CC BY
42
© Лазарян Г. Д., Василенко Ю.К., 2010 УДК 616.89-008.441.13
ВЛИЯНИЕ ПЫЛЬЦЫ-ОБНОЖКИ НА МЕТАБОЛИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОЙ ГИПЕРГЛИКЕМИИ
Г. Д. Лазарян, Ю. К. Василенко
Пятигорская государственная фармацевтическая академия, г. Пятигорск
Данная работа посвящена изучению влияния пыльцы на важнейшие показатели метаболизма при экспериментальной гипергликемии, вызванной выделением адреналина гидрохлорида или инсулиновой недостаточностью, вызванной аллоксаном гидрохлорида. В опаытах на крысах определены показатели состояния углеводного, липидного, белковонуклеинового обмена и пероксидации. Установлено, что нарушение метаболических на двух моделях гипергликемии имеет весьма сходную картину, а нормализующее действие пыльцы обусловлено самими метаболическими процессами в тканях организма, в связи с этим пыльца может применяться в комплексном лечении гипергликемических состояний, в том числе при сахарном диабете.
Ключевые слова: пыльца-обножка, экспериментальная гипергликемия, метаболизм,
Пыльца-обножка представляет собой комплекс биологически активных веществ, обладающих ценными лечебными свойствами, применяется в терапии ряда заболеваний, в том числе в комплексной терапии сахарного диабета [1,2,3].
Однако, экспериментального обоснования фармакотерапевтических свойств пыльцы-обножки, для лечения данного заболевания в литературе нами не найдено. В связи с этим, целью настоящей работы явилось изучение влияния пыльцы- обножки на важнейшие показатели метаболизма при экспериментальной гипергликемии, вызванной введением адреналина гидрохлорида или инсулиновой недостаточностью, вызванной аллоксаном гидрохлорида.
Материалы и методы
Опыты проводили на беспородных белых крысах обоего пола массой 180-220г., содержавшихся на стандартном режиме вивария со свободным доступом к воде. Каждая серия опытов включала не менее 8 животных. Экспериментальные исследования выполнялись в соответствии с правилами европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых в эксперименте для научных целей. Экспериментальную гипергликемию воспроизводили либо однократным внутрибрюшинным введением адреналина гидрохлорида в дозе 1,5мг/кг, или однократным внутрибрюшинным введением аллоксана гидрохлорида в дозе 100мг/кг. Пыльца -обножка, стандартизированная согласно нормативной документации [4], вводилась лабораторным животным интрагастрально с помощью металлического зонда на 0,5% растворе крахмала в дозе 100мг/кг в объеме 2мл в течение двух недель. В контрольных опытах вводился 0,5% раствор крахмала (2мл). После двухнедельного введения исследуемого вещества, через 30 минут после введения адреналина гидрохлорида и на пятые сутки после введения аллоксана гидрохлорида, на стадии развития стойкой гипергликемии [5], проводили декапитацию крыс под легким эфирным наркозом и определяли биохимические показатели в крови и тканях. Результаты опытов обрабатывались методом вариационной статистики.
Используя общепринятые методы в качестве показателей состояния углеводного обмена, определяли концентрации глюкозы и молочной кислоты в сыворотке крови и гликогена в тканях печени; показатели состояния липидного обмена - уровни холестерина, в- липопротеидов и триглицеридов в сыворотке крови, триглицериды в тканях печени; показатели состояния белково -нуклеинового обмена- общего белка в сыворотке крови и в тканях печени и общие нуклеиновые кислоты в тканях печени; показатели состояния процессов пероксидации-ТБК-активные продукты (ТБК-АП), диеновые коньюгаты (ДК) и общую антиоксидантную активность (АОА) в сыворотке крови.
Результаты и их обсуждение
Результаты исследований показали однонаправленность нарушений метаболических показателей углеводного, липидного и белково-нуклеинового обменов при инсулиновой недостаточности и повышенной адреналиновой нагрузке (таблица 1, 2).
