CC BY
36
© Коллектив авторов., 2007 УДК
ВЛИЯНИЕ СТРУКТУРНО - РЕЗОНАНСНОЙ ТЕРАПИИ НА РЕПАРАТИВНЫЙ ОСТЕОГЕНЕЗ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
С.С.Купов, А.В.Федосеев, П.А.Чумаченко, М.В.Мнихович
Рязанский государственный медицинский университет имени академика И.П. Павлова
В статье проанализированы данные о влиянии структурнорезонансной терапии на репаративный остеогенез кости. Впервые детально изучено состояние костной ткани под влиянием данной методики в эксперименте с последующим исследованием материала с помощью гистологического метода исследования.
Каждой структурной единице организма соответствует определенный частотный спектр колебаний. Развитие патологических процессов приводит к изменению этого спектра частот в виде появления патологических (дисгармонических) колебаний, которые, как было установлено в ряде исследований, [1,2,3] могут устраняться с помощью экзогенной биорезонансной терапии (внешними электромагнитными колебаниями).
Экспериментально и в клинических исследованиях с помощью биопотенциалографии были определены частоты спонтанной биоэлектрической активности (СБА) для ряда органов [1,3]. Таким образом, частота лечебного сигнала при экзогенной биорезонансной терапии соответствует спонтанным биопотенциалам, предваряющим работу различных органов в нормальном (физиологическом) состоянии. Естественно, что вокруг ткани, по которой проходит электрический сигнал, возникает электромагнитное поле. Поэтому достаточно подать на кожную проекцию поражённого органа в соответствии с его топографией нужный терапевтический сигнал, чтобы через определённое время получить выздоровление. Однако, как и в любом методе, возможности данной технологии не всеобъемлющи. Например, экзогенная биорезонансная терапия может привести к выздоровлению при острых и хронических заболеваниях. Но если заболевание достигло уровня генов - излечение чрезвычайно затруднено.
Воздействие на пациента может осуществляться электрическим током (контактно) с помощью металлических электродов или электродов из токопроводящей резины или электромагнитным полем (безконтактно) с помощью магнитных индукторов, петель, поясов. Напряжённость магнитного поля, создаваемого индукторами, составляет порядка 1 - 100 мкТ в зависимости от выбранной интенсивности и соизмерима с естественным магнитным полем Земли (около 50 мкТ).
Информация о частотах, характерных для тех или иных органах (или заболеваниях) может оказаться полезной в целенаправленном управлении функциями нашего организма.
Так, например, установлено, что частоты следования импульсов 9,6 Гц или 10 Гц регулируют обмен кальция в тканях, а частота 2,5 Гц характеризуется выраженным гемостатическим эффектом. Согласно исследованиям немецкого учёного П.Шмидта для лечения костей после переломов необходимо использовать частоту 92 Гц [1,3].
Однако, работ посвященных конкретным клиническим результатам использования данной методики в травматологии до настоящего времени нет.
Нами начато экспериментальное исследование по данному вопросу.
Материалы и методы
Эксперимент проводился на 50 кроликах, которым под эфирным наркозом производился перелом бедра в средней трети. На сломанные конечности была наложена гипсовая повязка для иммобилизаций. Животные были разделены на две равные группы. Опытной группе проводилась бесконтактная экзогенная биорезонансная терапия с помощью магнитных индукторов в проекции места перелома прибором ИМЕДИС ЭКСПЕРТ - Т. Частота составила 92 Гц [1,3], 99 Гц [1,3], 5636 Гц [1,3]; интенсивность воздействия 35 у.е. Данные частоты были отобраны на основании литературных данных. Две первых считаются тропными к костной ткани, а последняя является влияет на МЦР. Воздействие проводилось в течение 30 минут (по десять минут каждой частотой) по одному сеансу в два дня (через день). Сеансы продолжались в течение двух месяцев.
О результатах исследования судили по анализу рентгенограмм, а также по данным гистологического исследования.
