CC BY
29
УДК 615.038+616-097
ВЛИЯНИЕ ПЕРХЛОЗОНА И АНТИТЕЛ К ГАММА-ИНТЕРФЕРОНУ И ГЛИКОПРОТЕИНУ CD4 НА СОСТОЯНИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ БОЛЬНЫХ С ВИЧ И АССОЦИИРОВАННЫМ ТУБЕРКУЛЕЗОМ ЛЕГКИХ
А. В. Стрыгин, А. С. Кляусов, А. М. Доценко, А. О. Стрыгина, Е. И. Морковин
Волгоградский государственный медицинский университет, Волгоградский медицинский научный центр
Данная работа посвящена изучению влияния терапии новым отечественным противотуберкулезным препаратом Перхлозон и препаратом антител к гликопротеину CD4 и гамма-интерферону человека у пациентов с коинфекцией туберкулезом легких и ВИЧ на фоне антиретровирусной терапии. Обнаружено, что препарат Перхлозон в комбинации с АРВТ и препаратом антител к гликопротеину CD4 и IFN-y человека способствовал увеличению количества CD4+ клеток и росту плазменных концентраций IL-4, что может носить благоприятный прогностический характер при терапии пациентов с коинфекцией ВИЧ и туберкулезом легких.
Ключевые слова: ВИЧ, туберкулез легких, коинфекция, Перхлозон, антиретровирусная терапия, препарат антител к CD4 и гамма-интерферону человека.
DOI 10.19163/1994-9480-2017-2(62)-42-46
EFFECTS OF PERCHLOZON AND ANTIBODIES AGAINST HUMAN GAMMA-INTERFERON AND CD4 GLYCOPROTEIN ON THE IMMUNE SYSTEM OF HIV-INFECTED PATIENTS WITH ASSOCIATED PULMONARY TUBERCULOSIS
A. V. Strygin, A. S. Klyausov, A. M. Dotsenko, A. O. Strygina, E. I. Morkovin
Volgograd State Medical University, Volgograd Medical Research Center
This article presents the results of a study performed to estimate the effects of combined therapy with Perchlozon and antibodies against human CD4 and gamma-interferon in patients with HIV and pulmonary tuberculosis during the antiretroviral therapy Perchlozon and antibodies against human CD4 and gamma-interferon combined with antiretroviral therapy were found to increase the number of CD4+ cells and IL-4 concentrations in blood plasma, which could have a good prognostic value for treatment of patients with HIV and lung tuberculosis co-infection.
Key words: HIV, pulmonary tuberculosis, co-infection, Perchlozon, antiretroviral therapy antibodies against human CD4 and gamma-interferon.
При ВИЧ-инфекции ускоряется прогрессирование ряда других патологий, в первую очередь, таких социально значимых заболеваний, как вирусный гепатит и туберкулез. В случае последнего также возможно увеличение рисков реинфицирования и эндогенных рецидивов, обусловленных нарушением способности организма сохранять длительный протективный иммунный ответ из-за угасания клеточного звена иммунитета [12, 14]. ВИЧ является наиболее сильным из известных факторов риска развития туберкулеза. Успешное сдерживание туберкулезной инфекции зависит от индукции адаптивного иммунного ответа первого типа, характеризующегося производством гамма интерферона СD4+ Т-клетками для активации макрофагов и последующего уничтожения внутриклеточных бактерий [11]. Существующие экспериментальные данные демонстрируют, что туберкулез способен увеличивать скорость репликации ВИЧ [15, 16]. Таким образом, актуальной задачей является расширение возможностей своевременной терапии сочетанной патологии, вызванной коинфекцией микобактериями туберкулеза и ВИЧ.
Одним из перспективных направлений терапии может выступать терапия при помощи инновационных отечественных лекарственных средств — противоту-
беркулезного препарата Перхлозон и антител к гликоп-ротеину CD4 и гамма-интерферону человека, для препарата которых было показано специфическое стимулирующее действие на клеточное звено иммунитета и цитокиновую регуляцию при моноинфекции ВИЧ [5, 6].
ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Изучение влияния комбинированной терапии Пер-хлозоном и препаратом антител к гликопротеину CD4 и гамма-интерферону человека на состояние иммунной системы у пациентов с коинфекцией ВИЧ и туберкулезом легких.
