CC BY
13
УДК 631.523
А.В. ЛУКША, Н.А. МАКСИМОВИЧ, О.В. ГОРЧАКОВА, И.Э. ГУЛЯЙ, В.Р. ШУЛИКА
Гродненский государственный медицинский университет, г. Гродно, Республика Беларусь
Влияние полиморфизмов 894G/T и Т786С гена эндотелиальной синтазы оксида азота на уровень продуктов их экспрессии — eNOS и NOy детей с артериальной гипертензией
Контактная информация:
Лукша Александр Викторович — ассистент 1-й кафедры детских болезней
Адрес: 230009, Республика Беларусь, г. Гродно, ул. Горького, 80, тел.: +375 (0152) 44-81-21, e-mail: [email protected]
Цель исследования — изучить влияние полиморфных вариантов 894G/Tи Т786С гена эндотелиальной синтазы оксида
азота на уровень продуктов их экспрессии-eNOS и NO у детей с артериальной гипертензией.
Материал и методы. Обследовано 111 детей, среди них: 51 пациент с артериальной гипертензией, 30--с высоким
нормальным артериальным давлением и 30 условно здоровых детей. Определение полиморфных локусов 894G/T и Т786С гена NOS3 проводили с помощью полимеразной цепной реакции. Количественное определение уровня eNOS в плазме крови проводилось с помощью набора для иммуноферментного анализа. Концентрацию стабильных метаболитов монооксида азота (нитратов и нитритов, NOx) в плазме крови определяли с помощью реактива Гоисса.
Результаты. Установлено, что среди детей Гоодненской области преобладает гомозиготный генотип GG и G-аллель полиморфного локуса 894G/T гена NOS3 и гетерозиготный генотип ТС и Т-аллель полиморфного варианта Т786С гена NOS3. Присутствие в генотипе аллели Т полиморфного варианта 894G/T гена NOS3 у детей с артериальной гипертензией ассоциировано со снижением экспрессии eNOS и уровня NOx по сравнению с носителями аллели Т среди здоровых детей. Гетерозиготный генотип 786ТС и аллель С полиморфизма Т786С гена NOS3 у детей с артериальной гипертензией характеризуетсянизким уровнемNOx по сравнению с носителями аналогичного генотипа и аллели среди здоровых детей.
Ключевые слова: дети, артериальная гипертензия, эндотелиальная синтаза оксида азота, метаболиты оксида азота, полиморфизм гена NOS3.
(Для цитирования: Лукша А.В., Максимович Н.А., Горчакова О.В., Гуляй И.Э., Шулика В.Р. Влияние полиморфизмов 894G/T и Т786С гена эндотелиальной синтазы оксида азота на уровень продуктов их экспрессии — eNOS и 1\10у детей с артериальной гипертензией. Практическая медицина. 2022. Т. 20, № 7, С. 46-50)
DOI: 10.32000/2072-1757-2022-7-46-50
A.V. LUKSHA, N.A. MAXIMOVICH, V.V. HARCHAKOVA, I.E. GULYAI, V.R. SHULIKA
Grodno State Medical University, Grodno, Republic of Belarus
Effect of the polymorphisms 894G/T and T786C of the endothelial nitric oxide synthase gene on the levels of their expression products — eNOS and NO in children with arterial hypertension
Contact details:
Luksha A.V. — Assistant Lecturer of the Department of Pediatrics I
Address: 80 Gorkogo St., Grodno, Republic of Belarus, 230009, tel.: +375 (0152) 44-81-21, e-mail: [email protected]
The purpose — to study the effect of the polymorphic variants 894G/T and T786C of NOS3 gene of the endothelial nitric oxide synthase gene on the levels of their expression products — eNOS and NO in children with arterial hypertension.
Material and methods. We examined 111 children, including 51 patients with arterial hypertension, 30 patients with high-normal blood pressure and 30 healthy children. The polymorphism of the study genes was studied using a real-time polymerase chain reaction. Determination of plasma concentrations of eNOS was performed with enzyme immunoassay. NO metabolites, nitrateandnitrite (NOx) production were determined using the Griess reaction.
