CC BY
68
Физико-химическая биология Вестник Нижегородского универс итета им. Н.И. Лобачевского, 2010, № 2 (2), с. 532-535
УДК 57.023:591.1
ВЛИЯНИЕ ПРЕПАРАТА «АПИНГАЛИН» НА НЕКОТОРЫЕ ПОКАЗАТЕЛИ ЭНДОГЕННОЙ ИНТОКСИКАЦИИ КРОВИ КРЫС ПРИ ОТЕКЕ ЛЕГКИХ
© 2010 г. С.В. Копылова, АА. Пашкина, Ю.А. Старателева
Нижегородский госуниверситет им. Н.И. Лобачевского
Поступила в редакцию 27.01.2010
Исследовано влияние «Апингалина» на некоторые показатели интоксикации крови крыс на фоне адреналового отека легких. Установлено, что курсовая ингаляция препаратом привела к восстановлению тканей легкого и снятию эндогенной интоксикации: снижению уровня молекул средней массы; повышению содержания общего белка плазмы; увеличению доли альбуминов; улучшению морфологической картины фации сыворотки крови.
Ключевые слова: отек легких, ингаляция, эндогенная интоксикация, молекулы средней массы, альбумины, общий белок, сыворотка крови.
Введение
Известно, что прополис и маточное молочко обладают выраженным лечебным действием и являются одними из средств апитерапии. Разработанный в ННГУ на кафедре физиологии и биохимии человека и животных на основе прополиса и маточного молочка препарат «Апингалин» позволил расширить спектр применения продуктов пчеловодства. Апингалин обладает несомненным преимуществом перед другими апипрепаратами - ингаляционное действие позволяет применять его неинвазивно при тяжелых формах некоторых заболеваний (ИБС, ожоговая болезнь, ХНЗЛ и т.д.) [1, 2].
Заболевания дыхательной системы различной этиологии нередко сопровождаются развитием эндогенной интоксикации, что усложняет протекание болезни. Поэтому проблема снятия симптомов эндотоксикоза в настоящее время широко обсуждается и изучается [3, 4]. Поскольку препарат на основе прополиса и маточного молочка обладает эффектом повышения резистентности, усиления адаптационных реакций организма [2] - можно предположить, что ингаляционное применение «Апингалина» может способствовать снятию или ослаблению токсического эффекта патологических продуктов метаболизма в организме человека и животных. В связи с указанным, целью работы явилось изучение влияния ингаляционного препарата «Апингалин» на показатели эндогенной интоксикации крови крыс: гистологическую картину легочной ткани, содержание общего
белка в плазме крови, уровень средних молекул, клиновидная дегидратация и системная хро-мокристалоскопия сыворотки крови. Экспериментальной моделью был выбран адреналовый отек легких, поскольку симптомы проявления эндотоксикоза при данной модели наиболее типичные.
Экспериментальная часть
Эксперименты проводили на белых крысах, самцах массой 150-180 г. В работе было использовано 60 животных, которые были разделены на 3 группы. К первой группе относились интактные животные. Крысам второй - контрольной - группы воспроизводили адреналовый отек легких, для этого им внутрибрюшинно вводили адреналин в дозе 0.5 мг/кг. Через 10-15 минут визуально наблюдали признаки отека -изменения поведения, значительное учащение дыхания [5]. Животным третьей - опытной -группы моделировали отек легких, а затем в течение 10 дней по 10 минут их ингалировали препаратом «Апингалин», представляющим собой водноспиртовую суспензию пчелиного маточного молочка и прополиса.
В работе использовались следующие методики: техника гистологических исследований легких [6], определение общего белка в плазме крови биуретовым методом (метод Кингслея -Вейксельбаума), скрининговый метод определения уровня средних молекул (модификация способа А. Бабеля и др.), методы клиновидной дегидратации и системной хромокристаллоскопии сыворотки [7].
Таблица
Влияние курсовых ингаляций препарата «Апингалин» на встречаемость (в %) включений и фаций в нативной сыворотке крови крыс с адреналовым отеком легких при клиновидной дегидратации
Г руппы Контрольная п = 20 Интактная п = 20 Опытная п = 20
Нормотип - 100 4
Тип фации У порядоченный 18 - 76
Депрессивный 82 - 20
Включения Трехлучевые трещины 100 - 20
Складки краевой зоны 70 - -
Результаты и их обсуждение
На гистологических срезах легких контрольной группы (на уровне бронхов) выявлялись типичные критерии отека - наблюдалось появление отечной жидкости и белка в ткани и альвеолах [8], в сосудах - образования эритроци-тарных агрегатов в виде «монетных столбиков». Кроме того, наблюдались эритроциты, вышедшие в просвет альвеол из-за нарушения целостности капилляров и ткани легкого, что свидетельствует о развитии острого альвеолярного отека легких (ОЛ).
