CC BY
103
© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2004
ВЛИЯНИЕ N-АЦЕТИЛ-Ь-ЦИСТЕИНА НА АУТОРЕГУЛЯЦИЮ КОРОНАРНОГО ПОТОКА ПРИ СТРЕССЕ РАЗЛИЧНОЙ ПРОДОЛЖИТЕЛЬНОСТИ
ДОРОШЕНКО А.С.*, СОЛОДКОВ А.П.*, ШЕБЕКО В.И.**
Витебский государственный медицинский университет, кафедра нормальной физиологии*, кафедра патологической физиологии**,
Центральная научно-исследовательская лаборатория
Резюме. Целью настоящего исследования было изучить влияние N-ацетил-С-цистеина на выраженность постстрессорных нарушений ауторегуляции коронарного потока, расширительного резерва и сократительной функции миокарда крыс, перенесших иммобилизационный стресс различной продолжительности (0,5 и 6 часов). Эксперименты выполнили на 148 препаратах изолированного по Лангендорфу сердца крыс-самок линии Вистар. С целью коррекции редокс-состояния при стрессе использовали низкомолекулярный тиолсодержащий антиоксидант N-ацетил-Ь-цистеин. Было показано, что при 0,5-ти часовом иммобилизационном стрессе возникает выраженное снижение показателей реактивной гиперемии, что указывает на возможность нарушения функциональных свойств эндотелия (“оглушенность” эндотелиоцитов) даже после вполне кратковременного воздействия стрессора. При 6-ти часовом иммобилизационном стрессе существенно нарушается редокс-состояние клеток миокарда (снижение белковых тиоловых групп в миокарде, падение тиол/ дисульфидного соотношения в эритроцитах). Изменение редокс-состояния кардиомиоцитов и клеток коронарных сосудов, вероятно, является важнейшей причиной нарушения тонуса коронарных сосудов и сократительной функции миокарда при 6-ти часовом иммобилизационном стрессе. Предварительное введение №ацетил^-цистеина в контроле не нарушало сократительной активности миокарда, увеличивая интенсивность его перфузии. Предварительное внутрибрюшинное введение N-ацетил-Ь-цистеина крысам, перенесшим 0,5-ти часовой иммобилизационный стресс, сопровождалось восстановлением показателей реактивной гиперемии и увеличением интенсивности перфузии миокарда. Предварительное введение N-ацетил-Ь-цистеина крысам, перенесшим 6-ти часовую иммобилизацию, полностью ограничивало постстрессорные изменения коронарного кровообращения и предупреждало вызываемое иммобилизацией снижение сократительной функции миокарда. Таким образом, можно заключить, что N-ацетил-Ь-цистеин обладает свойствами, позволяющими рассматривать его в качестве перспективного лекарственного препарата для ограничения обусловленных стрессом нарушений тонуса коронарных сосудов и сократительной функции миокарда.
Ключевые слова: N-ацетил-Ь-цистеин, коронарные сосуды, изолированное сердце, монооксид азота.
Abstract. The purpose of the present research was to study N-acetyl-L-cystein influence on expressiveness of poststressory damages of autoregulation of coronary flow, dilatation reserve and contractile functions of rat myocardium after immobilization stress of different duration (0,5 and 6 hours). The experiments have been performed on 148 preparations of isolated (according to Langendorf) rat hearts - Wistar females. To correct redox-condition in stress low-molecular antioxidant N-acetyl-L-cystein containing thiol has been used. Within 30 minutes of immobilization stress the expressed reduction in reactive hyperemia parameters has been observed, that indicates possible damage of endothelium functional properties («deafening» of endotheliocytes) even after shortterm stress factor influence. In 6 hour immobilization stress redox-condition of myocardial cells (reduction of albuminous thiol groups in myocardium, decrease of thiol / disulfide ratio in erythrocytes) is essentially broken. Probably, change in redox-condition of cardiomyocytes and coronary vessels cells is the major reason of damaged coronary vessel tone and contractile functions of myocardium in 6 hour immobilization stress. Preliminary N-acetyl-L-cystein introduction in the control group, did not change the contractile activity of myocardium, increasing its heart perfusion intensity. Preliminary N-acetyl-L-cystein intraperitoneal introduction in rats that experienced 30 minute immobilization stress was accompanied by reactive hyperemia parameters restoration and increased its intensity of heart perfusion. Preliminary introduction of N-acetyl-L-cystein in rats that experienced 6 hour immobilization stress, completely limited poststressory changes in coronary blood circulation and prevented decreased contractile function of myocardium caused by immobilization stress. Thus, it is possible to conclude, that N-acetyl-L-cystein possesses the properties, enabling us to consider it as a promising medicinal preparation, to restrict damages of coronary vessel tone and contractile functions of myocardium caused by stress.
При воздействии различных патогенов, в том числе мощных стрессоров, в клетках может увеличиваться образование и изменяться действие монооксида азота (N0). Важная роль в регуляции биологической активности N0 принадлежит клеточным редокс-чувствитель-ным молекулам белковой и небелковой природы. К таким молекулам относятся N0-^^ тазы, факторы транскрипции (АР-1, №-кВ, Н1Б-1), киназы (ЖК, СБК, р 38 МАР киназа), фосфатазы, регуляторы внутриклеточного метаболизма кальция (например рианодиновый рецептор и Ь-тип кальциевых каналов), протеины АТФ -зависимых калиевых каналов, а также молекулы, регулирующие сократительную активность гладкой мышцы коронарных сосудов [10, 13, 14]. Роль редокс-регуляции в нарушении тонуса коронарных сосудов при стрессе ранее не изучалась. В частности, не определена важность вклада этих механизмов в нарушение ауторегуляции коронарных сосудов при стрессе.
Известно, что низкомолекулярный тиол-содержащий антиоксидант №ацетил-Ь-цисте-ин проникает в клетки и способен восстанавливать дисульфидные группы, что и обуславливает его способность предупреждать нарушение эндотелийзависимой вазодилатации у спонтанно-гипертензивных крыс [12], восстанавливать N0-зависимое расслабление сосудов при экпериментальной сердечной недостаточности [11]. В работе Беляевой Л.Е. и др. было показано, что №ацетил-Ь-цистеин является эффективным средством, ограничивающим нарушения тонуса коронарных сосудов, обусловленные тяжелой кровопотерей [2]. В связи с тем, что стресс сопровождается активацией свободнорадикального окисления и изменением редокс-состояния клеток, представляется перспективным использовать предварительное введение ^ацетил-Ь-цистеина для ограничения постстрессорных нарушений функции коронарных сосудов, которые выражаются в ослаблении ауторегуляции коронарного потока, снижении коронарного расширительного резерва и сократительной функции миокарда.
Адрес для корреспонденции: 210023, г.Витебск, пр.Фрунзе, 27, Витебский государственный медицинский университет, кафедра нормальной физиологии - Дорошенко А.С.
