CC BY
78
В целом, анализ экспрессии ММП с одной стороны, дает общее представление об их определенном значении в метастази-ровании опухоли, с другой - указывает, что прямая взаимосвязь между возрастанием экспрессии ММП, прогрессированием опухолевого процесса и метастазированием на данный момент не может считаться самоочевидной или установленной для всех типов опухолей и клинических ситуаций [2].
Литература
1. БеркБ.С. //Кардиология.- 2006.- Т.46.- №9.- С.47-56.
2. Ганусевич И.И. // Онкология.- 2010, том 1, №1, С. 10-16.
3. Захарян А.Л., Захарян Е.А. // Клин.хир.- 2005.- №8.-С.42-44.
4. Лайнен Г.Р. // Биохимия.- 2002.- Т.67.- №1.- С. 107-115.
5. Плеханова О. С., Соломатина М. А., Меньшиков М. Ю. и др. // Кардиология: Научно-практический журнал.- 2006.- Том 46.- №9. - С. 47-56.
6. Потеряева О.Н. Антонов А.Р., Ким Н.О., Некрасова М.Ф.// Фундаментальные и прикладные проблемы медицины и биологии, 2006.- № 3.- С. 40.
7. Протасов М.В., Смагина Л.В., Галибин О.В., Пинаев Г.П., Воронкина И.В. // Цитология, 2008.- Том 50.- №10.- С. 882-886.
8. Рыбко А. Р. Книжник А.В., Каинов Я.А. // Вестник РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН 2008, том 19,№4. с . 16-22
9. Снарская Е.С. // Архив патологии.- 2005.-Е.67, №3.-С. 14-16.
10. Соболева Г. М. Шуршалина А. В., Сухих Г. Т. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины : ежемесячный международный научно-теоретический журнал / РАМН. - 2006.
- Том 141,N 2 . - С. 210-213.
11. Соловьева Н.И. // Биоорганическая химия 1998, том 24, № 4. с . 245-255.
12. Сухих Г. Т. Соболева Г. М., Силантьева Е. С. и др. //
Бюллетень экспериментальной биологии и медицины: ежемесячный международный научно-теоретический журнал / РАМН. -2007. - Том 143 ,N4. -С. 455^57.
13. Трошин И.Ю., Громова О.А. // Кардиология.- 2008. №10, С.14-21.
14. Хасигов П.З., Подобед О.В. //Биохимия, 2001, том 66, вып 2, с. 167-179.
15. Baker E.A., Bergin F.G., Leaper DJ // Mol.Pathol.-2000/- Vol.53,№6.- P307-312.
16. Dass K. , Ahmad A., Azmi A.S. et. al. // Cancer. Treat. Rev.- 2008.- Vol.34. №2.- P 122-136.
17. Dong D.M., Yao M., Liu B., et. al. Association between the -1306C/T polymorphism of matrix metalloproteinases-2 gene and lumbar disc disease in Chines young adults.Eur Spine J 2007;16:1958-1961.
18. Egeblad M., Werb Z. // Nat. Rev. Cancer.- 2002.-Vol.2.№3.- P.161-174.
19. Fu X., Pfrks W.C., Heinecke J.W. // Simin. Cell. Dev. Biol.
- 2008. -Vol.19, N 1. - P. 2-13.
20. Leinonen T.,Pirinen R.,Bohm J. et. al. // His-
tol.Histopathol.-2008.- Vol.23, №6.- P.693-700.
21. Sternficht M.D.,Werb Z. //Annu.Rev. Cell.Dev.Biol.-2001.-Vol.17.- P.463-516.
22. Turco L.// Physiologic redulating medicine.- 2006, №1, P.35-39.
23. Woessner F.J., Nagase H. 2001. Matrix metalloproteinases and TIMPs. New York: Oxsford Univ.Press.223p.
24. Wu Z. S. , Wu Q.,Yang J.H. et al. // Int.J.Cancer.- 2008.-Vol.122, № 9.- P2050-2056.
MATRIX METALLOPROTEINASES, THEIR ROLE IN PHYSIOLOGICAL AND PATHOLOGICAL PROCESSES (REVIEW)
L.N. ROGOVA, N.V. SHESTERNINA, T.V. ZAMECHNIK,
I.A. FASTOVA
Volgograd State Medical University
The article highlights the classification and biological role of matrix metalloproteinases in such pathological processes as morphogenesis, angiogenesis and embryogenesis. The influence of metallo-proteinases in mechanisms of formation and development of nondifferentiated connective tissue dysplasia, endometriosis, wound
process and tumor growth is shown.
