CC BY
55
в 2,5% случаев. В целом из всех наблюдаемых аберраций 78% составили аберрации хроматидного типа и 22% - хромосомного.
В группе больных острым лейкозом до лечения наблюдалось статистически достоверное повышение уровня хромосомных аберраций в клетках периферической крови по сравнению с контролем (2,37%±0,28, 1=4,41 при р<0,05) за счет всех видов хромосомных аберраций (табл. 1, 2), среди которых преобладали аберрации хроматидного типа (простые и обменные), составившие 70% от общего числа аберраций. Преобладающее число больных (74%) имели от 1 до 3 аберраций, у 17% пациентов не выявлены изменения со стороны хромосомного аппарата, у остальных (9%) определялось по 4 аберрации.
Среди больных острым лейкозом после курсов химиотерапии наблюдалось резкое повышение уровня хромосомных аберраций в клетках периферической крови (4,84±0,56, 1=6,68 при р<0,05) в сравнении с контрольной группой (табл. 1, 2). Так же, как и в предыдущих группах, основным типом хромосомных аберраций явились одиночные фрагменты, составившие 60,8%. Частота парных фрагментов достигала 30,7%; хромосомные обмены встречались в 5%, хроматидные обмены - в 3,5% случаев. Преобладали пациенты, имевшие от 1 до 3 аберраций (61,8%), 20% пациентов имели от 4 до 6 аберраций, 12,7% больных - 7 и более хромосомных аберраций. У 5,5% пациентов данной группы не обнаружено цитогенетических изменений.
При сравнении группы больных острым лейкозом до и после лечения также определялось статистически достоверное повышение уровня хромосомных аберраций в клетках периферической крови пациентов после химиотерапии (1=3,95 при р<0,05). При анализе уровня спонтанного мутагенеза в группах больных острым ми-ело- и лимфобластным лейкозом статистически значимых различий не выявлено.
Выявленное повышение уровня спонтанного мутагенеза у больных острым лейкозом свидетельствует о генетической нестабильности и о возможном мутагенном влиянии факторов внешней среды, что играет важную роль в патогенезе заболевания. Наблюдаемое резкое повышение уровня хромосомных аберраций у пациентов, получавших курсы индукции ремиссии, связано, в первую очередь, со специфическим
мутагенным воздействием химиотерапевтических препаратов. Преобладание аберраций хроматидного типа свидетельствует в пользу преимущественного влияния химических факторов на процесс формирования мутаций.
Полученные в ходе исследования данные вносят вклад в понимание вопросов патогенеза и прогрессирования острых лейкозов. Показано, что применяемые методы химиотерапии гемобластозов индуцируют значимый мутагенный эффект. Дальнейшие исследования в данной области позволят выявить возможное прогностическое значение исходного уровня спонтанного мутагенеза на течение острых лейкозов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бочков Н. П. Клиническая генетика. - М., 2002. - 448 с.
2. Бочков Н. П., Демин Ю. С., Лучник И. В. Классификация и методы учёта хромосомных аберраций в соматических клетках // Генетика. - 1972. - Т. 5. - С. 133-141.
3. Бочков Н. П., Кулешов Н. П., Журков В. С. Анализ спонтанных хромосомных аберраций в культурах лимфоцитов человека // Цитология. - 1972. - Т. 14. № 10. - С. 1267-1274.
4. Бочков Н. П., Чеботарев А. Н. Наследственность человека и мутагены внешней среды. - М.: Медицина, 1989. - 272 с.
5. Волкова М. А. Клиническая онкогематология: Руководство для врачей. - М.: Медицина, 2008. - 576 с.
6. Жимулев И. Ф. Общая и молекулярная генетика: Учеб. пособие. - Новосибирск, 2002. - 459 с.
7. Прокофьева-Бельговская А. А. Основы цитогенетики человека. - М.: Медицина, 1969. - 537 с.
8. Anderson D., A. J. Francis, P. Godbert, P. C. Jenkinson, K. P. Butterworth. Chromosome aberrations, sister-chromatid exchanges and mitogen-induced blastogenesis in cultured peripheral lymphocytes from 48 cotrol individuals sampled 8 times over 2 years // Mutat. Res. - 1991. - Vol. 250. - № 1/2. - P. 467-476.
