CC BY
23
3. Брехман И.И., Кириллов О.И. //Элеутерококк и другие адаптогены из дальневосточных растений.— Владивосток, 1966.— Вып. 7.— С. 9-12.
4. Бройтигам В., Кристиан П., Рад М. Психосоматическая медицина: Кратк. учебник / Пер с нем. Г.А.Обухова, А.В.Брусыка; Предисл. В.Г.Остраглазова.— М.: ГЭОТАР МЕДИЦИНА, 1999.—376 с.
5. Гольдберг Е.Д. Справочник по гематологии с атласом микрофотограмм.— Томск: Изд-во Томского ун-та, 1989.— 468 с.
6. Дардымов И.В. //Материалы к изучению женьшеня и других лекарственных растений Дальнего Востока.— Владивосток: Приморское книжное изд-во, 1963.— Вып. 5.— С. 245-248.
7. Дардымов И.В., Хасина Э.И. Элеутерококк: Тайны "Панацеи".— СПб.: Наука, 1993.— 125с.
8. Зимакова И.Е., Камбург Р.А., Киршин С.В. //Фармакология и токсикология.— 1980.— №4.— С. 368-370.
9. Ковалев Г.В., Спасов С.С.,Богачёв Н.А. //Новые данные об элеутерококке и других адаптогенах.— Владивосток: ДВНЦ АН СССР, 1981.— С. 51-56.
10. Крендаль Ф.П., Левина Л.В., Чубарев В.Н.и др. // Новые данные об элеутерококке и других адаптогенах.— Владивосток: ДВНЦ АН СССР, 1981.— С. 123-130.
11. Меерсон Ф.З. Патогенез и предупреждение стрессорных и ишемических повреждений сердца.— М.:Медицина, 1984.— 272 с.
12. Меерсон Ф.З. //Патолог, физиол. и эксперим. терапия.— 1986.— № 3.— С.9-19.
13. Методические рекомендации по экспериментальному изучению препаратов, предлагаемых для клинического изучения в качестве антигипоксических средств /Под ред. проф. Л.Д.Лукьяновой.— М.,1990.- 23 с.
14. Новиков В.Е., Катунина Н.П. // Вестник Смоленской медицинской академии.— 2002.—№3.— С. 9-10.
15. Пастушенков Л.В. Фармакологическая коррекция гипоксических состояний.— М.: ВИНИТИ, 1989.— С.188-224.
16. Переверзев В.А, Переверзева Е.В., Кубарко А.И., Головко А.И. Вещество, обладающее гипотермическим действием. Описание к А.с. на изобретение № 1827257 А1 СССР, МКИ5 А 61 К 35/78.— 4 с.
17. Рудаков В.Ф. //Высшие грибы и их физиологически активные соединения.— Л.: Наука, 1973.— С. 52-53.
18. Рудаков В.Ф.//Высшие грибы и их физиологически активные соединения.— Л.: Наука, 1973.- С. 131-133.
19. Саратиков А.С. Золотой корень.— Томск: Изд-во Том-го ун-та, 1974.— 154с.
20. Фурдуй Ф.И. Физиологические механизмы стресса и адаптации при остром действии стресс-факторов.— Кишинев: Штиинца, 1986.— 238с.
21. Хохлов Г.С. //Стимуляторы центральной нервной системы. В 2 т.— Томск, 1968.— Т. 2.— С. 123-125.
22. 22 Якимов П. А. Андреев С.М., Алексеева Е.В. //Комплексное изучение физиологически активных веществ низших растений.— М.-Л., 1961.— С. 121-127.
23. Pereverzeva E.V., Pereverzev V.A. //"Basic and Applied Thermophysiology" Edited by Prof. Dr. V.N.Gourine, Prof. Dr. V.A.Kulchitsky (Minsk, Belarus), Prof. Dr. B.Tzschentke (Berlin, Germany).— Minsk: Polibig, 2000.— P. 232-235.
