CC BY
56
© А. В. Якубов, Н. И. Пулатова, А. А. Хамраев удк 616. 33-002. 44-08:
А. В. Якубов, Н. И. Пулатова, А. А. Хамраев
влияние схем квадритерапии второй линии на BЗAИMОДEЙCTBИE некоторых факторов защиты в слизистой желудка при экспериментальной язве
Ташкентская медицинская академия (г. Ташкент, республика Узбекистан)
Данная работа является фрагментом НИР «Особенности изменения патологических механизмов при развитии различных патологических состояний и разработка оптимальных схем фармакотерапии», № гос. регистрации 01. 070070.
вступление. Язвенная болезнь - гетерогенное хроническое рецидивирующее с различной периодичностью заболевание, с разными вариантами течения и прогрессирования, у части больных приводящее к осложнениям. Основные факторы риска развития язвенной болезни - генетическая предрасположенность и нарушение равновесия между факторами агрессии и защиты. Агрессивными факторами являются кислота, пепсин, желчные кислоты, протеазы панкреатического сока и нарушение моторики гастродуоденальной системы, инфекция НеНсоЬа^ег ру!оп (НР). Согласно данным литературы, изучается в основном влияние противоязвенной терапии на факторы агрессии. Действие же различных схем эрадикационной терапии на факторы защиты практически не изучено, а результаты исследований зачастую носят противоречивый характер. Так, по одним данным [21], успешная эрадикация НР приводит к нормализации состояния слизистой оболочки желудка в 51,2% случаев. Другие исследователи какой-либо разницы в состоянии слизистой оболочки желудка у больных, у которых 7 лет назад была успешно проведена эрадикация НР, и больных, которым эрадикация НР не проводилась, не обнаружили [14]. Как утверждает И. М. Белова и соавт
[2], эрадикационная антимикробная терапия задерживает репарацию язвенных дефектов слизистой. А. В. Канонова и соавт. [5] при эрадикационной терапии хронических гастритов наблюдали повышение индекса апоптоза. Эти факты свидетельствуют о необходимости изучения влияния эффективности схем противоязвенной терапии второй линии на факторы защиты в слизистой гастродуоденальной зоны.
цель исследования. Изучить влияние схем квадритерапии второй линии на состояние слизистого барьера желудка и системы N0 образования при экспериментальной язве.
Объект и методы исследования. Исследования проводили на 60 белых крысах-самцах смешанной популяции массой 150-190 г, которые содержались в виварии на обычном рационе. Экспериментальную язву (ЭЯ) воспроизводили по
методу В. А. Вертелкина в модификации И. А. Лосева и соавт. [9]. Выполнено две серии экспериментов в 5 группах животных по 6 особей в каждой: 1-я группа - интактная; 2-я группа - ЭЯ; 3-я группа - ЭЯ+Н2О (без лечения); 4-я группа-ЭЯ+омепрозол+де-нол+ амоксициллин+тетрациклин;5-я группа - ЭЯ+оме-празол+де-нол+тетрациклин+метронидазол. Используемые препараты вводили перорально в виде водной суспензии в течение 10 дней в следующих дозах: омепразол 50 мг/кг [4], де- нол 10 мг/ кг [16], метронидазол 50 мг/кг [3], тетрациклин 50 мг/ кг [19], амоксициллин 40 мг/кг [18]. Применяемые схемы рекомендованы третьим Маастрихтским соглашением. Интактную группу составили ложно-оперированные животные, контрольной группой служили животные с ЭЯ, которые в течение 10 дней получали Н2О. Все болезненные процедуры выполняли согласно Хельсинской декларации о гуманном отношении к животным.
Для проведения биохимических исследований животных забивали под эфирным наркозом путем одномоментной декапитации. Желудок извлекали, очищали и промывали холодным физиологическим раствором, удаляли преджелудок, выскабливали слизистый слой, взвешивали и гомогенизировали в физиологическом растворе. Содержание нерастворимых гликопротеинов (НГП) в гомогенате оценивали по содержанию сиаловых кислот и фу-козы. Сиаловые кислоты определяли по методу Л. И. Линевика [8], фукозу - методом, предложенным П. Д. Рабиновичем и соавт. [10], содержание общего белка - по методу О. Н. Lowry и соавт. [17].
Образование N0 в слизистой ткани желудка изучали путем определения содержания его продуктов нитритов и нитратов [15] в микросомальной фракции гомогената. Содержание аминокислоты L-аргинина определяли в надосадочной фракции гомогената слизистой по методу A. Steven и соавт [20], активность маркеров N0 синтазы - НАДФН-диафоразы - по методу V Т. Hope и соавт. в модификации А. С. Комарина и соавт. [6]. Полученные результаты обрабатывали с использованием t- критерия Стьюдента стандартным пакетом Microsoft Excel. Различия считались значимыми при Р<0,05.
