ВЛИЯНИЕ ПРИМЕНИЯ ЭНРОФЛОКСАЦИНА НА ДИНАМИКУ ЛЕЙКОЦИТАРНЫХ ИНДЕКСОВ В КРОВИ УТЯТ Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

УДК 636.5.034:615.33:591.111.1

ВЛИЯНИЕ ПРИМЕНЕНИЯ ЭНРОФЛОКСАЦИНА НА ДИНАМИКУ ЛЕЙКОЦИТАРНЫХ ИНДЕКСОВ В КРОВИ УТЯТ

Моисеева А.А.1 - н.с., Присный А.А.1,2 - д.б.н., гл. н. с.,

Скворцов В.Н. 1 - д.вет.н., руководитель филиала, Горбанёва А.С.1 - мл.н.с.

белгородский филиал ФГБНУ «Федеральный научный центр - Всероссийский научно-исследовательский институт экспериментальной ветеринарии имени К.И. Скрябина и ЯР.

Коваленко Российской академии наук» 2ФГАОУ ВО «Белгородский государственный национальный исследовательский

университет»

Ключевые слова: утята, кровь, лейкоцитарная формула, лейкоцитарные индексы, фторхинолоны, энрофлоксацин

Keywords: ducklings, blood, leukocytic formula, leukocytic indices, fluoroquinolones, enrofloxacin

Непрерывный контроль состояния здоровья птиц в условиях современных птицефабрик является важной задачей, решение которой влияет на объем и качество получаемой продукции. Зачастую, на организм поголовья оказывает действие комплекс технологических факторов, таких как, например, повышенная плотность посадки, способствующая увеличению загрязненности воздуха микрофлорой, в результате чего возникают инфекционные заболевания, способные быстро распространяться, охватывая большое количество животных [9, 13, 16, 18].

Вышеуказанные факторы, как следствие, обуславливают снижение продуктивности птиц и ухудшение их физиологического состояния в целом. С целью стабилизации инфекционной обстановки среди птицепоголовья, проводят лечебные и профилактические мероприятия, с применением

антибактериальных препаратов различных групп. Одними из используемых лекарственных средств являются фторхинолоны, отличающиеся особым механизмом действия, а также широким спектром активности, что определяет эффективное решение проблем в терапии патологий микробного происхождения [15, 21].

Актуальным антибактериальным препаратом в птицеводстве является

представитель фторхинолонов

энрофлоксацин, изначально

синтезированный для терапии

инфекционных болезней птиц. Кроме того, лекарственное средство способно влиять как на грамотрицательные, так и на некоторые грамположительные

микроорганизмы [10].

Тем не менее, несмотря на выявленные достоинства энрофлоксацина, мало изучено его воздействие непосредственно на физиологическое состояние отдельных видов птиц, в особенности, в их ранний возрастной период. В частности, крайне мало данных о влиянии препарата на показатели системы крови утят. Так, важным фактором диагностических исследований,

отражающим физиологический статус, является изучение лейкоцитарных индексов, представляющих собой интегральные показатели лейкограммы, позволяющие оценить степень

воспалительного процесса, механизмы и уровень компенсации устойчивости организма, прогноз и направление воспалительных процессов, а также выявить эндогенную интоксикацию [1].

В связи с вышесказанным, целью нашего исследования являлось выявление динамики лейкоцитарных индексов утят при использовании энрофлоксацина.

Материал и методы исследований.

В осуществленном опыте были задействованы утята суточного возраста породы «Башкирская», разделенные на 1 (контроль) и 2 (опыт) группы, подобранные с учетом принципа аналогов. В ходе эксперимента все исследуемое поголовье получало рацион, сбалансированный по основным питательным и биологически активным веществам. Кроме того, утятам 2 группы на протяжении 10 суток выпаивали энрофлоксацин в дозе 200 мг/л, в то время как 1 группе давали обычную питьевую воду. Затем производили отбор крови

где ПЭ - псевдоэозинофилы, Л - лимфоциты.