24. Sapolsky R.M., Donelly Th.M. //Endocrinology.— 1985.— № 2.— P.662-666.
25. Selye H. //Endocrinology.— 1937. — Vol. 22.— P. 169-188.
26. Selye H. The story of the adaptation syndrome.— Montreal: Acta Med. Publ. 1952.— 225 p.
27. Selye H. The stress of life.— N.-Y.,Toronto,London: Mc-Graw-Hill Book Co. Inc., 1956.— 196 p.
28. Selye H. Stress without distress.— New York: Hodder, 1974. — 171 p.
29. Selye H. //Amer.J.Proctol Gastroenterol. and Colon and Rectal Surg.— 1979.— № 4.—P. 18-20.
30. Sklar L.S.,Anisman H. //Psychol.Bull.—1981.—№3.—P.369-406.
УДК 533.9:612.112.94
ВЛИЯНИЕ НИЗКОТЕМПЕРАТУРНОЙ ГЕЛИЕВОЙ ПЛАЗМЫ НА БИОЛОГИЧЕСКИЕ ОБЪЕКТЫ Н. Е. Щебникова, С. В.Кирюшенкова, Д. Ю. Гришанов, А. С. Соловьёв, Е. А. Федосов
Смоленская государственная медицинская академия
Гелиевая плазма, полученная при силе тока 30 А, напряжении 20 В и расходе газа 2 л/мин, в зависимости от времени воздействия оказывает бактерицидное действие, а также влияет на функциональную активность лимфоцитов.
В последние годы широко исследуется влияние плазменных потоков на биологические объекты [4] Настоящая работа посвящена изучению бактерицидного действия низкотемпературной гелиевой плазмы, а также исследованию воздействия плазменного потока на функциональную активность лимфоцитов. В опытах использовали плазменную установку СУПР-М и физиотерапевтический плазмотрон. Гелиевую плазму получали при силе тока 30А, напряжении 20В и расходе газа 2 л/мин. Воздействие на бактерии и лимфоциты осуществляли в течение 15, 30 и 90 секунд. В шести сериях по три опыта в каждой было изучено влияние плазменного потока гелия на стандартные взвеси S. aureus (209 p), S. pyogenes (АТСС19615) и K. pneumoniae (АТСС43062). Для получения суспензии в 5 ЕД по оптическому стандарту мутности суточные агаровые культуры эмульгировали в физиологическом растворе. Затем готовили десятикратные разведения взвеси бактерий до получения концентрации 1x10 микробных тел в 1 мл. Для контроля по 0,1 мл каждого вида бактерий полученной концентрации засевали на чашки с питательной средой. Для ста-
филококков был использован желточно-солевой агар (ЖСА), для стрептококков - кровяной агар и для клебсиелл - среда Эндо. После воздействия плазменным потоком гелия на микроорганизмы также проводили посевы по 0,1 мл взвеси на соответствующие питательные среды. Все посевы бактерий инкубировали в термостате при температуре 37°С в течение суток. После инкубации производили подсчёт выросших колониеобразующих единиц (КОЕ) в опытных и контрольных чашках. Функциональную активность клеток селезёнки (КС) мышей-гибридов (СВАхС57ВС/6) после воздействия гелиевой плазмы оценивали по уровню их спонтанной и индуцированной пролиферации в ответ на стимуляцию митогенами фитогемагглютинином (ФГА) и конканавалином А (Кон-А) в реакции бласттрансформации [3], аллоантигенами в смешанной культуре лимфоцитов [1,5], а также на модели регионарной реакции "трансплантат против хозяина " (РТПХ) в подколенных лимфатических узлах [2]. Контролем явились КС, находившиеся в тех же условиях, но без воздействия гелиевой плазмы. Регистрацию клеточного ответа в реакции бласттрансформации и смешанной культуре лимфоцитов осуществляли по включению 3Н-тимидина в ДНК пролифери-рующих клеток. Силу РТ ПХ в подколенных лимфатических узлах оценивали по индексу гипертрофии (ИГ). Результаты бактериологического исследования представлены в таблице 1.
Таблица 1. Влияние плазменного потока гелия на жизнеспособность бактерий in vitro
Вид бактерий Экспозиция
Контроль 15 сек 30 сек 90 сек
М± м
S.aureus 1,32+0,83 Нет роста Нет роста Нет роста
S.pyogenes 1,60±0,44 1,57+0,61 1,50+0,41* 1,44+0,76*
K.pneumoniae 1,58+0,62 1,57+0,64 1,56+0,65 1,51+0,62*
Примечание: М±м - десятичный логарифм количества КОЕ/мл, *р<0,05 по сравнению с контролем.