9. Gebhart E, Losing T., Wopfner F. Chromosome studies on lymphocytes of patients under cytostatic therapy. 1 Conventional chromosome studies in cytostatic interval therapy // Hum. Genet. -1980. - № 55. - P. 53-63.
10. Moorhead P. S., Nowell P. C., Mellman W. J., Battips D. M., Hungerford D. A. Chromosome preparations of leukocytes cultured from human peripheral blood // Exp. Cell. Res., 1960. -20. - P. 613.
Поступила 17.07.2009
А. В. ЗОРЬКИНА, А. А. УСАНОВА, О. М. КИСЕЛЕВА, А. Л. СЕРНОВА
ВЛИЯНИЕ СОЧЕТАННЫХ МЕТАБОЛИЧЕСКИХ НАРУШЕНИЙ НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПЕРЕКИСНОГО ОКИСЛЕНИЯ ЛИПИДОВ
В ТКАНЯХ ГОЛОВНОГО МОЗГА
Кафедра поликлинической терапии и функциональной диагностики медицинского института
ГОУ ВПО «МГУ им. Н. П. Огарева»,
430035, Мордовия, г. Саранск, ул. Ульянова, 28. E-mail: wind-lina@mail.ru
Экспериментальное моделирование гипергликемии, дислипидемии и сочетанных метаболических нарушений оказывает значительное влияние на показатели перекисного окисления липидов, антиоксидантной защиты тканей головного мозга и определяет их динамику при последующем моделировании острого нарушения мозгового кровообращения.
Ключевые слова: нарушение мозгового кровообращения, гипергликемия, дислипидемия.
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009 УДК 616.831: 577.125.33
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009
A. V. ZORCINA, A. A.USANOVA, O. M. KISELEVA, A. L. SERNOVA
INFLUENCE OF ASSOCIATED METABOLIC ABNORMALITIES ON SOME INDICES OF LIPID PEROXIDATION IN CEREBRAL TISSUES
Medical department chair of policlinic therapy and functional diagnostics SGI HPE «N. P. Ogarev MSU»,
430035, Uljanova, 28, Saransk, Mordovian Republic
Experimental simulation of hyperglycemia, dislipoproteinemia and associated metabolic abnormalities exerts significant influence on indices of lipid peroxidation, antioxidant protection of cerebral tissues and determines its dynamics when acute stroke is simulated.
Key words: acute stroke, hyperglycemia, dislipoproteinemia
Введение
Метаболический синдром привлекает внимание исследователей как совокупность факторов, часто сопровождающих развитие ишемического инсульта, но вместе с тем и осложняющих его течение. Нарушения липидного и углеводного обмена в сочетании с острым нарушением мозгового кровообращения приводят к ухудшению течения и прогноза заболевания [1, 2, 3, 4]. Существенное значение имеет совершенствование понимания основных причин и патофизиологических механизмов, усугубляющих прогноз заболевания, для разработки эффективного и дифференцированного подхода в комплексной терапии данной патологии.
Целью работы явилось изучение влияния гипергликемии и дислипидемии на некоторые показатели пере-кисного окисления липидов и антиоксидантной защиты в тканях головного мозга на фоне острого нарушения мозгового кровообращения (ОНМК) в эксперименте.