Целью настоящего исследования было изучить влияние N-ацетил-Ь-цистеина на выраженность постстрессорных нарушений ауторегуляции коронарного потока, расширительного резерва и сократительной функции миокарда крыс, перенесших иммобилизационный стресс различной продолжительности (0,5 и б часов).
Методы
Опыты были проведены на 148 крысах-самках линии Вистар массой 180- 240 г. Стресс вызывали посредством 0,5-ти и б-ти часовой иммобилизации крыс на спине без фиксации головы. Сердце извлекали сразу после 0,5 часового стресса и спустя 90 минут после окончания б-ти часовой иммобилизации. Контрольные крысы содержались в таких же условиях, как и опытные и получали такой же рацион питания.
Коронарный поток и сократительную функцию миокарда изучали на препаратах изолированного по Лангендорфу сердца, перфу-зируемого в условиях постоянного давления и сокращающихся в спонтанном ритме. Сердце перфузировалось раствором Кребса - Хензе-лайта следующего состава (мМ/л): NaCl - 118; KCl - 4,8; MgSO4 1,18; KH2PO4-1.2; CaCl2 - 2,5; NaHCO3 - 25,0; глюкоза - 5,5; pH - 7,3-7,4; насыщенным карбогеном (95% О2 и 5% СО2) при температуре 37°С. Постоянную температуру поддерживали при помощи ультратермостата UTU-4 (Польша). Перфузат не рециркулировал, что позволяло поддерживать его состав постоянным на протяжении всего опыта.
^ацетилі-цис^ин (NAC, - Sigma USA) вводили за 1 час до стресса, внутрибрюшин-но (40 мг/кг), с целью ограничения постстрес-сорных изменений тонуса коронарных сосудов и сократительной функции миокарда. Для определения прямого эффекта ^ацетилі-ци-стеина на тонус коронарных сосудов его добавляли в перфузионный раствор так, чтобы концентрация составляла 1 мМ/л (pH раствора 7,3). Для ингибирования синтеза NO в пер-фузионный раствор добавляли конкурентный ингибитор NO-синтазы L-NAME (L-NAME -метиловый эфир ^ю-нитро^-аргинина б0 мкМ/л, Sigma USA).
Каждый опыт состоял из двух этапов. На первом этапе сердце перфузировали обычным раствором или раствором, содержащим Ь-NAME, на втором этапе - этим же раствором, но с добавлением №ацетил-Ь-цистеина. Величину объемной скорости коронарного потока (ОСКП) определяли по объему перфузионной жидкости, оттекающей через свободный правый и дренированный левый желудочки за 10 секунд. В ходе опыта перфузионное давление ступенчато повышали от 40 до 120 мм рт. ст. с шагом в 20 мм рт. ст. Коронарный расширительный резерв определяли как отношение между величиной коронарного потока, найденного после 60-ти секундного прекращения перфузии (максимальный гиперемический коронарный поток, МГКП), и исходным потоком. Степень изменения коронарного потока по мере увеличения перфузионного давления, оценивали по индексу ауторегуляции, предложенному Е. Б. Новиковой (1972) [7]. Для сопоставления величины коронарного потока и характера сократительной активности изолированного сердца рассчитывали показатель интенсивности перфузии миокарда как отношение ОСКП к произведению частоты сердечных сокращений в минуту на величину развиваемого внутрижелу-дочкового давления. Интенсивность перфузии миокарда характеризовала количество перфу-зата, приходящегося на единицу функционирующего миокарда левого желудочка с массой 1 грамм. Поскольку изолированное сердце сокращалось в спонтанном ритме, для исключения влияния частоты сердечных сокращений на величину развиваемого внутрижелудочкового давления рассчитывали интенсивность функционирования структур миокарда.
ИФС=(ЧССхРВД)/ш, где ЧСС - частота сокращений изолированного сердца крысы, РВД - развиваемое внутрижелудочковое давление, ш-сухая масса левого желудочка [2].
В полость левого желудочка через разрез в ушке левого предсердия вводили латексный баллончик, полость которого соединялась с электроманометром. Запись кривой внутриже-лудочкового давления осуществляли электроманометром МХ-01 на одноканальном самописце Н 338-1.
Для оценки интенсивности свободнорадикального окисления в миокарде определя-
ли содержание диеновых конъюгатов (ДК) нм/ г липидов. Содержание белковых и небелковых тиоловых групп определяли спектрофотометрическим методом [15], при длине волны равной 412 нм. Общие тиоловые группы определяли по методу, предложенному ТЬаппауБег й а11. (1984), в реакции с НТСБ [16]. Содержание дисульфидных групп рассчитывали по разнице между концентрацией общих и восстановленных БН-групп.
Интенсивность базального образования N0 оценивали по концентрации продуктов его деградации (№02/№03), содержащихся в плазме крови. Определение суммарного содержания нитратов и нитритов в плазме осуществляли по методу Грисса [3].
Цифровой материал обработали общепринятыми методами вариационной статистики с использованием критерия Стьюдента с помощью программы ‘^айБйса 6.0”.
Результаты и обсуждение
Влияние иммобилизационного стресса различной продолжительности на ре-докс-состояние клеток миокарда и эритроцитов, интенсивность перекисного окисления липидов в миокарде, а также продукцию N0
Иммобилизационный стресс, продолжавшийся в течение 0,5 часа, не изменял содержание белковых и небелковых тиоловых групп в ткани сердца (табл. 1), но сопровождался увеличением содержания небелковых тиоловых групп в эритроцитах. Тиол/дисульфидное соотношение в эритроцитах оставалось неизменным. Наиболее выраженные изменения обнаруживались после 6-ти часового иммобилиза-ционного стресса. В миокарде отмечалось достоверное снижение содержания белковых тио-ловых групп, а в эритроцитах - выраженное уменьшение содержания небелковых тиоловых групп и тиол/дисульфидного соотношения. Концентрация диеновых коньюгатов в миокарде достоверно увеличилась после 0,5-ти часового и 6-ти часового иммобилизационного стресса (рис. 1 Б), что свидетельствует о повышенной продукции активных форм кислорода.
Нами была подобрана эффективная доза N ацетил-Ь-цистеина для внутрибрюшинного вве-
Таблица 1
Влияние предварительного введения ^ацетил-Ь-цистеина на содержание белковых и небелковых тиоловых групп в миокарде, небелковых тиоловых и дисульфидных групп, тиол/дисульфидного соотношения в эритроцитах после иммобилизационного стресса различной продолжительности
Показатель Эритроциты Миокард
Небелковые SH мкМ/л Небелковые SS мкМ/л SH/SS Белковые SH группы мкМ/л Небелковые SH группы мкМ/л
Контроль 2077±152 357±74 7,31±1,34 404±47 144±14
Стресс 0,5 часа 2б50±207* 5б1±81 б,43±1,30 453±19 12б±15
Стресс 6 часов 1б07±82* 7б9±158* 2,70±0,б3* 239±20* 153±13
Контроль NAC 2010±83 375±38 5,45±0,72 3б8±24 134±2б
Стресс 0,5 часа NAC 1824±12б б31±41* 2,91±0,12* 398±2б 145±28
Стресс 6 часов NAC 1985±б4 711±84* 3,0±0,55* 343±33 1б2±19
Примечание: *- p <0,05, по сравнению с исходными данными.