Results. Among the children of the Grodno region, the homozygous GG genotype and the G-allele of the polymorphic locus 894G/T of the NOS3 gene and the heterozygous TC genotype and the T-allele of the T786C polymorphic variant of the NOS3 gene predominate. The presence of the T allele 894G/T of the NOS3 gene in children with arterial hypertension is associated with a decrease eNOS expression and NOx levels compared with T allele carriers among healthy children. Heterozygous genotype 786TC and allele C of T786C polymorphism of the NOS3 gene in children with arterial hypertension are characterized by a low level of NOx compared with healthy children.
Key words: children, arterial hypertension, endothelial nitric oxide synthase, nitric oxide metabolites, NOS3 gene polymorphism.
(For citation: Luksha A.V., Maximovich N.A., Harchakova V.V., Gulyai I.E., Shulika V.R. Effect of the polymorphisms 894G/T and T786C of the endothelial nitric oxide synthase gene on the levels of their expression products — eNOS and NO in children with arterial hypertension. Practical medicine. 2022. Vol. 20, № 7, P. 46-50)
В настоящее время функциональному состоянию эндотелия придается большое значение в изучении этиологии, патогенеза и прогрессирования артериальной гипертензии. Основным вазоактивным метаболитом, определяющим регуляцию сосудистого тонуса эндотелия, является эндотелиальный фактор релаксации — оксид азота (NO) [1-3]. NO представляет собой восстановленную форму моноокиси азота с периодом полураспада от 2 до 30 с, которая образуется посредством окисления терминальной группы гуанидина аминокислоты L-аргинина [1, 3, 4]. Основным катализатором этой реакции выступает фермент — синтаза оксида азота (NOS).
В настоящее время идентифицированы три изо-формы NOS: NOS-1 — нейрональная (nNOS) или мозговая (bNOS), NOS-2 — индуцибельная (iNOS) или макрофагальная (mNOS) и NOS-3 — эндоте-лиальная (eNOS) [3, 5]. Две изоформы (nNOS и mNOS) локализованы главным образом в цитоплазме клеток, еNOS содержится в мембранах клеток. Все изоформы NOS катализируют образование NO, имеют сходную структуру, однако механизм действия, локализация каждой изоформы и биологический эффект имеют специфические особенности [6-9]. Имеются научные данные о существовании четвертой изоформы — митохондриальной NOS (mtNOS), убедительно подтверждающие участие митохондрий в продукции NO [10-12].
В норме образование NO происходит в основном с помощью eNOS (nNOS продуцируют NO в очень малых количествах) [6]. Эндотелиальная NO-синтаза является продуктом экспрессии гена NOS3. Ген NOS3 расположен на длинном плече 7 хромосомы (7q35-7q36) и содержит 25 интронов и 2б экзо-нов, которые кодируют мРНК из 4052 нуклеотидов [6, 13, 14]. Функциональная роль eNOS и ее способность синтезировать NO определяется как уровнем экспрессии самого фермента в тканях, так и процессами, приводящими к изменению ее активности [15]. При эндотелиальной дисфункции отмечается нарушение синтеза и биодоступности NO вследствие подавления экспрессии / инактивации еNOS, уменьшением уровня L-аргинина, кофакторов NO-синтазы, повышением эндогенных ингибиторов NO или из-за повышенного распада NO активными формами кислорода [16, 17]. На регуляцию NOS3 на транскрипционном, посттранскрипционном и посттрансляционном уровнях могут влиять генетические полиморфизмы в гене NOS3 [14].
В настоящее время известно о более чем 1700
генетических вариациях гена NOS3 [14]. Некоторые из них считаются функциональными, поскольку наличие их в генотипе влияет на экспрессию или активность NOS3 [18]. Уменьшенная продукция eNOS обусловливает снижение концентрации NO в кровеносном русле, вследствие чего снижается ва-зодилатация, что может быть важным механизмом развития артериальной гипертензии.
Наиболее изучаемыми научным сообществом полиморфизмами являются три полиморфных варианта гена NOS3: 4а/4Ь в 5 интроне, структурная замена 894G>T в 7 экзоне и полиморфизм промоторной области гена — 786Т>С.