Лейкоцитарный индекс (ЛИ) [11]:

где ПЭ - псевдоэозинофилы, Л - лимфоциты.

Индекс иммунореактивности (ИИР) [8]:

методом внутрисердечной пункции на 1, 3, 5, 7, 9 и 11 сутки после отмены препарата. Стабилизацию отобранных проб крови проводили с использованием 3,8 % цитрата натрия.

В мазках крови окрашенных по Романовскому-Гимзе исследовали

лейкограмму, используя метод подсчета отдельных видов лейкоцитов, после чего определяли индексы по следующим формулам.

Индекс Кребса (ИК) [5]:

ИК=ПЭ,

л '

ЛИ=

пэ'

ИИР=

л+э

м '

где Л - лимфоциты, М - моноциты, Э - эозинофилы.

Лейкоцитарный индекс интоксикации (ЛИИ) [14]:

пэ

ЛИИ =-—-,

б + э + л + м '

где ПЭ - псевдоэозинофилы, Б - базофилы, Э - эозинофилы, Л - лимфоциты, М - моноциты.

Индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК) [19]:

Б + Э + ПЭ ИСЛК = —-—-—, Л + М

где Б - базофилы, Э - эозинофилы, ПЭ - псевдоэозинофилы, Л - лимфоциты, М - моноциты. Лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ) [20]:

ИЛГ = ——,

б+э+пэ

где Л - лимфоциты, Б - базофилы, Э - эозинофилы, ПЭ - псевдоэозинофилы.

Статистическая обработка

цифрового материала проведена с использованием программы SPSS Statistic 17.0, достоверность полученных результатов оценивали при помощи непараметрического критерия Манна-Уитни.

Результат исследований.

Лейкоцитарные индексы являются показателями системы крови,

изменяющимися при многих

физиологических реакциях. Кроме того, их данные способны отражать

неспецифическую и специфическую резистентность организма, а также свидетельствовать о наличии эндогенной интоксикации [3, 17]. В результате

проведенных исследований, нами обнаружено, что энрофлоксацин вызывал достоверное изменение практически всех индексов только на третьи и седьмые сутки.

Так, индексы эндогенной интоксикации (ЛИИ и ИСЛК) были повышены на третьи (на 34 и 31 %) и седьмые сутки (72 и 59 % соответственно), а ИЛГ в аналогичные промежутки времени был достоверно снижен на 35 и 70 % (Таблица 1). Обнаруженные данные, вероятно, отражают присутствие небольшого количества токсических веществ в кровяном русле [2], не являющихся причиной серьезных расстройств, кроме того, в дальнейшем достоверных изменений выявлено не было.

Сутки Группа ЛИИ ИСЛК ИЛГ

1 1 1,56±0,19 1,95±0,25 0,55±0,11

2 1,33±0,16 1,77±0,22 0,59±0,08

3 1 1,04±0,09 1,33±0,13 0,77±0,08

2 1,58±0,08** 1,94±0,08** 0,50±0,02**

5 1 1,66±0,21 1,98±0,22 0,53±0,08

2 1,27±0,08 1,57±0,08 0,62±0,03

7 1 0,54±0,11 1,01±0,35 1,43±0,32

2 1,96±0,23** 2,48±0,34** 0,43±0,07**

9 1 1,78±0,19 2,29±0,21 0,44±0,04

2 1,56±0,18 2,21±0,31 0,48±0,06

11 1 2,35±0,22 3,25±0,26 0,30±0,03

2 2,28±0,17 2,93±0,18 0,30±0,02

** - Статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и группах опыта по ^критерию Манна-Уитни при P<0,01.

Легкую степень интоксикации подтверждают и другие зафиксированные данные, так, например, достоверное увеличение ЛИИ не выходило за пределы референтных значений, установленных исследователями (от 1,0 до 2,0) [7].

Установлено, что ИСЛК наиболее полно отражает уровень реактивности организма, чем общее количество

лейкоцитарных клеток в крови [17]. Опираясь на полученные значения индекса, не превышающие 1,99 у.е. [7], выявлено, что даже при повышении данных, ИСЛК находится в пределах нормы, что вероятно, свидетельствует об отсутствии

ингибирующего воздействия

энрофлоксацина на иммунную

реактивность организма утят.

