Научная статья на тему 'Влияние мультипробиотика на показатели иммунитета при Эпштейна - Барр вирусной инфекции у детей'

Влияние мультипробиотика на показатели иммунитета при Эпштейна - Барр вирусной инфекции у детей Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
2222
119
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ЭПШТЕЙНА БАРР ВИРУСНАЯ ИНФЕКЦИЯ / EPSTEIN-BARR VIRUS INFECTION / ИНФЕКЦИОННЫЙ МОНОНУКЛЕОЗ / INFECTIOUS MONONUCLEOSIS / ИММУНИТЕТ / IMMUNITY / ДЕТИ / CHILDREN / МУЛЬТИПРОБИОТИК / ДИФФЕРЕНЦИРОВОЧНЫЕ МАРКЕРЫ / DIFFERENTIAL MARKERS / ИММУНОКОМПЕТЕНТНЫЕ КЛЕТКИ / IMMUNOCOMPETENT CELLS / CD / ЕПШТЕЙНА БАРР ВіРУСНА іНФЕКЦіЯ / іНФЕКЦіЙНИЙ МОНОНУКЛЕОЗ / іМУНіТЕТ / ДіТИ / МУЛЬТИПРОБіОТИК / ДИФЕРЕНЦіЮВАЛЬНі МАРКЕРИ / іМУНОКОМПЕТЕНТНі КЛіТИНИ / MULTIPROBIOTIC

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Крамарев С.А., Выговская О.В., Тарадий Н.Н.

В статье приведены результаты исследования иммунологического статуса у 185 детей, больных острой Эпштейна Барр вирусной инфекцией в виде инфекционного мононуклеоза, в возрасте 6-18 лет и описаны результаты лечения этих детей с включением мультипробиотика. Детально проанализировано влияние мультипробиотика на выявленные изменения в иммунном статусе у детей с инфекционным мононуклеозом Эпштейна Барр вирусной этиологии.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Крамарев С.А., Выговская О.В., Тарадий Н.Н.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Influence of Multiprobiotic on Immunological Parameters in Epstein-Barr Virus Infection in Children

The paper contains results on immunological status investigation of 185 children aged 6-18 years with acute Epstein-Barr virus infection in the form of infectious mononucleosis; results of these children’s treatment with application of multiprobiotic are described. Detailed analysis of the multiprobiotic effect on revealed changes in immune status of children with infectious mononucleosis of Epstein-Barr virus etiology is also performed.

Текст научной работы на тему «Влияние мультипробиотика на показатели иммунитета при Эпштейна - Барр вирусной инфекции у детей»

K^fvlребёнка

¡нфекцп в д1тей / Infections in Children

УДК 616-022.7:578.825.13]-053.2-085:612.017.1

КРАМАРЕВ С.А.1, ВЫГОВСКАЯ О.В.1, ТАРААИЙ H.H.2 Национальный медицинский университет имени А.А. Богомольца, г. Киев

2Международный центр астрономических и медико-экологических исследований НАНУ, г. Киев

ВЛИЯНИЕ МУЛЫИПРОБИОТИКА НА ПОКАЗАТЕЛИ ИММУНИТЕТА ПРИ ЭПШТЕЙНА — БАРР ВИРУСНОЙ

ИНФЕКЦИИ У ДЕТЕЙ

Резюме. В статье приведены результаты исследования иммунологического статуса у 185 детей, больных острой Эпштейна — Барр вирусной инфекцией в виде инфекционного мононуклеоза, в возрасте 6—18 лет и описаны результаты лечения этих детей с включением мультипробиотика. Детально проанализировано влияние мультипробиотика на выявленные изменения в иммунном статусе у детей с инфекционным мононуклеозом Эпштейна — Барр вирусной этиологии.

Ключевые слова: Эпштейна — Барр вирусная инфекция, инфекционный мононуклеоз, иммунитет, дети, мультипробиотик, дифференцировочные маркеры, иммунокомпетентные клетки, СБ.

Эпштейна — Барр вирусная инфекция (ЭБВИ) является инфекционной болезнью иммунной системы с хронической персистенцией вируса. Вирус Эпштейна — Барр (ЭБВ) обладает тропизмом к различным клеткам, но основной мишенью для него являются В-лимфоциты и дендритные клетки, несущие на себе рецептор CD21 (или CR2-рецептор для С3ё-компонента системы комплемента) [1—3]. Он может также поражать эпителий слизистой носо- и ротоглотки, протоков слюнных желез, шейки матки, желудочно-кишечного тракта, эндотелий сосудов, гладкомышечных клеток [4, 5]. Также есть сообщение о возможном инфицировании вирусом иммунокомпетентных клеток — Т-лимфоцитов (CD3), клеток естественных киллеров ^К-клетки — CD16), макрофагов, моноцитов, нейтро-филов [6, 7]. При ЭБВ-инфекции можно наблюдать иммунологический образ, присущий персистирую-щим инфекциям в целом.