результаты исследований и их обсуждение. В таблице 1 представлены результаты изучения влияния стандартных схем терапии второй линии на
Таблица 1
содержание фракций нерастворимых гликопротеинов в слизистой желудка при экспериментальной язве
Группа животных Сиаловые кислоты, мкг/мл Фукоза, мг/мл Общий белок, мг/мл Сумма фракций НГП, мкг/мл
Интактная 3,44+0,178 5,66+0,25 15,42+0,75 21083,4
ЭЯ 1,52+0,11а 1,89+0,12а 7,51+0,46а 9401,5
ЭЯ+Н2О 1,74+0,182а 2,11+0,19а 8,44+0,37а 10551,7
ЭЯ+О+Д+А+Т 3,29±0,187б 4,57+0,28аб 14,16+0,65аб 18733,2
ЭЯ+О+Д+Т+М 1,08+0,031аб 1,34+0,12аб 6,10+0,38аб 9441,78
Примечание: р<0,05: а - по сравнению с показателями интактной группы; б - по сравнению с данными животных без лечения. О - омепразол, Д - де-нол, А - -амоксициллин, Т - тетрациклин, М - метронидазол.
Таблица 2
Показатели системы N0 образования в слизистой желудка при экспериментальной язве
Группа животных Продукты ІМО, мкмоль/мг белка 1_-аргинин, нмоль/мг белка НАДФ-Н-диа-фораза, нмоль/ мин/мг белка
Интактная 9,14+0,65 19,55+0,681 8,40+0,63
(ЭЯ) 3,16+0,19 8,34+0,48 4,70+0,22
ЭЯ+Н2О 4,28+0,21 9,26+0,55 4,56+0,28
ЭЯ+О+Д+А+Т 10,53+0,60б 20,34+0,968б 9,11+0,55б
ЭЯ+О+Д+Т+М 4,12+0,24 12,46+0,60б 3,13+0,17б
Примечание: р<0,05: а - по сравнению с показателями интактной группы; б - по сравнению с данными животных без лечения. О - омепразол, Д - де-нол, А - -амоксициллин, Т - тетрациклин, М - метронидазол.
содержание фракций НГП в слизистой ткани желудка при экспериментальной язве.
Как видно из таблицы 1, при экспериментальной язве содержание НГП и его фракций в слизистой ткани желудка значительно снижалось. Содержание сиаловых кислот уменьшалось в 2,3 раза, фукозы и общего белка - соответственно в 3 и 2 раза. В сумме содержание НГП в 1 мл суспензии слизистой ткани было в 2,2 раза ниже, чем у интактных животных. У животных группы без лечения эти показатели практически не менялись.
Квадритерапия, включающая омепразол, де-нол, амоксициллин и тетрациклин, стимулировала синтез слизистого барьера. У крыс этой группы содержание сиаловых кислот было выше, чем у животных без лечения на 89,0%, фукозы - на 116,6%, общего белка - на 67,8%. Сумма фракций НГП увеличивалась на 77,5%.
При применении другой схемы квадритерапии омепразол+де-нол+тетрациклин+метронидазол результаты были несколько иными, то есть эта схема оказывала на синтез НГП слизистого барьера ингибирующий эффект. По сравнению с группой без лечения у животных этой группы содержание сиаловых кислот снижалось на 38,0%, фукозы - на 36,5%, общего белка - на 27,8%. Сумма фракций НГП уменьшалась на 22,6%.
Результаты изучения влияния стандартных схем терапии второй линии на показатели системы N0 образования в
слизистой ткани желудка при экспериментальной язве представлены в таблице 2.
Как видно из таблицы 2, при экспериментальной язве содержание продуктов N0 снижалось почти в 3 раза. У животных группы без лечения наблюдалось некоторое увеличение продуктов N0 (>0,05). Экспериментальная язва сопровождалась снижением содержания 1_-аргинина в 2,1 раза, активности НАДФН-диафоразы в 1,8 раза.
При применении квадритерапии наиболее эффективной оказалось схема с омепразолом, де-нолом, амоксицил-лином и тетрациклином. У крыс этой группы содержание продуктов N0 было выше, чем у животных без лечения на 146,0%. Полученные результаты недостоверно отличались от результатов ин-тактной группы.
В группе животных, леченных оме-празолом, де-нолом, тетрациклином и метронидазолом, содержание продуктов N0 не менялось.
