CC BY
13
HayKOBHH BicHHK .HbBiBCbKoro Ha^OHaibHoro ymBepcurery BeTepHHapHoi' MegnuUHH Ta 6i0TexH0iroriH iMeHi C.3. f^H^Koro Scientific Messenger of Lviv National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies
doi: 10.15421/nvlvet8211
ISSN 2518-7554 print ISSN 2518-1327 online
http://nvlvet.com.ua/
УДК 636.09:639.3.1.09:616.99
Вплив препара^в «Бровермектин-гранулят™» i «Авесстим™» на piBeHb продуктiв ПОЛ та актившсть ферментiв АОС у гепатопанкреаа однорiчок
бiлого амура, уражених моногенеями
В.В. Стибель, О.В. Федорович, Р.1. Таф^ук [email protected]
Львiвський нацюнальний унгверситет ветеринарно1 медицини та бютехнологт iMeHi С.З. Гжицького,
вул. Пекарська, 50, Львiв, 79010, Украша
Наведено дат щодо впливу антипаразитарного препарату «Бровермектин-грануляттм» та iмyномодyлятора «Авесс-тимтм» на рiвeнь продyктiв пероксидного окиснення лiпiдiв (ПОЛ) i актившсть фeрмeнтiв антиоксидантноi системи (АОС) у гепатопанкреаа однорiчок бтого амура, уражених рiзними ектопаразитами. До^дження проведен у садково-рибних господарствах ДП «Рибгосп Галицький» (ниш ТОВ «Рибгосп «Бурштинський») Рогатинського району 1вано-Франювськог областi та ФГ «Добротвiрський рибзавод» Кам 'янка-Бузького району Львiвськоi областi, розташованих на теплих водах водойм-охолоджyвачiв Бурштинськог та Добротвiрськоi ТЕС. Для до^дження були вiдiбранi однорiчки бшого амура (з масою тыа 45-47 г), уражен збудниками Dactylogyrus lamellatus,Gyrodactylus ctenopharyngodonis та одно-часно обома паразитами.
Встановлено, що в однорiчок бтого амура, iнвазованих Dactylogyrus lamellatus, Gyrodactylus ctenopharyngodonis, та за змшаног твазй тсля л^вання «Бровермектин-гранулятомтм» рiвeнь ТБК-продyктiв у гепатопанкреаа зменшився вiдnовi-дно на 25,7; 29,3 та 32,4%, дieнових кон 'югатiв - на 13,5; 21,7 та 18,9% при Р < 0,001 в уах випадках. За одночасного ви-користання прeпаратiв «Бровермектин-грануляттм» та «Авесстимтм» зниження вищеназваних показниюв у вах випадках також було достовiрним (Р < 0,001) i становило вiдповiдно 68,0; 66,3 та 64,0 i 32,0; 35,4 та 36,2%. Щодо вмiстy гiдропe-роксидiв лiпiдiву гепатопанкреаа лжованихриб, то його зниження було вiрогiдним (Р < 0,05) лише за сукупного застосу-вання до^джуваних прeпаратiв.
Пкля застосування названих вище nрenаратiв актившсть eнзимiв антиоксидантного захисту в гепатопанкреаа одно-рiчок быого амура тдвищувалася. Проте rniд зазначити, що в риб, уражених дактилогiрyсами, достовiрно (Р < 0,001) зростала лише актившсть супероксиддисмутази (СОД) за комплексного використання «Бровермектин-гранулятутм» та «Авесстимутм». При ураженн гiродактилюсами актившсть супероксиддисмутази у гепатопанкреаа риб, яким вводили лише «Бровермектин-грануляттм», вiрогiдно (Р < 0,05) тдвищилася на 9,4%, а за застосування комплексу nрenаратiв - на 28,4% (Р < 0,001). За змiшаноi твазп, як i за монотвазп, у гепатопанкреаа однорiчок бтого амура тсля введення препара-тiв спостер^алося зростання активностi вах до^джуваних фeрмeнтiв, однак, достовiрним було лише тдвищення акти-вностi СОД (Р < 0,05; 0,001). Таким чином, комплекте застосування nрenаратiв за моногeноiдозiв риб мало бтьш сутте-вий вплив на бiологiчнy рiвновагy в систeмi ПОЛ^АОС.
K.mnoei слова: однорiчки быого амура, Dactylogyrus lamellatus,Gyrodactylus ctenopharyngodonis, гепатопанкреаа, ТБК-продукти, дiеновi кон 'югати, гiдроneроксиди, СОД, каталаза, глутатюнпероксидаза, «Бровермектин-грануляттм», «Авес-
стимтм».
