CC BY
46
ВЛИЯНИЕ МИКРОКАПСУЛИРОВАННОГО КОМПЛЕКСНОГО ПРЕПАРАТА НА ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКИЙ СТАТУС БЫЧКОВ
О.Б. Сеин, К.А. Толкачёв, Д.В. Трубников, А.А. Кролевец
Аннотация. Приводятся результаты исследования содержания иммуноглобулинов А, G и M у бычков на доращивании после применения комплексного микро-капсулированного препарата изготовленного по оригинальной технологии. Показано, что полученный препарат оказывает выраженное иммуностимулирующие действие. После его применения у животных в крови значительно повышается содержание иммуноглобулинов разных классов. Рассматриваются вопросы по использованию изготовленного комплексного препарата в практике ветеринарной медицины с целью коррекции иммунобиологического статуса у домашних животных.
Ключевые слова: бычки, биологически активный препарат, витамины, иммуноглобулины, иммунобиологический статус, нуклеинат натрия, микрокапсулиро-ванный препарат, пробиотик, селен.
Повышение продуктивности сельскохозяйственных животных в значительной степени связано с обеспечением физиологически адекватных условий их содержания и кормления, при которых наиболее полно реализуется генетически обусловленный продуктивный потенциал. В то же время технологические стрессы и другие неблагоприятные факторы окружающей среды вызывают у животных снижение продуктивности, ослабление защитных сил организма и заболевания различной этиологии.
Известно, что при стрессах у животных возрастает интенсивность биохимических реакций и образование избыточного количества свободных радикалов, происходит нарушение механизмов физиологической анти-оксидантной системы и снижение иммунобиологической реактивности организма. Наиболее часто это наблюдается у молодняка сельскохозяйственных животных в период смены технологических приемов. Поэтому в это время физиологически обоснованно применение биологически активных препаратов обладающих антиоксидантными, адаптогенными и иммуномодулирующими свойствами.
Учитывая вышеизложенное нами был изготовлен биологически активный препарат, особенностью которого являлось то, что в его состав входил комплекс веществ обладающих различной биологической направленностью. В частности, в качестве антиоксидантного компонента был выбран селен. Данный микроэлемент является составной частью глютатионпероксидазы -фермента, способного нейтрализовать действие самых агрессивных свободных радикалов, с которыми не могут справиться другие антиоксиданты. Помимо этого селен обладает иммуномодулирующими свойствами, которые особенно выражено проявляются при комплексном его применении с витамином Е (E. Kolb et al. 1995).
Другой компонент изготовленного препарата -нуклеинат натрия, обладает широким спектром биологической активности. Его действие проявляется в индукции лейкоцитарной реакции, стимуляции гемопо-эза, внутриклеточного метаболизма и нуклеинового обмена. Он активирует фагоцитарную активность макрофагов и продукцию факторов неспецифической резистентности организма, особенно при иммунодефиците.
В состав препарата входит пробиотик Ветом 1.1, который зарекомендовал себя в практике животноводства и ветеринарной медицины как эффективный пробиотический препарат. Его применяют для стимуляции
метаболизма и роста молодняка, профилактики и лечении дисбактериозов и других заболеваний кишечника.
Основной особенностью полученного нами биологически активного препарата являлось то, что комплекс веществ входящих в его состав были подвергнуты мик-рокапсулированию. При этом в качестве оболочки микрокапсул использовалась натрий карбоксиметилцеллю-лоза, а в качестве их ядра - биологически активные вещества.
Оболочка микрокапсул обладает устойчивостью к кислой среде желудка и разрушается в щелочной среде кишечника. Таким образом, капсулированные биологически активные вещества, минуя желудок, непосредственно поступают в кишечник, где, после ряда биохимических превращений, активно всасываются в кровь животных. В данном случае микрокапсулирование имеет большое значение, так как более 30 % пробиотических бактерий при попадании в кислую среду кишечника, как правило погибает.
Безвредность изготовленного препарата была проверена на лабораторных животных. Препарат был маркирован как «ВетСел - 2».
Испытания препарата проводили на бычках принадлежащих ООО «Молочник» Большесолдатского района Курской области. Было сформировано три группы бычков - аналогов 6 - месячного возраста по 10 голов в каждой.