Разные авторы описывают различные изменения со стороны всех звеньев иммунитета при ЭБВИ, очень часто даже противоречивые [8—10]. Так, G. МеёоЪ^ек й а1. отмечают отсутствие достоверных изменений уровня В-лимфоцитов с фенотипом CD20+ у детей с инфекционным мононуклеозом (ИМ) разной степени тяжести по сравнению со здоровыми детьми и между собой [11]. В исследованиях ^ Ка8аИага, А. Yachie, S. ОИ§а е1 а1. отмечалось повышение концентрации В-клеток CD21+

в первые 3 недели болезни у детей с более тяжелым течением ИМ [4, 12]. Об увеличении количества В-лимфоцитов (с фенотипом CD72+) в эти же сроки говорится и в других работах [5, 13]. В литературе есть данные о снижении содержания в периферической крови клеток с фенотипом CD19+ (В-лимфоциты) и CD19+CD23+ (зрелые В-лимфоциты) в острую фазу ИМ и в периоде ранней реконвалесценции, причем степень выраженности этого уменьшения и его продолжительность прямо коррелировали с тяжестью заболевания [14]. При острой ЭБВ-инфекции также происходят значительные изменения со стороны Т-клеточного иммунитета, проявляющиеся нарушениями в содержании и уровне функциональной активности Т-лимфоцитов. Эти изменения, по данным разных авторов, также носят разнонаправленный характер [1, 8, 14]. Так, в работах L.S. Zidovec et al., В.В. Новицкого и соавт. указывается на повышение при острой ЭБВИ относительного и/или абсолютного уровня Т-лимфоцитов (CD3+-клеток) [15, 16]. Другие исследователи отмечают некоторое снижение содержания клеток с данным фенотипом в острый период ИМ [5, 13]. Изменения субпопуляционного состава Т-лимфоцитов в доступной нам литературе также описываются по-разному. Повышенное содержание (или тенденция

© Крамарев С.А., Выговская О.В., Тарадий Н.Н., 2014 © «Здоровье ребенка», 2014 © Заславский А.Ю., 2014

к повышению содержания) CD4+-KneTOK в острый период ИМ и в период ранней реконвалесценции показано в работах Y. Kasahara et al., G. Niedobitek et al., L. Quintanilla-Martinez et al. [11, 12, 17]. В исследованиях D.H. Crawford, В.А. Кельцева и соавт., В.В. Новицкого и соавт. обнаружено, что уровень этих клеток при остром ИМ не изменяется или снижается [10, 14, 16]. В отношении содержания Т-лимфоцитов с фенотипом CD8+ данные различных исследователей также противоречивы. Большинство авторов указывает на повышение уровня этих клеток в острую фазу ИМ [10, 13, 14, 16]. При этом отмечается увеличение содержания активированных Т-лимфоцитов с фенотипом CD8+CD38+ и CD8+HLA-DR+ [14, 16]. Причем если инфекция переходит в хроническую форму, маркеры активности CD8+-клеток сохраняются и через 4 месяца от начала острой ЭБВ-инфекции [18]. Однако существуют работы, в которых отмечается тенденция к уменьшению содержания CD8+-клеток при острой ЭБВ-инфекции или зависимость этого показателя от тяжести заболевания: при легкой форме ИМ уровень CD8+-клеток повышен, а при тяжелой — снижен [4, 12]. Разбалансированность в работе клеточного иммунитета проявляется также повышением в крови клеток-предшественников кортикальных тимоцитов (CD3+CD4+CD8+) в острую фазу ИМ, различным соотношением среди Т-лимфоцитов клеток с фенотипом CD45RO+ (клетки памяти) и CD45RA+ (зрелые неиммунные, или «наивные», лимфоциты) [5, 10]. Популяция больших незрелых тимоцитов (с фенотипом CD3+CD4+CD8+) экс-прессирует рецептор CD21+. Очевидно, это способствует инфицированию этих клеток вирусом и объясняет способность ЭБВ поражать Т-лимфоциты на ранних этапах Т-лимфопоэза, еще в тимусе [13]. По содержанию еще одних эффекторных клеток—естественных киллеров, или NK-клеток (CD16+), также существуют противоречивые данные. В некоторых исследованиях указывается на повышение (абсолютное и/или относительное) уровня этих клеток в острый период ИМ [5, 13, 17]. Другие авторы констатировали снижение содержания NK-клеток в тот же период заболевания, причем более выраженное при тяжелом течении ИМ [4, 12].