Относительно хорошо изученным является одно-нуклеотидный полиморфизм (SNP, single nucleotide polymorphism) SNPrs2070744, широко известный как Т786С. Nakayama M. et al. показали, что в случае замены тимина (Т) на цитозин (С) в положении (-786) промотора приводит к снижению его активности [14, 19]. Предполагают, что возможный механизм влияния мутации Т786С в промоторе гена NOS3 обусловлен специфическим связыванием с репликационным белком A1, что приводит к снижению экспрессии eNOS [14, 20]. В случае пониженной активности промотора в результате замены T786C наблюдается уменьшение количества информационных РНК и белковых молекул eNOS, что приводит к соответствующему уменьшению синтеза No.
SNP rs1799983 расположен в экзоне 7 и соответствует замене гуанина (G) на тимин (T) в положении 894 гена NOS3, что приводит к замене глутами-на (Glu) на аспартат (Asp) в положении 298 белка, поэтому этот SNP известен как Glu298Asp [13, 14]. Эта замена приводит к уменьшению связывания eNOS с кавеолином-1 и уменьшению ее доступности в эндотелиальных клетках, что приводит к снижению eNOS, доступного для активации Са2+-связывающего белка — кальмодулина, что в итоге снижает продукцию NO [21].
Одним из примеров сердечно-сосудистых заболеваний, для которых нарушение образования эндогенного NO является важным патогенетическим механизмом, является артериальная гипертензия. Анализ опубликованных ранее данных не позволяет однозначно ответить на вопрос: как изменяется уровень NO в сосудах при артериальной гипертен-зии. В некоторых работах показано как снижение содержания метаболитов NO, так и его значительное повышение в крови пациентов с артериальной гипертензией [22-24, 26].
Внедрение современных методов типирования и изучение на их основе популяционных особенностей генотипов и аллельных полиморфизмов генов являются одной из актуальных задач на пути повышения эффективности до нозологической диагностики заболеваний, особенно среди лиц молодого возраста. Поэтому изучение ассоциации генетических полиморфизмов и метаболизма эндогенного NO в аспекте сердечно-сосудистой патологии представляется наиболее актуальным.
Цель исследования — изучить влияние полиморфных вариантов 894G/T и Т786С гена эндотели-альной синтазы оксида азота на уровень продуктов их экспрессии — eNOS и NO у детей с артериальной гипертензией.
Материал и методы
Обследовано 111 детей в возрасте от 14 до 18 лет, медиана возраста составила 15,2 (14,0; 16,5). Все пациенты были разделены на 3 группы: 1 группу (n = 51) составили дети с артериальной гипертензи-ей, 2 группу (n = 30) — с высоким нормальным артериальным давлением, 3 группу — 30 здоровых детей из групп периодического диспансерного наблюдения. Генотипирование по двум описанным полиморфным маркерам 894G/T и Т786С гена еNOS проводили на геномной ДНК, выделенной из цельной крови 90 детей. По результатам генотипирования установлено, что анализируемая выборка находится в равновесии согласно критерия Харди — Вайнберга для полиморфных вариантов гена eNOS (р > 0,05), что дает возможность интерпретировать результаты, полученные при обследовании данной выборки. Количественное определение уровня eNOS в плазме крови проводилось с помощью набора для иммуноферментного анализа. Концентрацию стабильных метаболитов монооксида азота (нитратов и нитритов, NOx) в плазме крови определяли с помощью реактива Грисса.
Для статистического анализа данных применяли непараметрические методы с использованием пакета прикладных программ Microsoft Excel и Statistica 10.0
для Windows (StatSoft, Inc., США). Сравнительный анализ частот генотипов и аллелей у разных групп пациентов осуществлялся с помощью точного критерия Фишера. Количественные данные, распределение которых не являлось нормальным, приводились в виде медианы, 25 и 75% квартилей. Сравнение групп по качественному бинарному признаку проводили с помощью критерия х2. Для оценки различий количественных признаков между двумя независимыми группами использовался критерий Мана — Уитни. Различия считались достоверными при значении р < 0,05.