Методика исследования
Исследования проводились на 48 нелинейных белых крысах обоего пола массой 250-300 г. Интактную группу (серия № 1) составили 6 животных. Моделирование ОНМК осуществлялось после общего обезболивания и местной анестезии 0,25% раствором новокаина путем двусторонней перевязки общих сонных артерий (серия №2). Метаболические нарушения воспроизводились с использованием трех экспериментальных моделей. Модель 1 - аллоксановая гипергликемия: однократное в/б введение аллоксана (135 мг/кг) (Мадянов И. В., 1997), выведение из эксперимента на 20-е сутки (серия №3, n=6). Животным серии № 4 (n=6) на 20-е сутки эксперимента осуществлялось моделирование ОНМК по вышеуказанной методике. Модель 2 - холестериновая дислипидемия: ежедневно в течение 20 суток животным вводили масляный раствор холестерина (40 мг/кг/сут) и эргокальциферол (25 тыс. МЕ/кг/сут) per os (S. Y. K Jowsufzai S. Y. K. et al., 1976) (№ 5). Животным серии № 6 на фоне моделирования дислипидемии на 20-е сутки эксперимента воспроизводилось ОНМК. Модель 3-аллоксан-холестериновая дислипидемия: подопытным животным вводился аллоксан (135 мг/кг) однократно в/б, затем ежедневно в течение 20 суток вводили масляный раствор холестерина (40 мг/кг/сут) per os (серия № 7). Животным серии №8 на фоне моделирования сочетанных метаболических нарушений воспроизводилось ОНМК на 20-е сутки эксперимента по вышеуказанной методике. Выведение из эксперимента осуществлялось на 20-е сутки после в/б введе-
ния тиопентала натрия 50 мг/кг; в группах с моделированием ОНМК - на 20-е сутки эксперимента через час после воспроизведения ОНМК.
В тканях головного мозга определяли активность каталазы (М. А. Королюк, 1988), уровень малонового диальдегида при спонтанном (МДА) и железоиндуцированном окислении (РеМДА) (С. Г. Конюхова, 1989). Резерв липидов для перекисного окисления (РЛПО) рассчитывали по формуле [РЛПО=(Ре-МДА-МДА)/ МДА] (Д. И. Кузьменко, Б. И. Лаптев, 1999). Производили определение активности супероксиддисмутазы (С. Чевари, 1985). Антиокислительную активность рассчитывали по формуле: АОА = Ре-МДА - МДА. Результаты обрабатывали методами вариационной статистики на персональном компьютере с использованием программы Ехсе1 путем расчёта средних арифметических (М) и ошибок средних (±т). Различия оценивали как достоверные при р<0,05.
Результаты исследования и обсуждение
Моделирование аллоксановой гипергликемии приводило к росту содержания МДА в ткани головного мозга в 2 раза, угнетению активности каталазы на 78%, снижению РЛПО на 85%, АОА - на 63% и активации СОД в 3,5 раза (табл. 1). На фоне холестериновой дислипидемии наблюдался рост содержания МДА на 34% и Ре-МДА на 41%, повышение АОА на 47%, угнетение активности каталазы на 41% и активация СОД в 5,6 раза. В условиях сочетанных метаболических нарушений наблюдалась активация процессов липоперокси-дации, проявившаяся в повышении содержания МДА в 2,6 раза, РеМДА - на 34%. Наблюдалось снижение АОА и РЛПО на 61% и 88%, в 2 раза снизилась активность каталазы, активации СОД не регистрировалось.
При моделировании ОНМК у животных без метаболических нарушений был отмечен рост содержания МДА на 51%, снижение активности каталазы на 82%, АОА и РЛПО - на 47% и 66%. Активность СОД возросла в 5,5 раза (табл. 2). ОНМК у животных с аллоксановой гипергликемией привело к дальнейшему снижению изученных показателей антиоксидантной защиты: АОА и РЛПО - на 58% и 53%, активность СОД снижалась на 64% по сравнению с данными соответствующей серии без ОНМК. При моделировании ОНМК на фоне холестериновой дислипидемии содержание МДА и Ре-МДА в ткани головного мозга возрастало на 47% и 27%, активность каталазы снижалась на 48%, отсутствовала дальнейшая активация СОД. При моделировании ОНМК у животных с сочетанными метаболическими нарушениями содержание МДА снижалось на 38%,
Таблица 1
Влияние моделирования метаболических нарушений на некоторые показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты в ткани головного мозга (М±m)
Показатели Интактные АГ ХД АХД
МДА, ммоль/л 7,55±0,56 16,18±1,39* 10,15±1,05* 19,3±0,8*
Ре-МДА, ммоль/л 16,36±1,29 18,83±0,61 23,10±2,98* 21,98±3,5*
АОА, ммоль/л 8,80±1,12 3,25±0,42* 12,95±1,31* 3,40±0,56*
РЛПО, % 119,0±16,9 17,3±2,5* 151,1±31,3 14,1±1,2*
Каталаза, мкКат/с-л 1,04±0,10 0,237±0,017* 0,61±0,04* 0,52±0,07*
СОД, усл.ед. 11,18±1,53 38,8±2,0* 62,60±4,54* 9,82±2,46
Примечание: АГ - аллоксановая гипергликемия (модель 1),
ХД - холестериновая дислипидемия (модель 2),
АХД - аллоксан-холестериновая дислипидемия (модель 3);
* - достоверность различия р<0,05 к данным интактной группы.