Влияние препаратов «Бровермектин-гранулят™» и «Авесстим™» на уровень продуктов ПОЛ и активность ферментов АОС в гепатопанкреасе однолеток белого амура, пораженных моногенеями
Citation:
Stybel, V.V., Fedorovych, O.V., Tafiychuk, R.I. (2017). Influence of drugs «Granulated brovermectin» and «Avesstim» on the level of LOPs and of activity antioxidant system enzymes in hepatopancreas of the same age grass carp affected by Monogeneas. Scientific Messenger LNUVMB, 19(82), 50-55.
В.В. Стибель, А.В. Федорович, Р.И. Тафийчук [email protected]
Львовский национальный университет ветеринарной медицины и биотехнологий имени С.З. Гжицкого,
ул. Пекарская, 50, г. Львов, 79010, Украина
Приведены данные о влиянии антипаразитарного препарата «Бровермектин-грануляттм» и иммуномодулятора «Авес-стимтм» на уровень продуктов пероксидного окисления липидов (ПОЛ) и активность ферментов антиоксидантной системы (АОС) в гепатопанкреасе однолеток белого амура, пораженных различными эктопаразитами. Исследования проведены в садково-рыбных хозяйствах ГП «Рыбхоз Галицкий» (теперь ООО «Рыбхоз «Бурштинский») Рогатинского района Ивано-Франковской области и ФХ «Добротворский рыбзавод» Каменка-Бугского района Львовской области, расположенных на теплых водах водоемов-охладителей Бурштынской и Добротворской ТЭС. Для исследования были отобраны одногодки белого амура (с массой тела 45-47 г), пораженные возбудителями Dactylogyrus lamellatus, Gyrodactylus ctenopharyngodonis и одновременно обеими паразитами.
Установлено, что у однолеток белого амура, инвазированных Dactylogyrus lamellatus, Gyrodactylus ctenopharyngodonis, и при смешанной инвазии, после лечения «Бровермектин-гранулятомтм» уровень ТБК-продуктов в гепатопанкреасе уменьшился соответственно на 25,7; 29,3 и 32,4%, диеновых конъюгатов - на 13,5; 21,7 и 18,9% при Р < 0,001 во всех случаях. При одновременном использования препаратов «Бровермектин-грануляттм» и «Авесстимтм» снижение вышеназванных показателей во всех случаях также было достоверным (Р < 0,001) и составило соответственно 68,0; 66,3 и 64,0 и 32,0; 35,4 и 36,2%. Что касается содержания гидропероксидов липидов в гепатопанкреасе рыб после лечения, то его снижение было вероятным (Р < 0,05) только при совокупном применении исследуемых препаратов.
После применения названных выше препаратов активность энзимов антиоксидантной защиты в гепатопанкреасе однолеток белого амура повышалась. Однако следует отметить, что у рыб, пораженных дактилогирусами, достоверно (Р < 0,001) увеличивалась только активность супероксиддисмутазы (СОД) при комплексном использовании «Бровермек-тин-гранулятатм» и «Авесстиматм». При поражении гиродактилюсами активность супероксиддисмутазы в гепатопанкреасе рыб, которым вводили только «Бровермектин-грануляттм» достоверно (Р < 0,05) повысилась на 9,4%, а при применении комплекса препаратов - на 28,4% (Р < 0,001). При смешанной инвазии, как и при моноинвазии, в гепатопанкреасе однолеток белого амура после введения препаратов наблюдалось увеличение активности всех исследуемых ферментов, однако достоверным было лишь повышение активности СОД (Р < 0,05; 0,001). Таким образом, комплексное применение препаратов при моногеноидозах рыб имело более существенное влияние на биологическое равновесие в системе ПОЛ^АОС.
Ключевые слова: одногодки белого амура, Dactylogyrus lamellatus, Gyrodactylus ctenopharyngodonis, гепатопанкреас, ТБК-продукты, диеновые конъюгаты, гидропероксиды, СОД, каталаза, глутатионпероксидаза, «Бровермектин-грануляттм», «Авесстимтм».
Influence of drugs «Granulated brovermectin» and «Avesstim» on the level of LOPs and of activity antioxidant system enzymes in hepatopancreas of the same
age grass carp affected by мonogeneas
V.V. Stybel, O.V. Fedorovych, R.I. Tafiychuk [email protected]
Stepan Gzhytskyi National University of Veterinary Medicine and Biotechnologies Lviv, Pekarska Str., 50, Lviv, 79010, Ukraine
The data on the influence of the anti-parasitic drug «Granulated brovermectin» and immunomodulator «Avesstim» on the level of lipid oxidation products (LOPs) and the activity of antioxidant system enzymes (AOS) in hepatopancreas of white currant annuals affected by various ectoparasites are given. The research was carried out at the garden and fish farms of the state enterprise «Rybgosp Galitsky» (now Rybgosp «Burshtynskyy» LLC) of the Rogatyn district of the Ivano-Frankivsk region and the farm enterprise «Dobrotvirskiy rybzavod» in the Kamianko-Buzsky district of the Lviv region, located on the warm waters of the Burshtynskaya cooling water reservoirs and Dobrotvirskaya TPS. For the study, white amur of the same age (with body weight 45-47 g) was selected, infected with Dactylogyrus lamellatus, Gyrodactylus ctenopharyngodonis and both parasites at the same time.