аблица 2 - Значения лейкоцитарных индексов крови цыплят, у.е.

Сутки Группа ИК ЛИ ИИР

1 1 1,92±0,26 0,60±0,12 22,2±4,41

2 1,64±0,21 0,67±0,09 37,2±3,84*

3 1 1,23±0,12 0,86±0,09 37,7±4,37

2 1,87±0,09** 0,54±0,03** 30,7±4,26

5 1 1,92±0,23 0,58±0,09 36,7±3,24

2 1,50±0,07 0,67±0,03 27,9±5,08

7 1 0,76±0,24 1,92±0,48 49,8±8,41

2 2,41±0,32** 0,46±0,07** 28,3±0,15

9 1 2,19±0,22 0,48±0,05 29,8±2,31

2 2,04±0,29 0,54±0,07 34,6±4,15

11 1 3,11±0,26 0,33±0,03 28,3±2,09

2 2,87±0,21 0,36±0,02 25,7±2,82

** - Статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и группах опыта по ^критерию Манна-Уитни при P<0,01; * - статистически достоверные различия между значениями параметров в контрольной и группах опыта по ^критерию Манна-Уитни при P<0,05.

Практически аналогичный

непродолжительный эффект обнаружен при исследовании индексов

неспецифической реактивности. Так, на

третьи и седьмые сутки зафиксировано

увеличение ИК на 34 и 68 %, а также

падение ЛИ на 37 и 76 % (Таблица 2).

Повышение ИК, вероятно, отражает

небольшую активизацию фагоцитарных процессов, в то время как снижение ЛИ, возможно, отражает некоторый непродолжительный сдвиг в обмене веществ организма птиц [4, 10].

Зарегистрировано единовременное увеличение ИИР на 40 % в сравнении с контролем, произошедшее на первые сутки после отмены препарата. Подобный сдвиг ИИР может отражать возможный рост секреции лимфокинов, стимулирующих функциональную активность эозинофилов, псевдоэозинофилов и базофилов [6]. Индексы неспецифической резистентности аналогично вышеуказанным показателям эндогенной интоксикации так же не выходили за пределы установленных норм.

Заключение. Несмотря на выявленные изменения, как индексов эндогенной интоксикации, так и неспецифической резистентности, сдвиги данных не являются ярко выраженными, а также подтверждающими негативное воздействие применения энрофлоксацина. Кроме того, достоверные отличия индексов в крови утят опытной группы не превышали обозначенные нормы. В целом, основываясь на установленных

результатах, можно предположить, что использование энрофлоксацина в дозе 200 мг/л не оказывает отрицательного эффекта на физиологический статус утят.

ЛИТЕРАТУРА

1. Банзаракшеев, В. Г. Лейкоцитарные индексы как способ оценки эндогенной интоксикации организма / В. Г. Банзаракшеев // Acta Biomedica Scientifica. - 2010. - № 3. - С. 390-391.

2. Васильцова, И. В. Влияние детоксикантов растительного происхождения на аккумуляцию антропогенных загрязнителей (свинца и кадмия) в организме крыс: автореф. дисс. канд. биол. наук: 03.03.01 / Васильцова Ирина Васильевна. - Красноярск, 2011. - 24 с.

3. Гаркави, Л. Х. Адаптационные реакции и резистентность организма / Л. Х. Гаркави, Е. Б. Квакина, М. А. Уколова. - Ростов н/Д : Изд-во Рост. ун-та, 1990. - 223 с.

4. Ермашкевич, Е. И. О возможности

применения лейкоцитарных индексов в комплексной диагностике субклинических гепатозов у кур-несушек

/ Е. И. Ермашкевич, Л. В. Клепикова,

A. Н. Мартынов, Н. Н. Якименко // Успехи современной науки и образования. - 2016. -№ 7. - С. 161-165.

5. Забудский, Ю. И. Современные методы диагностики состояния стресса у сельскохозяйственных птиц / Ю. И. Забудский // Труды II Международной Ирано-Российской конференции «Сельское хозяйство и природные ресурсы». - Москва, 2002. - С. 134-135.