МЕТОДИКА ИССЛЕДОВАНИЯ
В исследование было включено 57 пациентов в возрасте 18—55 лет с подтвержденным диагнозом ВИЧ и туберкулезом легких, без тяжелых поражений печени и сопутствующих заболеваний в стадии обострения. Беременные женщины, потребители инъекционных наркотиков и лица, не подписавшие информированное согласие, не включались в исследование. Работа проводилась после одобрения Региональным Независимым Этическим Комитетом (ГУ Волгоградский Медицинский Научный Центр)
(регистрационный номер ^В 00005839 ЮRG 0004900 (oHRp)): протокол № 82-2014 от 20 июня 2014 г). Клинические и лабораторные исследования выполнены в ГКУЗ «Волгоградский областной центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями» и ГБУ «Волгоградский медицинский научный центр».
В соответствии с патологией и схемой терапии, участники исследования были разделены на следующие группы:
1. ВИЧ-инфицированные пациенты с туберкулезом легких, получающие антиретровирусную терапию (АРВТ) и антитела к гамма-интерферону и гликопротеи-ну CD4 человека (18 пациентов).
2. ВИЧ-инфицированные пациенты с туберкулезом легких, получающие АРВТ и антитела к гамма-интерферону и гликопротеину CD4 человека и Перхлозон (19 пациентов).
3. ВИЧ-инфицированные пациенты с туберкулезом легких, получающие только АРВТ (20 пациентов).
Антиретровирусная терапия включала зидовудин (300 мг, 2 р./сут.), ламивудин (150 мг 2 р./сут.) и эфави-ренз (600 мг 1 р./сут.). Перхлозон назначался по 800— 1000 мг в сутки. Препарат антител к у-интерферону и гликопротеину CD4 (ПАТ) назначался 2 раза в день суб-лингвально до еды по две таблетки (0,03 мг) на прием до полного растворения.
Исследовалась динамика клинико-лабораторных показателей, включавших субпопуляционный состав лимфоцитов (CD3, CD4, CD8), концентрации цитокинов (^-2, ^-4, у-^) и вирусную нагрузку ВИЧ. Срок наблюдения за больными составлял 3 месяца.
Статистическую обработку результатов производили с помощью программ MS Excel, Satistica 8.0 и GraphPad Prism 5.0. Параметры распределения данных оценивали при помощи методов Колмогорова-Смирнова и Шапиро-Уилка. Межгрупповые различия по количественным показателям оценивали в ходе двухфак-торного дисперсионного анализа; различия по качественным признакам оценивали по методу %2.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Динамика субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у пациентов исследуемых групп представлена на рис. 1. Несмотря на отсутствие статистически значимых различий между группами в общем количестве Т-лимфоцитов (рис. 1 А), соотношение CD4+ и CD8+ клеток значительно повысилось в группах, получавших препарат антител к гамма-интерферону и CD4 человека и его комбинацию с Перхлозоном (рис. 1 Г). Увеличение данного показателя было статистически значимым как по сравнению с исходными значениями в группах, так и по сравнению с группой, получавшей только АРВТ p < 0,001); при этом изменения, произошедшие в группе, получавшей Перхлозон, оказались более выраженными и превосходили таковые в группе, получавшей ПАТ и АРВТ (p < 0,001). Произошедшее повышение иммунорегуляторного индекса, в первую очередь, связано с аналогичным ростом количества CD4+ клеток (рис. 1 Б). В группах, получавших препарат антител, также отмечалось снижение количества CD8+ клеток, статистически значимое по отношению к группе, получавшей только АРВТ (p < 0,01-0,05; рис. 1 В).
*p < 0,05; **p < 0,01; ***p < 0,001.
Рис. 1. Динамика субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови у пациентов с коинфекцией ВИЧ/туберкулез на фоне проводимой терапии: А — С03+ клетки, Б — С04+ клетки, В — С08+ клетки, Г — иммунорегуляторный индекс. Выполнен двухфакторный дисперсионный анализ (RANOVA) с пост-хок тестом Ньюмена-Кеулса; сравниваемые группы данных обозначены горизонтальными линиями
I^FOpIÜ ©(Ш^ТМЩ;
Добавление препарата антител к гамма-интерферону и CD4 сопровождалось также статистически значимым увеличением плазменных концентраций yIFN и ^-4 (р < 0,001; рис. 2 А, В), превосходящим изменения, произошедшие в группе больных, получавших исключительно АРВТ. Описанные изменения привели к статистически значимому снижению соотношения между у^ и ^-4 в группах, получавших препарат антител (р < 0,05; рис. 2 Г). Статистически значимых изменений плазменных концентраций ^-2 во всех исследуемых группах выявлено не было (рис. 2 Б), что может быть связано с угнетением пролиферации Т-лимфоцитов микобактериями туберкулеза. Статистически значимых различий между эффектами препарата антител, а также препарата антител и Перхлозона на состояние цитокиновой регуляторной сети не выявлено.