It was found that white amur of the same age infected with Dactylogyrus lamellatus, Gyrodactylus ctenopharyngodonis and in mixed infestations, the level of TBK-products in hepatopancreas decreased by 25.7% after the treatment with «Granulated brovermectin»; 29.3 and 32.4%, diene conjugates - by 13.5; 21.7 and 18.9% at P < 0.001 in all cases. At the same time using the drugs «Granulated brovermectin» and «Avesstim», the reduction of the above-mentioned indicators in all cases was also reliable (P < 0.001) and was 68.0; 66.3 and 64.0 and 32.0; 35.4 and 36.2%. Concerning the content of lipid hydroperoxides in hepatopancreas of treated fish, its decrease was probable (P < 0,05) only for the combined application of the studied drugs.
After use of the above-mentioned preparations the activity of enzymes of antioxidant protection in hepatopancreas of white amur of the same age increased. However, it should be noted that fish affected by dactylosurids, only the activity of superoxide dismutase (SOD) in the complex use of «Granulated brovermectin» and «Avesstim» increased significantly (P < 0.001). In the case of damage by hydroactylics, the activity of superoxide dismutase in hepatopancreas offish that was administered only «Granulated brovermectin» probably (P < 0,05) increased by 9,4%, and the use of a complex of drugs - by 28,4% (P < 0,001). After mixed infections, as well as for monoinvasia, in the hepatopancreas of white amur of the same age after the use of drugs, an increase in the activity of all
the enzymes studied, however, was only significant increase in the activity of SOD (P < 0,05; 0,001). Thus, the complex application of drugs for monogenous doses offish had a more significant impact on the biological equilibrium in the system LOPs^AOS.
Key words: white amur of the same age, Dactylogyrus lamellatus, Gyrodactylus ctenopharyngodonis, hepatopancreas, TBC products, diene conjugates, hydroperoxides, SOD, catalase, glutathione peroxidase, «Granulated brovermectin», «Avesstim».
Вступ
У забезпеченш нормально1 життед1яльносп орга-шзму риб важливу роль вщграють в1льнорадикальш процеси. Внаслщок перебиу останшх утворюеться ряд продукпв, яш е результатом взаемодп в1льних радикатв як м1ж собою, так i з бюлопчними макромолекулами (Osoba, 2009; Zyn, 2012). За рiвнем даних продуктiв можна судити про штенсившсть вшьнора-дикального пероксидного окиснення у рiзних бюло-гiчних системах оргашзму, що визначае ïx роль як фiзiолого-бiоxiмiчниx маркерiв (Lushchaketal., 2006). Утворення в органiзмi вiльниx радикалiв, як i процес пероксидного окиснення лшвдв (ПОЛ), належить до фiзiологiчниx процеав, як1 за нормальних умов стабь льно вiдбуваються в органiзмi та е необхщними для здiйснення таких фiзiологiчниx функцiй, як шноци-тоз, фагоцитоз, регулящя проникностi мембран, про-ведення нервового збудження тощо. Переб^ вшьно-радикальних процесiв у клггинах та тканинах регла-ментуеться функцюнуванням системи антиоксидант-ного захисту (АОЗ), що сприяе забезпеченню в№но-радикального гомеостазу в органiзмi. Порушення рiвноваги про- та антиоксидантних систем шдтвер-джуе важливе значення вiльнорадикального пероксидного окиснення у розвитку багатьох патолопчних станiв (Deb et al., 2013; Baglaj et al., 2011; Guberuk et al., 2015; Khariv et al., 2016; Martyshuk et al., 2016).
Вщомо, що на штенсившсть перебну вшьноради-кальних реакцш в органiзмi впливають чинники як ендогенного, так i екзогенного характеру (Storey, 1996; Menshikova et al., 2006; Staryk, 2007; Zyn, 2012; Lavryshyn et al., 2016).
З огляду на вищезазначене метою наших досль джень було вивчити вплив препарапв «Бровермектин-гранулят™» i «Авесстим™» на рiвень продуктiв ПОЛ та актившсть ферментiв АОС у гепатопанкреаа одно-рiчок бiлого амура, уражених Dactylogyrus lamellatus,Gyrodactylus ctenopharyngodonis.
