiency / S. Wallach // Journal of American College Nutrition. —1985. — V. 4. — P. 107-120.
Рецензент - д.с.-г. н., професор Буцяк B.I.
35