Результаты
Полиморфизм 894G/T гена NOS3
По результатам генотипирования полиморфного варианта 894G/T гена NOS3 установлено, что анализируемая выборка детского населения Гродненского региона находится в равновесии по критерию Харди — Вайнберга (х2 = 0,12; р = 0,9), что позволяет интерпретировать результаты, полученные при обследовании данной выборки детей.
Анализ распределения частот генотипов и аллелей полиморфного варианта 894G/T гена NOS3 в общей выборке детей Гродненской области (n = 90) показал, что в 55,5% случаев встречался гомозиготный генотип 894GG, гетерозиготный генотип 894GT — в 38,9%, носителями мутантного генотипа 894ТТ были 5,6%. Генотип 894GG, в отличие от генотипа 894TT, встречался чаще (х2 = 53,0, р < 0,001). Носителями аллеля 894G являлись 75,0% детей, алле-ля 894Т — 25,0% (р < 0,001).
При статистическом анализе данных, представленных в табл. 1, выявлено, что концентрация эндотелиальной синтазы оксида азота у детей с артериальной гипертензией с генотипом GT была статистически значимо ниже, по сравнению с носителями аналогичного генотипа среди детей группы 3 (р = 0,05). Пациенты-носители генотипа 894GG и 894ТТ по уровню eNOS статистически не различались (р > 0,05).
Таблица 1. Концентрация eNOS при различных генотипах и аллелях полиморфного варианта 894G^ гена еNOS в исследуемых группах пациентов (Me (Q25; Q75))
Table 1. Concentration of eNOS in various genotypes and alleles of the polymorphic variant 894G/T of the NOS3 gene in the studied groups of patients (Me (Q25; Q75))
Генотип, аллель Группа 1 Группа 2 Группа 3 р
GG 484,51 (400,00; 617,93) 627,56 (432,39; 740,67) 565,58 (457,39; 680,50) > 0,05
GT 494,09 (407,04; 649,82) 554,15 (546,93; 649,22) 657,04 (644,40; 774,97) рЬ2 > 0,05 р^-з = 0,05 р2-3 > 0,05
ТТ 433,10 (327,46; 720,22) 544,33 (410,56; 678,10) - р^-2 > 0,05 Р1-3-р2-3-
G 484,51 (400,00; 617,93) 627,56 (432,39; 740,67) 565,58 (457,39; 680,50) рЬ2 > 0,05 р,-2 = 0,04 р2-3 > 0,05
T 433,10 (327,46; 720,22) 544,33 (410,56; 678,10) 657,04 (644,40; 774,97) рЬ2 > 0,05 р,-2 = 0,04 р2-3 > 0,05
Таблица 2. Уровень стабильных метаболитов монооксида азота при различных генотипах и аллелях полиморфного варианта 894G/T гена NOS3 в исследуемых группах пациентов (Me (Q25; Q75))
Table 2. Level of the stable nitric oxide metabolites in various genotypes and alleles of the polymorphic variant 894G/T of the NOS3 gene in the studied groups of patients (Me (Q25; Q75))
Генотип, аллель Группа 1 Группа 2 Группа 3 р
GG 18,70 (16,56; 21,97) 18,12 (16,72; 19,35) 24,10 (18,03; 28,31) рь2 > 0,05 Pi-з = 0,02 Р2-3 = 0,03
GT 20,65 (16,30; 22,13) 14,68 (12,81; 17,81) 21,06 (18,69; 24,84) Р1-2 > 0,05 рьз > 0,05 Р2-3 = 0,002
ТТ 16,56 (16,07; 21,97) 18,90 (18,75; 19,06) - Р1-2 > 0,05 Р1-3-Р2-3-
G 18,70 (16,56; 21,97) 18,12 (16,72; 19,35) 24,10 (18,03; 28,31) Р1-2 > 0,05 р^ = 0,01 Р2-3 = 0,004
T 16,56 (16,07; 21,97) 18,90 (18,75; 19,06) 21,06 (18,69; 24,84) Р1-2 = 0,01 Р1-2 = 0,02 Р2-3 = 0,003
У пациентов группы 1 присутствие в генотипе аллели С и патологической аллели Т ассоциировано со сниженной активностью eNOS по сравнению с носителями аллели С и аллели Т среди здоровых детей (р = 0,04).