6. Захаров, Ю. М. Эритробластический островок / Ю. М. Захаров, А. Г. Рассохин. - Москва: Медицина, 2002. - 279 с.

7. Земсков, А. М. Клиническая иммунология / А. М. Земсков,

B. М. Земсков, А. В. Караулов. - Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2005. - 264 с.

8. Иванов, Д. О. Лейкоцитарные индексы клеточной реактивности как показатель наличия гипо - и гиперэргического вариантов неонатального сепсиса / Д. О. Иванов, Н. П. Шабалов, Н. Н. Шабалова [и др.] // Опыт лечения детей в многопрофильной детской больнице. - Санкт-Петербург, 2002. - С. 2228.

9. Кавтарашвили, А. Ш. Физиология и продуктивность птицы при стрессе / А. Ш. Кавтарашвили, Т . Н. Колокольникова // Сельскохозяйственная биология. - 2010. -№ 4. - С. 24-37.

10. Кобец, Т. В. Интегральные лейкоцитарные индексы как критерий оценки тяжести течения эндогенной интоксикации и эффективности проводимого лечения у детей с атопическим дерматитом / Т. В. Кобец, Е. В. Гостищева, А. А. Кобец // Вестник физиотерапии и курортологии. - 2012. - № 3. - С. 72-74.

11. Козинец, Г. И. Исследование системы крови в клинической практике / Г. И. Козинец, В. А. Макаров. - М.: Триада-Х, 1997. - С. 204-243.

12. Моисеева, А. А. Влияние

энрофлоксацина на показатели красной крови цыплят при экспериментальном сальмонеллезе / А. А. Моисеева,

A. А. Присный // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. - 2020. - Т. 243 (Ш). - С. 171-175.

13. Никулина, Н. П. Повышение эффективности птицеводческих хозяйств в условиях формирования рынка: дисс. канд. эк. наук: 08.00.05 / Никулина Наталья Павловна. - Москва, 2000. - 140 с.

14. Островский, В. К. Лейкоцитарный индекс интоксикации при острых и воспалительных заболеваниях легких / В. К. Островский, Ю. М. Свитич,

B. Р. Вебер // Вестник хирургии. - 1983. -Т. 131. - № 11. - С. 21-24.

15. Присный, А. А. Лейкограмма крови цыплят под влиянием энрофлоксацина при экспериментальном сальмонеллезе / А. А. Присный, А. А. Моисеева // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. - 2020. - Т. 243 (Ш). - С. 200-205.

16. Сайфутдинова, А. В. Лейкоциты и их информативность в оценке напряженности стресс - реакции у кур-несушек / А. В. Сайфутдинова, М. А. Дерхо // Известия Оренбургского государственного аграрного университета. - 2019. - № 1 (75). - С. 136-139.

17. Сидоренко, Г. Г. Динамика лейкоцитарных индексов под влиянием препарата «Адаптовит» / Г. Г. Сидоренко, Г. В. Хонина // Вестник Омского государственного аграрного университета. - 2014. - № 2. - С. 52-53.

18. Чугунова, Е. О. Зараженность сальмонеллами продукции птицеводства / Е. О. Чугунова, Н. А. Татарникова, Т. С. Прохорова, О. Г. Мауль // Современные проблемы науки и образования. - 2014. - № 6. - С. 18-23.

19. Шевченко, С. И. Значимость гематологических показателей в диагностике аутоиммунных заболеваний щитовидной железы / С. И. Шевченко, Ю. И. Ткач, Ж. П. Ярина // Здравоохранение Казахстана. - 1986. - № 6. - С. 41-43.

20. Яблучанский, Н. И. Индекс сдвига лейкоцитов как маркер реактивности организма при остром воспалении / Н. И. Яблучанский // Лабораторное дело. - 1983. - № 1. - С. 6061.