Снижение вирусной нагрузки было отмечено во всех группах больных (рис. 3 А), при этом доля больных со сни-
жением менее 50 мл-1 составила от 31,5 % до 45 % (рис. 3 Б). Достоверных межгрупповых различий выявлено не было.
У больных с коинфекцией ВИЧ/туберкулез, получавших только АРВТ, отмечалось достоверное снижение вирусной нагрузки, которое, в то же время, не сопровождалось значимыми изменениями в клеточном звене иммунитета и в соотношении цитокинов. По-видимому, это связано с влиянием туберкулеза на Т-лимфо-циты и сопряженными с этим нарушениями в цитокиновой регуляторной сети [2, 3, 4, 7]. С этих позиций добавление препарата антител к гликопротеину CD4 и IFN-y человека к схеме терапии представляется оправданным в силу иммуномодулирующих эффектов, включающих достоверное увеличение CD4+ клеток, повышение отношения CD4+ к CD8+ клеткам, а также достоверный рост плазменных концентраций IFN-y и IL-4, участвующих в противовирусном и противомикробном иммунитете [10]. При этом отмечалось достоверное снижение соотноше-
*p < 0,05; ***p < 0,001.
Рис. 2. Динамика состояния цитокиновой регуляторной сети у пациентов с коинфекцией ВИЧ/туберкулез на фоне проводимой терапии: А — плазменные концентрации yIFN, Б — концентрации IL-2, В — концентрации IL-4, Г — соотношение плазменных концентраций yIFN и IL-4. Выполнен двухфакторный дисперсионный анализ (RANOVA) с пост-хок тестом Ньюмена-Кеулса; сравниваемые группы данных обозначены горизонтальными линиями
А 61012 10000-1
25-
о о
= 20.
=
Г =' о
а
ЛРВТ ЛРВТ+ПЛТ ЛРВТ+ПЛТ+Перхломш
Более 50 копшгмл и-:н Менее 50 копий мл
Рис. 3. Динамика вирусной нагрузки у пациентов с коинфекцией ВИЧ/туберкулез: А — вирусная нагрузка ВИЧ, данные представлены в виде медиан, числами обозначены максимальные значения, превышающие 10 тыс. мл-1;
Б — соотношение пациентов по вирусной нагрузке ВИЧ
I^mpfö ©©СаГГГМЩ
ния между данными цитокинами, что говорит о развитии противовоспалительных реакций. Несмотря на отсутствие достоверных различий между группами по вирусной нагрузке ВИЧ, изменения, произошедшие в гуморальном и клеточном звене, наиболее значимым из которых является увеличение пула CD4+ клеток, носят благоприятный прогностический характер [1, 8, 9, 13]. Это позволяет рекомендовать совместное использование противотуберкулезного препарата Перхлозон и препарата антител к гликопротеину CD4 и у-интерферону человека в качестве терапевтического средства у больных с коин-фекцией ВИЧ/туберкулез легких.
ЛИТЕРАТУРА
1. Зимина В. Н. Лечение туберкулеза у больных ВИЧ-инфекцией / Зимина В. Н., Кравченко А. В., Викторова И. Б. и др. // Туберкулез и болезни легких. — 2011. — № 11. — С. 3—9.
2. Новицкий В. В. Молекулярно-генетические аспекты прогнозирования и иммунотерапии туберкулёзной инфекции / В. В. Новицкий, О. В. Воронкова, О. И. Уразова и др. // Успехи физиологических наук. — 2009. — № 40 (2). — С. 40—46.
3. Новицкий В. В. Особенности функциональной активности лимфоцитов крови у больных туберкулезом легких /
B. В. Новицкий. А. К. Стрелис, О. И. Уразова и др. // Иммунология. — 2006. — № 27 (2). — С. 76—79.
4. Сахарова И. Я. Некоторые закономерности иммунного ответа у больных туберкулезом легких с лекарственно-устойчивыми штаммами микобактерий / И. Я. Сахарова, Б. М. Ариэль, Б. Е. Кноринг и др. // Проблемы туберкулеза и болезни легких. — 2008. — № 12. — С. 22—27.