Key words: matrix metalloproteinases (MMP), tissue inhibitors of matrix metalloproteinases (TCMP), collagen.
УДК 616-092.9:616.33-002.44:615.272.4
ВЛИЯНИЕ МАГНИЙСОДЕРЖАЩЕЙ КОМПОЗИЦИИ НА МАГНИЕВЫЙ БАЛАНС, ИНТЕНСИВНОСТЬ ПЕРОКСИДАЦИИ И АКТИВНОСТЬ АНТИОКСИДАНТНЫХ ФЕРМЕНТОВ У КРЫС С АЦЕТАТНОЙ ЯЗВОЙ ЖЕЛУДКА
Л.Н. РОГОВА, Н.В. ШЕСТЕРНИНА, В.А. СТАРАВОЙТОВ*
У крыс со сформировавшейся ацетатной язвой желудка в эритроцитах крови из подключичной вены уровень магния значительно снижался, процесс пероксидации шел достаточно активно на фоне уменьшения активности ферментативной антиоксидантной защиты. Под влиянием магнийсодержащей лекарственной композиции площадь язвенного дефекта уменьшалась. В эритроцитах крови из подключичной и еще больше из портальной вены содержание магния увеличивалось, при практически неизменном уровне в плазме. В крови из воротной вены снижалось содержание малонового диальдегида, а из подключичной вены диенового конъюгата при одновременном увеличении активности каталазы и супероксиддисмута-зы в эритроцитарной массе полученной из обоих коллекторов. Ключевые слова: ацетатная язва желудка, магний, малоновый диальдегид, диеновые коньюгаты, каталаза, супероксиддисмутаза.
В нарушении баланса между факторами агрессии и механизмами защиты значимую роль играет гипомагнийгистия как дестабилизатор малых ядерных РНК и причина замедления синтеза структурных белковых молекул [7]. Известна роль магния в механизмах локальной резистентности как активатора и фактора энергообразования, как модулятора активности фермента межклеточного матрикса - гиалуронсинтетазы [8], а также фосфолипазы С -тригерного фактора продукции вторичных мессенджеров [2].
Важным патогенетическим звеном в образовании язвенного дефекта тканей желудочно-кишечного тракта является нарушение равновесия между интенсивностью перекисного окисления липидов (ПОЛ) и активацией ферментов антиоксидантной защиты (АОЗ): каталазы (КА), супероксиддисмутазы (СОД) [9]. Активатором СОД выступает марганец, который гипотетически может быть заменен на магний [1].
Цель исследования - определение влияния магнийсодержащей композиции на содержание магния, первичных и вторичных продуктов ПОЛ, активность ферментов АОЗ в крови у крыс с ацетатной язвой.
Материалы и методы исследования. Эксперименты выполнены на крысах линии Вистар массой 180-230 г. обоего пола, разделенных на четыре экспериментальные группы. Первую группу составили интактные животные. Крысам второй и третьей группы моделировали экспериментальную ацетатную язву (ЭАЯ) под нембуталовым наркозом (40 мг/кг массы тела) по Окабе С. (2005) [10]. При этом крысы третьей группы получали магнийсодержащию лекарственную композицию (МСЛК) на основе полиминерала бишофит per rectum в течение 7 суток (62,5мг/кг/сут в пересчете на Mg2+) после моделирования язвы [4]. Животным четвертой группы (контрольная серия) выполняли те же манипуляции, что во второй и третьей группе, но без нанесения повреждения стенки желудка.
Кровь забирали из подключичной и воротной вены и методом центрифугирования разделяли на плазму и эритроцитарную массу.
Концентрацию магния в эритроцитарной массе определяли спектрофотометрическим методом по реакции с титановым жёлтым. Для определения концентрации магния в гепаринизирован-ной плазме использовали набор фирмы «Лахема» [3].
ПОЛ оценивали по уровню первичных и вторичных продуктов. Уровень диеновых конъюгатов (ДК) определяли спектрофотометрическим методом, малонового диальдегида (МДА) - по реакции с тиобарбитуровой кислотой, а антиоксидантную защиту - по активности КА и СОД. Для определения активности СОД использовали спектрофотометрический метод Костюка В. А. [3].