ЭБВ модулирует как функционирование системы естественной цитотоксичности, так и иммуногенез, что может помогать вирусу избегать действия защитных факторов организма человека.

С учетом всего вышеизложенного целью нашего исследования было изучить состояние Т- и В-клеточного иммунитета у больных с острой ЭБВ-инфекцией и провести коррекцию выявленных изменений путем использования мультипробиотика, который представляет собой симбиотическую ассоциацию бактерий рода Bifidobacterium, Lactobacillus, Propionibcterium и Lactococcus. В зависимости от вида мультипробиотик содержит от 14 до 25 штаммов пробиотических бактерий в концентрации от 109 до 1013 живых клеток в одной дозе препарата [19].

Материалы и методы исследования

Под нашим наблюдением находилось 185 детей, больных инфекционным мононуклеозом ЭБВ-этиологии, в возрасте 6—18 лет, проходивших лечение в городской детской клинической инфекционной больнице г. Киева в течение последних семи лет. Диагноз устанавливался на основании типичной клинической картины заболевания. В план обследования входило определение специфических антител к ЭБВ — иммуноглобулинов классов М и G к капсид-ному антигену (VCA), IgG к раннему антигену (EA), IgG к ядерному антигену (EBNA) методом иммуно-ферментного анализа (ИФА) в сыворотке крови с использованием диагностической иммуноферментной системы «Вектор-Бест», Россия. Полимеразная цепная реакция использовалась для обнаружения ДНК ЭБВ в крови и слюне («Вектор-Бест», Россия).

Исследование экспрессии дифференциро-вочных маркеров CD проводилось в лаборатории иммунологии Международного центра астрономических и медико-экологических исследований Национальной академии наук Украины (заведующая лабораторией иммунологии — Тарадий Н.Н., к.м.н.) и включало изучение экспрессии антигенов: CD3+ (Т-лимфоциты), CD4+ (Т-хелперы), CD8+ (супрессорно-цитотоксическая субпопуляция, цитотоксические Т-лимфоциты (ЦТЛ)), CD7+ (Т-лимфоциты, Fc^R-маркер), CD16+ (естественные киллеры, или NK-клетки), CD20+ (В-лимфоциты), CD22+ (В-лимфоциты), CD25+ (IL-2R), Т-лимфоцитов, экспрессирующих на своей поверхности рецептор к интерлейкину-2 (IL-2), CD45RA+ (зрелые неиммунные, или «наивные», лимфоциты), CD95+ (Fas/Apo, маркер апоптоза). Состояние Т- и В-клеточного звена иммунитета определяли в остром периоде болезни.

Референтные значения (n = 15) исследовали в группе сравнения, в которую вошло 15 практически здоровых детей в возрасте от 6 до 18 лет. При отборе детей в эту группу учитывали анамнестические данные: отсутствие на протяжении последних трех месяцев любых заболеваний, вакцинации и инъекции биологически активных препаратов. В разработку не включались дети с признаками гипогаммаглобу-линемии, проявлениями аллергических и хронических заболеваний.

Статистическая обработка полученных результатов проводилась с использованием современных методов медицинской статистики. Статистическую обработку результатов исследования проводили с помощью MS Excel 2007 [20].

Результаты исследования и их обсуждение

При иммунологическом обследовании детей с ЭБВ-инфекцией отмечались изменения как в Т-, так и в В-клеточном звеньях иммунитета. Состояние Т-клеточного звена иммунитета характеризовалось у детей с острым течением ЭБВ-инфекции значительным дисбалансом, признаками актива-

ции противовирусных механизмов защиты и признаками нарушения регуляции иммунной системы (рис. 1).