Как видно из таблицы, плазменный поток гелия в заданном режиме оказал выраженное бактерицидное действие на стандартную культуру 8.аигеш. Уже после воздействия на стафилококки плазменной струёй гелия в течение 15 секунд роста микроорганизмов на чашках с ЖСА не наблюдалось. Такие же результаты были получены при экспозициях в 30 и 90 секунд. При оценке результатов влияния плазменного потока гелия на S.pyogenes достоверные различия по сравнению с контролем были получены при экспозиции в 30 и 90 секунд. При обработке плазменным потоком гелия стандартных штаммов К.рпеитотае бактерицидное действие получено при экспозиции 90 секунд. При этом количество КОЕ/мл уменьшилось с ЕД 1,58±0,62 в контроле до ЕД 1,51±0,62 в опыте (р<0,05). Облучение культуры лимфоцитов гелиевой плазмой в течение 15 секунд не влияло на спонтанную и митоген-индуцированную пролиферацию, тогда как пролиферативный ответ при стимуляции аллоантигенами усиливался по сравнению с контролем (таблица 2). Экспозиция 30 секунд повышала спонтанную и индуцированную пролиферацию лимфоцитов в ответ на стимуляцию ФГА, Кон-А и аллоантигенами. Лимфоциты, подвергшиеся воздействию гелиевой плазмы в течение 30 секунд, индуцировали более сильную РТПХ в подколенных лимфатических узлах по сравнению с контролем. В подопытной группе ИГ составлял 4,21±0,4, в контрольной -2,87±0,3 (р<0,05). Облучение КС гелиевой плазмой в течение 90 секунд подавляло спонтанную пролиферацию, но не влияло на их пролиферативный ответ при стимуляции митогенами и аллоан-тигенами (таблица 2).
Таблица 2. Пролиферативный ответ клеток селезёнки мышей-гибридов (СВАхС57ВС/6)¥1 при действии гелиевой плазмы
Пролиферативный Контроль Время воздействия гелиевой плазмы, сек
ответ 15 30 90
Без стимуляции 1388,8+ 21,7 1224,2+ 128,1 3617,5+ 323,4* 892,2+ 32,0*
ФГА 7590,2+ 516,8 8356,3+ 422,1 17019,2+ 1182,2* 7235,3+ 144,6
Кон-А 12089,8+ 636,4 11535,6+ 127,8 18793,5+ 1292,6* 11922,4+ 524,1
Аллоантигены 2207,1+ 163,5 3456,2+ 48,9* 4690,4+ 178,3* 2375,2+ 134,1
Примечание: Данные пролиферативной активности представлены по включению Н-тимидина лимфоцитами, в мл/мин. *р<0,05 по сравнению с контролем.
Таким образом, полученные данные свидетельствуют о том, что гелиевая плазма данного режима в зависимости от времени воздействия оказывает различный эффект на биологические объекты.
Литература
1. Брондз Б.Д., Хачикян Г.И., Дризлих Г.И., Андреев А.В. Торможение иммунными лимфоцитами активации синтеза ДНК в смешанных культурах нормальных лимфоцитов. //Бюлл. эксперим. биол. мед.- 1977 -Т.83 - № 6 - С. 723 - 725 .
2. Фёдоров Г.Н. Модификация метода введения родительских лимфоидных клетлк при индукции локальной реакции "трансплантат против хозяина". //Бюлл. эксперим. биол. Мед.- 1979 - Т.88 - №8 - С.238-240.
3. Хоробрих В.В., Пронин Л.В., Коркин А.Ф., Санин А.В. Методы постановки реакции бласттрансформации в микромодификации. //Иммунология - 1983 - №3 - С.76-79
4. Щебникова Н.Е., Соловьёв А.С. Влияние аргоновой плазмы на функциональную активность лимфоцитов. //Вестник Смол. мед. акад. - 1998 - С. 153-154
5. Glick J.L, Lockwood C., Williams J. et al. Human serum as economical substitute for fetal bovine serum in lymphoid cell cultures. //Transplantation.- 1974,- V. 18- №1- P.86-87.