Результаты исследований обработаны методом вариационной статистики с использованием стандартного пакета анализа с помощью электронных таблиц Excel. Средние величины при
* Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации, Волгоград.400131, пл.Павших Борцов,1
нормальном распределении выражались как М±т, значимость различий оценивали по коэффициенту Стьюдента.
Результаты и их обсуждение. Проведенное исследование показало, что через 7 суток с момента моделирования формируется типичная язва, обычно кратерообразной формы с грануляционным валом, отечностью, гиперемией, а также геморрагиями в слизистой оболочке площадью 30,95±6,7 мм2.
Анализ результатов исследования показывает, что при моделировании ацетатной язвы формируется язвенный дефект с выраженными признаками воспаления, что может быть связано с его индуцированием спиралевидными бактериями, возможно, Helicobacter Pylori [6].
Таблица І
Содержание магния в эритроцитарной массе и плазме крови (ммоль/л) у крыс с ацетатной язвой до и после применения МСЛК (М±т)
Кровь Исходное состояние Контроль Ацетатная язва Ацетатная язва на фоне МСЛК
подключичная вена (эритроцитарная масса) 1,52±0,089 1,8±0,105** 1,32±0,082**а 1,84±0,04*###
воротная вена (эритроцитарная масса) 1,48±0,13 1,65±0,11 1,69±0,105 2,085±0,1**###
подключичная вена (плазма) 0,981±0,015 0,917±0,011* 0,914±0,026** 0,882±0,006***а
воротная вена (плазма) 1,02±0,013 0,884±0,006*** 0,923±0,02*** 0,947±0,016**а
Примечание: по отношению к исходному состоянию: * - р<0,05;
** - р<0,01; *** - р<0,001;
По отношению к контролю: а - р<0,05;
По отношению к ацетатной язве: ### - р<0,001.
В группе животных с ЭАЯ желудка на сроке 7 суток в эритроцитарной массе крови из подключичной вены концентрация магния по сравнению с контролем снижалась на 26% (р<0,05). В то время как в крови воротной вены его уровень практически оставался неизменным (табл. 1).
Содержание магния в плазме крови из подключичной, воротной вены по отношению к контролю значимо не изменялась.
Результаты исследования показали, что формирование язвы сопровождается значительным снижением уровня магния в эритроцитах крови из подключичной вены, что связано, очевидно, с перераспределительными процессами. Работами Л.Н.Роговой [5] установлено, что при острой стрессовой язве в тканях зоны изъязвления идет накопления магния, а при ацетатной язве, имеющей тенденцию к хронизации, содержание магния снижается. Накопление магния, равно как и снижение его концентрации в изъязвленных тканях желудка, может быть фактором его перераспределения между поврежденными тканями и депо «подвижного пула», к коему относятся печень, мышечная ткань и форменные элементы крови [1].
Известно, что подключичная вена собирает кровь преимущественно от мышц плечевого пояса, а мышцы обладают большим сродством к магнию и относятся к тканям, депонирующим магний. В этой связи его концентрация в эритроцитарной массе может снижаться. Дефицит магния влияет на нарушение механизмов локальной резистентности, в частности, на энергообразование и репаративные процессы в язве [7].
Таблица 2
Содержание ДК, МДА и активность КА, СОД в эритроцитарной массе из подключичной и воротной вены у крыс с ацетатной язвой до и после применения МСЛК (М±т)
Показатели Исходное состояние Контроль Ацетатная язва Ацетатная язва на фоне МСЛК
Воротная вена ДК 0,053±0,01 0,033±0,002 0,062±0,015 0,059±0,005
МДА 0,42±0,047 0,59±0,095 0,757±0,09 0,51±0,049 ##
КА 37,3±2,32 36,49±1,92 27,97±1,55 а 61,3±2,39 ###
СОД 25±0,4 17,5±5,1 4,66±0,7 *** ааа 18,11±4,36 ##
1 Подключич-1 ная вена ДК 0,045±0,006 0,03±0,03 * 0,073±0,015 а 0,039±0,004 ##
МДА 0,52±0,05 0,54±0,08 0,71±0,07 0,63±0,079
КА 62,56±2,6 55,7±2,09 35,15±1,27 ааа 65,56±2,57 ###
СОД 19,9±2,3 12,2±3,2 6,46±1,9 *** 28,14±4,85 аа ###
Примечание: По отношению к с исходным состоянием: * - р<0,05; ** - р<0,01; *** - р<0,001;
По отношению к контролю: а - р<0,05; аа - р<0,01; ааа - р<0,001; По отношению к ацетатной язве: ## - р<0,01; ### - р<0,001.