Достоверно, по сравнению с группой сравнения, повышен общий уровень лимфоцитов за счет относительного и абсолютного увеличения содержания Т- и В-лимфоцитов. Повышенный уровень экспансии CD3+-клеток (Т-лимфоциты) отмечается в первую очередь за счет увеличения экспрессии диф-ференцировочных маркеров CD95+ (Fas-лиганд), CD45RA+ (зрелые неиммунные, или «наивные», лимфоциты), CD25+ (IL-2R), ОТ4+-клеток (Т-хелперы) и Т-лимфоцитов CD7+ (Fc^R-маркер) (p < 0,05). Со стороны экспрессии дифференциро-вочных маркеров клеток, вносящих основной вклад в противовирусную защиту организма от ЭБВ — ОТ8+-клеток (ЦТЛ) и ОТ16+-клеток (NK-клетки), имеет место следующая ситуация: уровень экспрессии CD16+-клеток повышен (p < 0,01), а уровень экспрессии цитотоксических Т-лимфоцитов CD8+ снижен (p < 0,05). Показатели В-клеточного иммунитета при острой ЭБВИ также изменяются и характеризуются повышением уровня экспрессии дифференцировочных маркеров В-лимфоцитов — CD20+ и CD22+ (p < 0,05). Таким образом, у обследованных нами детей с острой ЭБВ-инфекцией мы наблюдали изменения со стороны экспрессии дифференцировочных маркеров, характеризующих состояние Т- и В-клеточного иммунитета, которые мы расцениваем как проявления иммунной дисфункции, по Т-клеточному типу и проявления выраженной активации противовирусной защиты — больше по В-клеточному типу.

Повышение численности лимфоцитов в периферической крови при острой ЭБВ-инфекции происходит как за счет экспансии клеток костномозгового происхождения — NK-клеток CD16, В-лимфоцитов CD20 и CD22, так и за счет повышения уровня экспрессии дифференцировочных маркеров Т-лимфоцитов (CD3-клетки). Через CD7 (Fc^R)-маркер осуществляется повышение внутриклеточной концентрации ионов кальция, перекрестное реагирование с CD25 (IL-2R), CD71, CD54, HLA-DR, стимуляция секреции интерферона (ИФН-у), повышается цитотоксическая активность NK-клеток, инициируется пролиферация NK-клеток и опосредуется адгезия к фибронекти-ну. При острой ЭБВ-инфекции происходит значительное повышение экспрессии маркера апоптоза (CD95/Fas) Fas-лиганда, который связывается с Fas-рецептором на активированных Т-лимфоцитах и запускает тем самым апоптоз последних. Уровень экспрессии дифференцировочных маркеров стимулированных лимфоцитов — CD45RA и высокоаффинного рецептора IL-2 CD25 (IL-2R) отражает интенсивность иммунного ответа: повышение количества этих клеток соответствует высокой активности иммунного ответа, что соответствует острой фазе инфекционного процесса и выраженному инфекционному воспалению [1].

При острой ЭБВ-инфекции за счет выраженной антигенной нагрузки происходит активация антиген-специфических и антиген-неспецифических механизмов иммунитета, связанных с естественными киллерами и В-клетками. Антиген-неспецифический механизм иммунитета является, с одной стороны, малоэффективным для элиминации ЭБВ-антигенов, с другой стороны, является основой формирования аутоиммунных реакций и лимфопроли-феративных заболеваний в отдаленном катамнезе, после перенесенной острой ЭБВ-инфекции [2, 8]. Значимость экспрессии дифференцировочных маркеров естественных киллеров (СD16-клетки) объясняется тем, что эти клетки занимают важнейшее место в противоинфекционной и противоопухолевой защите и тесно связаны с аутоиммунными цитоток-сическими и лимфопролиферативными процессами [4, 12]. CD16-клетки относят иммунокомпетентные клетки (ИКК) не к рециркулирующим между кровью и лимфой клеткам, а к циркулирующим только в крови, которые могут додифференцироваться в зрелые формы при циркуляции в кровяном русле. Кроме рецепторов для цитокинов, на мембране естественных киллеров размещаются рецепторы для антигенов МНС-1 и рецептор для Fc-концов — IgG-FcyRIIIA (CD 16) — единственный из ингибитор-ных, работающий с растворимыми лигандами. Естественные киллеры CD16 участвуют в распознавании антигенов непептидной природы в комплексе с молекулами CD1, вырабатывают интерлейкин-4 (IL-4) и через стимуляцию дифференцировки Th0 в Th2 активируют гуморальный иммунный ответ; они также экспрессируют большое количество Fas-лиганда (CD95), который связывается с Fas-рецептором на активированных Т-лимфоцитах и запускает апоптоз этих клеток [4, 12]. Увеличение уровня экспрессии дифференцировочных маркеров В-лимфоцитов при острой ЭБВ-инфекции, с одной стороны, может быть компенсаторным, с другой — может свидетельствовать о том, что активной элиминации ЭБВ-инфицированных (ЭБВ+) В-лимфоцитов не происходит (может быть, за счет снижения уровня экспрессии дифференцировочного маркера ЦТЛ (ОТ8-клетки)).

