CC BY
6
238
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
культуры, полученные из различных ТБ очагов резекта-тов легких 30 пациентов, состояли из макрофагов и других клеток иммунитета, как правило, с отсутствием фи-бробластов [2, 3].
Развитие методики с ex vivo культивированием клеток до 5-7 дней позволило не только выявить ряд характеристик Mtb [4], но и оценить вероятное присутствие МСК в первичном инфильтрате клеток из резектатов легких пациентов по появлению колоний делящихся клеток с характерной для МСК фибробластоподобной морфологией. В результате, значительное количество МСК выявили только для инфильтрата клеток из стенки туберкулемы пациента 27. Для инфильтратов клеток как из удаленного района легкого этого пациента, так и из различных ТБ очагов из резектатов легких других пациентов обнаружили только единичные МСК или полное их отсутствие вне зависимости от воспалительной и микробицидной активации клеток, зараженности их Mtb и степени фиброза в исследованных тканях. Изучение участия МСК в патогенезе и ремоделировании легких пациентов, больных ТБ, требует продолжения для разработки новых методов и препаратов для эффективного восстановления функций легочного эпителия.
Работа выполнена с использованием оборудования ЦКП микроскопического анализа биологических объектов ФИЦ ИЦиГ СО РАН и ЦКП «Протеомный анализ» ФИЦ ФТМ (соглашение № 075-15-2021-691). Финансирование бюджетное.
Литература:
1. Zhang X., Xie Q., Ye Z. et al. Front. Immunol. 2021. V. 12. Ant.
№ 695278.
2. Ufimtseva E., Enemeeva N., Petnunina E. et al. PLoS ONE. 2018.
V. 13. № 2. Ant. № e0191918.
3. Ufimtseva E.G., Enemeeva N.I., Umpeleva T.V. et al. Int. J. Mol.
Sci. 2021. V. 22. Ant. № 3452.
4. Уфимцева Е.Г., Еремеева Н.И., Кравченко М.А. и др. Пат.
РФ № 2652882. Бюл. № 13. 2018.
ВЛИЯНИЕ СПОСОБА СТИМУЛЯЦИИ СОЗРЕВАНИЯ НА СЕКРЕЦИЮ КУЛЬТИВИРУЕМЫМИ IN VITRO ДЕНДРИТНЫМИ КЛЕТКАМИ IL-12
Ф.А. Фадеев, А.Д. Никанорова
ГАУЗ СО Институт медицинских клеточных технологий, Екатеринбург, Россия
e-mail: fdf79@mail.ru
Ключевые слова: дендритные клетки, стимуляция созревания, цитокины, интерлейкин 12.
Дендритные клетки (ДК) играют ключевую роль в инициации адаптивного иммунного ответа и являются перспективным средством для клеточной терапии, позволяющим стимулировать направленный антиген-специфический иммунный ответ. ДК, культивируемые in vitro, используют для лечения различных заболеваний, в первую очередь, онкологических. Противоопухолевая иммунотерапия направлена, в основном, на активацию Т-звена иммунитета и формирование клонов эф-фекторных Т-хелперов 1 типа (Тх1) и цитотксических Т-лимфоцитов, специфичных к опухолевым клеткам. Продуцируемый ДК интерлейкин-12 (IL-12) во многом определяет направление дифференцировки наивной CD4+ Т-клетки в Тх1, и в целом обусловливает развитие иммунного ответа в сторону активации клеточного звена.
В данной работе была проведена оценка различных способов стимуляции созревания культивируемых in vitro ДК на секрецию ими IL-12. ДК были получены путем обработки моноцитов из донорской крови цитоки-нами (GM-CSF и IL-4). Полученные незрелые ДК подвергали воздействию различными смесями для стимуляции созревания:
• TNFa;
• «коктейль» TNFa + IL-1 + IL-6 + PGE2;
• poly I:C;
• липополисахарид(LPS)
• лизат опухолевых клеток SK-MEL-2.
Экспрессию рецепторов ДК определяли методом проточной цитофлуориметрии. Уровень секреции цитокинов определяли методом ИФА.
При использовании разных смесей отмечены существенные различия в уровне экспрессии ДК поверхностных рецепторов (данные не представлены), хотя, в целом, их иммунофенотип соответствовал зрелым ДК (CD14-CD11c++ HLA-DR++ CD86++ CD40+ CD83+).
Уровень секреции IL-12 при использовании лигандов TLRs (polyI:C, LPS), а также лизата клеток, содержащего DAMPs, достоверно не отличался от контроля (ДК без стимуляции созревания), несмотря на то, что связывание TLRs с лигандами должно активировать сигнальные пути, усиливающие транскрипцию генов, кодирующих IL-12. ДК, подвергшиеся воздействию TNFa, также демонстрировали невысокий уровень секреции IL-12, несмотря на то, что TNFa является активатором nF-кВ сигнального пути, усиливающего экспрессию генов, кодирующих IL-12. Максимальный уровень секреции IL-12 (20,67 ± 12,06 пг / мл) отмечен при использовании «коктейля», что можно объяснить сочетанным действием входящих в его состав компонентов. Примечательно, что, содержащийся в его составе PGE2, по данным литературы, инги-бирует синтез IL-12.
Таким образом, использование «коктейля» из TNFa + IL-1 + IL-6 + PGE2 для стимуляции созревания ДК обеспечивает наиболее высокий уровень секреции IL-12. Полученные с его использованием ДК также имеют максимальный уровень экспрессии рецепторов, обеспечивающих миграцию ДК в лимфоузлы, в частности, CCR7 (данные не представлены). На этом основании можно сделать вывод, что «коктейль» является наиболее подходящим компонентом для стимуляции созревания ДК, получаемых in vitro для использования в противоопухолевой терапии.
ИССЛЕДОВАНИЕ БИОСОВМЕСТИМОСТИ ДЕЦЕЛЛЮЛЯРИЗОВАННЫХ КОЛЛАГЕНОВЫХ СКАФФОЛДОВ С АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
А.Н. Файзулина, А.Д. Кручинина
ФГБОУ ВО Пензенский государственный университет, Пенза, Россия
e-mail: a.d.kruchinina@mail.ru
Ключевые слова: коллагеновый скаффолд, децеллюляри-зация, антимикробная активность.
Увеличение количества реконструктивных и пластических операций обуславливает потребность в расширении производства биоматериалов для регенеративной медицины. Наиболее распространенным и доступным является сырье ксеногенного происхождения. Удаление клеток методами ферментативной или химической
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
