Влияние МТБЭ на клеточный иммунный ответ мышей Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

128 ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА '3-1 (50) май 2011 г.

ТРИФОНОВА Э.В., САИФУТДИНОВ Р.Г. УДК 615.03: 004.354.5

Казанская государственная медицинская академия, г. Казань МСЧ ОАО «Татнефть», г. Альметьевск, Россия

Влияние МТБЭ на клеточный иммунный ответ мышей

Цель: Оценить влияние МТБЭ на клеточный иммунный ответ мышей.

Материалы и методы: Экспериментальные животные (мыши линии С57В1/6, СВА и Р! (СВАхС57В1) поступали из питомника РАМН «Рапполово», Ленинградская область. Из МТБЭ готовили 0,01%-ный водный раствор. Экспериментальный эмоциональный стресс вызывали скученностью (40 мышей в клетке размером 17x25x8 см) в течение 10 дней. Контрольные животные в течение эксперимента получали ежедневно вну-трижелудочно (в/ж) дистиллированную воду, опытные — МТБЭ в дозе 70 мг/кг Использованы следующие методы исследования влияния на клеточную иммунную систему животных: 1). Определение реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) проводили с использованием в/в иммунизации мышей ЭБ в дозе 2х105 кл. Разрешающую дозу ЭБ (1х108 кл в 0,04 мл физиологического раствора) вводили в подушечку задней лапы на 7-е сутки после иммунизации. Местную воспалительную реакцию учитывали через 24 часа по разнице массы опытной (Ро) и контрольной (Рк) лапок. Индекс реакции (ИР) вычисляли для каждой мыши по формуле:

Ро - Рк ИР =-----------х 100%, [7].

Рк

2). Определение реакции «трансплантат против хозяина» (РТПХ). Ее развитие вызывали введением в подушечку правой задней лапы мышей Р! (СВАхС57В!) подкожно 2х106 кл лимфатических узлов родительского генотипа (СВА). В левую лапу вводили сингенные лимфоциты. На 9-е сутки определяли число клеток в 5 мл гомогената левого (контроль) и правого (опыт) лимфоузла. 3). Фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов мышей оценивали, используя в качестве объекта фагоцитоза опсонизированные ^ЗЭБ. Макрофаги привлекали в брюшную полость раствором гидролизованного крахмала. На 3-4-е сутки внутрибрюшинно (в/б) вводили 0,5 мл 5%-ной взвеси ЭБ. Отмывали взвесь клеток. В окрашенном по Романовскому — Гимзе препарате определяли процент фагоцитирующих клеток. Для определения фагоцитарного индекса (ФИ1) число захваченных ЭБ высчитывали спектрофотометрически по концентрации гемоглобина с использованием калибровочной кривой. Через 3 часа инкубации при 37°С вновь определяли фагоцитарный индекс (ФИ2). Индекс завершенности фагоцитоза (ИЗФ) определяли по формуле:

ФИ., - ФИ2 ИЗФ =--------------х 100 %.

ФИ1

При определении фагоцитарной активности in vivo мышам в/в вводили 25%-ный раствор туши в объеме 0,5 мл затем в течение 15 минут через каждые 3 минуты брали кровь из орбитального синуса (0,02 мл) и вносили в 1 мл 3%-ной уксусной кислоты. После взятия крови животное забивали, определяли вес тела, печени и селезенки. Оптическую плотность гемолизи-рованной крови определяли на СФ-26 при длине волны 610 нм и строили график f(D). Находили точку lg 0' (нулевого времени) и lg 10' (по графику). Высчитывали константу (К) фагоцитоза по формуле:

lg 0' - lg 10'

К =---------------,

10

а затем вычисляли истинный показатель фагоцитоза (а) по формуле:

вес тела

а =----------------------------x К.

вес печени + вес селезенки

4). Активность комплемента определяли методом титрования с использованием для прямого пути активации эритроцитов кролика (ЭК), обработанных гипериммунной антисывороткой морской свинки, а для альтернативного пути активации — ЭК, обработанные раствором иодида калия. Активность выражали в единицах 50% лизиса на мл сыворотки (СН50).

Результаты: Влияние МТБЭ на реакции ГЗТ и РТПХ показало, что при однократном в/б введении вещество не изменяет интенсивности реакций клеточного типа. При 7-дневном в/ж введении у мышей линии С57В1/6, развивающих в 2-2,5 раза более выраженную реакцию ГЗТ, чем мыши линии СВА, МТБЭ в дозе 700 мг/кг подавляет интенсивность реакции. На развитие РТПХ МТБЭ при в/ж введении направленного влияния не оказывал.

Исследование влияния МТБЭ на фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов и клиренс туши показало, что МТБЭ при однократном в/б введении не изменяет ни числа фатоцитирующих клеток в перитонеальном экссудате, ни способности фагоцитов к захвату опсонизированных ЭБ, однако в 1,5-2 раза увеличивает переваривающую способность макрофагов. При в/ж введении МТБЭ в дозе 700 мг/кг увеличивает содержание фагоцитирующих клеток в экссудате, но не изменяет ФИ и ИЗФ. Способность МТБЭ стимулировать завершенность фагоцитоза при в/б введении может быть связана с его местным действием. При в/б и в/ж введении МТБЭ не изменяет интенсивности захвата инертных частиц туши и не влияет на скорость очищения крови.