Из изученных показателей Т- и В-клеточного иммунитета, с нашей точки зрения, предикторами перехода острой ЭБВ-инфекции в хроническую форму выступают: уровень экспрессии Т-лимфоцитов CD8+, естественных киллеров CD16+, CD95+ (Fas-лиганд, маркер апоптоза), В-лимфоцитов CD20+ и CD22+. Именно уровень экспрессии дифференци-ровочных маркеров этих клеток в остром периоде и в динамике болезни свидетельствует о переходе острой инфекции в хроническую.

В связи с тем, что у всех обследуемых пациентов с острой ЭБВ-инфекцией были выявлены изменения со стороны экспрессии всех исследуемых дифференцировочных маркеров Т- и В-клеточного иммунитета, с целью коррекции выявленных нарушений дети, участвующие в исследовании, получали

мультипробиотик по 1 пакетику 1 раз в день в течение 1 месяца. Все дети получали базисную терапию, которая включала антибактериальные, антигиста-минные препараты, энтеросорбенты, симптоматическую и местную терапию, при необходимости — дезинтоксикационную инфузионную терапию с включением глюкозо-солевых растворов. Параметры иммунитета у детей исследовали через 1 месяц от начала терапии.

Мы провели оценку влияния разработанной схемы терапии у детей с включением мультипробиотика на иммунологические показатели с помощью метода однофакторного дисперсионного анализа и получили данные, представленные на рис. 2.

Через 1 месяц от начала терапии у детей с острой ЭБВ-инфекцией отмечали, что уровень экспрессии СБ4+-Т-лимфоцитов-хелперов, СБ8+-Т-лимфоцитов (ЦТЛ), СБ7+-Т-лимфоцитов (РсцЯ-маркер), дифференцировочных маркеров активированных лимфоцитов — СБ25+ (1Ь-2Я), СБ45ЯЛ+ (зрелые неиммунные лимфоциты) и СБ95+ (Ба8-лиганд, маркер апоптоза) приблизился к показателям у детей из группы сравнения (р > 0,05). Уровень экспрессии дифференцировочных маркеров остальных ИКК — СБ3+-лимфоцитов (общий пул лимфоцитов за счет как Т-, так и В-лимфоцтитов), СБ16+-клеток (МК-клетки — естественные киллеры), В-лимфоцитов СБ20+ и СБ22+ — оставался повышенным по сравнению с группой сравнения (р < 0,05) (рис. 2). В динамике заболевания на фоне проведенной терапии с включением мультипробиоти-ка у наших пациентов регистрировали следующие изменения: уровень экспрессии дифференцировоч-ного маркера СБ3+-лимфоцитов, отображающий общее количество Т- и В-лимфоцитов, сохранялся повышенным и составил 1,58 ± 0,08 г/л по сравнению с аналогичным показателем при поступлении — 1,53 ± 0,05 г/л (р > 0,05). Уровень экспрессии дифференцировочных маркеров основных клеток, принимающих участие в противовирусной защите, — СБ4+-Т-лимфоцитов-хелперов, СБ7+-Т-лимфоцитов (Бс^Я-маркер), соответствующий выраженной воспалительной реакции как со стороны иммунной системы, так и со стороны всего орга-

низма, снижался в 2 раза по сравнению с этими же показателями при поступлении (р < 0,05). Уровень экспрессии цитотоксических Т-лимфоцитов — СБ8+-Т-лимфоцитов в динамике на фоне терапии повысился и достиг показателя 0,68 ± 0,06 г/л по сравнению с уровнем при поступлении — 0,43 ± 0,03 г/л (р < 0,05) (рис. 2). Уровень экспрессии дифференцировочных маркеров В-лимфоцитов СБ20+ и СБ22+ на фоне проведенной терапии снизился в 2 раза по сравнению с аналогичным уровнем при госпитализации (р < 0,05). Уровень экспрессии натуральных киллеров, принимающих активное участие в противовирусной защите и являющихся предиктором перехода острой ЭБВ-инфекции в хроническую, у исследуемых детей также снизился в 2 раза (р < 0,05) (рис. 2). Уровень экспрессии дифференцировочных маркеров активированных ИКК снизился: СБ25+-лимфоцитов (1Ь-2Я) — в 3 раза, СБ45ЯЛ+-лимфоцитов (зрелые неиммунные лимфоциты) — в 4 раза и СБ95+-лимфоцитов (Ба8-лиганд, маркер апоптоза) — в 5 раз сравнительно с показателем при поступлении в клинику (р < 0,05).

