CC BY
6этого растения, составлял 5 видов. По количеству преобладает гомованиловая кислота, которая составляет в среднем 146,2 мг / л. Из сухого экстракта побегов клена, приготовленного в 30% этиловом спирте, также были идентифицированы 5 фенольных соединений. Хотя этот экстракт имеет как гомованиловую кислоту, так и на 35,6 мг / л меньше, чем это вещество в экстракте из листьев, мы также видим разницу в количестве эпи катехина, которое на 12,2 мг больше, чем в листьях. экстракт катехина из побегов - 5,4 мг /л. В экстракте из листьев данное соединение не обнаружено.
Из результатов, показанных на рисунке, и сравнения с экстрактом листьев и побегов клена, было обнаружено, что только 4 фенольных соединения были идентифицированы в экстракте корня, который по количеству аналогичен экстракту, полученному из побегов.
Ключевые слова; Флора, корни, побеги, листья, экстракт, кора клена, противовоспалительное, успокаивающее средство, трава.
THE AMAUNT OF POLIFHENOLIC COMPOUNDS IN THE AGUEOUS ALCOHOL EXTRACTS OF THE LEAVES, TWIGS AND ROOTS OF CHAMOIS PRICKLY
In this article, were identified more than 5 phenolic compounds during analyzing the chemical composition of phenols of dry extracts,extracted from maple's leaves, shoots and roots in various organic solvents (30% ethyl alcohol). According to the results obtained, it was found that the composition of the dry extract, extracted from the leaves of this plant was 5 species. Quantitatively it dominates homovanilic acid, which averages 146.2 mg /1. Five phenolic compounds were also identified from dry extract of maple shoots prepared in 30% ethyl alcohol. Although this extract has both homovanilic acid and 35.6 mg /1 less than this substance in the leaf extract, we also see a difference in the amount of epi catechin, which is 12.2 mg more than in the leaves extract catechin from shoots - 5.4 mg /1. This compound was not found in the leaves extract.
From the results that are shown in the figure and the comparison with the extract leaves and maple shoots, it was found that only 4 phenolic compounds were identified in the root extract, which is similar in quantity to the extract obtained from the shoots.
Key words: Flora, roots, shoots, leaves, extract, maple bark, anti-inflammatory, sedative, herb.
Сведение об авторах:
Мадалиев Алишер Сайдалиевич - Таджикский государственный педагогический университет,именна Садриддина Айни докторант PhD второго курса Адрес: 734003, Республика Таджикистан, г. душанбе, E-mail: info@tgpu.tj проспект Рудаки 121 тел: (+992) 907827298.
Шамсуддинов Шаъбон Начмуддинович- Таджикский Государственный педагогический университет, именна Садриддин Айни кандидат биологических наук Адрес: 734003, Республика Таджикистан, г. душанбе, E-mail: info@tgpu.tj проспект Рудаки121тел: (+992) 935085614.
About the authors:
Madaliev Alisher Saidalievich Doktor Ph.D of biology . Tajik state pedagogical University named after Sadriddin Ayni. Address:734003. Republic of Tajikistan, Dushanbe Rudaki 121 E-mail ddot@mail.ti Tel: (+992) 907827298. Shamsuddinov Shabon Najmudinovich. Candidate of biology science . Tajik state pedagogical University named after Sadriddin Ayni Address:734003. Republic of Tajikistan, Dushanbe Rudaki 121 E-mail ddot@mail.ti Tel (+992)935085614.
УДК 581.1:577.1 ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФАКТОРОВ НА АКТИВНОСТЬ ФОСФОРИБУЛОКИНАЗЫ В ЭКСТРАКТАХ ИЗ ЛИСТЬЕВ АРАБИДОПСИСА РАСЫ ЭНКХАЙМ
Сайфудинов А.К.
Таджикский национальный университет
В жизнедеятельности растений центральная роль принадлежит фотосинтезу. Фотосинтез является основой первичной трансформации солнечной энергии, единственным первичным источником органического вещества и кислорода на планете, он обеспечивает постоянное воспроизведение биоресурсов, существование кислород зависимой жизни.
Синтез первичных органических веществ происходит в процессе темновых реакций фотосинтеза в цикле Кальвина, который был расшифрован в 1954 году. Ключевой реакцией
цикла является фиксация СО2 катализируемая ферментам рибулозобисфосфат карбоксилазой / оксигеназой (РБФК/О 4.1.1.39) .