ТЕРАПИЯ

'3-1 (50) май 2011 г.

ПРАКТИЧЕСКАЯ МЕДИЦИНА 129

МТБЭ не оказывал влияния на активность комплемента сыворотки крови мышей.

Исследования влияния МТБЭ на выраженность иммуно-дефицитного состояния, индуцированного эмоциональным стрессом, показало, что скученность животных в течение 10 дней приводит к подавлению гуморального иммунного ответа (числа АОК и титра ГА), подавлению завершенности фагоцитоза и скорости очищения крови от инертных частиц туши. Все перечисленные нарушения, за исключением последнего, индуцированы стрессом. 10-дневное в/ж введение МТБЭ в дозе 700 мг/кг предотвращает эти нарушения. Таким образом, пероральное введение МТБЭ защищает иммунную систему от депрессивных эффектов эмоционального стресса.

Выводы: 1). МТБЭ при в/б введении не влияет на выраженность реакции ГЗТ, а при 7-дневном введении вовнутрь в дозе 700 мг/кг подавляет развитие ГЗТ у сильно реагирующей линии мышей С57В1/6. 2). МТБЭ не влияет на развитие реакции РТПХ. 3). Выявлена способность стимулировать завершенность фагоцитоза перитонеальных макрофагов при в/б введении в дозах 70 и 700 мг/кг, а при в/ж введении в дозе 700 мг/кг способность увеличивать число фагоцитирующих клеток в перитонеальном экссудате. 4). Эфир не оказывает влияния на скорость очищения крови от частиц туши и активность комплемента сыворотки крови мышей. 5). МТБЭ при 10-дневном в/ж введении в дозе 700 мг/кг предотвращает снижение гуморального иммунного ответа и нарушение функции макрофагов, вызываемые эмоциональным стрессом.

УДК 614.4

ТУПИЦЫН В.П.

Кафедра физического воспитания Нижегородского государственного технического университета им. Р.Е. Алексеева, Россия

Влияние боевых искусств (джиу-джитсу) на состояние здоровья человека

Актуальность: В послании Федеральному собранию от 2006 года президент России В.В. Путин, рассматривая вопросы физической культуры и здравоохранения, отметил: «Мы не можем мириться с тем, что российские женщины живут почти на 10 лет, а мужчины на 16 лет меньше, чем в странах Западной Европы».

Большое количество молодых людей не призывается в ряды Российской армии из-за отклонений в здоровье. В России сложился настоящий культ больных людей. Эти негативные тенденции в стратегическом плане в целом отражаются на экономическом развитии и несут угрозу национальной безопасности страны.

По мнению В.В. Путина, следует направить усилия на профилактику заболеваний, реализовать целый комплекс мер, позволяющих преодолеть эту сложную ситуацию. Результатом этих мер, в частности, должно стать осознание молодым поколением необходимости в здоровом образе жизни, регулярных занятиях физической культурой и спортом.

Цель работы: Давно стало аксиомой: хорошая физическая подготовленность в молодые годы — залог не только здоровья, но и в дальнейшем высокопроизводительного умственного и физического труда, радости жизни, рождения здоровых детей, долголетия и сопутствующих этому многих позитивных явлений. В настоящее время Министерство образования России серьезно обратило внимание на проблемы физического воспитания. Идет разработка президентской программы тестов на физическую подготовленность подрастающего поколения.

Совершенствуется программа дисциплины «Физическая культура», а поскольку боевые искусства (джиу-джитсу) являются составной частью физической культуры, накопленной тысячелетиями, то их история и развитие, несомненно, заслуживают огромного внимания.

Материалы и методы: Боевые искусства Востока (джиу-джитсу) предстают перед человеческом как ни на что не похожий мир, как уникальная самобытная культура. В XX! веке боевые искусства Востока вышли далеко за пределы своего региона. Они могут служить своеобразным уроком истории и примером культурного взаимодействия.

При занятиях Б.И. (джиу-джитсу) помимо общеукрепляющего воздействия на организм происходит специфическое воздействие на многие функциональные системы. Необходимо также отметить комплекс подготовительных упражнений, разработанных исключительно на физиологической основе, присущей различным функциональным группам организма. Происходит последовательная и глубокая проработка суставов. Все это значительно улучшает трофику адаптивных капсул и связочного аппарата и активизирует в них обменные процесс, восстанавливает эластичность хрящевой и мышечной ткани.

Физические нагрузки, получаемые во время занятий, способствуют не только увеличению мышечной массы, но и ведут к активному включению и увеличению работоспособности мышечных групп, более полному использованию их резервной возможности за счет нейрогуморальной мышечной реакции. Присутствующие в Б.И. (джиу-джитсу) эмоционально-психические

ТЕРАПИЯ