CC BY
20
ровых крыс; препятствует снижению исследовательской активности у здоровых; отсроченно и временно снижает эмоциональную активность у здоровых крыс и повышает эмоциональную активность у ишемизиро-ванных; способствует удержанию и восстановлению условных рефлексов в условиях ишемии головного мозга; сохранению и восстановлению координации движений в условиях ишемии мозга; более быстрому принятию полезного решения для избавления от стрес-сорной ситуации у ишемизированных крыс. Учитывая динамику изменения эмоционального фона у здоровых крыс, можно предположить, что введение кислоты фе-руловой уменьшает эмоциональное напряжение при воздействии стрессорных факторов, поэтому уменьшение полезного времени происходит к 8-му дню наблюдений, а во время введения феруловой кислоты этот показатель достоверно не изменялся. В сравнении с кавинтоном влияние феруловой кислоты на двигательную и эмоциональную активность ишемизированных крыс не имеет отличий и превосходит по показателям методов УРПИ, «вращающегося стрежня» и «экстра-поляционного избавления».
Изменение показателя в процентах 500
400
300
200
-100
-200
- 1-я группа (биологический контроль) ■
- 2-я группа (контрольная) ■
- 3-я группа (опытная)
Дни наблюдений
- - 4-я группа (ФК без патологии)
- - 5-я группа (кавингон)
Рис. 4. Изменение времени в тесте «экстраполяционное избавление»
Литература
1. Благодырь М.Н. Влияние некоторых амидов, а-ацила- 2. Гацура В.В., Саратиков А.С. Фармакологические мидов коричных кислот на мозговое крообращение: Автореф. агенты в экспериментальной медицине и биологии. Томск, дис. ... канд. фармац. наук. Пятигорск, 1992. 1977.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
9 июня 2006 г.
УДК 615.31:547.587.5].015:616.36-002-099-092.9
ВЛИЯНИЕ НОВЫХ ПРОИЗВОДНЫХ КОРИЧНОЙ КИСЛОТЫ НА СОДЕРЖАНИЕ БЕЛКОВЫХ ФРАКЦИЙ В СЫВОРОТКЕ КРОВИ КРЫС С ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫМ ТОКСИЧЕСКИМ ГЕПАТИТОМ
© 2006 г. Л.Е. Назарова, Ю.А. Огурцов
On the model of tetrachlormethanic toxic hepatitis there was carried out the estimation of hepatoprotective action of substances: 3-phenyl (4-hydroxy-3,5-ditretbutyl) propenic acid (substance 1) and 2-(4-hydroxy-3-methoxycinnamoilamido) propenic acid (substance 2) on maintenance of whole protein and protein fractions in blood serum. The preparations of comparison are silibor and dibunol. Dibunol, silibor, substance 1 and substance 2 promoted the normalization of protein spectrum, what's more the last three did it to the fullest extent. The most active substance 2, for sure, surpassed silibor in action. Substance 1 acted on the level of silibor.
Для диагностики заболеваний печени используются методы определения общего белка и белковых фракций в сыворотке крови [1]. Эти показатели отражают про-теинообразующую функцию печени, которая в значительной степени страдает при токсическом и вирусном гепатите, циррозе и других патологических состояниях, связанных с дистрофическими и некротическими изменениями в ее паренхиме. По содержанию общего белка и его изменениям в сыворотке крови, особенно его фракций, судят о функциональном состоянии печени, об эффективности проводимого лечения (И.Д. Мансурова и др., 1971). В результате скрининговых исследований перспективными гепатопротекторами были выбраны новые синтетические производные коричной кислоты, обладающие выраженными антиоксидантными свойствами: 3-фенил (4-гидрокси-3,5-дитретбутил) пропено-вая кислота (вещество 1) и 2-(4-гидрокси-3-метокси-
циннамоиламидо) пропеновая кислота (вещество 2) [2]. Препаратами сравнения были выбраны силибор (аналог по действию) и дибунол (аналог по структуре).
Острая токсичность была установлена ранее. ЬБ50 для вещества 1 составила 0,850 г/кг, для вещества 2 -1,930 г/кг, что по классификации токсичности веществ (Сидоров, 1973) позволяет их отнести к малотоксичным.
Экспериментальный токсический гепатит у крыс создавался путём внутрижелудочного (через зонд) введения тетрахлорметана (СС14) в дозе 2,5 мл/кг. Опыты проведены на 80 белых крысах-самцах линии Вистар. Препараты сравнения и исследуемые вещества вводились через зонд в желудок в дозе 30 мг/кг 1 раз в день на протяжении 4 дней за 1 ч до введения СС14. Кровь для исследования в объеме 1,0 мл бралась из хвостовой вены на 7, 14 и 21-й дни от начала отравления. Сыворотку получали методом центрифугирования.
Содержание общего белка определяли рефрактометрическим методом. Результаты исследования выражались в г % и приведены в табл. 1.
Из табл. 1 видно, что отравление животных СС14 приводит к достоверному снижению общего белка в сыворотке крови на 14-й день по отношению к интактной группе (6,81±0,14 и 7,43±0,25 г % соответственно).