Таким образом, у детей с острой ЭБВ-инфекцией на фоне назначенной терапии с включением муль-типробиотика в динамике заболевания измененные показатели Т- и В-клеточного иммунитета имели выраженную позитивную динамику, свидетельствующую о ликвидации выраженной воспалительной реакции со стороны всего организма и соответствующую клиническому выздоровлению, отсутствию затяжного инфекционного процесса, отсутствию угрозы перехода в хроническую ЭБВИ.

Остановимся более детально на динамике уровня экспрессии дифференцировочных маркеров ИКК, выступающих предикторами перехо-

г/л 6,00-| 5,004,003,002,001,000,00

CD3 CD4 CD7 CD8 CD16 CD20 CD22 CD25 CD45 CD95

■ При поступлении □ Через 1 мес. от начала терапии

■ Группа сравнения

Рисунок 1. Экспрессия дифференцировочных маркеров ИКК у детей, больных острой ЭБВ-инфекцией

Примечания:* — достоверность разницы изучаемых показателей у детей с острой ЭБВ-инфекцией по сравнению с группой сравнения (с референтными значениями).

Рисунок 2. Экспрессия дифференцировочных маркеров ИКК у детей, больных острой ЭБВ-инфекцией, при поступлении и через 1 месяц от начала терапии Примечания: * — достоверность разницы изучаемых показателей у детей с острой ЭБВ-инфекцией через 1 месяц от начала лечения по сравнению с группой сравнения (с референтными значения-

ми);

достоверность разницы изучаемых пока-

зателей у детей с острой ЭБВ-инфекцией через 1 месяц от начала лечения по сравнению с показателями при поступлении.

#

да острой ЭБВ-инфекции в хроническую форму, — CD8+-^ лимфоцитов, естественных киллеров CD16+, CD95+ (Fas-лиганд, маркер апоптоза), В-лимфоцитов CD20+ и CD22+. Уровень экспрессии цитолитических CD8+-Т-лимфоцитов при поступлении в стационар был снижен (0,53 ± 0,03 г/л) по сравнению с показателем у детей из группы сравнения (p < 0,05) (рис. 3А). В динамике заболевания на фоне проведенной терапии их уровень повысился (0,68 ± 0,06 г/л) и достиг значения аналогичного показателя у детей из группы сравнения (p > 0,05) (рис. 3А). Уровень экспрессии СD16+-естественных киллеров у детей с острой ЭБВ-инфекцией при поступлении в стационар был повышен в 3 раза (1,32 ± 0,07 г/л) по сравнению с показателем в группе сравнения (0,45 ± 0,02 г/л) (р < 0,01) (рис. 3Б). На фоне лечения этот показатель снизился в 2 раза (1,02 ± 0,13) (р < 0,05) (рис. 3Б), но еще оставался незначительно повышенным по сравнению с контрольным значением (р < 0,05) (рис. 3). Уровень экспрессии дифференцировочных маркеров В-лимфоцитов при поступлении в стационар был повышен: CD20+ — в 4 раза (2,12 ± 0,30 г/л), CD22+ — в 7 раз (2,38 ± 0,40) по сравнению с показателем у детей из группы сравнения (p < 0,05) (рис. 4А, 4Б).

я»

&©С **

При поступлении

После лечения

На фоне проводимой терапии их уровень снизился в 2 раза (1,02 ± 0,13 г/л и 1,02 ± 0,02 г/л) (р < 0,05) (рис. 4А, 4Б), но еще оставался незначительно повышенным по сравнению с показателем в группе сравнения (0,54 ± 0,06 г/л и 0,34 ± 0,04 г/л) (р < 0,05) (рис. 4).

Уровень экспрессии CD95+-Т-лимфоцитов (Fas-лиганд, маркер апоптоза) у больных с острой ЭБВ-инфекцией при поступлении был резко повышен (5,29 ± 0,50 г/л) и превышел аналогичный показатель в группе сравнения (0,54 ± 0,09 г/л) в 10 раз (р < 0,001). В динамике заболевания его уровень снизился в 5 раз (1,0 ± 0,2 г/л) (р < 0,001), но значения показателя группы сравнения еще не достиг (р < 0,05).