С целью объективизации рентгенологической информации проводилась оцифровывание снимков, с помощью сканера с приставкой для обработки негативов БР80К 1380. Анализ полученных изображений производился компьютерной программой для цитофотометрии РЬоіоМ версии 1.31 (программа создана А. Черниговским под руководством Е. Черниговской, ИЭФБ им. Сеченова РАН; Г. Штерн, ЦИН РАН). Для этого производилась серия рентгенограмм со стандартными условиями. Рентгенологический контроль проводился на 30 - е и 60 - е сутки.
Перед проведением серии снимков на 30 - й день после травмы гипс снимался. После этого гипс вновь накладывался до 60 - го дня, когда проводилась вторая серия снимков.
В полученной рентгенологической информации нас интересовали два параметра: оптическая плотность костной мозоли, величина которой, как известно, обратна минеральной плотности [4]; и площадь костной мозоли. В результате анализа рентгеновских изображений полученных на 30 - й день после нанесения перелома нами были получены следующие данные.
Результаты и их обсуждение
На 30 - й день среднее значение оптической плотности костной мозоли в контрольной группе составило 2,04 у.е. ± 0,025 у.е.. В опытной группе среднее значение оптической плотности костной мозоли на 30 - е сутки составило 2,07 у.е.
± 0,019 у.е.. Полученные данные были оценены с помощью коэффициента Стъюдента. Достоверность составила і - 2,547.
Среднее значение оптической плотности костной мозоли на 30 - й день после травм ы ( 1 - 2,547 )
2,07п
2,06
2,05
2,04
2,03
2,02
□ контроль
□ опыт
Среднее значение площади костной мозоли на 30 - й день после травмы ( t - 3,314 )
20000
15000
10000
5000
0
С
□ контроль
□ опыт
контроль
контроль
На 30 - й день среднее значение площади костной мозоли составило в контрольной группе 8755,375 у.е. ± 4338,854 у.е.. В опытной группе среднее значение площади костной мозоли на 30 - е сутки составило 15886,83 у.е. ± 3686,413 у.е.. Полученные данные были оценены с помощью коэффициента Стъюдента. Достоверность составила 1 - 3,314.
На 60 - й день среднее значение оптической плотности костной мозоли в контрольной группе составило 2,11 у.е. ± 0,038 у.е.. В опытной группе среднее значение оптической плотности костной мозоли на 60 - е сутки составило 2,15 у.е. ± 0,027 у.е.. Полученные данные были оценены с помощью коэффициента Стъюдента. Достоверность составила 1 - 2,320.
Среднее значение оптической плотности костной мозоли на 60 - й день после травмы ( 1 - 2,320 )
2,15
2,14
2,13
2,12
2,11
2,1
2,09
□ контроль
□ опыт
Среднее значение площади костной мозоли на 60 - й день после травмы ( 1 - 2,001 )
контроль
25000
20000
15000
10000
5000
0
1
□ контроль
□ опыт
контроль
На 60 - й день среднее значение площади костной мозоли составило в контрольной группе 17125,88 у.е. ± 2960,748 у.е.. В опытной группе среднее значение площади костной мозоли на 60 - е сутки составило 24681,38 у.е. ± 9543,313 у.е.. Полученные данные были оценены с помощью коэффициента Стъюдента. Достоверность составила 1 - 2,001.
Также нами было оценена достоверность изменения значений полученных данных между 30 - м и 60 - м днём как в контрольной, так и в опытной группах.
В контрольной группе разница в оптической плотности на 30 - е и 60 -е сутки достоверна (1 - 4,055).
Изменение средних значений оптической плотности костной мозоли от 30 - го до 60 - го дня после травмы в контрольной группе ( г - 4,055 )
2,12-|
2,1
2,08
2,06
2,04
2,02
2
30 - 60 - е
сутки сутки
□ 30 - сутки
□ 60 - е сутки
Изменение средних значений оптической плотности костной мозоли от 30 - го до 60 - го дня после травмы в опытной группе ( г - 6,487 )
2,16
2,14
2,12
2,1
2,08
2,06
2,04
2,02
30 - 60 - е
сутки сутки
В опытной группе разница в оптической плотности на 30 - е и 60 - е сутки достоверна (1 - 6,487).
В контрольной группе разница в площади на 30 - е и 60 - е сутки достоверна (1 - 4,216).