21. Moiseeva, A. A. Leukocytes differential under effect of ciprofloxacin in experimental colibacillosis in chickens / A. A. Moiseva, A. A. Prisnyi, A. M. Gulyukin, T. V. Stepanova // IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. - 2020 - Vol. 548 - P. 42044.

ВЛИЯНИЕ ПРИМЕНИЛ ЭНРОФЛОКСАЦИНА НА ДИНАМИКУ ЛЕЙКОЦИТАРНЫХ

ИНДЕКСОВ В КРОВИ УТЯТ

Моисеева А.А., Присный А.А., Скворцов В.Н., Горбанёва А.С.

Резюме

В статье приведены результаты опыта по изучению воздействия энрофлоксацина на динамику показателей лейкоцитарных индексов эндогенной интоксикации и неспецифической резистентности в крови утят, на основании которых можно косвенно судить

0 состоянии физиологического статуса птиц. Утята были разделены на две группы, в которых

1 - контрольная (птицы получали чистую воду), 2 - опытная (на протяжении десяти суток выпаивали энрофлоксацин с водой в дозе 200 мг/л). Отбор крови проводили на 1, 3, 5, 7, 9, 11 сутки после отмены препарата. Осуществляли подсчет лейкоцитарной формулы, на основе которой находили значения индекса иммунореактивности (ИИР), индекса Кребса (ИК), лейкоцитарного индекса (ЛИ), лимфоцитарно-гранулоцитарного индекса (ИЛГ), лейкоцитарного индекса интоксикации (ЛИИ), индекс сдвига лейкоцитов крови (ИСЛК). В результате произведенных исследований обнаружена достоверная динамика практически всех индексов на третьи и седьмые сутки после отмены препарата, что, возможно, вызвано воздействием энрофлоксацина. Так, например, индексы эндогенной интоксикации (ЛИИ и ИСЛК) увеличены на третьи (на 34 и 31 %) и седьмые сутки (72 и 59 % соответственно), а ИЛГ в аналогичные промежутки времени был достоверно ниже на 35 и 70 %, ЛИ на 37 и 76 %, а ИК повышен на 34 и 68 %. Однако зарегистрированные сдвиги не являлись продолжительными, а изменение ИИР вовсе было единовременным. Кроме того, все зафиксированные отличия в крови утят опытной группы не выходили за пределы референсных значений.

EFFECT OF ENROFLOXACIN ON DYNAMICS OF LEUKOCYTIC INDICES IN DUCKLING

BLOOD

Moiseeva A.A., Prisnyi A.A., Skvortsov V.N., Gorbaneva A.S.

Summary

Herein we present the results of the experiment aimed at studying the effect of enrofloxacin on dynamics of leukocytic indices of endogenous intoxication and of indices of non-specific resistance in duckling blood; aforenamed indices indirectly reveal the state of physiological status of birds. We divided the ducklings into 2 groups, Group I was assigned as control (they received pure drinking water), Group II was assigned as experimental (they received enrofloxacin via drinking water at concentration 200 mg/L for 10 consecutive days). Blood samples were drawn at Day 1, Day 3, Day 5, Day 7 and Day 9 after the drug withdrawal. WBC differential was performed and then we calculated index of immunoreactivity (IIR), Krebs index (KI), leukocyte index (LI), lymphocyte-granulocyte index (LGI), leukocyte index of intoxication (LII), leukocyte shift index (LSI). In the course of all the tests we observed reliable changes in practically all the indices on Day 3 and Day 7 after the drug withdrawal, which could be caused by action of enrofloxacin. For instance, indices of endogenous intoxication (LII and LSI) increased on Day 3 (by 34 and 31 % respectively) and on Day 7 (by 72 and 59 % respectively); on the same days LGI decreased reliably by 35 and 70 %, while LI decreased by 37 and 76 % and KI increased by 34 and 68 %. But the changes we registered were not lasting and the change in IIR occurred only once. However, all the registered changes in blood of ducklings in experimental group did not leave reference intervals.