дения (40 мг/кг массы тела). В контроле, на фоне предварительного введения К-ацетил-Ь-цистеи-на, содержание белковых и небелковых тиоловых групп в миокарде, небелковых тиоловых и дисульфидных групп в эритроцитах достоверно не изменялось. Концентрация диеновых конью-гатов оставалось неизменной. После 0,5-ти часового иммобилизационного стресса содержание белковых и небелковых тиоловых групп в миокарде на фоне введения К-ацетил-Ь-цистеи-на достоверно не изменялось, но при этом увеличивалось содержание небелковых дисульфид-ных групп, что сопровождалось снижением тиол/ дисульфидного соотношения в эритроцитах. После 6-ти часового иммобилизационного стрес-
са в миокарде и эритроцитах не снижалось содержание белковых и небелковых тиоловых групп, но увеличивалось содержание дисульфидных групп в эритроцитах. На фоне введения К-ацетил-Ь-цистеина концентрация диеновых ко -ньюгатов после 0,5-ти и 6-ти часового стресса достоверно не изменилась. Таким образом, предварительное введение К-ацетил-Ь-цистеина ограничивало снижение содержания белковых ти-оловых групп в миокарде после 6-ти часового иммобилизационного стресса, а также уменьшало, по отношению к соответствующему стрес-сорному воздействию, активность образования начальных продуктов перекисного окисления липидов.
NO2/NO3
Диеновые коньюгаты
35
30
25
20
15
10
5
0
с 0,5 с б ч к NAC
с 0,5 NAC
с б ч NAC
400
350
300
250
200
150
100
50
0
П
с 0,5 с б ч к NAC с 0,5 с б ч NAC NAC
А
Б
*
*
*
*
*
*
*
Рис. 1. Влияние предварительного введения К-ацетилі-цистеина (NAC) на содержание продуктов деградации монооксида азота (нитратов/нитритов) в плазме крови (А), диеновых коньюгатов (Б) у крыс при иммобилизационном стрессе различной продолжительности.
Содержание продуктов деградации N0 в крови увеличивалось на 82% (рис. 1А) после 0,5-ти часового и на 55% после 6-ти часового иммобилизационного стресса. Предварительное введение ^ацетил-Ь-цистеина сопровождалось повышением содержания нитратов/ нитритов как в контроле на 113%, так и после 0,5-ти стресса на 118% и 67% после 6-ти часового иммобилизационного стресса. Таким образом, наиболее выраженный прирост нитратов/нитритов наблюдался после 0,5-ти часового стресса, а предварительное введение №аце-тил-Ь-цистеина увеличивало их содержание в крови и существенно ограничивало их прирост после 0,5-ти и 6-ти часового иммобилизационного стресса.
Влияние 0,5-ти, 6-ти часового иммобилизационного стресса на коронарное кровообращение и сократительную функцию миокарда
В препаратах изолированного сердца крыс, перенесших 0,5 часовую иммобилизацию, объемная скорость коронарного потока (ОСКП), развиваемое и диастолическое внут-рижелудочковое давление, а также интенсивность функционирования структур миокарда не изменялись по отношению к контролю (рис. 2 А). Отмечалось снижение индекса ауторегуляции на 35% и 21% при перфузионном давлении (ПД) 80 и 100 мм рт. ст. Максимальный гиперемический коронарный поток уменьшался на 29% ПД 80 мм рт. ст (табл. 4, 5), соответственно, коронарный расширительный резерв
снижался на 20%. Интенсивность перфузии миокарда достоверно не изменялась.
6-ти часовой иммобилизационный стресс, как было показано нами ранее [4, 6], сопровождался нарушением тонуса коронарных сосудов и сократительной функции миокарда. Так, ОСКП увеличивалась на 21-46% при ПД 60-120 мм рт. ст. (рис. 2Б), индекс ауто -регуляции снизился на 29-52% при всех уровнях ПД. МГКП достоверно не изменялся, но коронарный расширительный резерв снизился, что было связано с более низким, чем в контроле, базальным сосудистым тонусом. Развиваемое внутрижелудочковое давление уменьшилось в среднем на 16% при всех уровнях ПД. В связи с тем, что в этой группе крыс увеличилась частота сердечных сокращений на 20%, интенсивность функционирования структур миокарда достоверно не изменялась. Интенсивность перфузии изолированного сердца крыс после иммобилизационного стресса была выше контрольной в среднем на 32%.
Влияние предварительного введения ^ацетил-Ь-цистеина на коронарное кровообращение и сократительную функцию миокарда при иммобилизационном стрессе различной продолжительности
Внутрибрюшинное введение ^ацетил-Ь-цистеина контрольным животным не сопровождалось изменением значений ОСКП (рис.
3). Однако отмечалось уменьшение индекса ауторегуляции в среднем на 48% и МГКП на 33%, только при одном уровне ПД 80 мм рт.
Рис. 2. Влияние предварительного введения ^ацетил-Ь-цистеина на объемную скорость коронарного потока при стрессе различной продолжительности.
* - достоверность (р<0,05) по отношению к контролю.
-контроль
к+ЫАО
с 0,5
с 0,5+ЫАС
А
40 60
80
100
В
120
-стресс 6 с 6+ЫАО
Рис. 3. Влияние интракоронарного введения ^ацетил-Ь-цистеина на объмную скорость коронарного потока при стрессе различной продолжительности. * - достоверность (р<0,05) по отношению к значениям ОСКП, полученным при перфузии изолированного сердца раствором, не содержащим ^ацетил-Ь-цистеин (№ЛС).
ст. Соответственно коронарный расширительный резерв снижался на 33%. Развиваемое внутрижелудочковое давление в этой группе животных уменьшалось на 13-16% при ПД 4060 мм рт. ст. В связи с тем, что частота изолированного сердца возрастала в среднем на 21%, интенсивность функционирования структур миокарда не изменялась, а интенсивность перфузии мышц сердца возрастала на 28-33%. Следовательно, можно заключить, что предварительное введение №ацетил-Ь-цистеина не нарушало сократительной активности миокарда, увеличивая интенсивность его перфузии.
У крыс, перенесших получасовую иммобилизацию, на фоне введения №ацетил-Ь-цис-теина, ОСКП (рис. 2А), индекс ауторегуляции и коронарный расширительный резерв не изменились (табл. 2). МГКП достоверно не отличался от контроля, что свидетельствовало о его увеличении по сравнению с таковым после 0,5-ти часового иммобилизационного стресса. №ацетил-Ь-цистеин не оказал влияния на показатели сократительной функции миокарда крыс этой группы и вызвал характерное для него увеличение
интенсивности перфузии мышцы сердца. Таким образом, предварительное внутрибрюшинное введение К-ацетил-Ь-цистеина крысам, перенесшим 0,5-ти часовой иммобилизационный стресс, сопровождалось восстановлением показателей реактивной гиперемии и увеличением интенсивности перфузии миокарда.