Изменение средних значений площади костной мозоли от 30 -го до 60 - го дня после травмы в контрольной группе ( г - 4,216 )
20000
15000
10000
5000
0
30 - 60 - е
сутки сутки
Изменение средних значений площади костной мозоли от 30 -го до 60 - го дня после травмы в опытной группе ( г - 2,274 )
30000
20000
10000
0
□ 30 - сутки
□ 60 - е сутки
30 - сутки 60 - е сутки
В опытной группе разница в оптической плотности на 30 - е и 60 - е сутки достоверна (1 - 2,274).
Таким образом мы можем утверждать, что данные рентгенологического исследования, полученные на 30 - й и 60 - й день, как в опытной, так и в контрольной группах, достоверно отличаются друг от друга, что свидетельствует о незавершённости остеогенеза на 30 - е сутки и продолжение репаративных процессов к 60 - му дню.
Также мы имеем достоверное увеличение размеров и оптической плотности костной мозоли как на 30 - й, так и на 60 - й день в опытной группе по сравнению с контрольной, что может быть объяснено более быстрым остеогенезом в опытной группе за счёт выраженного регенеративного эффекта от применения экзогенной биорезонансной терапии. Причём интересным представляется феномен очень быстрого роста костной мозоли в первые 30 - ть дней после травмы.
Полученные данные получили дальнейшее развитие в ходе гистологического исследования зоны перелома.
Рис. 1. Морфология костной ткани сразу после нанесения перелома.
Окраска гематоксилином и эозином;
Х 80
Рис. 2. Гнойно-некротические массы в зоне перелома на 1 сутки после нанесения перелома.
Окраска гематоксилином и эозином;
Х 80
В зоне перелома определяются следующие изменения: массивное пропитывание кровью, в некоторых участках тромбообразование, нарушение целостности надкостницы с массивным отеком последней; сосуды надкостницы расширены, полнокровны, в сосудах стаз эритроцитов; в некоторых полях зрения надкостница с фокусами некрозов. В препарате определяются свободно лежащие костные фрагменты, большинство которых некротизированы. Мягкие ткани, окружающие зону перелома с расширенными полнокровными сосудами, единичными периваскулярными воспалительными инфильтратами и выраженным отеком (рис. 1 ). Некоторые фрагменты мягких тканей и мышечных волокон подвергаются некротическим изменениям. Во многих полях зрения определяется экссудат, состоящий преимущественно из нейтрофильных лейкоцитов и небольшого количества макрофагов (рис 2.).
Морфология формирования костной мозоли на разных сроках эксперимента.
Гистологическое исследование зоны переломав группе опыта на 12 день подтверждает наличие полнокровных сосудов костной ткани, пролиферацию эндотелия сосудов с формирование вокруг сосудов муфт из молодых
фибробластов, наличием макрофагально-клеточной реакции. Края костного дефекта покрыты молодой соединительной тканью. Вдоль краев дефекта происходит новообразование костных балок (Рис. 3.). К этому сроку обнаружено значительное расширение сосудов костного мозга с повышенным их кровенаполнением. Подсчет количества капилляров на единицу площади показал некоторое увеличение их абсолютного числа по сравнению с контролем (Таблица
2.)
Рис. 3. Морфология формирования костной мозоли на 12 лень в группе опыта.
Окраска гематоксилином и эозином; Х 100
Рис. 4. Полиморфно-клеточная реакция в группе контроля на 12 день.
Окраска гематоксилином и эозином;
Х 240
В группе контроля на 12 сутки гистологическое исследование зоны перелома подтверждает наличие полнокровных сосудов костной ткани, умеренную пролиферацию эндотелия сосудов. Обращает на себя внимание наличие полиморфно - клеточной реакции; края костного дефекта покрыты молодой соединительной тканью. Вдоль краев дефекта новообразования костных балок почти не происходит, отмечается умеренная пролиферация остеобластов (Рис. 4).