При сравнении пациентов внутри каждой группы в зависимости от полиморфизма 894G/T гена NOS3 не выявлено статистических различий в концентрации eNOS (р > 0,05).
При оценке влияния полиморфизма 894G/T гена NOS3 на уровень метаболитов монооксида азота (табл. 2), установлено, что медиана NOx у детей группы 1 с генотипом GG составила 18,70 (16,56; 21,97), у детей группы 2 — 18,12 (16,72; 19,35) и были статистически значимо ниже по сравнению с носителями аналогичного генотипа среди детей группы 3 — 24,10 (18,03; 28,31) мкмоль/л (р = 0,02; р = 0,03 соответственно). Также установлено статистически значимое различие в уровне NOх среди детей группы 2 с генотипом GT по сравнению с группой 3 (р = 0,002). Носители генотипа ТТ полиморфного локуса G894Т гена NOS3 по уровню NOx статистически не различались (р > 0,05).
У пациентов с артериальной гипертензией присутствие в генотипе патологической аллели Т ассоциировано со сниженным уровнем NОx по сравнению с носителями аллели Т среди детей с высоким нормальным артериальным давлением (р = 0,01) и группой здоровых детей (р = 0,02).
Полиморфизм Т786С гена NOS3
Распределение частот генотипов полиморфизма Т786С гена NOS3 в общей выборке соответствует теоретически ожидаемому равновесию Харди — Вайнберга (х2 = 0,02; р = 0,9). При определении частоты полиморфного варианта Т786С гена NOS3 в общей выборке пациентов установлено, что дикий генотип 786ТТ гена еNOS выявлен у 40,9% детей, у 45,5% — генотип 786ТС, у 13,6% детей —
гомозиготный мутантный генотип 786СС. Генотипы ТТ и ТС, в отличие от мутантного генотипа СС, встречались чаще (х2 = 16,5, р < 0,001; х2 = 21,4, р < 0,001). Частота аллеля 786Т составила 63,6%, аллеля 786С — 36,4% (р = 0,002).
При статистическом анализе данных, представленных в табл. 3, установили, что концентрация эндотелиальной синтазы оксида азота у детей в зависимости от генотипов и аллелей полиморфного локуса Т786С гена NOS3 статистически не различались между группой детей с артериальной гипер-тензией и группой здоровых детей (р > 0,05).
При статистическом анализе данных, представленных в табл. 3, установили, что концентрация эндотелиальной синтазы оксида азота у детей в зависимости от генотипов и аллелей полиморфного локуса Т786С гена NOS3 статистически не различались между группой детей с артериальной гипер-тензией и группой здоровых детей (р > 0,05).
При сравнении пациентов внутри каждой группы в зависимости от полиморфизма Т786С гена eNOS не выявлено статистических различий в концентрации eNOS (р > 0,05).
При анализе данных, представленных в табл. 4, установили, что уровень стабильных метаболитов монооксида азота у детей группы 1 с генотипом ТТ составил 19,34 (16,87; 22,18) мкмоль/л, у детей группы 2 — 16,72 (14,37; 18,12) мкмоль/л, в группе 3 — 21,80 (19,67; 26,89) мкмоль/л. Наименьший уровень NOx наблюдался среди детей группы 2 и был статистически ниже по сравнению с группой 3 (р = 0,005). У детей группы 1 и группы 2 с гетерозиготным генотипом 786ТС уровень NOx был достоверно ниже по сравнению с носителями аналогичного генотипа среди детей группы 3 (р = 0,002; р = 0,01 соответственно). В зависимости от присутствия мутантного генотипа 786СС исследуемые группы по содержанию нитритов и нитратов статистически не различалась (р > 0,05).