Животным 1 опытной группы скармливали препарат ВетСел - 2 в дозе 50 мг на 1 кг живой массы тела один раз в день в течение 10 дней подряд. Затем препарат скармливали один раз в день каждые 10 дней до окончания эксперимента (18 мес.). Бычки 2 опытной группы получали микрокапсулированный препарат ВетСел, включающий в свой состав пробиотик Ветом 1.1 и селен. Препарат скармливали в той же дозировке и схеме, что и ВетСел - 2. Животные 3 контрольной группы препараты не получали.
Содержались бычки опытных и контрольной группы в одинаковых условиях и получали одинаковый основной рацион составленный с учетом норм ВИЖ.
При постановке на эксперимент (6 мес.), в 12 - и 18
- месячном возрасте у 7 бычков из каждой группы брали кровь утром до кормления с использованием вакуумных систем (ЗАО фирма «Домен»).
Во время лабораторного анализа крови определяли скорость оседания эритроцитов (СОЭ), гематокрит, содержание эритроцитов, лейкоцитов и гемоглобина общепринятыми методами (Клиническая диагностика в ветеринарии. - М., 1985).Концентрацию иммуноглобулинов А, G и М в крови подопытных животных определяли методом простой радиальной иммунодиффузии по
G. Mancini (1965).
Результаты исследований показали, что в период эксперимента все подопытные животные были здоровы, о чем свидетельствует общие клинические гематологические показатели. Так, температура тела (38,0 -38,7 С°), частота пульса (24 - 27 уд/мин), количество дыхательных движений у бычков всех групп находились в пределах физиологических границ. Скорость оседания эритроцитов (0,6 - 1,0 мм/час), гематокритная величина (37,5 - 411%), содержание в крови эритроцитов (6,2 - 7,2 • 101 / л), лейкоцитов (6,5 - 7,0 • 109/ л), гемоглобина (97,0 - 111,7 г/л), также находились в пределах физиологических величин. При этом было отмечено, что в крови бычков получавших препарат ВетСел
- 2 гематокритная величина (40,0 ± 0,27 - 41,5 ± 0,62 %), содержание эритроцитов (7,1 ± 0,16 - 7,2 ± 0,14 •
1012/ л) и гемоглобина (111,7 ± 1,0 - 112,4 ± 1,8 г/л) было достоверно больше, чем у контрольных животных (38,4 ± 0,39 - 39,0 ± 0,21 %; 6,4 ± 0,20 - 6,7 ± 0,14 • 1012/ л; 98,4 ± 0,8 - 100,0 ± 1,1 г/л).
С использованием простой радиальной иммунодиффузии нами было определенно содержание иммуноглобулинов А, G и М в крови подопытных животных. Результаты исследований показали, что концентрация ^ класса А у бычков всех групп до начала эксперимента достоверных различий не имела и находилась в пределах 0,74 ± 0,05 - 0,80 ± 0,03 г/л (рисунок 1).
В 12 мес уровень JgA у бычков получавших препарат ВетСел - 2 увеличился в 1,3 раза. У бычков 2 опытной группы содержание иммуноглобулинов этого класса в это время также повысились в среднем на 0,16 г/, однако данное увеличение по сравнению с контролем являлось статистически недостоверным (Р>0,05). В то же время по сравнению с фоновыми значениями повышения содержания JgA в крови бычков 2 группы имело статистически достоверный характер (Р<0,001). У контрольных животных повышение содержания JgA в 12 мес. было незначительным, в среднем на 0,14 г/л (Р >
0,05).
В 18 - месячном возрасте содержание JgA в крови бычков получавших препарат ВетСел - 2 по сравнению с 12 мес. увеличивалось в среднем на 0,20 г/л, а у бычков 2 опытной группы и у контрольных животных практически оставалось на прежнем уровне.
С 12 13
Возраст, мес:
Ш1 груп па 0:2 групп а 113 к оитрол ьн ая гр у ппа
Рисунок 1 - Содержание иммуноглобулинов А в крови подопытных бычков
є хг 18
Возраст, мес
□ I группа а г гру ппа ИЗ 3 контрольная группа
Рисунок 2 - Содержание иммуноглобулинов G в крови подопытных бычков
Содержание JgG в крови подопытных бычков, относительно других классов, было высоким и в 6 - месячном возрасте находилось в пределах 5,08±0,085,17±0,05г/л (рисунок 2). В 12 мес у бычков 1 опытной группы их концентрация увеличилась до 10,04±0,08 г/л.