Завершающей стадией регенерации акцептора СО2 рибулозобисфата (РБФ) является реакция фосфорилирования рибулозо -5-фосфата. Эта реакция катализируется ферментом фосфорибулокиназой (ФРК, КФ 2.7.1.19) . РБФК/О и ФРК являются уникальными характеристическими ферментами цикла Кальвина, так как они не встречаются в других метаболитических последовательностях.
ФРК, наряду с РБФК/О один из самых лабильных ферментов цикла Кальвина. Поэтому РБФК/О и ФРК отводится роль регуляторов интенсивности фотосинтеза, а фотосинтезу -определяющую роль в продукционном процессе.
В связи с вышеизложенным важно исследовать свойства ФРК. Субстрат для ФРК поставляет фермент рибозофосфатизомераза (РФИ, КФ 5.3.1.6). РФИ, ФРК и РБФК/О образуют мультиферментный комплекс, что установлено исследованиями Бабаджановой и сотр [1-3]
Целью настоящей работы являлось изучение кинетического поведения фосфорибулокиназы в мультиферментном комплексе цикла Кальвина в экстрактах из листьев арабидопсиса.
Материал и методы
Объектом для наших экспериментальных исследований были взяты листья растений арабидопсиса Arabidopsis Thaliana L. семейство Cruciferae расы Энхайм в фазе розеток.
Арабидопсис выращивали в яшиках, в оранжерее при оптимальних условиях- температура 20-25° С, почва (перегной и песок в соотношении 1: 2), относительная влажность 70-80%, освещенность 20-25тыс. люкс.
Получение экстракта из листьев арабидопсиса подробно описано в работе [ 41.
Количественное содержание белка определяли с реактивом Бенедикта [5]. Калибровочная кривая построена по бычьему сывороточному альбумину.
Определение активности фосфорибулокиназы осуществляли по методу Hurwitz et al [6].
Результаты и их обсуждение
Для изучение кинетического поведения фосфорибулокиназы в мультиферментном цикле Кальвина нами было исследовано влияние на активность фермента количества белка, концентрации рибозо -5- фосфата и АТФ в реакционной среде.
На рисунке 1 приведены результаты изучения влияния количества белка в реакционной среде на фосфорибулокиназную активность мультиферментного комплекса в экстрактах из листьев арабидопсиса расы Энкхайм.
мкмоль
Рис.1. Зависимость фосфорибулокиназной активности мультиферментного комплекса цикла Кальвина из листьев арабидопсиса расы Энкхайм от концентрации белка в реакционной среде.
Как видно из представленных на рис. 1 данных, кривая зависимости активности фосфорибулокиназы мультиферментного комплекса от количества белка в реакционной среде не имела классическую гиперболическую форму. Уже в пределах количества белка от 1 до 10 мкг не наблюдалось прямо пропорционального возрастания активности фермента. Увеличение количества белка до 20 мкг белка в мл реакционной среды приводило к снижению фосфорибулокиназной активности мультиферментного комплекса. При дальнейшем увеличении количества белка до 30 и 40 мкг на мл реакционной среды наблюдался выход на плато скорости фосфорибулокиназной реакции, т.е. все молекулы фермента полностью насыщены субстратом.
На основании полученных данных можно считать, что наибольшая фосфорибулокиназная активность мультиферментного комплекса проявилась при количестве белка 10 мкг на мл реакционной среды. При этом количестве белка в реакционной среде проводили дальнейшие исследования.
При длительности реакции 1 минута и концентрации белка 10 мкг в 1 мл реакционной среды исследовали влияние концентрации рибозо-5-фосфата в реакционной среде на фосфорибулокиназную активность мультиферментного комплекса в экстракте из листьев арабидопсиса расы Энкхайм.
Результаты изучения зависимости от концентрации рибозо-5-фосфата скорости ферментативной реакции, катализируемой фосфорибулокиназой экстракта из листьев арабидопсиса расы Энкхайм представлены на рис. 2.