Таблица 1
Изменения метаболических показателей при введении пыльцы белым крысам с гипергликемией, вызванной введением адреналина гидрохлорида
Показатель Группа животных
Интактные Получавшие адреналина гидрохлорид (контроль) Получавшие адреналина гидрохлорид и пыльцу
Глюкоза сыворотки крови, ммоль/л 4,57±0,21 13,88±0,48 (Ри<0,001) 4,67±0,5(Ри>0,05; Рк<0,01)
Лактат сыворотки крови, ммоль/л 4,88±0,36 7,16±0,55 (Ри<0,05) 3,24±0,98(Ри>0,05;Рк<0,05)
Гликоген печени, г/кг 12,19± 1,1 3,01±0,62 (Ри<0,001) 10,72±0,69(Ри<0,05;Рк<0,001)
в- липопротеиды сыворотки крови, г/л 0,39±0,05 0,53±0,07 (Ри>0,05) 0,41±0,06(Ри>0,05;Рк<0,001)
Холестерин сыворотки крови, ммоль/л 3,93±0,93 8,6±1,19 (Ри<0,05) 5,29±0,4(Ри>0,05;Рк<0,05)
Триглицериды сыворотки крови, ммоль/л 1,15±0,11 1,37±0,3 (Ри>0,05) 1,43±0,4(Ри>0,05;Рк>0,05)
Триглицериды печени, ммоль/л 4,83±1,25 7,06±0,86 (Ри<0,05) 6,53±1,4(Ри<0,05;Рк>0,05)
Белок сыворотки крови, ммоль/л 75,44±1,6 62,1±3,2 (Ри<0,05) 82,7± 1,7(Ри<0,05;Рк<0,01)
Общий белок печени, мг/г 1,40±0,02 1,55±0,08 (Ри>0,05) 1,78±0,04(Ри<0,05;Рк>0,05)
НК печени, мкг/г 25,9±3,44 22,1±1,96 (Ри>0,05) 26,15±2,73(Ри<0,001;Рк<0,01)
АОА сыворотки крови, % 53,2±3,56 59,7±5,24 (Ри>0,05) 84,4±2,01(Ри<0,05;Рк<0,05)
ДК сыворотки, моль/мг 3,7±0,3 19,7±2,46 (Ри<0,001) 6,41±0,89(Ри>0,05;Рк<0,01)
ТБК-АП сыворотки крови, ммоль/л 0,62±0,13 3,63±0,22 (Ри<0,05) 1,23±0,24(Ри<0,05;Рк<0,05)
Примечание (здесь и далее): Ри - достоверность разницы по отношению к показателям интактных животных;
Рк - достоверность разницы по отношению к показателям контрольной группы животных.
Таблица 2
Изменение метаболических показателей при введении пыльцы белым крысам с гипергликемией, вызванной введением аллоксана
Показатель Группа животных
Интактные Получавшие аллоксана гидрохлорид (контроль) Получавшие аллоксана гидрохлорид и пыльцу
Глюкоза сыворотки крови, ммоль/л 4,57±0,21 8,32±1,11(Ри<0,001) 6,32±0,53(Ри>0,05;Рк<0,01)
Лактат сыворотки крови, ммоль/л 4,88±0,36 11,8±2,05 (Ри<0,001) 4,93±0,15(Ри>0,05;Рк<0,001)
Гликоген печени, г/кг 12,19±1,1 4,79±0,65 (Ри<0,01) 9,12±1,68(Ри>0,05;Рк<0,01)
в- липопротеиды сыворотки крови, г/л 0,39±0,05 0,82±0,12 (Ри<0,05) 0,45±0,06(Ри>0,05;Рк<0,05)
Холестерин сыворотки крови, ммоль/л 3,93±0,93 6,2±0,47 (Ри<0,05) 2,95±0,61(Ри>0,05;Рк<0,05)
Триглицериды сыворотки крови, ммоль/л 1,15±0,11 1,27±0,09 (Ри>0,05) 0,78±0,14(Ри>0,05;Рк>0,05)
Триглицериды печени, ммоль/л 4,83±1,25 5,4±1,41 (Ри>0,05) 4,93±0,65(Ри>0,05;Рк>0,05)
Белок сыворотки крови, ммоль/л 75,44±1,6 79,9±3,3 (Ри>0,05) 81,6±5,35(Ри>0,05;Рк>0,05)
Общий белок печени, мг/г 1,40±0,02 1,38±0,03 (Ри>0,05) 1,31±0,1(Ри>0,05;Рк>0,05)
НК печени, мкг/г 25,9±3,44 11,14±3,34 (Ри<0,01) 19,2±3,92(Ри<0,05;Рк<0,05)
АОА сыворотки крови, % 53,2±3,56 23,0±2,97 (Ри,0,01) 55,7±3,21(Ри>0,05;Рк<0,01)
ДК сыворотки, моль/мг 3,7±0,3 20,9±4,95 (Ри<0,01) 5,96±0,67(Ри<0,05;Рк<0,05)
ТБК-АП сыворотки крови, ммоль/л 0,62±0,13 22,4±6,42 (Ри<0,01) 7,89±0,98(Ри<0,01;Рк<0,05)
В обоих случаях развивалась гипергликемия и гиперлактатемия с падением содержания гликогена в печени (несколько более выраженная в опытах с введением адреналина). В обоих случаях изменялось содержание в-липопротеидов , холестерина и триглицеридов в крови и триглицеридов в печени. Однако повышение триглицеридов в крови и печени при инсулиновой недостаточности оказалось слабым (р>0,05), тогда как при повышенной адреналиновой нагрузке таковыми оказались изменения в- липопротеидов и триглицеридов в крови.
Как следует из данных таблиц, введение двум группам животных пыльцы- обножки обусловило сходные сдвиги показателей углеводного обмена. У крыс с адреналиновой нагрузкой, по сравнению с контролем, уровень глюкозы и молочной кислоты в крови понизился соответственно на 66,4% (р<0,01) и 54,8% (р<0,05), а гликогена печени- повысился более чем в 3 раза (р<0,001). У крыс с инсулиновой недостаточностью эти показатели составили соответственно - на 24,0% (р<0,01), на 58,2% (р<0,001) и на 90,4% (р<0,01).