Рис. 1. Патологические элементы фации сыворотки крови (указаны стрелками, *128): а - складки краевой зоны, б - трехлучевые трещины
Данные изменения в легких приводят к ухудшению общего состояния организма и нарушению гомеостаза. Так, при рассмотрении фации сыворотки крови контрольной группы крыс после клиновидной дегидратации было обнаружено, что в 82% случаев наблюдается депрессивный тип формообразования фации сыворотки, являющийся показателем слабых компенсаторных возможностей организма [7]. Кроме того, в фациях контрольной группы наблюдалась 100%-ная встречаемость патологических структур-маркеров застойных явлений в организме - трехлучевых трещин. В 70% фаций присутствовали складки краевой зоны - маркеры интоксикационного процесса (рис. 1, табли-
ца). Он может быть вызван повреждением тканей при ОЛ с выходом в плазму и полость альвеол содержимого поврежденных клеток, в том числе ферментов, способных разрушать макромолекулы с образованием продуктов извращенного обмена, которые входят в пул молекул средней массы (МСМ).
Уровень МСМ вырос на 35% (р < 0.05), а концентрация общего белка снизилась на 80% (р < 0.05). Это свидетельствует о нарушении клеточного метаболизма, усилении катаболических процессов, в частности протеолиза (рис. 2, 3).
При рассмотрении фации сыворотки при хромокристаллоскопии амидочерным 10В наблюдалось снижение доли альбуминов в белках плазмы на 68% (р < 0.05). Содержание а-гло-булинов в сыворотке повышается на 43% (р < 0.05). Это свидетельствует о нарушении нормального соотношения белков в сыворотке.
Таким образом, после введения внутрибрю-шинно адреналина (0.5 мг/кг) у крыс развивался остро протекающий отек легких (ОПОЛ), который сопровождался синдромом ЭИ. Он, в свою очередь, может сильно осложнять течение основного заболевания. Поэтому при лечении ОПОЛ снижение уровня ЭИ имеет важное значение.
После десятидневных ингаляций «Апинга-лином» состояние ткани легких значительно улучшилось. Наблюдалось значительное снижение содержания жидкости в альвеолах и окружающей их ткани. В ткани практически не обнаруживались вышедшие из капилляров эритроциты. В просветах альвеол наблюдались макрофаги, которые являются маркерами завершения воспалительного процесса. Характерной их особенностью было наличие темноок-рашенных включений - фагосом с поглощенным материалом (вышедших в ткань и альвеолы белков, остатков разрушенной ткани и т.д.). На срезах сосудов почти не обнаруживались явления образования эритроцитарных агрегатов в виде «монетных столбиков».
Наряду с этим, происходило улучшение общего состояния организма, о чем свидетельствуют исследования фаций сыворотки крови: в 76% слу-
чаев имеет место упорядоченный тип структуро-образования, отражающий сохраненный уровень компенсаторных возможностей организма.
Ранее было показано, что курсовая ингаляция «Апингалина» способствует повышению возду-хопроходимости крупных и средних бронхов, улучшает спирометрические характеристики легких при хронических неспецифических заболеваниях легких. Вещества маточного молочка и прополиса, помимо воздействия непосредственно на ткани легких, легко всасываясь через слизистые, проникают в кровоток через капилляры и оказывают на больной организм и общее действие [2]. Именно поэтому «Апингалин» способен проявлять свои детоксикационные свойства генерали-зованно, на весь организм в целом, о чем свидетельствуют наши результаты. Так, в фациях сыворотки опытной группы крыс не обнаруживались складки белковой зоны, лишь в 20% случаев встречались трехлучевые трещины, которые являются маркерами эндотоксикации.
После курсовой ингаляции крыс препаратом «Апингалин» наблюдалось снижение уровня МСМ на 50% (р < 0.05). По-видимому прекращается первичное образование эндогенных токсинов. Кроме того, «Апингалин» имеет антиок-сидантные свойства благодаря 10-окси-2-деце-новой кислоте маточного молочка и пиноцем-брину прополиса. Эти вещества способствуют удалению ранее образовавшихся МСМ из организма. Кроме того, компоненты «Апингалина» способствуют восстановлению нормального синтеза белка в организме, что подтверждают полученные результаты: концентрация белка плазмы увеличилась в 2 раза по сравнению с контрольной группой животных.