В сердцах крыс, перенесших 6-ти часовую иммобилизацию на фоне предварительного введения К-ацетил-Ь-цистеина, ОСКП увеличилась, а индекс ауторегуляции, МГКП, коронарный расширительный резерв снизились в меньшей степени, чем у животных, перенесших стресс без введения препарата. Введение К-ацетил-Ь-цис-теина полностью предупреждало характерные для 6-ти часового иммобилизационного стресса падение развиваемого внутрижелудочкового давления, а, следовательно, и возрастание интенсивности перфузии миокарда. Таким образом, предварительное введение К-ацетил-Ь-цистеина ограничивало постстрессорные изменения коронарного кровообращения и предупреждало вызываемое иммобилизацией снижение сократительной функции миокарда.
Таблица 2
Влияние предварительного введения ^ацетил-Ь-цистеина на величины индекса ауторегуляции, максимального гиперемического коронарного потока, коронарного расширительного резерва в изолированных сердцах крыс, перенесших стресс различной продолжительности
Показатель Группа 40 60 80 100 120
Индекс ауторегуляции Контроль(п=8) 0,55±0,05 0,67±0,05 0,71±0,04 0,72±0,01
Контроль + предварит. Ш.С (п=7) 0,24±0,03* 0,33±0,04* 0,43±0,07* 0,6±0,07
Стресс 0,5 (п=8) 0,34±0,05 0,59±0,07 0,67±0,06 0,73±0,05
Стресс 0,5 + предварит. Ш.С (п=7) 0,37±0,05* 0,53±0,07 0,53±0,09 0,59±0,07
Стресс 6 (п=8) 0,29±0,07* 0,37±0,06* 0,37±0,03* 0,42±0,06*
Стресс 6 + предварит. Ш.С (п=7) 0,35±0,09 0,45±0,08* 0,43±0,1* 0,55±0,07
Максимальный гиперемический коронарный поток мл/мин X г-1 Контроль(п=8) 108,8±4,4 248,5±12,5 238,7±13,5
Контроль + предварит. Ш.С (п=7) 78,1±14,4 181±9,5* 178,7±16,4
Стресс 0,5 (п=8) 101,9±5,3 182,1±4,8* 202,6±12,1
Стресс 0,5 + предварит. Ш.С (п=7) 105,1±6 229,7±14,4 205,4±17,4
Стресс 6 (п=8) 121,5±4,2 235,6±11,9 252,7±11,1
Стресс 6 + предварит. Ш.С (п=7) 126,8±17,6 283,2±24,8 250,1±22,6
Коронарный расширительный резерв Контроль(п=8) 1,27±0,04 1,72±0,06 1,84±0,1
Контроль + предварит. Ш.С (п=7) 1,25±0,04 1,28±0,04* 1,58±0,04
Стресс 0,5 (п=8) 1,28±0,06 1,38±0,05* 1,67±0,09
Стресс 0,5 + предварит. Ш.С (п=7) 1,15±0,03 1,4±0,07* 1,27±0,08*
Стресс 6 (п=8) 1,23±0,04 1,37±0,1* 1,45±0,11*
Стресс 6 + предварит. Ш.С (п=7) 1,27±0,1 1,59±0,09 1,72±0,17
Примечание:* - р <0,05, по сравнению с контролем.
Влияние интракоронарного введения ^ацетил-Ь-цистеина на коронарное кровообращение и сократительную функцию миокарда при иммобилизационном стрессе различной продолжительности
Для определения прямого эффекта К-аце-тил-Ь-цистеина на тонус коронарных сосудов его вводили в перфузионный раствор в концентрации 1мМоль/л (pH раствора 7,3). Введение К-ацетил-Ь-цистеина в перфузионный раствор в контроле приводило к увеличению ОСКП, где прирост при всех уровнях ПД составил 17-34% (рис. 3 А). При этом индекс ауторегуляции (табл.
4) уменьшался на 42% только при ПД 40 мм рт. ст., МГКП, коронарный расширительный резерв и развиваемое внутрижелудочковое давление не изменялись (табл. 5). Интенсивность перфузии изолированного сердца не изменялась, за исключением ПД 60 мм рт. ст, где она была выше, чем в контроле, на 27%.
При внутрикоронарном введении К-аце-тил-Ь-цистеина в сердца крыс, перенесших получасовую иммобилизацию, прирост ОСКП (рис. 3Б) составил 27-32%, индекс ауторегуляции (табл. 4) снизился на 27-42% при всех уровнях ПД, МГКП достоверно не изменился, но коронарный расширительный резерв снизился на 16-30% при всех уровнях ПД, что, вероятно, было связано со снижением базального тонуса коронарных сосудов. Рвзвиваемое внутрижелудочковое давление между группами достоверно не различалось. Интенсивность перфузии изолированного сердца крыс была выше, чем в контроле, на 27-43% при ПД 6080 мм рт. ст (табл. 4).