Таблица 2
Влияние ОНМК на некоторые показатели перекисного окисления липидов в тканях головного мозга белых нелинейных крыс на фоне метаболических нарушений (M±m)
Показатели ОНМК АГ, ОНМК ХД, ОНМК АХД, ОНМК
МДА, ммоль/л 11,37±1,9 18,6±3,3 14,9±1,6 11,9±2,5
Ре-МДА, ммоль/л 16,07±3,44 20,0±2,97 29,3±1,9* 19,8±2,0
АОА, ммоль/л 4,7±0,89 1,38±0,13* 14,4±2,0* 7,5±1,2*
РЛПО, % 40,24±11,07 8,2±1,5* 106±22* 65,5±4,8
Каталаза, мкКат/с-л 0,189±0,070 0,46±0,15* 0,32±0,03* 0,24±0,04
СОД, усл.ед. 61,18±6,22 14,0±1,1* 69,0±2,3 41,8±5,2*
Примечание: АГ -аллоксановая гипергликемия (модель 1),
ХД - холестериновая дислипидемия (модель 2),
АХД - аллоксан-холестериновая дислипидемия (модель 3);
* - достоверность различия р<0,05 к данным группы с ОНМК без метаболических нарушений.
наблюдался рост расчетных показателей - АОА и РЛПО в 2,2 и 4,7 раза, активность каталазы снижалась еще на 52%, активность СОД возрастала в 4,3 раза по сравнению с данными соответствующей серии без ОНМК (табл. 2).
Полученные результаты свидетельствуют, что экспериментальное моделирование диабета приводит к росту активности процессов перекисного окисления липидов в ткани головного мозга, к снижению активности каталазы и росту активности СОД. При последующем моделировании ОНМК наблюдается дальнейшее угнетение антиок-сидантной защиты ткани головного мозга. Дислипидемия приводит в эксперименте к умеренной активации процессов перекисного окисления липидов, активации суперок-сиддисмутазы и снижению активности каталазы. При последующем моделировании ОНМК наблюдается даль-
нейший рост активности процессов липопероксидации и истощение каталазной активности. В условиях сочетанных метаболических нарушений отмечается значительная активация процессов перекисного окисления липидов в ткани головного мозга, снижение антиокислительной активности и активности каталазы. При последующем ОНМК в тканях головного мозга наблюдается снижение содержания вторичных продуктов липопероксидации. Отмечается дальнейшее угнетение активности каталазы и рост активности супероксиддисмутазы, что способствует накоплению гидроперекисей в тканях головного мозга и может выступить в качестве дополнительного повреждающего фактора.
Таким образом, гипергликемия, дислипидемия и их сочетание оказывают выраженное влияние на состояние процессов перекисного окисления липидов тканей
Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009
УДК 615.216.2 Кубанский научный медицинский вестник № 7 (112) 2009
головного мозга в эксперименте и выступают в роли не менее значимого повреждающего фактора, чем острое нарушение мозгового кровообращения.
ЛИТЕРАТУРА
1. Мамедов М. Н. Роль статинов в первичной и вторичной профилактике мозгового инсульта // СопвШит МесИсит. - 2008. -Т. 10. № 2. - С. 91-94.
2. Мкртумян А. М. Кардиоваскулярные осложнения сахарного диабета 2-го типа и особенности коррекции углеводного обмена // Сердце. - 2003. -Т. 2. - № 6 (12). - С. 266-271.
