CC BY
6ВЕТЕРИНАРНЫЕ НАУКИ
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА ИЗ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА НА МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ СОБАК
Федоренко Татьяна Валериевна
старший преподаватель Дальневосточный ГАУ г. Благовещенск
THE INFLUENCE OF THE PREPARATION FROM THE BONE MARROW CELLS ON THE MORPHOLOGICAL PARAMETERS OF DOG'S BLOOD
Fedorenko Tatyana Valerievna, senior lecturer Far Eastern state agrarian UNIVERSITY Blagoveshchensk
АННОТАЦИЯ
Область использования иммуномодуляторов в ветеринарии постоянно расширяется, так как иммуноде-фицитные состояния стали практически неотъемлемой частью жизнедеятельности животных. В связи с этим поиск и создание эффективных иммуностимулирующих препаратов является весьма актуальным. Изучено влияние биологически активного препарата из клеток костного мозга сибирской косули на показатели клеточного иммунитета собак в период вакцинации. В результате проведенных исследований установлено достоверное увеличение иммунокомпетентных клеток в крови собак. Доказано применение костно-мозгово-го препарата с целю повышения общей резистентности организма.
ABSTRACT
The area of using of immunomodulators in veterinary science is constantly expanded as immunodeficiency states of organism of animals became practically integral part of vital functions of animals. So the search and creating of effective immunostimulating preparations are very actualy. We learned the impact of biologicall and active preparation from bone marrow cells of capreolus pygargus on the indexes of the dog's cellular immunity at the vaccination period. As a result of the researched explorations is installed the reliable increase of immunocompetent cells in dog's blood. It is proven the application of bone marrow preparation with the aim of increasing the general resistance of organism.
Ключевые слова: иммуномодуляторы; иммунокоррекция; иммунокомпетентные клетки; клетки костного мозга; белковый препарат; клеточный иммунитет.
Keywords: immunomodulators; immunotherapy; immune cells; bone marrow cells; protein preparation; cell-mediated immunity.
Введение. В последние годы значительно возрос интерес исследователей и практических специалистов к проблеме иммуномодуляции, что связано прежде всего с усилением экологического неблагополучия и возрастающей нагрузкой на организм животных неблагоприятных антропогенных факторов, существенным ростом иммунодефицитных состояний и пониманием того, что развитие большинства патологических процессов обусловлено нарушением функций иммунной системы [5,с.38-43].
В связи с этим возникает необходимость в более широком использовании уже имеющихся и в разработке новых различных приемов и средств, способных стимулировать защитные силы организма животных. Особого внимания для повышения резистентности сельскохозяйственных животных заслуживает использование генетических и фенотипических факторов, а также неспецифических и специфических иммуномо-дуляторов [4, с.156].
В литературных источниках [1, с.145-149; 6,с.14-49; 8, с.192-209] имеется информация об использовании для повышения резистентности млекопитающих нетрадиционных подходов с использованием фитопрепаратов, адъювантов интерферона, поливак-Н, и тканевых биостимуляторов. Что касается последних, казалось
бы, эра тканевых стимуляторов ушла в прошлое, но в последнее время появляются статьи, направленные на изучение производных клеток костного мозга. Ведь родоначальником иммунной системы организма млекопитающих является его стволовая клетка, участвующая как в клеточном, так и в гуморальном иммунитете [3, с.16-17].
Использование стволовых клеток, выделенных как из ранних предимплантационных эмбрионов, так и из тканей и органов взрослой особи, является актуальным. Легкость их выделения и доступность биологического материала (подкожный жир, костный мозг, кожа, плацента) делают их перспективным материалом для ветеринарии [9, с.3-5].
Костный мозг - один из источников иммунокомпе-тентных клеток, производными которых являются белки, применяемые в качестве модуляторов для повышения резистентности организма животных. В настоящее время охарактеризован гуморальный фактор костного мозга и изучены его некоторые физико-химические свойства. Известно, что стимулятор антигенных популяций (САП) белковой природы, активность фракций которого зависит от количества, содержащегося в них белка. Кроме того, важной особенностью фактора костного мозга является то, что эффект стимуляции анти-
телообразования под влиянием надосадочной жидкости, полученной от культур клеток костного мозга, не зависит от генотипа доноров этих клеток [2, с.14-45].