MaTepia™ i методи дослiджень
Дослiдження проведенi у садково-рибних госпо-дарствах ДП «Рибгосп «Галицький» (нинi ТОВ «Риб-госп «Бурштинський») Рогатинського району 1вано-Франшвсько1 областi та ФГ «Добротвiрський рибза-вод» Кам'янка-Бузького району Львiвськоï обласл, розташованих на теплих водах водойм-оxолоджувачiв Бурштинськоï та Добротвiрськоï ТЕС. Для досль дження були вiдiбранi однорiчки бiлого амура (з ма-сою тша 45-47 г), ураженi збудниками Dactylogyrus lamellatus,Gyrodactylus ctenopharyngodonis та одноча-сно обома паразитами.Для вивчення впливу препарату «Бровермектин-гранулят™» та iмуномодулятора «Авесстимтм» на рiвень продуктiв ПОЛ та актившсть ферменпв АОС у гепатопанкреаа, нами було сформовано три групи риб по 6 екземплярiв у кожшй:
контрольна - риби, уражеш моногенеями, дослiдна I -риби, яких лiкували антипаразитарним препаратом «Бровермектин-гранулят™», дослвдна II - риби, яких лшували комплексом препарапв «Бровермектин-грануляттм» та «Авесстимтм». Особин кожноï групи утримували в окремих акварiумаx емнiстю 40 дм3 зi штучною аерацiею за температури 20-22 °С. ïx догляд та годiвлю проводили зпдно вiдповiдними нормами та рацюнами. Впродовж усього перiоду дослщжень проводили спостереження за поведiнкою та клшчним станом риб. Переддослiдний перюд аклiматизацiï однорiчок бiлого амура становив 7 дiб.
Лiкування iнвазованиx риб препаратом «Бровермектин-гранулят™» (у розрахунку 60 мг/кг живо1' маси риби) та комплексом препарапв «Бровермектин-гранулят™» (60 мг/кг живо1' маси риби) i «Авесстим™» (1 мг/кг живо1' маси риби) проводили два дш поспшь шляхом введения ïx перорально за допомогою зонду в переднш ввддш кишечнику. Перед застосуванням препарати у визначених дозах змiIпували з 1 мл 2% крохмального клейстеру. Рибам контрольних груп вводили лише по 1 мл 2% клейстеру. На 14-у добу тсля застосування препарапв провели паразитолоп-чний огляд риб та забiр кровi для дослвджень.
Рiвень продуктiв пероксидного окиснення лшщв (ПОЛ) та активнiсть ферменпв антиоксидантно1' системи (АОС) риб визначали в гепатопанкреасi. Вщб-раш зразки тканин заморожували в рщкому азотi. Iнтенсивнiсть процесiв ПОЛ ощнювали за вмiстом у гепатопаикреасi ТБК-активних продуктiв за методом Е. Н. Коробейниково1' (Korobeynikova, 1989), дiеновиx кон'югапв - за методом 1.Д. Стальной (Stalnaya, 1977) та гiдропероксидiв лшщв - за методом В.В. Мирончика (Mironchik,1984). Антиоксидаитнi властивостi досл1д^вано1' тканини визначали за ак-тивнiстю супероксиддисмутази (СОД) (Dubinina et al., 1983), каталази (Korolyuk et al., 1988) та глутатюнпе-роксидази (Moin, 1986).
Одержат дат наукових дослвджень обробляли методом варiацiйноï статистики за Г.Ф. Лакиным (Lakin,1990) з використанням комп'ютерних програм «Exсel» та «Statistica 6.1».
Результата та ïx обговорення
Мониторинг переб^ процесiв пероксидного окиснення лшщв у однорiчок коропових риб, уражених моногенеями, показав, що шсля застосування швазо-ваним рибам препарату «Бровермектин-грануляттм» та iмуномодулятора «Авесстим™» у них спостер^алася активацiя iмунноï системи, про що сввдчить рiвень продукпв ПОЛ та актившсть ферменпв АОС у ïx гепатопанкреасг
Встановлено, що в однорiчок бiлого амура, швазо-ваних Dactylogyrus lamellatus, пiсля л^вання ïx «Бровермектин-гранулятом™» рiвень ТБК-продуктiв та дiеновиx кон'югатiв у гепатопанкреасi вiрогiдно
змeншивcя - нa 1,95 тa 0,28 нмoль/мг бiлкa вiдпoвiднo ^и P < 0,001 в o6ox випaдкax (тaбл. 1). Cпocтepiгaдo-cя тaкoж знижeння y ниx вмюту гiдpoпepoкcидiв лшь дiв, oднaк вoнo бyлo нeвipoгiдним.