Обе примененные нами стандартные схемы увеличивали содержание _-аргинина, но схема с омепразолом, де-нолом, амоксициллином и тетрациклином оказалась более эффективной. Однако эти схемы действовали на активность НАДФН-диафоразы разнонаправленно. Квадритерапия с омепразолом, де-нолом, амоксициллином, тетрациклином достоверно увеличивала активность НАДФН-диафоразы. Схема с омепразолом, де-нолом, тетрациклином, метронидазолом оказывала на активность НАДФН-диафоразы ингибирующий фармакодинамический эффект.
Обсуждение. Установлено, что из факторов «защиты» в развитии уль-церогенеза, наряду с кровотоком, системой N0 образования, особую роль играет защитный слизистый барьер, на 95% состоящий из НГП. В составе НГП большое значение имеют такие углеводные компоненты как фукоза и сиаловые кислоты, обеспечивающие упругость и вязкость слизистого барьера. При применении квадритерапии, включающей омепразол, де-нол, амоксициллин и тетрациклин, отмечалось увеличение содержания НГП. Вероятно, это обусловлено примечательными свойствами де-нола. Как известно, препараты висмута оказывают на слизистую желудка и двенадцатиперстной кишки цитопро-тективное действие, повышая локальный синтез простагландина Е2 (в среднем на 50%), что в свою очередь увеличивает
секрецию бикарбонатов и слизи, улучшает микроциркуляцию в слизистой, стимулирует ангиогенез, поддерживает реконструкцию внеклеточного матрикса, оказывает противовоспалительное действие [7].
Квадритерапия, состоящая из омепразола, де-нола, тетрациклина и метронидазола, подавляла механизмы защитного барьера. Эти результаты согласуются с утверждением И. М. Беловой и соавт.
[3], которые отмечают, что схемы тройной и квадри-терапии, включающие омепразол, метронидазол и фуразолидон, обладают довольно активным эради-кационным и антисекреторным действием, однако при этом они отрицательно влияют на механизмы цитопротекции. Аналогичное мнение высказывают и другие авторы [12]. Видимо, при квадритерапии с омепразолом, де-нолом, амоксициллином и тетрациклином ингибирующий эффект омепразола не проявляется, а преобладает стимулирующий эффект де-нола.
Установлено, что одним из важных факторов цитозащиты в слизистой гастродуоденальной зоны является N0. Состояние N0 образования представляет собой основное звено обеспечения микроциркуляции. Сообщают, что недостаточное функционирование системы N0 образования служит основополагающим патологическим фактором уль-церогенеза [11]. Устойчивость к экзо- и эндогенным факторам слизистой оболочки желудка в значительной мере зависит от регионарного кровотока.
А. С. Абасова [1] и Э. М. Эседов [13], изучавшие содержание продуктов окиси азота в желудочном соке при применении различных схем эрадикацион-ной терапии у больных с язвенной болезнью, отмечают, что лучшей комбинацией для коррекции синтеза N0 является тройная терапия омепразолом,
кларитромицином и амоксициллином, а при применении тройной терапии омепразолом, клари-тромицином и метронидазолом содержание продуктов N0 в желудочном соке снижается. Авторы утверждают, что схемы, содержащие омепразол и метронидазол, подавляют синтез N0. Это мнение подтверждают результаты, полученные нами при применении квадритерапии, включающей омепра-зол, де-нол, тетрациклин и метронидазол.
Данные наших исследований аргументировано свидетельствуют о том, что при комбинированном применении омепразола с де-нолом, амоксициллином, тетрациклином ингибирующий фармакодинамический эффект омепразола на ключевые механизмы N0 образования не проявляется. В случае комбинации омепразола с метронидазолом (омепразол+де- нол+тетрациклин+метронидазол) ингибирующие эффекты омепразола, метронида-зола проявляются в виде фармакодинамического синергизма.
выводы.
1. Квадритерапия, включающая омепразол, де-нол, амоксициллин и тетрациклин, стимулирует синтез слизистого барьера желудка, что обусловлено положительным влиянием этой схемы на механизмы N0 образования.
2. Квадритерапия с омепразолом, де-нолом, тетрациклином, метронидазолом ингибирует ключевые механизмы N0 образования, что приводит к снижению синтеза нерастворимых гликопротеинов в слизистом барьере желудка.
Перспективы дальнейших исследований. Результаты наших исследований позволяют аргументировано обосновать и выбрать наиболее эффективные схемы лечения с позиции улучшения цитопротективных механизмов в гастродуодена-ольной зоне.