В литературных источниках [7, с.39-41; 10, с.26] имеется информация о получении из костного мозга биологически активных препаратов. Так, Л.И. Юрчен-ко (1972) из губчатого вещества костей получил тканевой препарат, который испытал на лошадях, жвачных и всеядных. Данный тканевой биостимулятор увеличивал количественные показатели макроэлементов (кальция, фосфора) в крови, повышал накопления гам-маглобулинов и увеличивал фагоцитарную активность нейтрофилов в два - восемь раз [10, с.72-74].
Таким образом, иммуномодуляторы обладают им-мунотропной активностью, в терапевтических и профилактических дозах восстанавливает функции иммунной системы - эффективную иммунную защиту. Эти препараты действуют преимущественно на измененные параметры, понижая повышенные и повышая пониженные показатели иммунной системы. Несмотря на значительное количество лечебно-профилактических препаратов, многие вопросы, касающиеся лечения и профилактики иммунодефицитных состояний, остаются нерешенными. Анализируя имеющуюся информацию по затронутой проблеме, сегодня можно констатировать, что исследование проблемы имму-нокоррекции с помощью препаратов косно-мозгового происхождения, являющихся модуляторами физиологического происхождения, весьма актуально.
Влияние белкового препарата на клини
В связи с этим перед нами была поставлена цель исследования - изучить влияние препарата приготовленного из костного мозга сибирской косули на морфологические показатели крови собак в возрасте до 6 месяцев, в период вакцинации.
Объекты и методы исследований. Влияние препарата изучали на собаках двух-трех месячного возраста с одного помета, первоначально, в период дегельминтизации (Каниквантел+). В дальнейшем препарат из клеток костного мозга вводили подкожно в дозе 0,1 мл на 1 кг массы животного на 14 и 42 дни с вакциной (Нобивак DHPPi), в соответствии с наставлением по применению. На 7, 21, 35, 49 дни определяли морфологические показатели крови этих животных. Контролем послужила группа собак в период вакцинации и ревакцинации, но без применения препарата из клеток костного мозга. Результаты исследований обрабатывали статистически общепринятыми методами с использованием MюrosofЮfficeExcel.
Результаты исследований. Препарат из костного мозга - продукт, полученный нами в результате суспен-дирования, гомогенизации, осаждения и диализа клеток костного мозга трубчатых костей сибирской косули и представляет собой аморфный порошок красно-коричневого цвета (патент RU 2553334, от 18 мая 2015г.).
Проведен анализ показателей клеточной защиты организма подопытных животных. Гематологические показатели контрольной и подопытной групп представлены в таблицах 1 и 2.
Таблица 1
¡ские показатели крови собак (М± т), (п=8)
Показатели Схема опыта Эритроциты, 1012/л Лейкоциты, 109/л
М±т % М±т %
Контроль 7 день 7,65±0,62 100 8,73±0,35 100
21 день 7,70±0,56 100 9,68±0,37 100
35 день 7,65±0,57 100 10,2±0,39 100
49 день 7,73±0,36 100 10,73±0,13 100
Опыт 7 день 7,78±0,15 101,7 12,58±0,99* 144,1
21 день 7,85±,014 102,0 14,08±0,46** 145,5
35 день 7,83±0,14 102,4 14,28±0,33** 140,0
49 день 7,80±0,13 100,9 15,13±0,39** 141,0
Из данных таблицы 1 следует, что применение белкового препарата из клеток костного мозга, в период дегельминтизации, вакцинации и ревакцинации, увеличивает количество лейкоцитов. Так их количество к 7 дню производственного эксперимента достоверно увеличилось на 44,1%, а к 49 дню их количество увеличилось уже на 51,9% по сравнению с показателями контрольной группы и составило 15,13±0,39*109/л, при этом их количество не повышается сверх нормального (Р<0,001). Количество эритроцитов осталось на уровне 7,8±0,13*1012/л, что может быть связано с индивидуальными особенностями организма.
Рассматривая показатели лейкограммы (таблица 2),
можно отметить, что при введении препарата из клеток костного мозга в дозе 0,1 мл на 1 кг массы животного, на 7 день производственного эксперимента, отмечается увеличение количества моноцитов по сравнению с контролем на 14,3%, лимфоцитов увеличилось на 8,2%. Количество палочкоядерных нейтрофилов и эозинофилов снизилось на 69,2% и 27,3% соответственно, что связано с увеличением количества имму-нокомпетентных клеток. На 21 день производственного эксперимента отмечается достоверное увеличение количества моноцитов на 29,2% по сравнению с контролем, на 35 день их количество составило 9,0, а к 35 дню - 9,5, что 22,6% больше чем в контрольной группе.