Введение К-ацетил-Ь-цистеина в раствор для перфузии сердца крыс, перенесших 6-ти часовую иммобилизацию, приводило к приросту ОСКП на 8-22% (рис. 3В) по отношению к контролю. При этом индекс ауторегуляции
Таблица 3
Влияние предварительного введения ^ацетил-Ь-цистеина на величины развиваемого внутрижелудочкового давления, частоту сокращений, интенсивности функционирования структур миокарда, а также интенсивности перфузии миокарда в сердцах крыс, перенесших стресс различной продолжительности
Показатель Группа 40 60 80 100 120
Развиваемое внутрижелудочковое давление, мм. рт. ст. Контроль(п=8) 75,9±3 102,1±3,4 110,6±3,7 122,8±5,4 125±5,2
Контроль + предварит. КАС (п=7) 66±3,5* 85,5±4,1* 105±2,9 110±2,4 111,9±1,3
Стресс 0,5 (п=8) 72,6±4,9 107±4,6 116,4±4,5 121±3,8 122,6±3,8
Стресс 0,5 + предварит. КАС (п=7) 73,3±2,3 85,5±2,2 106,1±3,4 114,4±0,9 115,7±0,8
Стресс 6 (п=8) 55,9±3,9* 84,3±4,1* 98±4,9* 103,4±5,2* 105,8±4,2*
Стресс 6 + предварит. КАС (п=7) 66,7±4,7 86,5±8,5 105,3±3,5 116,6±3,8 116,6±3,7
Частота сокращений изолированного сердца, мин-1 Контроль(п=8) 201,3±10,6 198,9±9,6 210,9±8,8 216,8±9,1 223,5±7,2
Контроль + предварит. КАС (п=7) 240,7±11* 256,3±12,6* 257,4±11* 256±10,5* 264,7±10,4±
Стресс 0,5 (п=8) 215,3±5,2 237,4±8,6 262,4±10,6* 257,4±10,5* 257,4±10,1*
Стресс 0,5 + предварит. КАС (п=7) 223,5±8,6 246±10,1* 261,5±10,8* 261±10,3* 257,3±9,4*
Стресс 6 (п=8) 273,2±20,4* 273,4±17,7* 283±20,7* 273,2±17,2* 275±20,5*
Стресс 6 + предварит. КАС (п=7) 263,6±21,4* 267,6±20,4* 271,2±21,3* 246±17,4 269,6±30,1
Интенсивность функционирования структур миокарда, мм рт. ст. *г-1мин-1 Контроль(п=8) 208,8±17,3 278,3±22,4 316,6±8,1 361,5±23,5 378,4±19,4
Контроль + предварит. КАС (п=7) 173,4±6,5 240,3±12 296,8±10,3 309,6±10,1 325,9±9,6*
Стресс 0,5 (п=8) 199,1±13,4 322,5±13,6 390,5±24,2 396,3±25,5 403,8±23,7
Стресс 0,5 + предварит. КАС (п=7) 186±10,3 221±15,6 271,7±20,4 299,6±29,2 311,6±27*
Стресс 6 (п=8) 212,6±16,5 324,5±17,2 393±23 404,7±24,0 412,8±22,7
Стресс 6 + предварит. КАС (п=7) 214,2±20,4 277,1±21 350±31 374±32 376±36
Интенсивность перфузии миокарда, млхг-1 хмм рт.ст.-1 Контроль(п=8) 0,43±0,04 0,43±0,02 0,45±0,02 0,46±0,03 0,49±0,02
Контроль + предварит. КАС (п=7) 0,4±0,02 0,48±0,02 0,51±0,04 0,59±0,03* 0,65±0,04*
Стресс 0,5 (п=8) 0,41±0,02 0,33±0,06 0,35±0,05 0,4±0,03 0,45±0,03
Стресс 0,5 + предварит. КАС (п=7) 0,46±0,01 0,54±0,03* 0,53±0,03* 0,56±0,03* 0,6±0,02*
Стресс 6 (п=8) 0,38±0,05 0,51±0,06* 0,56±0,04 0,58±0,04* 0,66±0,05*
Стресс 6 + предварит. КАС (п=7) 0,42±0,05 0,42±0,05 0,53±0,04 0,49±0,03 0,54±0,03
Примечание:* - р <0,05, по сравнению с контролем.
уменьшался на 30-63% при всех уровнях ПД, МГКП увеличился на 46% при ПД 120 мм рт. ст., коронарный расширительный резерв снижался на 15-31% при всех уровнях ПД, развиваемое внутрижелудочковое давление снижалось на 16% при ПД 40 мм. рт. ст. Интенсивность перфузии изолированного сердца крыс при всех уровнях перфузионного давления была выше, чем в контроле, в среднем на 53%.
Следовательно, эффект К-ацетил-Ь-цисте-ина, проявляющийся в снижении тонуса коронарных сосудов, наименее был выражен после
6-ти часового иммобилизационного стресса.
Для выяснения роли монооксида азота в снижении тонуса коронарных сосудов при внутрикоронарном введении К-ацетил-Ь-цис-теина использовали ингибитор синтеза монооксида азота Ь-КАМЕ.
Введение К-ацетил-Ь-цистеина в перфу-зионный раствор на фоне блокады синтеза монооксида азота Ь-КАМЕ в контроле не сопровождалось характерным для действия К-аце-тил-Ь-цистеина увеличением показателей ОСКП (рис. 4А). Индекс ауторегуляции сни-
NAME
NAME+NAC
NAME 0,5
NAME
0,5+NAC
А
NAME б NAME 6+NAC
В
Рис. 4. Влияние интракоронарного введения К-ацетил-Ь-цистеина на фоне блокады синтеза монооксида азота Ь-КАМЕ на объемную скорость коронарного потока при стрессе различной продолжительности.
* - достоверность (р<0,05) по отношению к значениям ОСКП, полученным при перфузии изолированного сердца раствором, не содержащим К-ацетил-Ь-цистеин (КАС).
жался на 37-42% при ПД 80-120 мм рт. ст., ко - ся на 26% только при одном уровне ПД - 120
ронарный расширительный резерв уменьшал- мм рт. ст., причем это было обусловлено ха-
Таблица 4
Влияние интракоронарного введения К-ацетил-Ь-цистеина на величины индекса ауторегуляции, максимального гиперемического коронарного потока, коронарного расширительного резерва в изолированных сердцах крыс, перенесших стресс различной продолжительности
Показа- тель Группа 40 60 80 100 120
Индекс ауторегуля- ции Контроль(п=6) 0,4±0,02 0,59±0,1 0,б7±0,05 0,81±0,04
Контроль+КАС (п=5) 0,23±0,02* 0,51±0,1 0,бб±0,07 0,8б±0,08
Стресс 0,5 (п=8) 0,34±0,05 0,4±0,05 0,53±0,08 0,б2±0,08
Стресс 0,5+КАС (п=8) 0,22±0,02* 0,43±0,07* 0,45±0,04* 0,45±0,05*
Стресс 6 (п=8) 0,29±0,07* 0,37±0,0б* 0,37±0,03* 0,42±0,0б*
Стресс 6 +КАС (п=8) 0,23±0,04* 0,31±0,02* 0,47±0,05* 0,3±0,08*
Максимальный гипереми-ческий коронарный поток мл/мин X г-1 Контроль(п=6) 113±7,7 255±17,9 193,2±12,4
Контроль+КАС (п=5) 124,8±8,8 28б,4±18,8 249,4±9,2*
Стресс 0,5 (п=8) 101,9±5,3 182,1±4,8* 202,б±12,1
Стресс 0,5 + КАС (п=8) 117,7±4,7 230,7±2б,2 243,2±32,5
Стресс 6 (п=8) 121,5±4,2 235,б±11,9 252,7±11,1
Стресс 6 +КАС (п=8) 127,3±8,7 2б8,4±20 282±1б,4*
Коронарный расширительный резерв Контроль(п=6) 1,39±0,03 1,82±0,12 1,99±0,11
Контроль+КАС (п=5) 1,3±0,0б 1,59±0,09 1,92±0,1б
Стресс 0,5 (п=8) 1,28±0,0б 1,38±0,05* 1,б7±0,09
Стресс 0,5 + КАС (п=8) 1,23±0,05 1,б5±0,07 1,75±0,07
Стресс 6 (п=8) 1,23±0,04* 1,4б±0,0б* 1,45±0,11*
Стресс 6 +КАС (п=8) 1,18±0,04* 1,3б±0,05* 1,37±0,0б*
Примечание:* - p <0,05, по сравнению с контролем.