У бычков 2 опытной группы содержание JgG также достоверно повысилось (Р<0,001) и составляло 6,83 ±
0,05г/л. Что касается контрольных животных, то в 12 -месячном возрасте JgG, было достоверно меньше (Р>0,05) по сравнению с бычками опытных групп, но достоверно больше (Р<0,01) по сравнению с фоновыми показателями.
В 18 мес. содержании JgG у бычков получивших препарат ВетСел-2 повысилось в среднем на 1,81 г/л, а у бычков 2 опытной группы уменьшилось на 0,14 г/л. В то же время у бычков контрольной группы содержание иммуноглобулинов данного класса несколько увеличилось и составляло 6,52±0,04 г/л, что было достоверно больше (Р<0,001) по сравнению с фоновыми значениями и достоверно (Р<0,001) меньше по сравнению с животными которые получали препараты.
Содержание JgМ в крови бычков всех групп до начала эксперимента составляло 0,48±0,04-0,52±0,02г/л (рисунок 3). В 12 мес. их уровень в крови животных получавших препарат ВетСел-2 значительно повысился достигая 0,85±0,04г/л (Р<0,01). У бычков 2 контрольной группы содержание JgМ в этот возрастной период также увеличилось, однако данное увеличение было статистически недостоверным (Р>0,05).
В 18-месячном возрасте содержание иммуноглобулинов данного класса у бычков 1 опытной группы уменьшилось (0,78 ± 0,05 г/л), в то же время оставалось выше, чем у бычков 2 опытной группы (0,65 ± 0,06 г/л) и у контрольных животных (0,66 ± 0,04 г/л).
2..............................................
1
1.
Возраст, мес
Ш1 гру п п а 0:2 гру ппа 83 3 контрол ьн ш г руп п а
Рисунок 3 - Содержание иммуноглобулинов М в крови подопытных бычков
По - нашему мнению иммуностимулирующие эффекты микрокапсулированного препарата ВетСел - 2 связаны, прежде всего, с нуклеинатом натрия, являющегося специфическим стимулятором иммунной системы организма. При этом нельзя не учитывать иммуностимулирующие свойства пробиотика Ветом 1.1 и селена. Пробиотик создает благоприятную среду в кишечнике, который представляет собой как часть иммунной системы, поскольку значительный объем лимфоидной ткани сосредоточен именно в кишечнике. В настоящее время установлено, что разные штаммы пробиотиков и их продукты жизнедеятельности оказывают различный по степени выраженности иммуномодулирующий эффект. В частности, они могут изменять продукцию цитоников, оказывать влияния на Т-клеточный иммунитет и фагоцитарную активность лейкоцитов.
Микроэлемент селен, входящий в состав препарата, обладает не только антиаксидантными свойствами, но оказывает стимулирующее влияние на гуморальные факторы защиты, повышая бактерицидную и лизоцим-ную активность сыворотки крови.
Помимо вышеизложенного, компоненты препарата ВетСел - 2 хорошо совместимы и дополняют друг друга. Это позволило получить комплексный биологически активный препарат, обладающий выраженным им-
муностимулирующим действием. Препарат ВетСел - 2 можно применять в практике ветеринарной медицины с целью коррекции иммунобиологического статуса и метаболизма у домашних животных разного вида.
Информация об авторах Сеин Олег Борисович, доктор биологических наук, профессор, заведующий кафедрой терапии и акушерства ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА», тел. (4712) 53-15-55.
Толкачев Константин Александрович, аспирант ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА», т. (4712) 53-15-55.
Трубников Денис Владимирович, кандидат биологических наук, доцент, декан факультета ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Курская ГСХА», т. (4712) 53-14-04.
Кролевец Александр Александрович, доктор химических наук, заведующий лабораторией нанопартикулярных биоло-гически-активных соединений, ведущий научный сотрудник Центра доклинических и клинических исследований Национального Исследовательского Университета «Белгородский университет».