Таблица 2
Лейкограмма крови собак, % (M± m),(n=8)
Группы животных, дни Палочко Сегменто Моноциты Эозинофилы Лимфоциты
ядерные ней- ядерные ней-
трофилы трофилы
Контроль 7 день 3,25±0,55 61,25±1,91 5,25±0,29 2,75±0,55 27,5±1,37
21 день 3,0±0,47 56,5±1,2 6,0±0,67 3,25±0,55 31,25±0,99
35 день 3,5±0,33 52,25±0,55 7,0±0,47 2,75±0,55 34,5±0,33
49 день 3,5±0,33 50,0±0,82 7,75±0,29 3,0±0,67 35,75±0,73
Опыт 7 день 1,0±0,47** 61,25±2,31 6,0±0,47 2,0±0,47 29,75±3,21
21 день 3,0±0,47 54,0±1,49 7,75±0,55* 2,75±0,29 32,5±1,11
35 день 1,3±0,55** 51,75±0,9 9,0±0,77** 3,25±0,29 34,25±0,73
49 день 1,5±0,75** 48,25±0,99 9,5±0,33*** 3,50±0,58 37,25±0,73
Примечание: *Р<0,05; **Р<0,01; ***Р<0,001 - в сравнении с контролем.
К 35 дню отмечается увеличение количества эози-нофилов на 18,2%, к 49 дню увеличились на 16,7% по сравнению с контролем. Также отмечается увеличение количества лимфоцитов, в среднем на 4-8% по сравнению с контролем. Количество палочкоядерных нейтро-филов к 49 дню эксперимента уменьшилось в среднем на 57,1%, а количество сегментоядерных нейтрофи-лов на 3,5%, за счет увеличения иммунокомпетентных клеток (моноцитов, эозинофилов, лимфоцитов).
Заключение. Использование препарата из клеток костного мозга во время вакцинации собак в возрасте до 6 месяцев дает положительный результат, происходит выработка иммунокомпетентных клеток и тем самым повышается иммунореактивность организма животных в целом.
Список литературы
1. Даричева, Н.Н. Тканевая терапия в ветеринарной медицине: монография / Н.Н.Даричева, В.А.Ермолаев. - Ульяновск, УГСХА, 2011.- 168с.
2. Зарицкая, В.В. Белковый состав костного мозга сельскохозяйственных и диких животных / В.В. За-рицкая // Зоотехния. - 2006. - №12. - С.17.
3. Калюжин, О.В., Абидов М.Т. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1999, т. 127, При-
лож. 2, с. 16-17.
4. Кетлинский, С.А. Эндогенные иммуномодуля-торы / С.А.Кетлинский, А.С.Симбирцев, А.А.Воробьев. - Санкт-Петербург, Гиппократ, 1992.- 256с.
5. Крапивина, Е.В. Влияние биологически активных препаратов на резистентность поросят / Е.В. Крапивина // Ветеринария. - 2001. - №6. - С.38-43.
6. Лазарева, Д.Н. Стимуляторы иммунитета / Д.Н.Лазарева, Е.К.Алехин // - М.: Медицина. - 1985. - С. 14-49.
7. Ляшенко, В.А. Механизмы активации иммунокомпетентных клеток/ В.А. Ляшенко и др. - М.: Медицина.-1988.- 143с.
8. Машковский, М.Д. Препараты, коррегирующие процессы иммунитета (иммуномодуляторы, иммуно-корректоры). Лекарственные средства: Пособие для врачей. Часть II / М.Д. Машковский. - М, 1993. - С.192-209.
9. Савченкова, И.П. Перспективы использования стволовых клеток в ветеринарии / И.П.Савченкова, М.И. Гулюкин // Ветеринария.- 2011.- №7.- С.3-5.
10. Юрченко, Л.И. Влияние тканевого препарата из кости на некоторые показатели реактивности организма животных / Л.И. Юрченко // Применение биогенных стимуляторов в ветеринарии и животноводстве. -Одесса. - 1972. - С.72-74.