Таблица 3. Концентрация eNOS при различных генотипах и аллелях полиморфного варианта Т786С гена eNOS в исследуемых группах пациентов (Me (Q25; Q75))
Table 3. Concentration of eNOS in various genotypes and alleles of the polymorphic variant T786C of the NOS3 gene in the studied groups of patients (Me (Q25; Q75))
Генотип, аллель Группа 1 Группа 2 Группа 3 р
ТТ 473,59 (412,68; 530,08) 554,15 494,37; 740,67) 580,63 (451,41; 645,61) Р1-2 = 0,05 р1-3 > 0,05 р2-3 > 0,05
ТС 529,48 (400,00; 747,89) 606,50 (478,64; 663,66) 674,49 (646,81; 814,08) > 0,05
СС 470,72 (378,87; 562,58) 492,96 (410,56; 980,14) 550,54 (496,48; 633,57) > 0,05
Т 473,59 (412,68; 530,08) 554,15 (494,37; 740,67) 580,63 (451,41; 645,61) > 0,05
С 470,72 (378,87; 562,58) 492,96 (410,56; 980,14) 550,54 (469,48; 633,57) > 0,05
Таблица 4. Уровень стабильных метаболитов монооксида азота при различных генотипах и аллелях полиморфного варианта Т786С гена NOS3 в исследуемых группах пациентов (Me (Q25; Q75))
Table 4. Level of the stable nitric oxide metabolites in various genotypes and alleles of the polymorphic variant T786C of the NOS3 gene in the studied groups of patients (Me (Q25; Q75))
Генотип, аллель Группа 1 Группа 2 Группа 3 р
ТТ 19,34 (16,87;22,18) 16,72 (14,37; 18,12) 21,80 (19,67; 26,89) Рь2 = 0,04 Р1-3 > 0,05 Р2-3 = 0,005
ТС 18,28 (16,07; 21,97) 18,59 (16,71; 20,17) 28,37 (20,33; 38,28) РЬ2 > 0,05 Р1-3 = 0,002 Р--3 = 0,01
СС 16,96 (10,31; 23,61) 17,81 (12,81; 19,06) 19,01 (15,74; 24,10) > 0,05
Т 19,34 (16,87;22,18) 16,72 (14,37; 18,12) 21,80 (19,67; 26,89) Р1-2 > 0,05 Р1-3 = 0,001 Р2-3 = 0,0001
С 16,96 (10,31; 23,61) 17,81 (12,81; 19,06) 19,01 (15,74; 24,10) Р1-2 > 0,05 р^ = 0,01 р2-3 = 0,02
Среди пациентов группы 1 и группы 2 присутствие в генотипе патологической аллели С ассоциировано со сниженным уровнем 1Юх, по сравнению с носителями С-аллели контрольной группы (р = 0,01; р = 0,02 соответственно). Медиана уровня ЫОх у пациентов группы 1, имеющих в генотипе аллель С, составила 16,96 (10,31; 23,61) мкмоль/л, у детей группы 2 — 17,81 (12,81; 19,06) мкмоль/л, у пациентов группы 3 - 19,01 (15,74; 24,10) мкмоль/л.
Полученные нами данные согласуются с результатами исследований, которые выявили тенденцию к более низким уровням циркулирующих маркеров, связанных с N0, у лиц, несущих патологическую Т-аллель 894G/T и С-аллель Т786С гена N0S3 по сравнению с носителями аллеля 894G и 786Т, что подтверждает функциональную роль исследуемых SNP [20, 27-30].
Выводы
Среди детей Гродненской области преобладает гомозиготный генотип GG и G-аллель полиморфного локуса 894G/Т гена N0S3 и гетерозиготный генотип Тс и Т-аллель полиморфного варианта Т786С гена N0S3.
Присутствие в генотипе аллели Т полиморфного варианта 894G/Т гена N0S3 у детей с артериальной гипертензией ассоциировано со снижением экспрессии eN0S и уровня N0x, по сравнению с носителями аллели Т среди здоровых детей.
Гетерозиготный генотип 786ТС и аллель С полиморфизма Т786С гена N0S3 у детей с артериальной гипертензией характеризуется низким уровнем N0x, по сравнению с носителями аналогичного генотипа и аллели среди здоровых детей.
