CC BY
47
УДК 615.32: 612.017.1
ВЛИЯНИЕ СУХОГО ЭКСТРАКТА GENTIANA ALGIDA PALL. НА ФАГОЦИТАРНУЮ АКТИВНОСТЬ МАКРОФАГОВ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ИММУНОСУПРЕССИИ
© Будаева Евдокия Ринчиновна
аспирант лаборатории экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН
Россия, 670047, г. Улан-Удэ, ул. Сахьяновой, 6 E-mail: evd_bud2688@mail.ru © Хобракова Валентина Бимбаевна
старший научный сотрудник лаборатории экспериментальной фармакологии Института общей и экспериментальной биологии СО РАН, доктор биологических наук, доцент Россия, 670047, г. Улан -Удэ, ул. Сахьяновой, 6 E-mail: val0808@mail.ru
В опытах на мышах линии Fj (СВАхС57В1/6) установлена иммунокорригирующая активность растительного средства — сухого экстракта горечавки холодной — в отношении макрофагального звена иммунного ответа. Показано, что испытуемое средство в дозе 200 мг/кг способно ослаблять супрессивное действие цитостатика азатиоприна на фагоцитоз перитонеальных макрофагов в отношении Staphylococcus aureus и частиц коллоидной туши, что выражается в повышении фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа. Исследуемое средство не изменяет показатели иммунитета у интактных мышей.
Ключевые слова: сухой экстракт горечавки холодной, азатиоприн, макрофагальный иммунитет, фагоцитоз, иммуномодулятор.
INFLUENCE OF THE DRY EXTRACT FROM GENTIANA ALGIDA PALL. ON THE PHAGOCYTOSIS ACTIVITY OF MACROPHAGES AT EXPERIMENTAL IMMUNE SUPRESSION
Evdokiya R. Budaeva
Research Assistant of the Laboratory of Experimental Pharmacology, Institute of General and Experimental Biology SB RAS 6 Sakhyanovoi St., Ulan-Ude, Russia 670047
Valentina B. Khobrakova
Senior Researcher of the Laboratory of experimental pharmacology, Institute of General and Experimen tal Biology SB RAS, DSc in Biology, A/Professor 6 Sakhyanovoi St., Ulan-Ude, Russia 670047
The immunocorrecting activity of the plant remedy — the dry extract from Gentiana algida Pall. in regard to macrophage link of the immune response has been identified in experiments on the line F1 (СВАxC57Bl/6) mice. The extract in the dose of 200 mg/kg can relax supressive action of azathioprin cytostatic on phagocytosis of peritoneal macrophages against Staphylococcus aureus and colloidal particles of mascara, that is expressed by the increasing of phagocytic index and phagocytic number. The remedy does not change the immunity indices in intact mice.
Keywords: the dry extract from Gentiana algida Pall., azathioprin, macrophage immunity, phagocytosis, immunomodulator.
Создание фармакологических средств для профилактики и лечения ряда заболеваний и патологических состояний человека, связанных с нарушением работы иммунной системы, является актуальной проблемой современной медицины. В изучении вопросов иммунокоррекции главенствующей задачей является выбор наиболее оптимальных лекарственных средств, отвечающих требованиям современных стандартов. Перспективным направлением представляется поиск им-муномодуляторов среди средств растительного происхождения, имеющих ряд преимуществ благодаря наличию в них комплексов биологически активных веществ, обеспечивающих мягкое действие, низкую токсичность, способность к активации иммунной, нервной и эндокринной систем, возможность применения у лиц с сочетанными патологиями.