В группах крыс, получавших силибор, вещества 1 и 2 во все дни исследования, существенных отклонений от нормы не наблюдалось. В этих группах по отношению к контролю проявилась тенденция к увеличению содержания общего белка в сыворотке крови, однако различия статистически недостоверны.
Определение содержания белковых фракций в сыворотке крови крыс исследовали методом электрофореза в агаровом геле. Оценка содержания окрашенных амидошварцем белковых фракций производилась с помощью элюирования с последующим колориметрированием на спектрофотометре СФ-26. Соотношение между отдельными фракциями белков определяли после измерения плотности элюатов из отдельных участков окрашенной электрофореграм-мы. Анализ спектра сыворотки крови крыс производился на 7, 14 и 21-й дни от начала отравления их СС14. Результаты исследования приведены в табл. 2.
Таблица 1
Содержание общего белка в сыворотке крови крыс с экспериментальным токсическим гепатитом
№ Исследуемое вещество Сроки исследования, дни Общий белок, г %
М± м % к контр. Р
1 Интактные 7,43±0,25 100,0
2 СС14 (контроль) 7 14 21 7,14±0,16 6,81±0,14 7,09±0,31 96,1 91,7 95,4 Рх>0,25 Рх<0,05 Рх>0,25
3 СС14 + дибунол 7 14 21 6,94±0,21 7,08±0,15 7,31±0,23 93,4 95,2 98,4 Р > 0,25 Р > 0,25 Р > 0,5
4 СС 14 + силибор 7 14 21 7,21±0,09 7,28±0,13 7,48±0,19 97,0 98,0 100,7 Р > 0,5 Р <0,05 Р > 0,25
5 СС14 + вещ. 1 7 14 21 7,21±0,13 7,20±0,30 7,37±0,17 97,0 96,9 99,2 Р > 0,5 Р > 0,25 Р > 0,25
6 СС14 + вещ. 2 7 14 21 7,47±0,25 7,26±0,23 7,38±0,16 100,5 97,7 99,3 Р > 0,25 Р > 0,1 Р > 0,2
Примечание. Р - по отношению к контролю; Рх - по отношению к интактным.
Таблица 2
Влияние исследуемых веществ на содержание белковых фракций сыворотки крови крыс с экспериментальным токсическим гепатитом, %
Номера экспериментальных Исследуемые вещества
Дни Альбумины Глобулины
групп а1 а2 ß Y
1. Интактные 49,1±1,3 13,6±1,1 10,4±0,9 18,6±1,2 8,3±1,4
7 39,9±1,0, 14,1±1,2, 10,8±1,7, 24,7±1,4, 10,5±0,9
Р<0,001 Р>0,5 Р>0,5 Р<0,01 Р>0,1
2. СС14 (контроль) 14 40,7±1,4, Р<0,01 13,0±1,3, Р>0,5 10,2±0,6, Р>0,5 19,7±1,2, Р>0,5 16,4±1,1 Р<0,001
21 46,1±1,5, 15,2±2,1, 10,1±1,0, 18,0±2,4, 10,6±0,8
Р>0,1 Р>0,5 Р>0,5 Р>0,5 Р>0,1
7 41,2±0,9 13,9±1,4 12,3±1,0 22,5±2,8 10,1±1,0
Р>0,25 Р>0,5 Р>0,25 Р>0,25 Р>0,5
3. CC14 + дибунол 14 40,8±1,4 Р>0,5 11,6±1,2 Р>0,25 12,1±1,6 Р>0,25 22,1±1,8 Р>0,25 13,4±1,6 Р>0,1
21 46,2±1,7 11,1±0,9 11,7±2,5 19,6±1,8 11,4±1,4
Р>0,5 Р<0,05 Р>0,5 Р>0,5 Р>0,5
7 44,0±1,1 13,3±1,2 11,0±0,9 22,0±1,9 9,1±0,6
Р<0,02 Р>0,5 Р>0,5 Р>0,25 Р>0,5
4. CC14 + силибор 14 45,2±1,2 Р<0,05 14,1±0,8 Р>0,25 9,5±1,1 Р>0,5 21,4±1,1 Р>0,25 10,3±1,2 Р<0,002
21 47,6±1,5 13,2±0,9 11,2±1,0 19,1±1,4 8,9±1,4
Р>0, Р>0,25 Р>0,5 Р>0,5 Р>0,25
Из табл. 2 видно, что под влиянием СС14 в сыворотке крови крыс развивалась гипоальбуминемия с максимумом на 7-й день и последующей тенденцией к нормализации на 14 и 21-й дни. Существенных изменений в содержании фракций а2-глобулинов под влиянием СС14 во все периоды исследований не наблюдалось. Более значительные отклонения от нормы в группе контрольных животных наблюдались во фракциях в- и у-гло-булинов сыворотки крови. Уровень в-глобулинов значительно возрастал в начальный период токсического гепатита. Нарастание уровня у-глобулинов отмечалось в более поздние сроки, чем в-глобулинов. К 21-му дню исследований у-глобулинемия снижалась, но исходных значений не достигала. В опытных группах животных, получавших дибунол, силибор, вещества 1 и 2, наблюдались аналогичные отклонения в содержании белковых фракций, однако эти изменения были гораздо менее выражены, чем в группе нелеченых крыс.