Лукша А.В.
https://orcid.org/0000-0002-3605-4495 Максимович Н.А.
https://orcid.org/0000-0002-5907-5942 Горчакова О.В.
https://orcid.org/0000-0001-9998-4350 Гуляй И.Э.
https://orcid.org/0000-0001-6070-6230 Шулика В.Р.
https://orcid.org/0000-0001-9509-8909
Литература
1. Zhao Y., Vanhoutte P.M., Leung S.W. Vascular nitric oxide: Beyond eNOS // J Pharmacol Sci. - 2015. - Vol. 129 (2). - P. 83-94. DOI: 10.1016/j.jphs.2015.09.002
2. Maltseva N.V., Smirnova A.S., Rublevskaya A.C., Bichan N.A. Possible genetically determined mechanisms of arterial hypertension in tobacco smoking // Kardiologiia. — 2019. — Vol. 59 (1S). — P. 4-10.
3. Belovol A.N., Knyazkova I.I. Endothelial function: focus on nitric oxide // Health of Ukraine. — 2012. — P. 50-51.
4. Lundberg J.O., Weitzberg E. Nitric oxide signaling in health and disease // Cell. — 2022. — Vol. 185 (16). — P. 2853-2878. DOI: 10.1016/j.cell.2022.06.010
5. Tejero J., Shiva S., Gladwin M.T. Sources of Vascular Nitric Oxide and Reactive Oxygen Species and Their Regulation // Physiol Rev. — 2019. — Vol. 99 (1). — P. 311-379. DOI: 10.1152/physrev.00036.2017
6. Forstermann U., Sessa W.C. Nitric oxide synthases: regulation and function // Eur. Heart. J. — 2012. — Vol. 33 (7). — P. 829-837.
7. Goncharov N.P. Nitric oxide (NO): physiology and metabolism (lecture) // Andrology and Genital Surgery. — 2020. — Vol. 21 (3). — P. 75-79.
8. Kuznetsova V.L., Soloveva A.G. Nitric oxide: properties, biological role, mechanisms of action // Modern problems of science and education. — 2015. — Vol. 4. — P. 24-29.
9. Shu X., Keller T.C., Begandt D. et al. Endothelial nitric oxide synthase in the microcirculation // Cell Mol Life Sci. — 2015. — Vol. 72 (23). — P. 4561-4575. DOI: 10.1007/s00018-015-2021-0
10. Giulivi C., Poderoso J.J., Boveris A.Production of nitric oxide by mitochondria // J. Biol. Chem. — 1998. — Vol. 273 (18). — P. 11038-11043.
11. Tengan, C.H., Moraes, C.T. NO control of mitochondrial function in normal and transformed cells // Biochimica et Biophysica Acta (BBA) — Bioenergetics. — 2017. — Vol. 1858 (8). — P. 573-581. DOI: 10.1016/j.bbabio.2017.02.009
12. Ghafourifar P., Cadenas E. Mitochondrial nitric oxide synthase // Trends Pharmacol Sci. — 2005. — Vol. 26 (4). — P. 190-195. DOI: 10.1016/j.tips.2005.02.005
13. Marsden P.A., Heng H.H., Scherer S.W.et al. Structure and chromosomal localization of the human constitutive endothelial nitric oxide synthase gene // J Biol Chem. — 1993. — Vol. 268. — P. 17478-17488.
14. Oliveira-Paula G.H., Lacchini R., Tanus-Santos J.E. Endothelial nitric oxide synthase: From biochemistry and gene structure to clinical implications of NOS3 polymorphisms // Gene. — 2016. — Vol. 575 (2 Pt 3). — P. 584-599. DOI: 10.1016/j.gene.2015.09.061
15. Гайнуллина Д.К., Кирюхина О.О., Тарасова О.С. Оксид азота в эндотелии сосудов: регуляция продукции и механизмы дейст-
вия // Успехи физиологических наук. — 2013. — T. 44, № 4. — C. 88-102.