і: «л ц.. э-и і.,-1 и ■ шм іМ'ї |_-,11 ^
I J к О-ЛІ! I Л
Рис. 2. Влияние ингаляций препарата «Апингалин» на МСМ в плазме крови крыс при отеке легких. * - Достоверность различия показателей по отношению к контрольной группе (р < 0.05)
При сравнении полученных данных о соотношении белков в сыворотке было обнаружено, что белковый состав сыворотки крыс опытной группы приближается к таковому интактной группы. Так, содержание альбуминов выросло на 68% по сравнению с контролем, а а-гло-булинов снизилось на 56%.
'* &■<} ґ"
\- 5 пріллю Л г мна ■ 1 та “ІІГ -у-ГГ-:
Г І Н ІН -Е- I ■ >1
Рис. 3. Влияние ингаляций препарата «Апингалин» на концентрацию общего белка в плазме крови при отеке легких (см. примечание к рис. 2)
Известно, что на 60% белки маточного молочка представлены альбуминами и глобулинами в соотношении 2:1 соответственно [1, 2]. Таким образом, попадая в кровь, белки препарата могли влиять на соотношение белков сыворотки.
Кроме того, как уже было показано, «Апингалин» стимулирует восстановление тканей легких и сосудов после ОЛ, что снижает степень инфильтрации белков крови в ткани легкого (а в первую очередь фильтруются альбумины).
Таким образом, ингаляции препаратом «Апингалин», приготовленным на основе природных продуктов - маточного молочка и прополиса, приводят к значительному восстановлению тканей легкого и сосудов и снижают уровень ЭИ. Это происходит благодаря антиокси-дантным, антигипоксическим, биостимули-
рующим и другим свойствам данных продуктов [2]. Кроме того, действуя совместно, маточное молочко и прополис моделируют и усиливают свойства друг друга, а при их ингаляционном введении оказывают свое действие генерализовано, на весь организм в целом. Поэтому ингаляционный препарат «Апингалин» целесообразно использовать для снятия ЭИ при отеке легких.
Заключение
1. Установлено, что при адреналовом отеке легких развивается ЭИ, характеризующаяся повышением содержания МСМ сыворотки и снижением общего белка плазмы, появлением трехлучевых трещин и складок белковой зоны в преимущественно депрессивном типе формообразования фации, а также снижением доли альбуминов с одновременным повышением доли а-глобулинов в сыворотке крови.
2. После курсовой ингаляции препаратом «Апингалин» произошло восстановление тканей легкого и сосудов, а также наблюдалась нормализация изучаемых показателей ЭИ: преимущественно упорядоченный тип формообразования фации при отсутствии в ней складок белковой зоны и трехлучевых трещин; снижение уровня МСМ на фоне повышения содержания общего белка плазмы; повышение доли альбуминов при снижении доли а-глобулинов.
Список литературы
1. Крылов В.Н., Сокольский С.С. Маточное молочко пчел: свойства, получение, применение. Краснодар: Агропромполиграф, 2000. 214 с.
2. Крылов В.Н., Агафонов А.В., Кривцов Н.И., Лебедев В.И. и др. Теория и средства апитерапии М.: Комильфо, 2007. 296 с.
3. Малахова М.Я. Эндогенная интоксикация как отражение компенсаторной перестройки обменных процессов в организме // Эфферентная терапия. 2000. Т. 6. № 4. С. 3-14.
4. Добротина Н.А., Копытова Т.В. Эндоинтоксикация организма человека: методологические и методические аспекты. Учебное пособие. Н. Новгород: ННГУ им. Лобачевского, 2004. 62 с.
5. Попов В.Г., Тополянский В.Д. Отек легких. М., 1975. 60 с.
6. Артишевский А.А., Лентюк А.С., Слука Б.А. Гистология с техникой гистологических исследований. Учебное пособие. Мн.: Выш. шк., 1999. 236 с.
7. Шабалин В.Н., Шатохина С.Н. Морфология биологических жидкостей человека. М.: Хризостом, 2001. 304 с.
8. Гриппи М.А. Патофизиология легких. М.: Бином, 2005. 304 с.
THE INFLUENCE OF THE PREPARATION “APINHALIN” ON SOME INDICATORS OF RAT BLOOD ENDOGENOUS INTOXICATION UNDER PULMONARY EDEMA
S. V. Kopylova, A.A. Pashkina, Yu.A. Starateleva
The effect of “Apinhalin” on some indicators of rat blood intoxication against the background of adrenal pulmonary edema has been studied. The course inhalation of the drug has been found to result in the restoration of lung tissue and the removal of endogenous intoxication: a decrease in the level of mean weight molecules, an increase in the total plasma protein content, an increase in albumin fraction, an improvement of the morphological picture of blood serum facies.
Keywords: pulmonary edema, inhalation, endogenous intoxication, mean weight molecules, albumins, total plasma protein, serum.