На 28 день в группе опыта основная масса дефекта заполнена плотной рубцовой тканью, которая является продолжением надкостницы краев кости, состоящей из пучков коллагеновых волокон, капилляров, фибробластов и малодифференцированных клеток, из чего следует, что образуется грануляционная ткань. Соединительнотканная прослойка пересекалась одиночными костными трабекулами. В области дефекта к этому сроку сохраняются отдельные участки кровоизлияния, подвергающихся соединительнотканному замещению. На гистологических срезах, в молодой соединительной ткани, прилежащей к костному фрагменту, выявлены пучки сосудов, дифференцирующихся по артериальному и венозному типам (Рис 5.).
У животных контрольной группы к 28-м суткам после нанесения перелома на гистологических срезах мы отметили участки фрагментированной губчатой костной ткани с островками компактной кости. Встречаются небольшие очаги плазматического пропитывания костного мозга, а также участки свежих кровоизлияний. К костной ткани прилежит созревающая грануляционная ткань
различной степени дифференцировки с кровоизлияниями и образованием тонкостенных сосудов синусоидного типа.
У опытных животных опытной группы на 38 день края дефекта кости закруглены и покрыты слоем волокнистой соединительной ткани, наблюдается уплотнение краев раны.
Происходит активная пролиферация остеогенных клеток, формирующих обширные пласты на границе с живыми костными балками. В глубине пластов формируются зоны дифференцировки остеогенных клеток в остеобласты, синтезирующие органический матрикс.
Костные регенераты увеличены в размерах и имеют ячеистое строение. Отложение молодой кости происходит также в костномозговых полостях по поверхности материнской кости. Некоторые лакуны в участках кости, близких к дефекту, запустевшие и остеоциты в них не обнаруживались, что указывает на гибель остеоцитов.
Процесс остеогенеза в области краев кости сохраняет активность, об этом свидетельствуют остеобластические клетки, расположенные по периферии новообразованной костной ткани. Показателем активного остеогенеза является существенный рост количества активных остеобластов на поверхности костной балки (Реи. 6.).
Рис. 5. Морфология костной ткани на 28 Рис. 6. Морфология костной ткани на 38 день формирования костной мозоли в день формирования костной мозоли в
опытной группе опытной группе
Окраска гематоксилином и эозином; Окраска гематоксилином и эозином;
Х 240 Х 240
На гистологических препаратов животных контрольной группы на 38 день среди грануляционной ткани встречаются единичные некротизированные костные балки, окруженные большим количеством нейтрофильных лейкоцитов. Края дефекта кости закруглены и окутаны слоем соединительной ткани. По периферии костная ткань покрыта слоем остеобластов. Основная масса костного дефекта в данный срок наблюдения была заполнена рубцовой тканью. Процесс остеогенеза почти не происходит. В области дефекта кости наблюдались единичные спайки с ниже лежащими тканями.
На гистологических срезах животных опытной группы на 60 день обнаружена компактная пластинка с прилежащей губчатой костной тканью.
Процесс остеогенеза еще не был закончен. В некоторых полях зрения определяются активные остеобласты на поверхности трабекул.
Наблюдается образование костномозговой полости, заполненной костным мозгом. В нем выявлялись синусоидные капилляры и артерии с тонкой мышечной стенкой. В области дефекта сформирована губчатая костная ткань зрелого вида, с сохраняющимися небольшими участками пролиферации остеогенных клеток (Рис. 7).
Надкостница трансплантата представлена волокнистой пластинкой, внутренний слой которой более богат клеточными элементами, чем наружный и на всем протяжении содержит остеобласты.
При оценке гистологических препаратов животных контрольной группы к концу наблюдения (60 дней) выявлено, на месте дефекта находится плотная волокнистая соединительная ткань (рубец), которая представляет собой единый конгломерат с мягкими тканями и мышцами.
Костный дефект постепенно замещается регенерирующей костной тканью, по толщине приближающейся к окружающим костям. Края кости покрыты регенератами молодой костной ткани. (Рис. 8.). Регенерирующая кость покрыта надкостницей не на всем протяжении. Определяется рост мелких сосудов, и мелкие островки грануляционной ткани. Фрагменты костных регенератов покрыты слоем остеобластических клеток.
Рис. 7. Морфология костной ткани на 60 Рис. 8. Морфология костной ткани на 60
день формирования костной мозоли в опытной группе Окраска гематоксилином и эозином; Х 100
день формирования костной мозоли в контрольной группе - формирование молодого хряща.