Ддя дocягнeння бiльшoï eфeктивнocтi щoдo ycy-нeння штативтого впливу дaктилoгipyciв нa opгaнiзм xвopиx pиб, нaми бyлo oднoчacнo з «Бpoвepмeктин-гpaнyлятoмтм» зacтocoвaнo iмyнoмoдyлятop «Авecc-тим™». У pиб, якиx лiкyвaли oднoчacнo двoмa ^era-paтaми, знижeння пpoдyктiв ПОЛ y гeпaтoпaнкpeaci бyлo бiльш cyттeвим i дocтoвipним. Piвeнь TBK-
пpoдyктiв y ниx пopiвнянo з oднopiчкaми бiлoгo aмypa кoнтpoльнoï гpyпи знизивcя нa 3,86 нмoль/мг бiлкa (P < 0,001) aбo нa 40,5%, дieнoвиx кoн'югaтiв - ra 0,57 нмoль/мг бiлкa (P < 0,001), aбo нa 24,3% i únpo-пepoкcидiв лiпiдiв - ra 1,09 oд. oпт. густ. /г (P < 0,05), aбo нa 30,2%.
Miж pибoю пepшoï тa дpyгoï дocлiдниx гpyп дoc-тoвipнa piзниця бyлa виявлeнa лишe зa вмicтoм y re-raTOrampeaci TБK-пpoдyктiв тa дieнoвиx кoн'югaтiв, вoнa cтaнoвилa вiдпoвiднo 1,91 тa 0,29 нмoль/мг бiлкa пpи P < 0,001 в o6ox випaдкax.
Таблиця 1
Piвень прoдуктiв ПОЛ та актившсть ферментiв АОС у гепатопанкреаС oднoрiчoк бiлoгo амура,
rpyna PH6
Пoкaзник кoнтpoльнa пepшa Apyra
дocлiднa дocлiднa
TБKпpoдyкти, нмoль/мг бiлкa 9,54 ± 0,036 7,59 ± 0,173*** 5,68 ± 0,153***
Дieнoвi кoн'югaти, нмoль/мг бiлкa 2,35 ± 0,033 2,07 ± 0,039*** 1,78 ± 0,025***
Гiдpoпepoкcиди, oд. orrr. густ. /г 3,61 ± 0,302 2,84 ± 0,297 2,52 ± 0,258*
Cyпepoкcиддиcмyтaзa, y.o./ мг бита 3,91 ± 0,022 4,19 ± 0,156 5,31 ± 0,134***
Kaтaдaзa, ммoль H2O2/мг бiдкaзa xe*10"5 1,58 ± 0,031 1,61 ± 0,053 1,68 ± 0,048
Глyтaтioнпepoкcидaзa, мкмoль GSH /мг бита зa xb 2,86 ± 0,240 3,07 ± 0,237 3,25 ± 0,241
Пpимiткa. * - P < 0,05, *** - P < 0,001 - пopiвнянo з ko^^lmoki ^ушю
Baжливим e вивчeння пoкaзникiв aнтиoкcидaнтнoï cиcтeми в iнвaзoвaниx pиб пicдя зacтocyвaння 1'м лшу-вaдьниx пpeпapaтiв. Peзyльтaти нaшиx дocлiджeнь cвiдчaть, щo в oднopiчoк бiлoгo aHypa, ypaжeниx дaк-тилoгipycaми, пicдя зacтocyвaння 1'м «Бpoвepмeктин-
тм
гpaнyдятy » cпocтepiгaдocя пiдвищeння y гегатоган-Kpeaci aктивнocтi cyпepoкcиддиcмyтaзи, oднaк цeй пoкaзник нe дocягaв piвня фiзioлoгiчнoï нopми. Лишe зa oднoчacнoгo зacтocyвaння «Бpoвepмeктин-гpaнyлятyтм» з «Авeccтимoмтм» aктивнicть дaнoгo фepмeнтy дocяглa фiзioлoгiчниx вeличин, вoнa пopiв-нянo з кoнтpoльнoю гpyпoю зpocлa нa 1,40 y.o./мг бiлкa (P < 0,001), aбo нa 35,8%.
Пoдiбнi змiни cпocтepiгaлиcя i щoдo aктивнocтi кaтaлaзи тa глyтaтioнпepoкcидaзи y вищeзaзнaчeнiй TCamm дocлiджyвaниx pиб, oднaк цi змши в жoднoмy випaдкy нe були дocтoвipними. Пpoтe нeoбxiднo вга-зaти, щo зa cyкyпнoгo зacтocyвaння ^erapara arara-нicть циx фepмeнтiв бyлa вищoю, нiж зa зacтocyвaння лишe «Бpoвepмeктин-гpaнyлятyтм».