Объектом исследования явился сухой экстракт из надземной части горечавки холодной (Gentiana algida Pall.). Тибетское название горечавки холодной — spang-rgyan dkar-po (банг-чжан гар-бо) [1]. По литературным данным установлено, что горечавку холодную использовали в составе сложных многокомпонентных прописей для лечения острых и хронических бронхитов,
крупозной пневмонии и хронических гнойных заболеваний легких [8]. Из источников в научной литературе известно, что в эксперименте водный экстракт и отвар горечавки холодной обладают противовоспалительными свойствами [2], водный экстракт надземной части — гемостатическими [10]. Настойка надземной части проявляет противотрихомонадную активность [5], водный экстракт и отвар — антибактериальную [2], анофиновая и фоманноксиновая кислоты — антифун-гальную [12]. Сухой экстракт горечавки холодной (ЭГХ) обладает мембраностабилизирующей, анальгетической, противовоспалительной и антибактериальной активностью [2; 3; 4; 9].
Целью настоящего исследования явилось определение влияния сухого экстракта из надземной части Gentiana algida Pall. на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов при аза-тиоприновой иммуносупрессии.
Материалы и методы
Эксперименты проведены на мышах-самцах линии F1 (СВАхС57В1/6) массой 18-20 г. Действие исследуемого средства было изучено на интактных животных, а также на животных, находящихся в состоянии иммунодепрессии, вызванной цитостатиком азатиоприном в дозе 50 мг/кг перорально 1 раз в сутки в течение 5 дней (контрольная группа).
Сухой ЭГХ вводили 1-й опытной группе интактных мышей и 2-й опытной группе мышей на фоне азатиоприна в экспериментально-терапевтической дозе 200 мг/кг перорально 1 раз в сутки в течение 14 дней. Интактная группа животных получала воду, очищенную по аналогичной схеме.
Состояние макрофагального звена иммунного ответа определяли в реакции фагоцитоза пери-тонеальных макрофагов в отношении Staphylococcus aureus по методике И. С. Фрейдлина [7], а также в отношении частиц коллоидной туши, при этом оптическую плотность лизата клеток пе-ритонеального экссудата, отражающую количество туши, поглощенной перитонеальными макрофагами, определяли при длине волны 620 нм [6].
Результаты и их обсуждение
При исследовании влияния сухого ЭГХ на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов мышей в отношении Staphylococcus aureus на фоне азатиоприна установлено, что данное средство увеличивает фагоцитарный индекс и фагоцитарное число в 2,0 и 1,9 раза соответственно по сравнению с данными в контрольной группе (табл. 1).
Таблица 1
Влияние сухого ЭГХ на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов мышей в отношении Staphylococcus aureus
Группы животных Фагоцитарный индекс, % Фагоцитарное число
Интактная, n = 8 76,1 ± 2,26 7,3 ± 0,57
Контрольная (Азатиоприн), n = 8 39,4 ± 1,43 3,6 ± 0,27
Опытная 1 (ЭГХ), n = 8 71,2 ± 3,23 5,9 ± 0,28
Опытная 2 (Азатиоприн + ЭГХ), n = 8 79,8 ± 4,47* 6,7 ± 0,46*
Примечание: п — количество животных в группе, * означает, что различия достоверны по сравнению с данными в контрольной группе при р < 0,05.
При введении экстракта 1-й опытной группе мышей установлено, что данное средство не вызывает значимого изменения фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа по сравнению с данными в интактной группе (табл. 1).
При исследовании влияния сухого ЭГХ на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов в отношении частиц коллоидной туши установлено, что данное средство увеличивает фагоцитарный индекс в 1,5 раза по сравнению с данными у животных, получавших азатиоприн (табл. 2).
Введение исследуемого средства мышам 1-й опытной группы не приводило к существенному изменению фагоцитарного индекса по сравнению с данными в интактной группе (табл. 2). Это свойство присуще лишь истинным иммуномодуляторам, обладающим активностью только в условиях повреждения иммунитета.
Таблица 2
Влияние сухого ЭГХ на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов мышей в отношении частиц коллоидной туши
Группы животных Фагоцитарный индекс, оптическая плотность, усл. ед.