У крыс с ЭАЯ в эритроцитарной массе, полученной из портальной вены, содержание ДК и МДА несколько увеличивалось по отношению к контролю, однако эти изменения не значимы. При этом активность КА снижалась на 23,35% (р<0,05), СОД - на 73,14% (р<0,001). Одновременно в плазме крови из подключичной вены отмечалось увеличение содержания ДК на 170% (р<0,05), МДА- на 31% (р<0,1). Активность КА уменьшалась на 36,8% (р<0,001), СОД - на 47,5 (р<0,1) (табл. 2).
Анализ полученных результатов свидетельствует, что к моменту завершения формирования ацетатной язвы процесс перок-сидации идет достаточно активно на фоне снижения ферментативной АОЗ.
Более значимые увеличения интенсивности ПОЛ в эритро-цитарной массе крови из подключичной вены, в сравнении с портальной веной - региональной к зоне повреждения, свидетельствует о ведущей роли системных механизмов в регулировании пероксидации, о взаимовлиянии крови и тканей на интенсивность ПОЛ в них.
После применения МСЛК площадь изъязвления уменьшалась с 30,95±6,7 мм2 до 4,6±1,02 мм2 (р<0,001), увеличилось количество грануляционной ткани в дне язвы, глубина язвенного дефекта и сосудистый компонент в дне язвы при этом значимо не изменялись.
На фоне применения МСЛК в крови из подключичной и портальной вены уровень магния увеличивался на 39,3% (р<0,001) и 18,94% (р<0,001), соответственно. В то время как в плазме крови полученных из изучаемых регионов значительных различий не выявлено.
Анализ результатов исследования показывает, что в условиях острофазного ответа тканей желудочно-кишечного тракта, развивающегося на фоне усиления поступления магния из просвета кишки, нормализует его содержание в эритроцитарной массе крови из подключичной вены. Некоторое превышение контрольных значений в эритроцитах портальной крови связано, вероятно, с тем, что, и до применения композиции и после, ткани желудочнокишечного тракта недостаточно интенсивно накапливают магний, крайне необходимый для усиления пролиферации [11].
Влияет МСЛК и на интенсивность пероксидации. В крови из воротной вены содержание МДА снижалось на 32,6% (р<0,01) и из подключичной вены ДК - на 46,57% (р<0,01).
При этом в эритроцитарной массе из воротной вены активность КА и СОД увеличивалась на 119% (р<0,01) и
74,25% (р<0,001), в подключичном коллекторе - на 86,5% (р<0,01) и на 77,8% (р<0,001), соответственно.
Таким образом МСЛК гасит интенсивность пероксидации, что проявляется снижением концентрации в портальной крови МДА, а в подключичной - ДК, а также в крови из обоих коллекторов значительно возрастает активность КА и СОД. Активатором СОД может выступать магний, содержание которого в крови значительно увеличивается.
Вывод: под влиянием магнийсодержащей композиции
уменьшается площадь язвенного дефекта, увеличивается содержание внутриэритроцитарного магния, активность ферментов антиок-сидантной защиты и снижается интенсивность перекисного окисления липидов в большей степени в крови из портальной вены.
Литература
1. Авцын А.П. Микроэлементозы человека: этиология классификация, органопатология.- М.: Медицина, 1991.- С. 267-188.
2. Багель К.О.,. Рогова ЛН // Вестник Российского университета Дружбы народов.- 2009.- .№4.- С. 328-331.
3. Камышников В.С. Справочник по клинико-
биохимическим исследованиям лабораторной диагностике.- М.: МЕДпресс-информ, 2004.- С. 579-591.
4. Рогов ВА. Определение стабильности суппозиториев с би-шофитом. Дипломная работа / В. А. Рогов.- Волгоград, 2007.- 95 с.
5. Рогова Л.Н. // Микро-элементы в медицине.- 2001.- Т.2.-№ 3.- С.56-59.