3. Смоленская О. Г. Место статинов и антагонистов кальция в первичной и вторичной профилактике ишемического инсульта // СопвШит МеС1сит. Неврология / Цереброваскулярные заболевания. - 2007. - Т. 9. № 2. -С. 72-78.
4. Соловьева Э. Ю., Миронова О. П., Федин А. И. Антиоксидантная терапия в восстановительном периоде лечения ишемического инсульта/ СопвШит МеСюит. Неврология. - 2008. - Т. 10. № 2. - С. 98-104.
Поступила 26.06.2009
М. А. КАДЕ1, Ю. Д. ИГНАТОВ2, А. И. ВИСЛОБОКОВ2, П. А. ГАЛЕНКО-ЯРОШЕВСКИЙ1, В. А. БОРИСОВА2, К. Н. МЕЛЬНИКОВ2
ВЗАИМНАЯ МОДУЛЯЦИЯ ДЕЙСТВИЯ НА ИОННЫЕ КАНАЛЫ НЕЙРОНОВ МОЛЛЮСКОВ МЕКСИДОЛА И БУПИВАКАИНА ПРИ ИХ СОВМЕСТНОМ ПРИМЕНЕНИИ
ГОУ ВПО «Кубанский государственный медицинский университет» министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации,
Россия, 350063, г. Краснодар, ул. Седина, 4. E-mail: kybfarma@rambler.ru;
2ГОУ ВПО «Санкт-Петербургский государственный медицинский университет имени акад. И. П. Павлова» Министерства здравоохранения и социального развития
Российской Федерации,
Россия, 197022, г. Санкт-Петербург, ул. Л. Толстого, 6/8
На изолированных нейронах прудовика (Limnaea stagnalis) с использованием метода внутриклеточного диализа и фиксации мембранного потенциала изучали изменения натриевых, кальциевых и калиевых медленных ионных токов при раздельном и совместном влиянии мексидола и бупивакаина. Проведено две серии опытов: 1-я - раздельное и совместное влияние мексидола (100 мкМ) и бупивакаина (62,5 мкМ); 2-я - совместное влияние мексидола (1000 мкМ) и бупивакаина (6,2, 62,5, 125, 250 и 500 мкМ). Показано ослабление мексидолом подавления кальциевых и калиевых медленных токов, вызванного бупивакаином, и усиление блокирования натриевых токов при сочетанном применении обоих препаратов.
Ключевые слова: местные анестетики, мексидол, бупивакаин, натриевые, кальциевые, калиевые ионные токи, нейроны прудовика.
M. A. KADE1, U. D. IGNATOV2, A. V. VISLOBOKOV2,
P. A. GALENKO-YAROSHEVSKY1, V. A. BORISOVA2, K. N. MELNIKOV2
MUTUAL MODULATION OF MEXIDOL AMD BUPIVACAIN EFFECT ON MOLLUSC ION CHANNELS DURING THEIR COMBINED APPLICATION
1The state education institutional«Kuban State Medical University» of the Ministry of health and social development of the Russian Federation,
Russia, 350063, Krasnodar, st. Sedina, 4. E-mail: kybfarma@rambler.ru;
2the state education institutional «St. Peterburg State Medical University named after academician Pavlov» of the Ministry of health and social development of the Russian Federation,
Russia, St. Peterburg, st. L. Tolstogo, 6/8
We studied the changes of natrium, calcium and potassium slow ion currents during separated and combined application of mexidol and bupivacain on the isolated limnaea stagnalis neurons using the method of intracellular dialysis and fixation of membrane potential.
Two series of experiments were performed: 1 - separate and combined effect of mexidol (100 mcM) and bupivacain (62,5 mcM); 2 - combined effect of mexidol (1000 mcM) and bupivacain (6,2, 62,5, 125, 250 and 500 mcM).
Mexidol weakening of natrium, calcium and potassium slow ion currents suppression induced by bupivacain and intensification of natrium currents prohibition during combined application of both preparations were demonstrated.
Key words: local anesthetics, mexidol, bupivacain, natrium, calcium and potassium slow ion currents, Limnaea stagnalis.