Интактная, n = 8 0,286 ± 0,021
Контрольная (Азатиоприн), n = 8 0,186 ± 0,0147
Опытная 1 (ЭГХ), n = 8 0,260 ± 0,0195
Опытная 2 (Азатиоприн + ЭГХ), n = 8 0,246 ± 0,0183*
Эффективность исследуемого средства обусловлена содержанием в нем флавоноидов (ориентин, изоориентин, изоориентин-4'-0-глюкозид) [11], тритерпеновых соединений (олеаноловая кислота) [13] и иридоидов (логановая кислота, гентиопикрозид, сверозид) [11], обладающих иммуномодули-рующими свойствами.
Таким образом, полученные данные позволяют сделать вывод, что сухой экстракт из надземной части горечавки холодной способен ослаблять супрессивное действие азатиоприна на макрофагаль-ное звено иммунитета, что позволяет рекомендовать его для дальнейшего изучения с целью создания новых растительных иммуномодулирующих препаратов.
Литература
1. Баторова С. М., Яковлев Г. П., Асеева Т. А. Справочник лекарственных растений традиционной тибетской медицины. — Новосибирск: Наука. — 2013. — 292 с.
2. Противовоспалительная и антимикробная активность Gentiana algida Pall. и Leucanthemum sibiricum Dc / Т. В. Корнопольцева, Ж. Ц. Хоцаев, Т. А. Асеева, Л. М. Танхаева // Сибирский медицинский журнал. — Иркутск. — 2007. — Т. 73, № 6. — С. 82-85.
3. Влияние сухого экстракта горечавки холодной на течение экспериментальной пневмонии / А. Г. Мондодоев [и др.] // Казанский медицинский журнал. — 2013. — Т. 94, № 1. — С. 71-74.
4. Растительные ресурсы России: дикорастущие цветковые растения, их компонентный состав и биологическая активность. Т. 4. Семейства Caprifoliaceae — Lobeliaceae / отв. ред. А. Л. Буданцев. — СПб.; М.: Товарищество научных изданий КМК, 2011. — 630 с.
5. Рубинчик М. А. Трихомоностатические свойства высших растений // Фитонциды. — Киев, 1972. — С. 128-132.
6. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / под ред. Р. У. Хабриева. — М.: Медицина, 2005. — 828 с.
7. Фрейдлин И. С. Использование культуры мышиных перитонеальных макрофагов в качестве модели для изучения клеток мононуклеарной фагоцитарной системы организма и их изменений под влиянием биологически активных веществ // Методические рекомендации. — Л., 1976. — С. 8-10.
8. Хайдав Ц., Алтанчимэг Б., Варламова Т. С. Лекарственные растения в монгольской медицине: истори-ко-медицинские исследования. — Улан-Батор: Изд-во АН МНР, 1985. — С. 390.
9. Хоцаев Ж. Ц. Противовоспалительная активность сухого экстракта горечавки холодной Gentiana algida Pall. // Разработка и внедрение новых методов и средств традиционной медицины. — М., 2001. — С. 202-204.
10. Исследование лекарственных препаратов природного и синтетического происхождения / Е. С. Шишкина [и др.]. — Томск, 1975. — 92 с.
11. Hostettmann-Kaldas M., Hostettmann K., Sticher O. Xanthones, flavones and secoiridoids of American Gentiana species // Phytochemistry. — 1981. — Vol. 20. — P. 443-446.
12. Two new secoiridoid glycosides from Gentiana algida / R. X. Tan [и др.] // Planta Med. — 1997. — Vol. 63. — P. 567-569.
13. Secoiridoids and antifungal aromatic acids from Gentiana algida / R. X. Tan [и др.] // Phytochemistry. — 1996. — Vol. 41. — P. 111-116.
References
1. Batorova S. M., Yakovlev G. P., Aseeva T. A. Spravochnik lekarstvennykh rastenii traditsionnoi tibetskoi meditsiny [Handbook of traditional Tibetan medicinal plants]. Novosibirsk: Nauka Publ., 2013. 292 p.