Литература
10
Абасова А. С. Комплексный анализ влияние схем эрадикационной терапии на активность оксида азота в желудочном соке у больных с гастродуоденальными заболеваниями, ассоциированными с Helicobacter pylori / А. С. Абасова // Антибиотикорезистентность и антимикробная химиотерапия: Материалы 2-й Всерос. науч. -практ. конф. - Махачкала, 2008. - С. 23-24.
Белова И. М. Фармакотерапевтическая эффективность антисекреторных и эрадикационных схем в лечении язвенной болезни, ассоциированной с Helicobacterpylori / И. М. Белова, О. Л. Белова // Клиническая фармакология в России: достижения и перспективы : Материалы науч. -практ. конф. - М., 2004. - С. 23-25.
Гавриленко Я. В. К вопросу о лечении язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки метронидазолом (клинико-экспериментальное исследование) / Я. В. Гавриленко, В. Е. Вазило, Е. М. Паршков // Тер. арх. - 1976. - №5. -С. 74-79.
Даминов Ш. Н. Сравнительная оценка действия кваматела и омеза на систему глутатиона различных отделов пищеварительной системы при экспериментальной язве двенадцатиперстной кишки / Ш. Н. Даминов, Ф. Х. Иноятова // Экспер. и клин. фармакол. - 1998. - №4. - С. 26-28.
Канонов А. В. Цитопротекция слизистой оболочки желудка: молекулярно-клеточные механизмы / А. В. Канонов // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2006. - №3. - С. 12-16.
Комарин А. С. Диагностическое значение определения нитратредуктазной активности и продуктов оксида азота при острых токсических поражениях печени : Метод. рекомендации / А. С. Комарин, В. Н. Горбунов, Л. Т. Даминова. - Ташкент, 2001. - 13 с.
Лапина Т. Л. Возможности лекарственного взаимодействия на цитопротективные свойства гастродуоденальной слизистой оболочки / Т. Л. Лапина // Рос. журн. гастроэнтерол., гепатол., колопроктол. - 2006. - №5. - С. 75-80.
Линевик Л. И. Успехи биологической химии / Л. И. Линевик. - М., 1962. - Т. 4. - 199 с.
Лосев И. А. Влияние холинопотенцирующих средств на репаративные процессы в поврежденной слизистой оболочке желудка крыс / И. А. Лосев, И. Н. Кузнецова // Экспер. и клин. фармакол. - 1992. - №5. - С. 15-17.
Рабинович П. Д. Биологическое окисление и основные функции желудка у больных язвенной болезнью / П. Д. Рабинович, П. В. Лилюшкин // Тер. арх. - 1979. - №11. - С. 103-105.
11. Сернеховская Н. Е. Комплексное лечение язвенной болезни с помощью оксида азота / Н. Е. Сернеховская, В. К. Шиш-ло, Д. М. Черепянчев [и др.] // Аллергол. и иммунол. - 2005. - №2. - С. 253.
12. Хамраев А. А. Некоторые механизмы рубцевания язвы желудка при применении различных схем противоязвенной терапии / А. А. Хамраев // Самарский мед. журн. - 2005. - №1 -2. - С. 75-76.
13. Эседов Э. М. Влияние различных схем эрадикационной терапии на активность оксида азота в желудочном соке у больных хеликобактер-ассоциированными заболеваниями гастродуоденальной зоны / Э. М. Эседов // Врач XXI века : сегодня и завтра : Съезд терапевтов Юга России. - Ростов н/Д, 2009. - С. 96-97.
14. Forbes J. Use of spinal manipulative therapy in the treatment of duodenal ulcer: a pilot study / J. Forbes // J. Manipulative Physiol. Ther. - 1995. - Vol. 18, №9. - Р 637-638.
15. Green L. C. Analysis of nitrate, nitrite and [15N] nitrete in biological fluids / L. С Green., D. A. Wanger, A. L. Glowsky [et al.] // Analyt. Biochem. - 1982. - Vol. 126. - Р 131-138.
16. Lambert J. R. Pharmacology of bismuth containing compounds / J. R. Lambert // Rev. Infec. Dis. - 1991. - Vol. 13, №8 (Suppl.) - Р 691-695.
17. Lowry О. H. Protein measurement with the folin phenol reagent / О. H. Lowry, N. J. Rosebrough, A. L. Farr, R. J. Randoll // J. Biol. Chem. - 1951. - Vol. 193, №1. - Р 265-275.