Как видно из приведенных на рис.2 данных, форма кривой отличается от гиперболической и характеризуется быстрым насыщением фермента субстратом уже при концентрации субстрата 0.25 мМ. и последующим выходом на плато, т.е. постоянный уровень.
vкvoль
Р Еф/ V ПН
0 0,1 12 рк&озо-5-фосфатг
Рис.2. Зависимость фосфорибулокиназной активности мультиферментного комплекса цикла Кальвина из листьев арабидопсиса расы Энкхайм от концентрации рибозо-5-фосфата в реакционной среде.
Представленные результаты дают основание считать, что рибозо-5-фосфат повышает скорость фосфорибулокиназной реакции, являющейся второй после рибозофосфатизомеразной в данной метаболической цепи цикла Кальвина, т.е. выполняет роль эффектора.
Рибозо - 5 - фосфат р Е1 ^о - 5 - фосфат рибулозо - 1.
- бисфосфат 3- фосфоглицериновая кислота. С02
АТФ
Е7
Результаты
подтверждением преимуществ образования ферментами
мультифермент] плекса, в котором реакции протекают с более высокой скоростью,
чем катал из иру______I .„ободными формами ферментов. Это обусловлено тем, что при
связывание рибозо-5-фосфата с аллостерическим центром рибозофосфатизомеразы, первого фермента Е1 данного мультиферментного комплекса, вызывает координированные конформационные изменения и у второго фермента Е2 - фосфорибулокиназы. Вследствие
этого изменяются кинетические параметры - Утах и Км фосфорибулокиназы, т.е. при малых концентрациях рибозо-5-фосфата достигается максимальная скорость фосфорибулокиназной реакции.
На основании полученных результатов в дальнейших исследованиях нами использовалась концентрация рибозо-5-фосфата 0.5-1 мМ в мл реакционной среды.
На рис. 3 представлены результаты изучения зависимости от концентрации АТФ в реакционной среде фосфорибулокиназной активности мультиферментного комплекса в экстрактах из листьев арабидопсиса расы Энкхайм.
Из приведенных на рис. 3 данных видно, что на кривой изменения активности фосфорибулокиназы в зависимости от концентрации АТФ не имеется сильных загибов.
мкмоль РБФ/мин
Рис 3. Зависимость от концентрации АТФ в реакционной среде фосфорибулокиназной активности мультиферментного комплекса цикла Кальвина из листьев арабидопсиса расы Энкхайм.
При концентрациях АТФ в реакционной среде от 0.1 до 1 мМ фосфорибулокиназная активность возрастала, в пределах концентраций АТФ от 1 мМ до 2 мМ наблюдалось насыщение фермента субстратом.
При значительных концентрациях АТФ, выше 2 мМ, фосфорибулокиназная активность снижалось. Полученные результаты дают основание считать, что АТФ является не только субстратом реакции, но и активатором фосфорибулокиназы мультиферментного комплекса в экстрактах из листьев арабидопсиса.
Таким образом, полученныме нами экспериментальные данные свидетельствуют о тонкой регуляции активности фосфорибулокиназы мультиферментного комплекса цикла Кальвина количеством белка и концентраций субстратов реакционной среде. Это обусловлено положительным кооперативным взаимодействиям между активными центрами субъединиц фермента при связывании субстратов.
ЛИТЕРАТУРА
1. Бабаджанова М.А. Физиология растений. / М.А.Бабаджанова Ю.С.Насыров - 1992. - т.39Б, вып.4, - С.753-759.
2. Gontero B., Guidici-Orticoni M., Ricard J.A. // Eur. J. Biochem. - 1994. - V. 226. - P. 999-1006.
3. Бабаджанова М.А., Мирзорахимов А.К., Бабаджанова М.П., Эсаналиева Ш.А. // Физиология растений. -2010. - т.57, №2, - С. 186-191.
4. Бабаджанова М.А., Сайфудинов А.К. // Доклад АН РТ, 2019. - т.62, №7.- С.464-468.
5. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии. / Г.А.Кочетов - М.: Выс.шк., 1980. - 272 с.
6. Hurwitz J., Weissbach A., Horecker B.L., Smymiotis P.Z. Spinach phosphoribulokinase // J. Biol. Cem. - 1956. - V. 218. - N. 2. - P. 769-783.