2. Kornopol'tseva T. V., Khotsaev Zh. Ts., Aseeva T. A., Tankhaeva L. M. Protivovospalitel'naya i antimikrob-naya aktivnost' Gentiana algida Pall i Leucanthemum sibiricum Dc [Anti-inflammatory and antimicrobial activity of Gentiana algida Pall and Leucanthemum sibiricum Dc]. Sibirskii meditsinskii zhurnal — Siberian Journal of Medicine. Irkutsk. 2007. V. 73. No. 6. Pp. 82-85.
3. Mondodoev A. G. et al. Vliyanie sukhogo ekstrakta gorechavki kholodnoi na techenie eksperimental'noi pnevmonii [Effect of gentian cold dry extract on the course of experimental pneumonia]. Kazanskii meditsinskii zhurnal — Kazan Journal of Medicine. 2013. V. 94. No. 1. Pp. 71-74.
4. Rastitel'nye resursy Rossii: Dikorastushchie tsvetkovye rasteniya, ikh komponentnyi sostav i biologi-cheskaya aktivnost'. T. 4 Semeistva Caprifoliaceae — Lobeliaceae [Plant Resources of Russia: wild flowering plants, their composition and biological activity. V. 4. Caprifoliaceae — Lobeliaceae family]. St Petersburg; Moscow: KMK Scientific Press Ltd., 2011. 630 p.
5. Rubinchik M. A. Trikhomonostaticheskie svoistva vysshikh rastenii [Trychomonas-static properties of higher plants]. Fitontsidy — Phytoncids. Kiev, 1972. Pp. 128-132.
6. Rukovodstvo po eksperimental'nomu (doklinicheskomu) izucheniyu novykh farmakologicheskikh veshchestv [Manual on experimental (preclinical) study of new pharmacological substances]. Moscow: Meditsina, 2005. 828 p.
7. Freidlin I. S. Ispol'zovanie kul'tury myshinykh peritoneal'nykh makrofagov v kachestve modeli dlya izucheniya kletok mononuklearnoi fagotsitarnoi sistemy organizma i ikh izmenenii pod vliyaniem biologicheski aktivnykh veshchestv [Use of mouse peritoneal macrophages cultures as a model for study cells of mononuclear phagocytic system in organism and their changes under the influence of biologically active substances]. Metodicheskie rekomendatsii — Guidelines. Leningrad, 1976. Pp. 8-10.
8. Khaidav Ts., Altanchimeg B., Varlamova T. S. Lekarstvennye rasteniya v mongol'skoi meditsine: istoriko-meditsinskie issledovaniya [Herbs in Mongolian medicine: historical and medical research]. Ulaanbaatar: MPR AS Publ., 1985. P. 390.
9. Khotsaev Zh. Ts. Protivovospalitel'naya aktivnost' sukhogo ekstrakta gorechavki kholodnoi Gentiana algida Pall. [Anti-inflammatory activity of gentian cold Gentiana algida Pall. dry extract]. Razrabotka i vnedrenie novykh metodov i sredstv traditsionnoi meditsiny — Development and implementation of new methods and means of traditional medicine. Moscow, 2001. Pp. 202-204.
10. Shishkina E. S. Issledovanie lekarstvennykh preparatov prirodnogo i sinteticheskogo proiskhozhdeniya [Study of natural and synthetic medicinal preparations]. Tomsk, 1975. 92 p.
11. Hostettmann-Kaldas M., Hostettmann K., Sticher O. Xanthones, flavones and secoiridoids of American Gentiana species. Phytochemistry. 1981. V. 20. Pp. 443-446.
12. Tan R. X. et al. Two new secoiridoid glycosides from Gentiana algida. Planta Med. 1997. V. 63. Pp. 567-569.
13. Tan R. X. et al. Secoiridoids and antifungal aromatic acids from Gentiana algida. Phytochemistry. 1996. V. 41. Pp. 111-116.