18. Luths S. 4-day triple therapy with rabeprozole, amoxicillin and clarithromycin in the eradication of Helicobacter pylori in patients with peptic ulcer disease - a pilot study / S. Luths, S. Teyssen, C. B. Kalbel, M. V. Singer // Gastroenterology. - 2001. -Vol. 39, №4. - Р 279-281, 284-285.
19. Moses О. Systemic tetracycline delays degradation of the three different collagen membranes in rat calvarias / О. Moses, A. Shemesh, G. Aboodi [et al.] // Clin. Oral. Implants Res. - 2009. - Vol. 20, №2. - Р 189-195.
20. Steven A. Amino Acid Analysis utilizing Fhenglysotiocyanata Derivatives / A. Steven, D. J. Cohen // Analyt. Biochem. - 1988. - Vol. 17, №1. - Р 11-16.
21. Zerbib F Study of Helicobacter pyllorum proinflammatory properties on human epithelial cells in vitro / F. Zerbib, F Mйgraud, C. Varon [et al.] // Gut. - 2009. - Vol. 58, №5. - Р 629-635.
УДК 616. 33-002. 44-085: 612. -396. 2
вплив СХЕМ КВАДРіТЕРАПії ДРУГОЇ ЛІНІЇ НА ВЗАЄМОДІЮ ДЕЯКИХ ЧИННИКІВ ЗАХИСТУ В СЛИЗОВІЙ ОБОЛОНЦІ ШЛУНКУ ПРИ ЕКСПЕРИМЕНТАЛЬНІЙ ВИРАЗЦІ
Якубов А. В., Пулатова Н. І., Хамраєв А. А.
Резюме. При вивченні впливу схем квадрітерапії другої лінії на стан слизового бар’єру шлунку і систему N0 утворення при експериментальній виразці встановлено, що квадрітерапія, включаюча омепразол, де-нол, амоксициллін і тетрациклін, стимулює механізми захисного бар’єру, робить позитивний вплив на механізми N0 утворення. Схема з омепразолу, де-нолу, тетрацикліну і метронідазолу пригнічує синтез слизового бар’єру, інгібує ключові механізми N0 утворення. Квадрітерапія з омепразолом, де-нолом, амоксицилліном, тетрацикліном ефективна для корекції механізмів цитопротекції в слизовій оболонці шлунку.
Ключові слова: експериментальна виразка, лікування, цитозахист, оксид азоту.
УДК 616. 33-002. 44-085: 612. -396. 2
ВЛИЯНИЕ СХЕМ КВАДРИТЕРАПИИ ВТОРОЙ ЛИНИИ НА ВЗАИМОДЕЙСТВИЕ НЕКОТОРЫХ ФАКТОРОВ ЗАЩИТЫ В СЛИЗИСТОЙ ЖЕЛУДКА ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ЯЗВЕ
Якубов А. В., Пулатова Н. И., Хамраев А. А.
Резюме. При изучении влияния схем квадритерапии второй линии на состояние слизистого барьера желудка и систему N0 образования при экспериментальной язве установлено, что, квадритерапия, включающая омепразол, де-нол, амоксициллин и тетрациклин, стимулирует механизмы защитного барьера, оказывает положительное влияние на механизмы N0 образования. Схема из омепразола, де-нола, тетрациклина и метронидазола подавляет синтез слизистого барьера, ингибирует ключевые механизмы N0 образования. Квадритерапия с омепразолом, де-нолом, амоксициллином, тетрациклином эффективна для коррекции механизмов цитопротекции в слизистой желудка.
Ключевые слова: экспериментальная язва, лечение, цитозащита, окись азота.
UDC 616. 33-002. 44-085: 612. -396. 2
Effect of Schemes Second Line Quadruple Therapy on Interactions of Some Protective Factors in Gastric Mucosal Tissue in Experimental Ulcer
Yakubov A. V., Pulatova N. I., Khamraev A. A.
Summary. In studying the effect of schemes second-line quadruple therapy on status gastric mucosal barrier and system N0 formation in experimental ulcer found that, quadruple therapy, consisting of omeprazole, de-nol, amoxicillin and tetracycline stimulates mechanisms of protective barrier, which has a positive effect on the mechanisms of N0 formation. Scheme with omeprazole, de-nol, tetracycline and metronidazole inhibits the synthesis of mucosal barrier, the key mechanisms of N0 formation. In the plan of correction of mechanisms of cytoprotection in the gastric mucosal tissue quadruple therapy with omeprazole, de ethanol, amoxicillin, and tetracycline is considered to be effective.
Key words: experimental ulcer, treatment, cytoprotection, nitric oxide.
Стаття надійшла 1. 03. 2013 р.
Рецензент - проф. Скрипник I. М.