5. Стрыгин А. В. Влияние антител к гамма-интерферону на показатели клеточного звена иммунитета и цитокиновый профиль ВИЧ-инфицированных больных / А. В. Стрыгин, П. П. Несмиянов, А. О. Стрыгина // Российский аллергологи-ческий журнал. — 2012. — № 1. — С. 298—299.
6. Стрыгин А. В. Влияние препарата антител к гамма-интерферону и CD4 на показатели иммунной системы у ВИЧ-инфицированных пациентов / А. В. Стрыгин, А. О. Стрыгина, Е. И. Морковин // Вестник ВолгГМУ. — 2017. — № 1 (61). —
C. 46—49.
7. Шкарин A. B. Уровень цитокинов в плазме крови у больных активным инфильтративным туберкулезом легких / A. B. Шкарин, С. С. Белоусов, O. A. Аникина // Проблемы туберкулеза и болезней легких. — 2008. — № 8 (1) — С. 34—38.
8. Appay V. Immune activation and inflammation in HIV-1 infection: causes and consequences / Appay V., Sauce D. // J Pathol. — 2008. — Vol. 214 (2). — Р. 231—241.
9. Autran B. Positive effects of combined antiretroviral therapy on CD4± T cell homeostasis and function in advanced HIV disease / Autran B., Carcelain G., Li T. S., et al. // Science. — 1997. — Vol. 277. — P. 112—116.
10. De Andrea M. The interferon system: an overview / De Andrea M., Ravera R., Gioia D., et al. // Eur. J. Paediatr. Neurol. — 2002. — Vol. 6. Suppl A: A41—6; discussion A55—8.
11. Kaufmann S. H. How can immunology contribute to the control of tuberculosis? // Nat. Rev. Immunol. — 2001. — Vol. 1. — P. 20—30.
12. Korenromp E. L. Effects of human immuno deficiency virus infection on recurrence of tuberculosis after rifampin-based treatment: an analytical review. / Korenromp E. L., Scano F., Williams B.G., et al. // Clin. Infect. Dis. — 2003. — Vol. 37. — P. 101—112.
13. Palella F. J. Jr. Durability and predictors of success of highly active antiretroviral therapy for ambulatory HIV-infected patients / Palella F. J. Jr., Chmiel J. S., Moorman A. C., et al. // AIDS. — 2002. — Vol. 16. — P. 1617—26.
14. Small P. M. Exogenous reinfection with multidrug- resistant Mycobacterium tuberculosis in patients with advanced HIV
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Включение в схему терапии больных с коинфек-цией ВИЧ и туберкулезом легких препарата антител к гликопротеину CD4 и у-интерферону человека и противотуберкулезного препарата Перхлозон не сопровождалось значимыми изменениями количества СD3+ и CD8+ клеток, а также концентрации ^-2, однако увеличение количества CD4+ клеток и отношения CD4+ клеток к CD8+ клеткам, а также значительное повышение концентрации ^-4 может рассматриваться как благоприятный признак в терапии пациентов с коинфекцией ВИЧ и туберкулезом легких.
REFERENCES
1. Zimina V. N. Lechenie tuberkuleza u bol'nyh VICh-infekciej / Zimina V. N., Kravchenko A. V., Viktorova I. B. i dr. // Tuberkulez i bolezni legkih. — 2011. — № 11. — S. 3—9.
2. Novickij V. V. Molekuljarno-geneticheskie aspekty prognozirovanija i immunoterapii tuberkuljoznoj infekcii / V. V. Novickij, O. V. Voronkova, O. I. Urazova i dr. // Uspehi fiziologicheskih nauk. — 2009. — № 40 (2). — S. 40—46.
3. Novickij V. V. Osobennosti funkcional'noj aktivnosti limfocitov krovi u bol'nyh tuberkulezom legkih / V. V. Novickij. A. K. Strelis, O. I. Urazova i dr. // Immunologija. — 2006. — № 27 (2). — S. 76—79.
4. Saharova I. Ja. Nekotorye zakonomernosti immunnogo otveta u bol'-nyh tuberkulezom legkih s lekarstvenno-ustojchivymi shtammami miko-bakterij / I. Ja. Saharova, B. M. Arijel', B. E. Knoring i dr. // Problemy tuberkuleza i bolezni legkih. — 2008. — № 12. — S. 22—27.