6. Старавойтов ВА. Роль плазмолеммного. ядерного регуляторов пролиферации и магния в механизмах формирования и развития язвенного дефекта желудка: автореф. дис. ... канд. мед. наук., Ростов-на/Д., 2009.
7. Старавойтов В А., Рогова Л.Н., Стаценко М.Е. // Вестник Российского университета дружбы народов (серия медицина), 2008.- № 7.- С. 532-535.
8. Трошин И.Ю., Громова О.А. // Кардиология, 2008.-№10.- С. 14-21.
9. Шестернина Н.В., Рогова Л.Н. // Гастроэнтерологии Санкт-Петербурга, 2010.- №4.- С.
10. Okabe S. // Biol.pharm.bull, 2005.- Vol.28, №8.- P.1321-
1341.
11. Rubin H. //Magnesium research, 2005.- Vol.18, 4.- P. 268-74.
THE INFLUENCE OF THE MAGNESIUM-CONTAINING COMPOSITION ON MAGNESIUM BALANCE, INTENSITY PEROXIDATION AND ACTIVITY OF ANTIOXIDANT ENZYMES IN RATS WITH ACID-INDUCED GASTRIC ULCER
L.N. ROGOVA, N.V. SHESTERNINA, V.A. STARAVOYTOV
Volgograd State Medical University, Chair of Pathological Physiology
In rats with generated acid-induced gastric ulcer the magnesium level is significantly decreased in red blood cells from subclavian vein; the process of lipid peroxidation was rather active against the background of the antioxidant activity reduction. The area of the ulcerative defect decreased under the influence of the Mg2+-containing composition. Magnesium content increased in red blood cells from the subclavian vein and still more from the portal vein, whereas its plasma level was practically invariable. Malon dialdehyde content in blood from the portal vein and diene conjugate content in blood from the subclavian vein reduced at simultaneous increase of catalase and superoxide dismutase activity in the mass of red blood cells obtained from both collectors.
Key words: acetic gastric ulcer, magnesium, malon dialdehyde, diene conjugate, сatalase, superoxide dismutase.
УДК 611.771-08+616-001.4.001.6
ВОССТАНОВИТЕЛЬНЫЕ ПРОЦЕССЫ В ЭПИДЕРМИСЕ ПРИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ РАЗЛИЧНЫХ МЕТОДОВ ЛЕЧЕНИЯ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ РАН МЯГКИХ ТКАНЕЙ
Н.Т. АЛЕКСЕЕВА, А.А. ГЛУХОВ, А.П. ОСТРОУШКО*
С помощью морфологических методик изучены процессы заживления экспериментальных гнойных ран на фоне применения гидроимпульсной санации и тромбоцитарного концентрата. Анализ динамики реакционноспособных SH-групп в пределах росткового слоя эпидермиса в области раны выявил наличие сложной нелинейной зависимости данного показателя от сроков течения раневого процесса. Наибольшая активность восстановительных процессов в ранах наблюдалась на фоне комбинированного применения гидроимпульсной санации и тромбоцитарного концентрата.
Ключевые слова: эпидермис, раны мягких тканей, гидроимпульсная санация, тромбоцитарный концентрат.
Значительный интерес к проблеме заживления ран связан с наличием разнообразных повреждающих факторов в окружающей среде, что делает востребованным изучение механизмов регенерации с целью коррекции восстановительных процессов с помощью разнообразных методов региональной терапии.
Репаративные реакции в эпидермисе определяют не только компенсаторно-приспособительные особенности кожи в период заживления, но также влияют на исход раневого процесса и полноту восстановления структуры кожи [3]. Заживление раневого дефекта обуславливается восстановлением соединительной ткани и регенерацией эпидермиса, а корреляционные изменения этих процессов зависят от адекватности применяемых воздействий при лечении ран мягких тканей [4,6].
Разработка эффективных методов региональной терапии, позволяющих влиять на составляющие кожи избирательно, в зависимости от фазы раневого процесса, связаны с большими трудностями, так как необходимо обеспечить взаимодействие всех клеточных компонентов, участвующих в регенерации. Следует учитывать, что при септических ранах имеются морфологические особенности заживления, связанные с выраженностью воспалительной реакции, поэтому применяемые методы воздействия неодинаково результативны для асептических и гнойных ран, и требуют дифференцированного подхода в выборе региональной терапии для купирования воспаления и стимуляции
* Воронежская государственная медицинская академия им. Н.Н. Бурденко, кафедра нормальной анатомии человека, 394036, г. Воронеж, ул. Студенческая, 10; тел.: +7 (473) 265-37-22.