Bcтaнoвлeнo, щo y TeraTOm^ped oднopiчoк 6wo-гo aHypa, ypaжeниx Gyrodactylus ctenopharyngodonis, пicля лiкyвaння aнтипapaзитapними пpeпapaтaми iнтeнcивнicть paдикaдoyтвopeння знижyвaлacя, ra щo вкaзye пpигнiчeння пpoцeciв ПОЛ i змeншeння ^o^-ктiв пepoкcидaцiï (тaбл. 2). TaK, piвeнь TБK-пpoдyктiв,
Таблиця 2
Piвень прoдуктiв ПОЛ та актившсть ферменив АОС у гепатопанкреаС oднoрiчoк бiлoгo амура, швазо-
дieнoвиx кoн'югaтiв тa гiдpoпepoкcидiв y pn5, якиx лiкyвaди«Бpoвepмeктин-гpaнyлятoмтм» змeншивcя вадшвадш нa 2,18 нмoль/мг бiлкa (P < 0,001), 0,43 нмoль/мг бшга (P < 0,001) тa 0,67 oд. oпт. гycт./г aбo га 22,6; 17,8 тa 18,9%. 3a кoмплeкcнoгo зacтocy-вaння «Бpoвepмeктин-гpaнyлятyтм» з «Авeccтимoмтм» cпocтepiгaлocя бiльш cyттeвe знижeння циx шгазни-к1в - вiдпoвiднo нa 3,84 нмoль/мг бiлкa (P < 0,001), 0,63 нмoль/мг бшга (P < 0,001) тa 1,10 oд. oпт. гycт./г (P < 0,05), aбo нa 39,9; 26,1 тa 31,0%.
Miж pибaми, якт лiкyвaди oдним пpeпapaтoм тa oднoчacнo двoмa, зa вмicтoм TBK-пpoдyктiв y гегато-пaнкpeaci тaкoж бyлa виявлeнa дocтoвipнa piзниця, вoнa cтaнoвилa 1,66 нмoль/мг бiлкa (P < 0,01).
Актившсть фepмeнтiв aнтиoкcидaнтнoï cиcтeми y гeпaтoпaнкpeaci oднopiчoк бiлoгo aмypa, iнвaзoвaниx Dactylogyrus lamellatus, пicля лiкyвaння зaзнaчeними пpeпapaтaми зpocтaдa. Oднaк цe збiльшeння бyлo дocтoвipним y pиб, яким ввoдили «Бpoвepмeктин-гpaнyляттм», лишe зa aктивнicтю cyпepoкcиддиcмyтa-зи - ra 0,40 y.o./мг бшга (P < 0,05), a y pn5, якт тку-вaли oднoчacнo двoмa пpeпapaтaми, - зa aктивнicтю cyпepoкcиддиcмyтaзи тa кaтaлaзи - вiдпoвiднo нa 1,53 y.o./мг бiлкa (P < 0,001) тa 0,15 ммoль H2O2/мг бiлкaзa xß*10-5 (P < 0,05).
Пoкaзник rpyna PH6
кoнтpoльнa nepшa дocлiднa дpyгa дocлiднa
TБK-пpoдyкти, нмoль/мг бiдкa 9,63 ± 0,024 7,45 ± 0,217*** 5,79 ± 0,358***
Дieнoвi кoн'югaти, нмoль/мг бiдкa 2,41 ± 0,030 1,98 ± 0,072*** 1,78 ± 0,080***
Гiдpoпepoкcиди, oд. om\ густ. /г 3,55 ± 0,365 2,88 ± 0,344 2,45 ± 0,202*
Cyпepoкcиддиcмyтaзa, y.o./ мг бита 3,85 ± 0,025 4,25 ± 0,127* 5,38 ± 0,158***
Kaтaдaзa, ммoль H2O2/мг бiлкaзa xe*10"5 1,54 ± 0,020 1,63 ± 0,038 1,69 ± 0,043*
Глyтaтioнпepoкcидaзa, мкмoль GSH /мг зa xв 2,90 ± 0,209 3,12 ± 0,161 3,32 ± 0,187
Пpимiткa. * - P < 0,05,
- P < 0,001 - пopiвнянo з кoнтpoльнoю гpyпoю
Встановлений вплив дослщжуваних препарапв на р1вень продукпв пероксидного окиснення лшвдш i актившсть ензимно1 ланки антиоксидантно1 системи гепатопанкреасу однорiчок бiлого амура i за змшано1 iнвазiï (табл. 3). Шсля застосування «Бровермектин-грануляту™» спостерiгалося вiрогiдне (Р < 0,001) зниження у ïx гепатопанкреасi ТБК-продукпв i дieно-вих кон'югатiв - вщповщно на 24,5 i 15,9%. Було вiдмiчено також зниження вмюту гiдропероксидiв, але воно було незначним i недостовiрним. У риб, яким застосовували одночасно два препарати, змен-шення вищезазначених показник1в порiвняно з конт-
рольною групою було суттeвiшим i у вах випадках достовiрним (Р < 0,05; Р < 0,001), воно становило вадповщно 39,0; 26,6 i 30,0%.