Менее выраженные сдвиги наблюдались со стороны показателей липидного обмена. У животных с адреналиновой нагрузкой под влиянием пыльцы - обножки значительно снизилось содержание холестерина в крови - на 86,2% (р<0,05), в- липопротеиды в крови - на 22,6% (р<0,001), тогда как изменения уровня триглицеридов как в крови, так и в печени оказались незначительными. У животных с инсулиновой недостаточностью отмечалось снижение уровня холестерина на 52,4% (р<0,05), что на 34% меньше, чем при адреналиновой нагрузке. Отмечалось так же снижение в крови в- липопротеидов (на 45,1%, р<0,05) и триглицеридов ( 38,6%, р<0,05), а уменьшение триглицеридов в печени было незначительно.
В обеих группах животных наблюдалось увеличение белка в крови и нуклеиновых кислот в печени, но статистически достоверным оказались изменения лишь при адреналиновой нагрузке относительно белка ( на 33,2%, р<0,01) и нуклеиновых кислот в печени ( на 72,4%, р<0,05) при инсулиновой недостаточности.
У животных с адреналиновой нагрузкой отмеченалось увеличение - АОА в крови на 29,3%, (р<0,05), а при инсулиновой недостаточности - на 142,2%, (р<0,01). Одновременно диеновые коньюгаты и ТБК - активные продукты понизились соответственно при адреналиновой нагрузке на 67,5%, (р<0,01) и на 33,9 %,(р<0,05) а при инсулиновой недостаточности - на 71,5%, (р<0,05) и на 64,8%, (р<0,05).
Выводы
Таким образом, проведенные исследования на двух моделях гипергликемии показали весьма сходную картину метаболических нарушений со стороны углеводного, липидного, белковонуклеинового обменов и процесса пероксидации, что свидетельствует о едином метаболическом аппарате, реализующем различные регуляторные механизмы. Поскольку под влиянием пыльцы -обножки картина восстановления реакций углеводного, липидного и белкового - нуклеинового обменов однонаправлена, можно полагать, что приложением нормализующего действия пыльцы служат сами метаболические процессы в тканях организма. Об этом же свидетельствуют значительные сдвиги показателей пероксидации под влиянием пыльцы. В целом, установленный позитивный эффект, оказываемый пыльцой в условиях экспериментальной гипергликемии позволяет сделать вывод об обоснованности ее применения в качестве дополнительного
компонента в комплексном лечении гипергликемических состояний, в том числе при сахарном диабете.
ЛИТЕРАТУРА
1. ГОСТ 28887-90. Пыльца цветочная (обножка). - Введ. 1990.-12.29.-М.: Изд-во стандартов, 1990. - 17с.
2. Лазарян, Д.С. Перспективы использования расплода пчел в медицинской практике / Д.С. Лазарян. - Пятигорск, 2002. - 134 с.
3. Синяков, А.Ф. Большой медицинский лечебник / А.Ф. Синяков. - М.: ИКСМО-Пресс,
2000. - 592 с.
4. Хасматулина, Н.З. Апитерапия / Н.З. Хасматулина. - Пермь: Мобилс, 2005. - 296 с.
5. Экспериментальный сахарный диабет. Роль в клинической диабетологии / под ред. В.Г. Баранова. - Л.: Наука , 1983. - 240 с.
THE INFLUENCE OF POLLEN PELLET ON METABOLIC INDICES AT EXPERIMENTAL HYPERGLYCEMIA
G.D. Lazaryan, J.K. Vasilenko
Pollen pellet is a complex of biologically active substances that caused its use in therapy of a number of diseases. The given work is devoted to the study of influence of pollen pellet on major indicators of metabolism at experimental hyperglycemia, caused by adrenalin hydrochloride or insulin deficiency caused by
alloxan hydrochloride. Indices of carbohydrate, lipidic, protein-nucleic metabolism condition and process are defined in experiments on rats. It is established that disorders of metabolic indices on two models of hyperglycemia have rather similar picture and that normalizing action of pollen pellet causes the metabolic processes in organism tissues. In this connection the pollen can be applied in complex treatment of hyperglycemic conditions including diabetes mellitus.
Key words: pollen-obnozhka, experimental hyperglycemia, metabolism
Авторы: Лазарян Гаяне Джониковна - заочный аспирант кафедры биологической химии и микробиологии Пятигорской государственной фармацевтической академии Росздрава.
357500, Ставропольский край, г.Пятигорск, ул. Московская, д.86, кв. 11.
Тел. 8-8793-32-37-07 e-mail - daisy7777@yandex.ru
Василенко Юрий Киприанович - доктор медицинских наук, профессор кафедры биологической химии и микробиологии Пятигорской государственной фармацевтической академии Росздрава.
357524, Ставропольский край, г.Пятигорск, пр. Калинина, д.2, корп. 1, кв. 42.
Тел. 8-8793-32-35-87.