Таблица 5
Влияние интракоронарного введения К-ацетил-Ь-цистеина на величины развиваемого внутрижелудочкового давления, частоту сокращений, интенсивности функционирования структур миокарда, а также интенсивности его перфузии в сердцах крыс, перенесших стресс различной продолжительности
Показатель Группа 40 60 80 100 120
Развиваемое внутрижелудочковое давление, мм. рт. ст. Контроль (п=6) 77,5±3,6 101,9±2,8 114,3±2,6 115,8±2,8 115,4±3,9
Контроль + КАС (п=5) 68,6±1,2* 103,4±5,1 115,4±2,8 121,3±4 117,5±4,5
Стресс 0,5 (п=8) 72,6±4,9 107±4,6 116,4±4,5 121±3,8 122,6±3,8
Стресс 0,5+КАС (п=8) 78,2±5,4 101,9±6 106,3±7,3 108,2±6,2 108,1±7,1
Стресс 6 (п=8) 55,9±3,9* 84,3±4,1* 98±4,9* 103,4±5,2* 105,8±4,2*
Стресс 6 +КАС (п=8) 65,8±1,3* 91,6±3,0 108,4±2,2 113,1±2,2 116,1±1,3
Частота сокращений изолированного сердца, мин-1 Контроль (п=6) 228±4,7 249,7±5,3 260,7±10,6 257,5±10,7 257,8±14,2
Контроль + КАС (п=5) 245±20,5 257,2±18,2 265,2±18,5 268±15 265,4±16,4
Стресс 0,5 (п=8) 215,3±5,2 237,4±8,6 262,4±10,6 257,4±10,5 257,4±10,1
Стресс 0,5 + КАС (п=8) 245,1±9,2 248,4±10,8 244,7±6,7 247,9±8,5 255,9±6,9
Стресс 6 (п=8) 246,3±7,7 255,8±5 247,3±9,5 257±5 252,7±5,6
Стресс 6 + КАС (п=8) 263,6±21,4* 267,6±20,4 271,2±21,3 246±17,4 269,6±30,1
Интенсивность функционирования структур миокарда, мм рт. ст. X г-1 мин-1 Контроль (п=6) 244,6±18,2 355,4±32,6 417,7±42,3 418,3±42,3 417,4±46,9
Контроль + КАС (п=5) 242,5±26,6 378,3±27,5 440,2±38 465,5±36,3 443,3±29,3
Стресс 0,5 (п=8) 199,1±13,4 322,5±13,6* 390,5±24,2 396,3±25,5 403,8±23,7
Стресс 0,5 + КАС (п=8) 250±14,3 342,4±17,3 349,9±24,8 366,3±20 363,1±16,4
Стресс 6 (п=8) 212,6±16,5 324,5±17,2 393±23 404,7±24,0 412,8±22,7
Стресс 6 + КАС (п=8) 217,2±14,9 336,9±22,2 355,7±19,5 386,9±16,6 390,8±19,9
Интенсивность перфузии миокарда, млхг-1 X мм рт.ст.-1 Контроль (п=6) 0,34±0,02 0,33±0,03 0,35±0,03 0,39±0,03 0,41±0,04
Контроль + КАС (п=5) 0,41±0,05 0,42±0,02 0,42±0,04 0,43±0,04 0,47±0,02
Стресс 0,5 (п=8) 0,41±0,02 0,33±0,01 0,35±0,03 0,4±0,03 0,45±0,03
Стресс 0,5+КАС (п=8) 0,41±0,03 0,42±0,03* 0,5±0,04* 0,55±0,07 0,61±0,08
Стресс 6 (п=8) 0,48±0,05* 0,41±0,03* 0,42±0,03* 0,52±0,04* 0,58±0,04*
Стресс 6 +КАС (п=8) 0,6±0,09* 0,47±0,05* 0,51±0,18* 0,55±0,09* 0,68±0,1*
Примечание:* - р <0,05, по сравнению с контролем.
рактерным для действия Ь-КАМБ, снижением МГКП на 36%. В условиях одновременного введения К-ацетил-Ь-цистеина и Ь-КАМБ развиваемое внутрижелудочковое давление снижалось на 17-22%, т. е. в той же степени, что и под влиянием Ь-КАМБ. Диастолическое давление между группами достоверно не изменялось. Следовательно, коронародилататор-ный эффект К-ацетил-Ь-цистеина мог быть обусловлен высвобождением эндотелиального КО.
При перфузии изолированного сердца крысы, перенесшей 0,5-ти часовой иммобили-зационный стресс, раствором, содержащим
К-ацетил-Ь-цистеин и Ь-КАМЕ, не наблюдалось характерного для К-ацетил-Ь-цистеина увеличения ОСКП (рис. 4Б). Более того, на фоне Ь-КАМЕ К-ацетил-Ь-цистеин приводил к снижению ОСКП в среднем на 22%. Индекс ауторегуляции, коронарный расширительный резерв и МГКП при физиологических значениях ПД не отличались от контроля. К-ацетил-Ь-цистеин и блокада синтеза монооксида азота приводили к снижению развиваемого давления и интенсивности функционирования структур миокарда в среднем на 29-43% (т.е. на 17% больше, чем в контроле). Интенсивность перфузии миокарда в этой группе дос-
Таблица 6
Влияние интракоронарного введения К-ацетил-Ь-цистеина на фоне блокады синтеза монооксида азота Ь-КАМЕ на величины индекса ауторегуляции, максимального гиперемического коронарного потока, коронарного расширительного резерва в изолированных сердцах крыс, перенесших стресс различной продолжительности
Показатель Группа 40 60 80 100 120
Индекс ауторегуля- ции Контроль(n=8) 0,55±0,05 0,б7±0,05 0,71±0,04 0,72±0,01
Контроль + NAME (n=11) 0,39±0,05* 0,42±0,03* 0,44±0,04* 0,33±0,04*
Контроль + NAME + NAC (n=5) 0,39±0,03* 0,37±0,07* 0,37±0,07* 0,47±0,1*
Стресс 0,5 + NAME (n=12) 0,57±0,07 0,71±0,07 0,б5±0,0б 0,8б±0,0б
Стресс 0,5 + NAME + NAC (п=6) 0,75±0,09 0,79±0,03 1,22±0,41 1,05±0,03
Стресс б + NAME (n=12) 0,24±0,45* 0,47±0,09* 0,51±0,03* 0,24±0,09*
Стресс б + NAME + NAC (n=6) 0,27±0,08* 0,32±0,09* 0,54±0,03* 0,34±0,0б*
Максимальный гипе-ремический коронарный поток, мл/мин X г-1 Контроль(n=8) 108,8±4,4 248,5±12,5 238,7±13,5
Контроль + NAME (n=11) 93,5±7,3 184,8±21,б 127,1±5,3
Контроль + NAME+NAC (n=5) 88,9±12,1 171,5±23,б 1б5,7±41,5
Стресс 0,5 + NAME (n=12) 94±5,3 1б3,3±8,б* 125,7±5,3*
Стресс 0,5 + NAME + NAC (n=6) 112,7±10,1 189,7±2б,4 143,б±б*
Стресс б + NAME (n=12) 94±3,1 187,8±7,4* 153,3±13,7*
Стресс б + NAME + NAC (n=6) 97,4±9,9 202±14,5 188,4±21
Коронарный расшири- тельный резерв Контроль(n=8) 1,27±0,04 1,72±0,05 1,84±0,1
Контроль + NAME (n=11) 1,1б±0,1 1,01±0,1* 1,0б±0,2
Контроль + NAME + NAC (n=5) 1,92±0,3* 1,19±0,31* 0,84±0,15*
Стресс 0,5 + NAME (n=12) 1,37±0,04 1,77±0,0б 1,8б±0,1
Стресс 0,5 + NAME + NAC (n=6) 1,41±0,04 1,5±0,12 1,5б±0,12
Стресс б + NAME (n=12) 1,31±0,03 1,78±0,11 1,82±0,1б
Стресс б + NAME + NAC (n=6) 1,17±0,0б 1,43±0,12 1,б3±0,13
Примечание: * - p <0,05, по сравнению с контролем.