Шсля л^вання уражених однорiчок бшого амура «Бровермектин-гранулятом™» актившсть ензимноï ланки АОС гепатопанкреасу значно тдвищилася, а саме активнiсть супероксиддисмутази зросла на 0,28 у.о./мг бшка (Р < 0,05), або на 7,5%, каталази - на 0,08 ммоль Н202/мг бiлка за хв*10-5, або 5,6% та глу-татюнпероксидази - на 0,27 мкмоль GSH/мг бiлка за хвабо на 10,5%.
Таблиця 3
PiBeHb продуктiв ПОЛ та актившсть ферменпв АОС у гепатопанкреас однорiчок бiлого амура, швазованих Dactylogyrus lamellatus i Gyrodactylus ctenopharyngodonis, до та шсля застосування
Показник Група риб
контрольна перша дослщна друга дослщна
ТБК-продукти, нмоль/мг бшка 9,81 ± 0,026 7,41 ± 0,170*** 5,98 ± 0,198***
Дieновi кон'югати, нмоль/мг бшка 2,52 ± 0,023 2,12 ± 0,035*** 1,85 ± 0,058***
Пдропероксиди, од. опт. густ. /г 4,24 ± 0,445 3,33 ± 0,419 2,97 ± 0,237*
Супероксиддисмутаза, у.о./ мг бiлка 3,74 ± 0,024 4,02 ± 0,106* 5,20 ± 0,098***
Каталаза, ммоль Н202/мг бiлказа хв*10"5 1,42 ± 0,038 1,50 ± 0,037 1,60 ± 0,079
Глутатюнпероксидаза, мкмоль GSH /мг бiлка за хв 2,58 ± 0,161 2,85 ± 0,163 3,11 ± 0,191
Примггка. * - P < 0,05, *** - P < 0,001 - порiвняно з контрольною групою
Шсля застосування одночасно двох препарапв за-значеш показники збшьшилися ввдповщно на 1,46 у.о./мг бшка (Р < 0,001), або на 39,0%, 0,18 Н202/мг бшка за хв*10-5, або на 12,7% та 0,53 мкмоль GSH /мг бшка за хв, або на 20,5%. За цими показни-ками була ввдм1чена р1зниця i м1ж рибами першо! та друго! дослiдних груп, проте вона була достовiрною лише за актившстю супероксиддисмутази i становила 1,18 у.о./ мг бiлка (Р < 0,001).
Висновки
Застосування однорiчкам бшого амура, швазова-ним моногенеями, препарату «Бровермектин-гранулят™» та iмуномодулятора «Авесстим™» приз-водило до пригнiчення процеав пероксидного окиснення лшщв та сприяло пiдвищенню активностi ен-зимно! ланки антиоксидантно! системи у !х гепатопа-нкреасi. Комплексне застосування препарапв за мо-ногено!дозiв риб мало бшьш суттевий вплив на бюло-гiчну рiвновагу в системi ПОЛ-^АОС.
Перспективи подальших дослгджень. У подаль-шому буде дослiджено вплив препарапв «Бровермек-тин-гранулят™» i «Авесстим™» на рiвень продуктiв ПОЛ та актившсть ферменпв АОС у гепатопанкреаа однорiчок коропа, уражених Eudiplozoon nipponicum.
Бiблiографiчнi посилання
Mironchik, V.V. (1984). Avtorskoe svidetelstvo №1084681 SSSR, MKI G №33/48. Sposob opredeleniya gidroperekisey lipidov v biologicheskih tkanyah. № 348369/28-13; zayavl. 08.07.82; opubl. 07.04.84, Byul. № 13 (in Russian).
Dubinina, E.E., Salnikova, L.Ya., Efimova, L.F. (1983). Aktivnost i kofermentnyiy spektr SOD eritrotsitov. Laboratornoe delo. 10, 30-33 (in Russian).
Zyn, A. (2012). Prooksydantno-antyoksydantnyi homeo-staz i membrannyi transport u zhyvykh orhaniz-makh. Visnyk Lvivskoho universytetu. Seriia biolo-hichna. 60, 21-39 (in Ukrainian).