16. Vasina L.V., Petrishchev N.N., Vlasov T.D. Markers of endothelial dysfunction // Regional blood circulation and microcirculation. — 2017. — Vol. 16 (1). — P. 4-15.
17. ГумановаН.Г. Оксид азота и его циркулирующие метаболиты NOx, их роль в функционировании человеческого организма и прогнозе риска сердечно-сосудистой смерти (Ч. II) // Профилактическая медицина. — 2021. — T. 24 (10). — C. 119-125.
18. Wattanapitayakul S.K., Mihm M.J., Young A.P.et al. Therapeutic implications of human endothelial nitric oxide synthase gene polymorphism // Trends Pharmacol Sci. — 2001. — Vol.22. — P. 361-368.
19. Nagassaki S., Sertorio J.T., Metzger I.F. et al. eNOS gene T-786C polymorphism modulates atorvastatin-induced increase in blood nitrite // Free Radic Biol Med. — 2006. — Vol. 41. — P. 1044-1049.
20. Miyamoto Y., Saito Y., Nakayama M. et al. Replication protein A1 reduces transcription of the endothelial nitric oxide synthase gene containing a -786T->C mutation associated with coronary spastic angina // Hum Mol Genet. — 2000. — Vol. 9. — P. 2629-2637.
21. Qian J., Fulton D. Post-translational regulation of endothelial nitric oxide synthase in vascular endothelium // Front Physiol. — 2013. — Vol. 4. — P. 347.
22. Goonasekera C.D.A., Shah V., Rees D.D. Nitric oxide activity in childhood hypertension // Archives of Disease in Childhood. — 1997. — Vol. 77 (1). — P. 11-16. DOI: 10.1136/adc.77.1.11
23. Lengyel S., Katona E., Molnar C. et al. Nitric oxide, serum homocysteine and intima-media thickness in adolescent hypertension // Journal of Hypertension. — 2018. — Vol. 36. — P. 154. DOI: 10.1097/01.hjh.0000539412.37108.72
24. Aflyatumova G.N., Nigmatullina R., Sadykova D.I. et al. Endothelin-1, nitric oxide, serotonin and high blood pressure in male adolescents // Vasc Health Risk Manag. — 2018. — Vol. 14. — P. 213-223. DOI: 10.2147/VHRM.S170317
25. ТопчиеваЛ.В. Балан О.В., Корнева В.А. и др. Содержание метаболитов оксида азота и уровень транскриптов генов NOS2 и NOS3 у пациентов с эссенциальной артериальной гипертен-зией // Известия РАН. Серия биологическая. — 2020. — № 3. — С. 259-265.
26. Genovesi S., Giussani M., Orlando A. et al. Relationship between endothelin and nitric oxide pathways in the onset and maintenance of hypertension in children and adolescents // Pediatr Nephrol. — 2022. — Vol. 37. — P. 537-545. DOI: 10.1007/s00467-021-05144-2
27. Nagassaki S., Sertorio J.T., Metzger I.F. et al. eNOS gene T-786C polymorphism modulates atorvastatin-induced increase in blood nitrite // Free Radic Biol Med. — 2006. — Vol. 41. — P. 1044-1049.
28. Nejatizadeh A., Kumar R., Stobdan T. et al. Endothelial nitric oxide synthase gene haplotypes and circulating nitric oxide levels significantly associate with risk of essential hypertension // Free Radic Biol Med. — 2008. — Vol. 44 (11). — P. 1912-1918.
29. Da Silva R.F., Trapé Á.A., Reia T.A. et al. Association of endothelial nitric oxide synthase (eNOS) gene polymorphisms and physical fitness levels with plasma nitrite concentrations and arterial blood pressure values in older adults // PLOS ONE. — 2018. — Vol. 13 (10). e0206254. DOI: 10.1371/journal.pone.0206254
30. Xie X., Shi X., Xun X. et al. Endothelial nitric oxide synthase gene single nucleotide polymorphisms and the risk of hypertension: A meta-analysis involving 63,258 subjects // Clinical and Experimental Hypertension. — 2017. — Vol. 39 (2). — P. 175-182. DOI: 10.1080/ 10641963.2016.1235177