товерно не отличалась от контрольной.
При перфузии изолированного сердца крысы, перенесшей 6-ти часовой иммобили-зационный стресс, раствором, содержащим К-ацетил-Ь-цистеин и Ь-КАМБ, ОСКП не изменялась (рис. 4В). Индекс ауторегуляции снижался на 19-58% при всех уровнях ПД. В отличие от действия только Ь-КАМБ его сочетание с К-ацетил-Ь-цистеином не сопровож-
далось изменением МГКП и коронарного расширительного резерва. В этой группе животных наблюдалось незначительное снижение развиваемого внутрижелудочкового давления, которое развивалось на фоне увеличения частоты сердечных сокращений и не приводило к снижению интенсивности функционирования структур миокарда и увеличению его перфузии. Таким образом, введение Ь-КАМБ ус-
Таблица 7
Влияние интракоронарного введения К-ацетил-Ь-цистеина на фоне блокады синтеза монооксида азота Ь-КАМЕ на величины развиваемого внутрижелудочкового давления, частоту сокращений, интенсивности функционирования структур миокарда, а также интенсивности перфузии миокарда в сердцах крыс перенесших стресс различной продолжительности
Показа- тель Группа 40 б0 80 100 120
Развиваемое внут-рижелу-дочковое давление, мм. рт. ст. Контроль(n=8) 75,9±3 102,1±3,4 110,б±3,7 122,8±5,4 125±5,2
Контроль + NAME (n=11) б5±2,б 83,8±5,9 87,7±б,9 9б,б±5,7* 102,8±б,4*
Контроль + NAME+NAC (n=5) 60,3±7,5 83,7±8,5 100,8±8,7 10б,2±9 113,4±10,5
Стресс 0,5 + NAME (n=12) б1,9±2,1 82,б±3,5 88,5±3,7* 95,2±3,2* 100,9±3,1*
Стресс 0,5 + NAME + NAC (n=6) 54,8±1* 73,б±2,б* 78,3±4* 79,9±4,5* 81,5±5*
Стресс б + NAME (n=12) б2,8±3,2* 83,1±3,1* 94,б±3* 100,8±3,б* 105,5±3*
Стресс б + NAME + NAC (n=6) 59,9±2,2* 83,4±3* 98,7±3,3* 102,2±3,5* 103,4±3,3*
Частота сокращений изолированного сердца, мин-1 Контроль(n=8) 201,3±10,б 198,9±9,б 210,9±8,8 21б,8±9,1 223,5±7,2
Контроль + NAME (n=11) 197,8±1б 210,7±11,1 232,3±11,3 233,3±7,б 231,7±б,1
Контроль + NAME + NAC (n=5) 214,2±5,3 232,4±7,7 243,8±11,8 235±8,7 228,4±9,7
Стресс 0,5+NAME (n=12) 210,5±б,1 220,б±8,4 229,4±12,4 247,2±12,2 242,4±10,8
Стресс 0,5 + NAME + NAC (n=6) 209±10,б 208,7±б 218,7±2,1 220±10,4 231,3±9,7
Стресс б + NAME (n=12) 179,7±3,1 204±7,б 205,7±9,б 199,9±10,3 197,5±9,4
Стресс б + NAME + NAC (n=6) 234,8±8,б 241,3±7,8* 242,8±12,1 233,8±13,9 235,5±13,7
Интенсивность функционирования структур миокарда, мм рт. ст. хг-1мин-1 Контроль(n=8) 208,8±17,3 278,3±22,4 31б,б±8,1 3б1,5±23,5 378,4±19,4
Контроль + NAME (n=11) 155,б±15,б* 215±22,1* 24б,2±21,7* 274,5±21,8* 289,7±25,4*
Контроль + NAME + NAC (n=5) 13б,1±12,б 205,4±15,2 258,б±11,5 2б3,8±13,9 273,8±19,4
Стресс 0,5 + NAME (n=12) 155,5±8,8* 215,9±12,7* 237,2±11* 275,7±11,1* 28б,5±9,5*
Стресс 0,5 + NAME + NAC (n=12) 124,4±9,2* 1б0,1±1б,2* 173,9±14,9* 177,1±17,5* 18б,0±18,8*
Стресс б + NAME (n=12) 13б,4±13,3* 204,1±19,4* 233,4±21,7* 238,8±20,8* 247±20,2*
Стресс б + NAME + NAC (n=6) 191,9±8,1 274,7±11,1 328,7±25,2 32б,7±23,5 334,7±31,3
Интенсивность перфузии миокарда, млхг-1хмм рт.ст.-1 Контроль(n=8) 0,43±0,04 0,43±0,02 0,45±0,02 0,4б±0,03 0,49±0,02
Контроль + NAME (n=11) 0,4±0,03 0,4±0,03 0,4±0,03 0,4±0,03* 0,43±0,02*
Контроль + NAME + NAC (n=5) 0,4б±0,04 0,45±0,05 0,4б±0,07 0,53±0,12 0,57±0,13
Стресс 0,5 + NAME (n=12) 0,44±0,02 0,4±0,02 0,4±0,02 0,38±0,02* 0,38±0,02*
Стресс 0,5 + NAME + NAC(n=12) 0,5±0,03 0,45±0,03 0,44±0,05 0,43±0,04 0,4б±0,04
Стресс б + NAME (n=12) 0,57±0,04* 0,49±0,03 0,49±0,03 0,53±0,04 0,58±0,04
Стресс б + NAME + NAC (n=6) 0,44±0,03 0,41±0,02 0,44±0,04 0,49±0,04 0,54±0,07
Примечание: * - p <0,05, по сравнению с контролем.
транило вызываемое К-ацетил-Ь-цистеином увеличение кровотока в контроле и при 6-ти часовом иммобилизационном стрессе, а также привело к его снижению при 0,5-ти часовом иммобилизационном стрессе. Более того,
сочетанное введение К-ацетил-Ь-цистеина и Ь-КАМБ в значительной степени восстановило сниженный при 6-ти часовом стрессе тонус коронарных сосудов и сократительную функцию миокарда.