пролиферации.
Предыдущими исследованиями установлено, что применение гидроимпульсной санации (ГИС) при лечении ран с минимальным некротическим компонентом нецелесообразно из-за повышенной травматизации тканей; с другой стороны, использование тромбоцитарного концентрата (ТК) при лечении асептических ран оказывает стимулирующее воздействие на регенерацию эпидермиса, что проявляется не только сокращением сроков реэпителизации раневого дефекта, но и ускорением стратификации, характерной для неповрежденного эпителия [1].
Цель исследования - экспериментально-морфологическое изучение процессов заживления гнойных ран в динамике на фоне применения ГИС и ТК.
Материалы и методы исследования. Эксперимент поставлен на 140 белых крысах. Животные разделены на контрольную и три опытные группы, по 7 животных в каждой. Всем животным под наркозом на выбритом от шерсти участке наружной поверхности средней трети бедра производили стандартный линейный разрез 1,0х0,5 см. Лечение ран у животных контрольной группы заключалось в ежедневной однократной смене асептической повязки. В опытных группах осуществлялось моделирование гнойной раны по следующей методике. После стандартного линейного разреза края раны и дно раздавливали зажимом Кохе-ра. В рану вносили марлевый тампон массой около 0,5 г со взвесью суточной культуры Staphilococcus aureus в дозе 1010 микробных тел в 1 мл 0,9% раствора хлорида натрия. После этого, на кожу накладывали адаптационные швы шелковой нитью. Рану закрывали асептической повязкой. Для моделирования гнойных ран применяли один и тот же штамм стафилококка. Лечение ран начинали на 3 сутки от начала опыта, т.е. когда появлялись характерные признаки гнойного воспаления, с предварительного проведения хирургической обработки.
В первой опытной группе лечение ран не приводилось. Во второй опытной группе при лечении ран применяли ТК с концентрацией тромбоцитов не менее 1 млн/мкл. Для нанесения ТК применяли оригинальное устройство для нанесения гелеобразных лекарственных средств «УНГЛС-01». В третьей опытной группе рану обрабатывали ГИС изотоническим раствором хлорида натрия. Для осуществления ГИС использовали модифицированный аппарат «УГОР-1М». В четвертой опытной группе после проведения хирургической обработки на рану вначале воздействовали гидроимпульсным потоком изотонического раствора хлорида натрия, а затем наносили ТК.
На 1, 3, 5 и 7 сутки животных выводили из эксперимента и проводили забор материала для морфологического исследования. Полученные фрагменты тканей фиксировали в 10% нейтральном формалине. Гистологические исследования проводились на парафиновых срезах толщиной 6 мкм, окрашенных гематоксилин-эозином.
Для оценки процессов созревания эпидермиса проводили выявление сульфгидрильных групп феррицианидным методом, так как с активностью SH-группы связаны основные процессы жизнедеятельности - проницаемость мембран, энергетический обмен, формирование вторичной и третичной структур белковых молекул, процессы кератинизации. Наряду с визуальной топохи-мической характеристикой проводилась количественная цитофо-тометрическая оценка содержания SH-групп в клетках росткового слоя эпидермиса в области раневого дефекта с помощью анализатора изображений «Видеотест».
Для анализа данных использовались статистические пакеты
Statistica 6.0 фирмы StatSoft и S-PLUS 7.0 PROFESSIONAL фирмы MathSoft. Для статистической обработки данных применяли одномерный и многомерный дисперсионный анализ, как наиболее адекватный с математической точки зрения, исходя из ограниченных объемов анализируемых экспериментальных групп животных (n<30) [7,8]. Использовались дисперсионный анализ (ANOVA и MANOVA) с поправкой Даннетта, критерий Шеффе (как более строгий) и двухсторонний критерий Стьюдента с поправкой Нъюмана-Кейлса. В качестве критериальной статистики для обеспечения большей точности оценок использовалась верхняя область 5% F-распределения, как более жесткая по сравнению с t-распределением.
Необходимость использования дисперсионного анализа обусловлена тем, что при применении традиционного для биомедицинских работ критерия Стьюдента (t-критерий) при попарном сравнении выборок возникает прогрессивно нарастающая ошиб-