5. Strygin A. V. Vlijanie antitel k gamma-interferonu na pokazateli kletochnogo zvena immuniteta i citokinovyj profil' VICh-inficirovannyh bol'nyh / A. V. Strygin, P. P. Nesmijanov, A. O. Strygina // Rossijskij allergologicheskij zhurnal. — 2012. — № 1. — S. 298—299.
6. Strygin A. V. Vlijanie preparata antitel k gamma-interferonu i CD4 na pokazateli immunnoj sistemy u VICh-inficirovannyh pacientov / A. V. Strygin, A. O. Strygina, E. I. Morkovin // Vestnik VolgGMU. — 2017. — № 1 (61). — S. 46—49.
7. Shkarin A. B. Uroven' citokinov v plazme krovi u bol'nyh aktivnym infil'trativnym tuberkulezom legkih / A. B. Shkarin, S. S. Belousov, O. A. Anikina // Problemy tuberkuleza i boleznej legkih. — 2008. — № 8 (1) — S. 34—38.
8. Appay V. Immune activation and inflammation in HIV-1 infection: causes and consequences / Appay V., Sauce D. // J Pathol. — 2008. — Vol. 214 (2). — R. 231—241.
9. Autran B. Positive effects of combined antiretroviral therapy on CD4± T cell homeostasis and function in advanced HIV disease / Autran B., Carce-lain G., Li T. S., et al. // Science. — 1997. — Vol. 277. — P. 112—116.
10. De Andrea M. The interferon system: an overview / De Andrea M., Ravera R., Gioia D., et al. // Eur. J. Paediatr. Neurol. — 2002. — Vol. 6. Suppl A: A41—6; discussion A55—8.
11. Kaufmann S. H. How can immunology contribute to the control of tuberculosis? // Nat. Rev. Immunol. — 2001. — Vol. 1. — P. 20—30.
12. Korenromp E. L. Effects of human immuno deficiency virus infection on recurrence of tuberculosis after rifampin-based treatment: an analytical re-view. / Korenromp E. L., Scano F., Williams B.G., et al. // Clin. Infect. Dis. — 2003. — Vol. 37. — P. 101—112.
13. Palella F. J. Jr. Durability and predictors of success of highly active an-tiretroviral therapy for ambulatory HIV-infected patients / Palella F. J. Jr., Chmiel J. S., Moorman A. C., et al. // AIDS. — 2002. — Vol. 16. — P. 1617—26.
14. Small P. M. Exogenous reinfection with multidrug- resistant Mycobacte-rium tuberculosis in patients with advanced HIV
©äSmpfä ©©CöFflM]^
infection. / Small P. M., Shafer R. W., Hopewell P. C., et al. // N. Engl. J. Med. — 1993. — Vol. 328. — P. 1137—1144.
15. Wallis R. S. A study of the safety, immunology, virology, and microbiology of adjunctive etanercept in HIV-1-associated tuberculosis. / Wallis R. S., Kyambadde P., Johnson J. L., et al. // AIDS. — 2004. — Vol. 18 (2). — P. 257—264.
16. Zhang Y. Mycobacterium tuberculosis enhances human immunodeficiency virus-1 replication by transcriptional activation at the long terminal repeat. / Zhang Y., Nakata K., Weiden M., Rom W. N. // J. Clin. Invest. — 1995. — Vol. 95. — P. 2324—2331.
infection. / Small P. M., Shafer R. W., Hopewell P. C., et al. // N. Engl. J. Med. — 1993. — Vol. 328. — P. 1137—1144.
15. Wallis R. S. A study of the safety, immunology, virology, and microbiology of adjunctive etanercept in HIV-1-associated tuberculosis. / Wallis R. S., Kyambadde P., Johnson J. L., et al. // AIDS. — 2004. — Vol. 18 (2). — P. 257—264.
16. Zhang Y. Mycobacterium tuberculosis enhances human immunodeficiency virus-1 replication by transcriptional activation at the long terminal repeat. / Zhang Y., Nakata K., Weiden M., Rom W. N. // J. Clin. Invest. — 1995. — Vol. 95. — P. 2324—2331.
Контактная информация
Стрыгин Андрей Валерьевич — к. м. н., зав. кафедрой фундаментальной медицины и биологии, Волгоградский государственный медицинский университет, e-mail: drumsav@mail.ru
