CC BY
20
Литература
1. Михайлова Р.И., Фаращук Н.Ф., Теленкова О.Г., Панченко Е.О. Влияние рассеянного солнечного света на структуру воды // Сборник докладов 7-ого Международного конгресса «Вода: экология и технология» Экватэк- 2006. - М., 2006. С.1025-1026.
2. Савостикова О.Н., Сковронский А.Ю., Фаращук Н.Ф. и др. Влияние различных физических воздействий на структуру воды // Сборник докладов 7-ого Международного конгресса «Вода: экология и технология» Экватэк- 2006. - М., 2006. С.1024-1025.
3. Фаращук Н.Ф. Метод количественного определения структурных фракций воды // Сборник докладов 6-ого Международного конгресса «Вода: экология и технология» Экватэк- 2004. - М., 2004. С.988.
4. Kano Fumiaki, Kaminoh Yoshiro, Kamaya Hiroshi, Ueda Issaka // Repts. Progr. Polym. Phys. Jap. - 1989. -Vol. 32. - P. 663-666.
УДК 612.014:546.291+577.15
ВЛИЯНИЕ НИЗКОТЕМПЕРАТУРНОЙ ГЕЛИЕВОЙ ПЛАЗМЫ НА АКТИВНОСТЬ КИСЛОЙ
ФОСФАТАЗЫ ПЕРИТОНЕАЛЬНЫХ МАКРОФАГОВ
Н. П. Делюкина, О. Д. Просцевич, Д. Ю. Гришанов, А. С. Соловьев
Смоленская государственная медицинская академия
Поток низкотемпературной плазмы используют при лечении поверхностных гнойных и ожоговых ран, рожистого воспаления, микробных экзем, воспаления брюшины [4]. Положительный эффект плазмы связывают с её бактериостатическим и бактерицидным действием, усилением репаративных процессов [3]. Однако до настоящего времени не раскрыты механизмы воздействия плазмы на воспалительные и восстановительные процессы в тканях организма.
Важную роль в противомикробной защите, в развитии воспалительных и восстановительных процессов в организме играют клетки системы мононуклеарных фагоцитов, в частности макрофаги. Маркерным ферментом макрофагов, активность которого отражает функциональное состояние фагоцитов, указывает на способность макрофагов к разрушению захваченных частиц, является кислая фосфатаза [5]. В то же время в литературе отсутствуют сведения о влиянии плазменных потоков на активность кислой фосфатазы перитонеальных макрофагов.
Целью исследования явилось изучение активности внутриклеточной кислой фосфатазы перитоне-альных макрофагов в условиях воздействия на них низкотемпературной гелиевой плазмы.
Методика. В опытах использовали мышей - гибридов первого поколения (СВАЧ С57В1/6)Р1. Резидентные макрофаги получали из перитонеального эксудата брюшной полости. 1Ч106 макрофагов вносили в пластиковые чашки Петри диаметром 5 см в объеме 1 мл среды 199. Облучение клеток проводили гелиевой плазмой при силе тока 30 А, напряжении 20 В с расстояния 20 см от сопла плазмотрона. Расход гелия составлял 2 л/мин. Макрофаги подвергали воздействию плазменного потока в течение 15, 30, 60 и 180 секунд. Контролем служили перитонеальные макрофаги, находящиеся в тех же условиях, но без воздействия гелиевой плазмы.
Определение активности кислой фосфатазы проводили в гомогенате перитонеальных макрофагов. В качестве субстрата использовали Р-глицерофосфат [2]. Расчет освобождающегося неорганического фосфора проводили по калибровочной кривой, построенной по стандартному раствору КН2РО4. Активность кислой фосфатазы выражали в мкг неорганического фосфора в пересчете на мг белка. Содержание белка в гомогенате определяли по Лоури [6]. Для статистической обработки полученных результатов применяли параметрический метод определения достоверности с вычислением 1>критерия Стьюдента.
Таблица. Активность кислой фосфатазы перитонеальных макрофагов при облучении клеток гелиевой плазмой
Серии опытов
Показатель Контроль Экспозиция облучения клеток
15 секунд 30 секунд 60 секунд 180 секунд
Активность кислой фосфатазы 70,21+5,60 (9) 71,64+3,48 (9) 93,92+2,51* (9) 51,13+1,75* (9) 41,30+1,02* (9)
Примечание: * - различия показателей достоверны по сравнению с контролем.
В скобках - число наблюдений.
Из таблицы следует, что воздействие гелиевой плазмы на макрофаги в течение 15 секунд не приводит к изменению активности кислой фосфатазы фагоцитов. Облучение клеток в течение 30 секунд сопровождалось повышением активности внутриклеточной кислой фосфатазы макрофагов, что может свидетельствовать об активации фагоцитов и повышении их способности разрушать захваченные частицы.
Воздействие гелиевой плазмы на клетки в течение 60 секунд приводит к снижению активности фермента. Снижение активности кислой фосфатазы фагоцитов при данной экспозиции коррелирует с ранее полученными нами данными о подавлении внутриклеточного переваривания бактерий макрофагами в этих условиях [1]. Увеличение времени облучения макрофагов гелиевой плазмой до 180 секунд сопровождается ещё большим подавлением активности кислой фосфатазы, что может свидетельствовать о нарастании депрессии функциональной активности фагоцитов по мере увеличения воздействия плазменного потока на клетки.
Таким образом, действие гелиевой плазмы на перитонеальные макрофаги сопровождается изменением активности внутриклеточной кислой фосфатазы, степень и направленность которого зависит от экспозиции облучения клеток. Полученные результаты необходимо учитывать при использовании гелиевой плазмы в клинической практике.
Литература
1. Делюкина Н.П., Просцевич О.Д., Соловьев А.С. Воздействие низкотемпературной гелиевой плазмы на функции перитонеальных макрофагов // Вестник Смоленской медицинской академии. - 2006. - №6. - С. 23-25.
2. Зайцева Л.Г., Васильева Е.И., Туманян М.А. Комплексное исследование функциональной активности фагоцитирующих клеток: Метод. рекомендации. - М., 1989. - 15 с.
3. Марахонич Л.А., Архипов В.В., Слостин С.М. Морфологические особенности репаративных процессов в огнестрельных ранах, обработанных плазменным потоком // Плазма в медицине и биологии. Новые технологии в хирургии: Тез. докл. науч. конф. Смоленск. - 1997. - С. 27 - 28.
4. Новиков Ю.Г., Геращенко И.И., Жорова Е.М. Морфологический анализ влияния плазменного гелиевого облучения на асептические и гнойные раны // Плазма в медицине и биологии. Новые технологии в хирургии: Тез. докл. науч. конф. Смоленск. - 1997. - С. 30 - 31.
5. Фрейдлин И.С. Система мононуклеарных фагоцитов. - М., 1984. - 272 с.
6. Lowry O.H., Rosebrough N., J. Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement wth the Folin phenol reagent // J. Biol. Chem. - 1951. - Vol. 193. - P. 265.