ВЛИЯНИЕ РАЗЛИЧНЫХ ФАКТОРОВ НА АКТИВНОСТЬ ФОСФОРИБУЛОКИНАЗЫ В ЭКСТРАКТАХ ИЗ ЛИСТЬЕВ АРАБИДОПСИСА РАСЫ ЭНКХАЙМ
Полученныме нами экспериментальные данные свидетельствуют о тонкой регуляции активности фосфорибулокиназы мультиферментного комплекса цикла Кальвина количеством белка и концентраций субстратов реакционной среде. Это обусловлено положительным кооперативным взаимодействиям между активными центрами субъединиц фермента при связывании субстратов.
Ключевые слова: арабидопсис - мутанты - активность - фосфорибулокиназа -мультиферментный комплекс - цикл Кальвина.
INFLUENCE OF VARIOUS FACTORS ON PHOSPHORIBULOKINASE ACTIVITY IN EXTRACTS FROM THE LEAVES OF ARABIDOPSIS OF THE ENKHEIM RACE
The experimental data obtained by us indicate a fine regulation of the activity of phosphoribulokinase of the multi-enzyme complex of the Calvin cycle by the amount of protein and the concentrations of substrates in the reaction medium. This is due to the positive cooperative interactions between the active centers of the enzyme subunits during substrate binding.
Key words: arabidopsis - mutants - activity - phosphoribulokinase - multi-enzyme complex -Calvin cycle.
Сведения об авторе:
Сайфудинов Ахлиддин Киёмович - кандидат биологических наук, доцент кафедра физиология растений и биотехнологии Таджиский национальный университет, Тел: (+992) 919360144 E- mail: saifudinov71@mail.ru About the author:
Sayfudinov Akhliddin Kiyomovich - Dotset Department of Plant Physiology and Biotechnology, Tajikistan National University, Tel: (+992) 919 36 01 44 E- mail: saifudinov71@mail.ru
УДК: 581.132.633.11 АЛОЦАМАНДИИ ОМИЛХОИ ГОМЕОСТАЗИИ МУБОДИЛАИ ОБ ДАР ДАВР^ОИ САБЗИШИ КАРТОШКА
Гулов М.К.
Донишгощ давлатии тиббии Тоцикистон ба номи Абуали ибни Сино
Мух,иммият: Мубодилаи об дар растанй яке аз равандхои мухими физиологй ва биохимиявии растанихо ба шумор рафта, дар синтези моддахои органикй вазифаи мухимро ичро менамояд. Гомеостази (кобилияти нигохдории доимиятии мухити дохили организм) мубодилаи мубодилаи об дар растанй, шидатнокии транспиратсия ва кобилияти обнигохдории баргро нишон медихад.Тахкикотхои илмй оид ба алокамандии хосилнокии гандуми бахорй ва меъёри об дар шароити хушкй нишон доданд, ки аз хисоби баланд шудани кобилияти обнигохдории баргхои растанй ва норасогии об мутобикшавии растанй зери таъсири танзимкунандахо бехтар мегардад. Меъёри мубодилаи оби растанй, хамчун инъикоскунандаи амали равандхои физиологй ва биохимиявй бахри вучудияти онхо хизмат мекунад |"1, с.81-84, 2, с. 29-381.
Асоси мувозинати обро дар растанихо шиддатнокии транспиратсия ташкил медихад, ки нишондихандаи мухими дарачаи обтаъминкунии растанихо ба шумор меравад. Шиддатнокии транспиратсия аз омилхои агроэкологии мухити атроф: харорати хаво, намнокии хок, кувваи шамол, шиддатнокии нури офтоб, хушкй ва нишондихандахо морфофизиологии растанй, сохти анатомии барг, фаъолият ва масохати масомахо, даврахои сабзиши растанй ва гайрахо вобастагии калон дорад [3, с.78-85, 4, с.119-1211. Тагйирёбии шиддати транспиратсия дар навъхои гуногуни картошка аз руи хусусиятхои навъй зохир мегардад. Чй кадаре, ки дар вакти муайян об аз барг зиёд бухор шавад, хамон кадар кобилияти обнигохдории барг паст мешавад. Эхтимол бухоршавии микдори зиёди об растаниро аз гармшавй нигох дошта, кобилияти фотосинтетикии растаниро фаъол гардонида, то андозае нисбатан махсулнокии биологй ва хочагии картошкаро дар шароити иклими гарм