Заключение
Результаты экспериментов демонстрируют, что при 6-ти часовом иммобилизационном стрессе существенно нарушается редокс-со-стояние клеток миокарда. О нем свидетельствует значительное уменьшение белковых тиоловых групп в ткани миокарда. Изменение редокс-состояния кардиомиоцитов и клеток коронарных сосудов, вероятно, является важнейшей причиной нарушения тонуса коронарных сосудов и сократительной функции миокарда при 6-ти часовом иммобилизационном стрессе. Этот вывод подтверждают данные, указывающие на то, что низкомолекулярный тиолсодержащий антиоксидант, обладающий способностью стимулировать синтез глютати-она, ограничивает не только выраженность снижения содержания белковых сульфгид-рильных групп в ткани миокарда при 6-ти часовом иммобилизационном стрессе, но и неблагоприятное воздействие стресса на тонус коронарных сосудов. Увеличение содержания небелковых дисульфидных групп в эритроцитах при 6-ти часовом стрессе, скорее всего, обусловлено накопившимся в них окисленным глютатионом и является дополнительным свидетельством образования при стрессе больших количеств активных форм кислорода и азота. Изменение редокс-состояния клеток сердца и коронарных сосудов при стрессе обусловлено как повышенным образованием активных форм кислорода, но так и увеличением образования пероксинитрита. Это связано с тем, что при стрессе одновременно повышается продукция и оксида азота, и активных форм кислорода.
Так как эндотелиоциты коронарных сосудов играют важнейшую роль в механизме реактивной гиперемии, то ее выраженное снижение, возникающее уже после 0,5-ти часового иммобилизационного стресса, указывает на возможность нарушения функциональных свойств эндотелия (“оглушенность” эндотели-оцитов) даже после вполне кратковременного воздействия стрессора. Защитное действие К ацетил-Ь-цистеина на тонус коронарных сосудов при стрессе является, вероятно, комплексным. Какая-то часть его положительных эффектов при стрессе может быть опосредована
оксидом азота. Результаты экспериментов показывают, что предварительное введение К-ацетил-Ь-цистеина при стрессе повышает содержание в крови продуктов деградации монооксида азота, а внутрикоронарное введение сопровождается коронародилатацией, обусловленной высвобождением эндотелиального КО. Возможно, это связано с высвобождением монооксида азота из его депонированных форм. Хотя не исключено, что К-ацетил-Ь-ци-стеин способен повышать активность эндотелиальной КО-синтазы при стрессе через ре-докс-чувствительные механизмы регуляции функций этого фермента. Реализация этих двух механизмов действия К-ацетил-Ь-цисте-ина могла обеспечить уменьшение базального тонуса коронарных сосудов в контроле и после стресса при внутрикоронарном введении К-ацетил-Ь-цистеина.
Еще один механизм защитного действия К-ацетил-Ь-цистеина на тонус коронарных сосудов при стрессе заключается, вероятно, в его прямом влиянии на редокс-состояние клеток, по крайней мере через стимуляцию синтеза глютатиона и последующее изменение баланса между окисленным и восстановленным глю-татионом. Изменение этого баланса далее может влиять на функцию редокс-чувствитель-ных внутриклеточных факторов, регулирующих сократительную функцию клеток. Таким образом, результаты экспериментов показывают, что К-ацетил-Ь-цистеин обладает свойствами, позволяющими рассматривать его в качестве перспективного лекарственного препарата для ограничения обусловленных стрессом нарушений тонуса коронарных сосудов.
Работа выполнена при поддержке Белорусского республиканского фонда фундаментальных исследований, договор Б03-240.
Литература
1. Андреева Л.И., Кожемякин В. А. Модификация метода определения перекисей липидов в тесте с тио-барбитуровой кислотой // Лабораторное дело. -1988.
- №.11. - С.41-43.
2. Беляева Л.Е., Шебеко В.И., Солодков А.П. Коррекция дисфункции эндотелия К-ацетилцистеином: ре-докс-зависимые механизмы его влияния. Дисфункция эндотелия: экспериментальные и клинические исследования. Труды Ш-й международной научно-
практической конференции. Витебск 2004. - С.72-79.
3. Веремей И.С., Солодков А. П. Восстановление КО3 в КО2 цинковой пылью в присутствии аммиачного комплекса сульфата меди // Сборник научных трудов. - Витебск, 1999. - С.274-277.
4. Дорошенко А.С., Солодков А.П., Шебеко В.И. Ре-докс-состояние клеток миокарда, тонус коронарных сосудов и сократительная активность сердца при им-мобилизационном стрессе. // Дисфункция эндотелия: экспериментальные и клинические исследования. Труды 11-й международной научно-практической конференции. - Витебск, 2002: ВГМУ - С.48-54.
5. Манухина Е.Б., Смирин Б.В., Машина С.Ю., Пшен-никова М.Г., Ванин А.Ф., Малышев И.Ю. Физиологическая роль депо оксида азота в кровеносных сосудах. // Дисфункция эндотелия: экспериментальные и клинические исследования. Труды 11-й республиканской научно-практической конференции. Витебск 2002. - С.13-18.
6. Солодков А.П. Эндотелиальные механизмы изменения сосудистого тонуса: Автореф. дис. д-ра мед. наук.
- Витебск: ВГМУ, 1998. - 28 с.
7. Новикова Е.Б. Об ауторегуляции в коронарной системе // Физиол. журнал, 1972. - №1. - С.61-74.
8. Шебеко В.И. Редокс-регуляция фенотипа эндотели-оцитов: от хаоса к порядку. // Витебск: ВГМУ, 2002.
- Т.1., №1.- С.30-38.
9. Шебеко В.И., Солодков А.П., Манухина Е.Б., Ванин А.Ф. Механизмы редокс-регуляции депонирования оксида азота в сердечно-сосудистой системе: гипотеза // Дисфункция эндотелия: экспериментальные и клинические исследования. Труды II-й республиканской научно-практической конференции. Витебск 2002. - С. 48-55.
10. Abe J-i., Berk B. C. Reactive oxygen species as mediators of signal transduction in cardiovascular disease // Trends Cardiovasc. Med. - 1998. - Vol.8. - P.59-64.
11. Andrews N.P., Prasad A.A.,Quyyumi A.A. N-acetylcysteine improves coronary and peripheral vascular function //J. Am. Coll.Cardiol.-2001. - Vol.37, №1. - P. 117-123.
12. Cabassi A., Bouchard J., Dumont E.C. e.a. Effects of N-acetylcysteine in a rat model of ischemia and reperfusion injury//J. Hypertens.- 2001. -Vol. 18, №2. - Р. 187-196.
13. Kamata H., Hirata H. Redox regulation of cellular function // Cell Signal. -1999. - Vol.11, №1. - P. 1-14.
14. Kunsch C., Medford R. M. Oxidative stress as a regulator of gene expression in the vasculature // Circ. Res. - 1999.
- Vol.85. - P.753-766.
15. Ellman G. Tissue sulfhydryl groups.// Arh. of Bioch and Bioph. - 1959. - Vol. 82. - P. 70-77.
16. Thannauser T., Koniahi V., Scherada H. Sensitive quantative analysis of disulfide bonds in polypeptides and proteins // Analyt. biochem. - 1984. - Vol. 138, №1.
- P. 181-188.
Поступила 21.06.2004 г. Принята в печать 25.06.2004 г.