Таким образом, включение мультипробиотика в терапию острой ЭБВ-инфекции улучшает эффективность лечения этого заболевания, имеет выраженную клиническую эффективность, способствует клиническому выздоровлению, препятствует формированию затяжного течения заболевания и переходу в хроническую ЭБВ-инфекцию. Мульти-пробиотик действует на следующие звенья иммунитета: Т- и В-клеточное путем нормализации уровня экспрессии дифференцировочных маркеров основных ИКК, проявляет иммунорегулирующее действие, особенно при активации клеточного иммун-

При поступлении

После лечения

Рисунок 3. А. Уровень экспрессии CD8+-Т-лимфоцитов у детей, больных острой ЭБВ-инфекцией, по данным КЛСМ, в остром периоде болезни и в динамике через 1 месяц от начала лечения. Б. Уровень экспрессии естественных киллеров CD16+ в остром периоде болезни и в динамике через 1 месяц от начала лечения. Методика: метод ИФА с моноклональными антителами, меченными флуоресцеином (CD-маркер — имеет зеленое свечение). Больная Г., 7лет, диагноз «острая ЭБВ-инфекция»

При поступлении После лечения При поступлении После лечения

Рисунок 4. А. Уровень экспрессии В-лимфоцитов CD20+ у детей, больных острой ЭБВ-инфекцией,

по данным КЛСМ, в остром периоде болезни и в динамике через 1 месяц от начала лечения. Б. Уровень экспрессии CD22+-В-лимфоцитов в остром периоде болезни и в динамике через 1 месяц от начала лечения. Методика: метод ИФА с моноклональными антителами, меченными флуоресцеином (CD-маркер — имеет зеленое свечение). Больная Г., 7лет, диагноз «острая ЭБВ-инфекция»

ного ответа, имеет иммуномодулирующий эффект, который особенно выражен при недостаточности клеточного иммунитета.

Список литературы

1. Cohen J.I. Epstein-Barr virus infection //N. Engl. J. Med. — 2000. — 343. — 481-92.

2. Блохина Е.Б. Роль латентной инфекции, вызванной вирусом Эпштейна — Барр, в развитии лимфопролиферативных заболеваний // Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии. — 2003. — Т. 2, № 3. — С. 65-70.

3. Кудин А.П. Эта «безобидная» вирус Эпштейна — Барра инфекция. Часть 1. Характеристика возбудителя. Реакция иммунной системы на вирус // Медицинские новости. — 2006. — № 7. — С. 14-22.

4. Ohga S., Nomura A., Takada H. Immunological aspects of Epstein-Barr virus infection// Crit. Rev. Oncol. Hematol. — 2002. — Vol. 44, № 3. — Р. 203-215.

5. Ikuta K., Satoh Y., Hoshikawa Y. et al. Detection of Enstein-Barr virus in salivas and throat washings in healthy adults and children // Microbes Infect. — 2000. — Vol. 2, № 2. — Р. 115-120.

6. Precopio M.L. et al. Differential kinetics and specificity of EBV — specific CD4+ and CD8+ T cells during primary infection // J. Immunol. — 2003. — Vol. 170, № 5. — P. 2590-2598.

7. Mittrucker H.W., Kaufmann S.H. Mini-review: regulatory T cells and infection: suppression revisited // Eur. J. Immunol. — 2004. — 34. — 306-312.

8. Кудин А.П., Романовская Т.Р., Белевцев М.В. Состояние специфического иммунитета при инфекционном мононуклеозе у детей//Медицинский журнал. — 2007. — № 1. — С. 102-106.

9. Железникова Г.Ф., Васекина Л.И., Мочакова П.Е. и др. Апоптоз и иммунный ответ у детей с острым инфекционным мононуклеозом//Иммунопатология. Аллергология. Инфектоло-гия. — 2000. — № 4. — С. 87-94.

10. Кельцев В.А., Гребенкина Л.И., Петрова Е.В. и др. Функциональное состояние и взаимосвязь иммунной и эндокринной систем у больных Эпштейна — Барра вирусным мононуклеозом // Детские инфекции. — 2005. — № 1. — С. 29-32.

11. Niedobitek G., Agathanggelou A., Herbst H. et al. Epstein-Barr vims (EBV) infection in infectious mononucleosis: vims latency, replication and phenotype of EBV-infected cells // J. Pathol. — 1997. — Vol. 182, № 2. — P. 151-159.