Расчет альбумин/глобулинового (А/Г) коэффициента показал, что дисбаланс белков наиболее сильно проявлялся в группе нелеченых крыс. А/Г коэффициент в этой группе составлял соответственно дням исследования 0,664; 0,686 и 0,855, что значительно ниже, чем у интактных животных (0,965). Наиболее близок к норме был А/Г коэффициент в группе животных, получавших вещество 2, где он составлял со дня исследования 0,926; 0,897; 1,024. В группах животных, получавших силибор и вещество 1, А/Г коэффициент также превышал контроль. В группе, леченой дибунолом, лишь на 7-й день проявлялась тенденция к улучшению этого показателя (А/Г = 0,701), в остальные дни А/Г коэффициент не отличался от контроля.
Пятигорская государственная фармацевтическая академия
Таким образом, в результате проведенных исследований по содержанию общего белка и его фракций в сыворотке крови крыс с экспериментальным токсическим гепатитом и влиянию исследуемых веществ на изменения различных показателей установлено следующее. У крыс под действием СС14 наблюдалось умеренное уменьшение содержания общего белка в сыворотке крови с максимальным достоверным снижением к 14-му дню на 8,3 %. Под влиянием силибора, веществ 1 и 2 проявлялась тенденция к его нормализации.
Более значительные отклонения от нормы наблюдались в содержании белковых фракций сыворотки крови крыс, отравленных СС14, у которых, с одной стороны, резко снижалось количество альбуминов, с другой -возрастала фракция глобулинов, особенно в- и у-глобу-линов. Дибунол, силибор, вещества 1 и 2 способствовали нормализации белкового спектра, причем последние три в значительной мере. Наиболее активное вещество 2 достоверно превосходило по действию силибор. Вещество 1 действовало на уровне силибора.
Литература
1. Хазанов А.И. Функциональная диагностика заболеваний печени. М., 1988.
2. Огурцов Ю.А. и др. Анализ зависимости антиоксидан-тных свойств производных 3-фенилпропеновой (коричной) кислоты от характера заместителей в её ароматическом ядре и алифатической цепи // Пятигорск, 2002. Деп. в ВИНИТИ РАН 19.02.02 № 334 - В 2002. Анн.: Библ. Указ.: Деп. науч. работы (Естественные и точные науки, техника). 2002. № 4 (362). С. 6-7.
26 мая 2006 г.
УДК 615.31:547.52].015:616.831-005.98-092.9
ВЛИЯНИЕ КИСЛОТЫ ФЕРУЛОВОЙ НА РАЗВИТИЕ ИШЕМИЧЕСКОГО ОТЕКА, АКТИВНОСТЬ КАТАЛАЗЫ И СОДЕРЖАНИЕ МАЛОНОВОГО ДИАЛЬДЕГИДА
В МОЗГЕ КРЫС
© 2006 г. Л.Е. Назарова, И.Н. Дьякова
The introduction of ferulic acid reduces the size of brain edema, increases catalase activity and reduces the maintenance of malonic dialdehyde in brain homogenate with ischemized rats.
Ишемия головного мозга с последующей гипоксией и гиперкапнией сопровождаются развитием отека мозга. Для моделирования ишемии использовали метод создания гравитационных перегрузок на центрифуге с радиусом 1 м, 110 об./мин в течение 12 мин в кранио-каудальном направлении.
Для исследования использовали 46 крыс-самцов одного возраста массой 180-200 г. Крысы были разделены на группы: 1-я - контроль 1. Животным этой группы вводили 1 мл физиологического раствора за 1 ч до создания ишемии; на следующий день - утром и вечером; 2-я - контроль 2. Животным этой группы вводили физиологический раствор в той же дозе через 1 ч после создания ишемии, на следующий день утром и вечером; 3-я - получала раствор феруловой кислоты в дозе 30 мг/кг в 1 мл физиологического раствора за
1 ч до создания ишемии и на следующий день утром и вечером; 4-я - получала раствор феруловой кислоты в дозе 30 мг/кг в 1 мл физиологического раствора через 1 ч после создания ишемии и на следующий день утром и вечером; 5-я - получала препарат сравнения - раствор кавинтона в дозе 3,2 мг/кг за 1 ч до создания ишемии и на следующий день утром и вечером; 6-я - получала препарат сравнения - раствор циннаризина в дозе 5,6 мг/кг за 1 ч до создания ишемии и на следующий день утром и вечером; 7-я - биологический контроль. Животные этой группы получали физиологический раствор в те же сроки, но не подвергались ишемии. Все вещества вводились интраперитонеально.
Через 36 ч после ишемии животных декапитирова-ли. Вскрывали черепную коробку, извлекали головной мозг и определяли величину отека. Далее исследовали