Khariv, M., Gutyj, B., Butsyak, V., Khariv, I. (2016). Hematological indices of rat organisms under conditions of oxidative stress and liposomal preparation action. Biological Bulletin of Bogdan Chmelnitskiy Melitopol State Pedagogical University. 6(1), 276-289.
Korobeynikova, E.N. (1989). Modifikatsiya opredeleniya produktov perekisnogo okisleniya lipidov v reaktsii s tiobarbiturovoy kislotoy. Laboratornoe delo. 7, 8-9 (in Russian).
Korolyuk, M.A., Ivanova, L.I., Mayorova, I.G. (1988). Metod opredeleniya aktivnosti katalazyi. Laboratornoe delo. 1, 16-19 (in Russian).
Lakin, G.F. (1990). Biometriya. M.: Vyisshaya shkola (in Russian).
Martyshuk, T.V., Gutyj, B.V., Vishchur, O.I. (2016). Level of lipid peroxidation products in the blood of rats under the influence of oxidative stress and under the action of liposomal preparation of «Butaselmevit», Biological Bulletin of Bogdan Chmelnitskiy Melitopol State Pedagogical University, 6 (2), 22-27. doi: 10.15421/201631.
Moin, V.M. (1986). Prostoy i spetsificheskiy metod opre-dileniya aktivnosti glutationperoksidazyi v eritrotsitah. Laboratornoe delo. 12, 724-727 (in Russian).
Menshikova, E.B., Lankin, V.Z., Zenkov, N.K., Bondar, I.A.,Krugovyih, N.F., Trufakin, V.A. (2006).0kislitelnyiy stress. Prooksidantyi i antioksi-dantyi M.: Firma «Slovo» (in Russian).
HayKOBHH BicHHK ^HyBME iMeHi C.3. iW^Koro, 2017, T 19, № 82
Osoba, I.A. (2009). Osoblyvosti funktsionuvannia systemy antyoksydantnoho zakhystu orhanizmu. Rybohospodarska nauka Ukrainy. 1, 133-139 (in Ukrainian).
Lushchak, V.I., Bahniukova, T.V., Luzhna, L.I. (2006). Pokaznyky oksydatyvnoho stresu. Peroksydy lipidiv.Ukrainskyi biokhimichnyi zhurnal. 78(5), 113119 (in Ukrainian).
Stalnaya, I.D. (1977). Opredelenie dienovyih kon'yugatov. Sovremennyie metodyi v biohimii. Orehovicha. M: Meditsina, 63-64 (in Russian).
Staryk, L.I. (2007). Antyoksydantna systema: pryroda, sklad, mekhanizmy homeostazu. Naukovyi visnyk Lvivskoho NUVMBT im. S.Z. Hzhytskoho. 9, 3(34), 2, 172-177 (in Ukrainian).
Baglaj, O.M., Murs'ka, S.D., Gutyj, B.V., Gufrij, D.F. (2011). Systema antyoksydantnogo zahystu ta perekysne okysnennja lipidiv organizmu tvaryn. Naukovyj visnyk L'vivs'kogo nacional'nogo universytetu veterynarnoi' medycyny ta biotehnologij im. G'zhyc'kogo. 13, 4(2), 3-11 (in Ukrainian).
Guberuk, V.O., Gutyj, B.V., Gufrij, D.F. (2015). Vplyv ursovit-ades ta selenitu natriju na riven' neenzymnoi' systemy antyoksydantnogo zahystu organizmu bychkiv za gostrogo nitratno-nitrytnogo toksykozu. Naukovyj visnyk L'vivs'kogo nacional'nogo universytetu veterynarnoi' medycyny ta biotehnologij im. G'zhyc'kogo. 17, 1(1), 3-10 (in Ukrainian).
Lavryshyn, Y.Y., Varkholyak, I.S., Martyschuk, T.V., Guta, Z.A., Ivankiv, L.B., Paladischuk, O.R., Murska, S.D., Gutyj, B.V., Gufriy, D.F. (2016). The biological significance of the antioxidant defense system of animals body. Scientific Messenger LNUVMBT named after S.Z. Gzhytskyj. 18, 2(66), 100-111. doi:10.15421/nvlvet6622.
Deb, N., Das, S. (2013). Chlorpyrifos Toxicity in Fish: A Review. Curr. World Environ. 8(1), 77-84.
Storey, K.B. (1996). Oxidative stress: animal adaptations in nature. Bras. J. Med. Biol. Res. 29, 1715-1733.
Received 11.09.2017 Received in revised form 24.10.2017 Accepted 31.10.2017