12. Kasahara Y., Yachie A. Cell type specifie infection of Epstein-Barr virus (EBV) in EBV-associated hemophagocytie lymphohistiocy-tosis and chronic active EBV infection// Crit. Rev. Oncjl. Hematol. — 2002. — Vol. 44, № 3. — Р. 283-294.

13. Иванова В.В., Родионова О.В., Железникова Г.Ф. и др. Инфекционный мононуклеоз: клиника, патогенез, новое в диагностике и терапии // Инфекционные болезни. — 2004. — Т. 2, № 4. — С. 5-12.

14. Crawford D.H. Biology and disease associations of Epstein-Barr virus // Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. — 2001. — Vol. 356, № 1408. — Р. 461-473.

15. Zidovec L.S., Vince A., Dakovic R.O. Increased numbers of CD 38 molekules on bright CD8+ T lymphocytes in infectious mononucleosis caused by Epstein-Barr virus infection // Clin. Exp. Immunol. — 2003. — Vol. 133, № 3. — P. 384-390.

16. Новицкий В.В., Уразова О.И., Наследникова И.О. Суб-популяционный состав лимфоцитов периферической крови у детей с инфекционным мононуклеозом // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2002. — № 7. — С. 66-68.

17. Quintanilla-Martinez L., Kumar S., Fend F. et al. Fulminant EBV+ T-cell lymphoproliferative disorder following acute/chronic EBV infection: a distinct clinicopathologic syndrome // Blood. — 2000. — Vol. 96, № 2. — Р. 443-451.

18. Hjalgrim H., Askling J., Sorensen P. et al. Risk of Hodgkin's disease and other cancers after infectious mononucleosis // J. Natl. Cancer Inst. — 2000 Sep. — Vol. 92, № 18. — Р. 1522-1528.

19. Янковский Д.С. Микробная экология человека: современные возможности ее поддержания и восстановления. — К.: Эксперт ЛТД, 2005. — 362 с.

20. Методы обработки медицинской информации: Уч. пособие/ О.П. Минцер, Б.Н. Угаров, В.В. Власов. — К.: Высшая школа, 1991. — 271 с.

Получено 28.11.13 □

Крамарев С.О.1, Виговська О.В.1, Тарад!й Н.М.2

1Нацюнальниймедичний уиверситетIменIО.О. Богомольця, м. Ки!в

2М1жнародний центр астроном1чних I медико-еколопчних дослджень НАНУ, м. Кив

ВПЛИВ МУЛЬТИПРОБЮТИКА НА ПОКАЗНИКИ ¡МУЖТЕТУ ПРИ ЕПШТЕЙНА — БАРР В^УСНМ ¡НФЕКЦМ В Д^ЕЙ

Резюме. У статп наведено результата дослщження iму-нолопчного статусу в 185 дггей, хворих на гостру Епштей-на — Барр вiрусну шфекцш у виглядi шфекцшного моно-нуклеозу, вжом 6—18 ротв i описаш результати л^вання цих дней iз включенням мультипробютика. Детально про-аналiзовано вплив мультипробютика на виявлеш змши в iмунному статуш в дней iз шфекцшним мононуклеозом Епштейна — Барр вiрусноi етюлоги.

Ключовi слова: Епштейна — Барр вiрусна шфекц1я, ш-фекцшний мононуклеоз, iмунiтет, д!ш, мультипробютик, диференцшвальш маркери, iмунокомпетентнi клгшни, CD.

KramarevS.A.1, Vygovskaya O.V.1, TaradiyN.N.2 National Medical University named after A.A. Bogomolets 2International Center for Astronomical, Medical and Ecological Researches of National Academy of Sciences of Ukraine, Kyiv, Ukraine

INFLUENCE OF MULTIPROBIOTIC ON IMMUNOLOGICAL PARAMETERS IN EPSTEIN-BARR VIRUS INFECTION IN CHILDREN

Summary. The paper contains results on immunological status investigation of 185 children aged 6—18 years with acute Epstein-Barr virus infection in the form of infectious mononucleosis; results of these children's treatment with application of multiprobiotic are described. Detailed analysis of the multipro-biotic effect on revealed changes in immune status of children with infectious mononucleosis of Epstein-Barr virus etiology is also performed.

Key words: Epstein-Barr virus infection, infectious mononucleosis, immunity, children, multiprobiotic, differential markers, immunocompetent cells, CD.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.