Окраска гематоксилином и эозином; Х 100
Характерно то, что кость, замещающая дефект, в отдельных участках отделена от интактной кости соединительнотканной прослойкой.
Таблица 1
Численная динамика остеобластов в перестраивающейся костной
ткани
№ п\п Дни опыта Опыт Контроль
1. 12 день 51,3-53,5 39-41,5
2. 28 день 55,6-60,5 42-43
3. 38 день 60,0-65-68,5 55-60
4. 60 день 70-85 60-65
80-і
70
60
50
40
30
20
10
0
□ опыт
□ контроль
12 28 38
60
Рис. 9 Численная динамика остеобластов в перестраивающейся костной
ткани
90-і
1 О 00 / в >
1 о /
1 о 6 /
1 о ю /
1 о /
1 о 3 /
1 о 2 /
10- /
0- —Ґ
□ опыт
12
28
38
60
Рис 10. Процент прироста числа остеобластов от 12 к 60 дню., опытной группе по отношению к контрольной)
Таблица 2.
Динамика изменения числа функционирующих капилляров костной ткани в различные сроки формирования костной мозоли.
№ п\п Дни опыта Опыт Контроль
1. 12 день 210-220 диаметр капилляра пр. 5,5-6,3 мкм. 196-198
2. 28 день 240-250 диаметр капилляра пр. 5,5-6,5 мкм. 200-210
3. 38 день 340-350 диаметр капилляра пр. 7,5 мкм. 200-250
4. 60 день 400-420 280-320
450-|
400 350 300 250 200 150 100 50
0 ....
12 28 38 60
Рис. 11. Динамика изменения числа функционирующих капилляров костной ткани в различные сроки формирования костной мозоли.
1_ %
12
28
38
60
□ опыт
□ контроль
Рис. 12. Процент прироста числа функционирующих капилляров костной ткани от 12 к 60 дню.
80
70
60
50
40
30
20
10
0
У У У У У У У
^
У / —В-т— -Ґ
□ опыт
12
28
38
60
Рис. 13.Процент прироста числа функционирующих капилляров костной ткани от 12 к 60 дню (в опытной группе по отношению к контрольной).
Выводы
На основании представленных материалов рентгенологического исследования мы можем сделать вывод о том, что в результате воздействия экзогенной биорезонансной терапии достоверно увеличивается среднее значение оптической плотности и площади костной мозоли как на 30 - й так и на 60 - й день после травмы.
Полученные данные морфологического исследования достоверно свидетельствуют об увеличении количества остеобластов и числа функционирующих капилляров костной мозоли на всем протяжении репаративного остеогенеза при воздействии экзогенной биорезонансной терапии.
Всё это в целом позволяет говорить о достоверном и положительном стимулирующем влиянии данной методики на репаративный остеогенез.
ЛИТЕРАТУРА
1. Ю.В.Готовский, Л.Б.Косарева, И.Л.Блинков, А.В.Самохин. Экзогенная биорезонансная терапия фиксированными частотами. - М.: «ИМЕДИС», 2001. - 95 с.
2. А.В.Самохин, Ю.В.Готовский. Электропунктурная диагностика и терапия по методу Р. Фолля. - М.: «ИМЕДИС», 2003. - 527 с.
3. Ю.В.Готовский, И.Л.Блинков. Структурно - резонансная терапия (экзогенная биорезонансная терапия). - М.: «ИМЕДИС», 1999 - 256 с.
4. Корнеев М.А. Эталонная линейная рентгеноденситометрия как метод прижизненного определения минеральной насыщенности костной ткани. // Арх. Анатом. - 1977. - Т.72, вып.6. - С.58 - 60.
THE EXPERIMENTAL STUDIES OF THE INFLUENCE OF STRUCTURAL AND RESONANCE THERAPY ON REPARATIVE OSTEOGENESIS
S.S. Kupov, A.V., Fedoseev, P.A, Chumachenko, M.V. Mnikhovich
The influence of structural and resonance therapy on reparative osteogenesis of the bone was analyzed in the given article. We studied in detail the bone tissue state, the influence of the method used in the experiment with further histological examination of the material.
