CC BY
16
з'являються клоним з ультраструктурними ознаками функционально! напруги, спрямованих на пiдтримку секреторно! функцп яечка. Центральна депривацiя синтезу тестостерону викликае розвиток оксидативного стресу в Ым'яниках, знижуе активнiсть арпназного шляху метаболiзму L-аргiнiну i змшюе джерело продукцп NO з конституцшних iзоформ NO-синтази на iндуцибельну. Виявлет порушення метаболiчноí i функционально! активност цих клiтин i призводять до порушень сперматогенезу.
Ключовi слова: Ым'яники, штерстищальт ендокриноцити, сустентоцити, NO-синтаза, iNOS, cNOS, L-арпнш, супероксиддисмутаза, NF-kB-COX2, щури.
Стаття надшшла 24.05.2019 р.
появляются клетки с ультраструктурными признакам функционального напряжения, направленными на поддержку секреторной функции яичка. Центральная депривация синтеза тестостерона вызывает развитие оксидативного стресса в семенниках, снижает активность аргиназного пути метаболизма Ь-аргинина и меняет источник продукции N0 с конститутивных изоформ N0-синтазы на индуцибельную. Выявленные нарушения метаболической и функциональной активности этих клеток и приводят к нарушениям сперматогенеза.
Ключевые слова: семенники, интерстициальные эндокриноциты, сустентоциты, N0-синтаза, iN0S, cN0S, Ь-аргинин, супероксиддисмутаза, №-кБ-С0Х2, крысы.
Рецензент Гаврилюк А.О.
DOI 10.26724/2079-8334-2019-4-70-233-236
УДК 616.37-091.8-06:616.379-008.64-085.322:615.349.7
1.1. Фсшсмко. С.М. Марчишим. К.С. Волков. О.П. Аи.фшипи. Н.1. Ярема l rpiioni. и.ськмп iiaiiioiin. и.ммм че.шчним унпверсмич i\ieiii 1.Я. I орбачеви.кшо МО{
У крмТми. lepiioiii.ii.
ВПЛИВ Л1ОФ1Л1ЗОВАНОГО ЕКСТРАКТУ З ТРАВИ ХАМЕР1Ю ВУЗЬКОЛИСТОГО НА ПСТОЛОПЧНИЙ СТАН ПЕЧ1НКИ ЩУР1В ЗА УМОВ ГОСТРОГО ТОКСИЧНОГО
УРАЖЕННЯ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОМ
e-mail: svitlanafarm@ukr.net
У дослiдах на бших щурах дослiджена гiстологiчна структура печшки за умов гострого токсичного ураження тсля введення екстракту хамерш та препарату порiвняння «Силiбiнiну». Виявлено, що дослiджуваний екстракт мае виразний захисний вплив на мкроскотчну будову печшки. Одержат морфолопчт данi засвщчили, що екстракт хамерiю суттево зменшуе пошкоджуючу дiю тетрахлорметану та сприяе активному вщновленню паренхiми печiнки, мае кращий позитивний ефект порiвняно з препаратом порiвняння «Силiбiнiн». Позитивний вплив дослщжуваного засобу проявляеться активацiею регенераторних процеЫв, що покращуе структурну оргашзащю печiнки тварин пiсля гострого токсичного ураження тетрахлорметаном.
Ключовi слова: гiстологiчне дослiдження, печiнка, експериментальний токсичний гепатит, тетрахлорметан, люфшзований екстракт трави xaMepiro.
Робота е фрагментом НДР «Фармакологiчнi та фармакогенетичш аспекты протекторного впливу iмунобiологiчних препаратiв, ентеросорбентiв, речовин природного та синтетичного походження за рiзних патологiчних статв», № державноi реестраци 0116U004148.
Печшка - один ¡з провщних оргашв регуляцп вуглеводного та лшщного обмшу, депо глшогену, мюце синтезу лшопроте!шв дуже низько! щшьносп. Близько 20 млн. х1м1чних реакцш щохвилини вщбуваеться в цьому оргаш [3]. Порушення обмшу речовин обов'язково пов'язаш з1 змшами структури i функцш печшки, тому пошук та дослщження засоб1в з гепатопротекторною активнютю е важливим завданням сучасно! експериментально! та клшчно! медицини [5]. Сьогодш одним ¡з джерел одержання препарат1в з гепатопоротекторною д1ею е лшарсью рослини. Вони мають ряд переваг перед синтетичними, тому що пор1вняно легко переносяться оргашзмом, не викликають ютотних поб1чних ефекпв нав1ть при тривалому !х застосуванш. Кр1м того, лшування рослинними засобами е бшьш доступним, що мае важливе значення при хрошчних захворюваннях.
Хамерш вузьколистий (Chamerion angustifolium L.) - рослина роду 1ван-чай (Chamerion), здавна використовуеться у народнш медициш для лшування мпреш, головного болю, безсоння, анемп, виразково! хвороби шлунка та дванадцятипало! кишки, гастриту, кол1ту, як протипухлинний i жовчогшний зас1б; зовшшньо - для лшування та швидшого загоювання ран та опшв [7]. З огляду на те, що люфшзований екстракт з трави хамер1ю (ЛЕТХ) мютить загальнов1дом1 за антиоксидантними властивостями фенольш сполуки (флавонощи, пдроксикоричш кислоти, дубильш речовини) [9], доцшьним було дослщити гепатопротекторну активнють даного засобу.
Метою роботи було вивчити коригуючий вплив ЛЕТХ на мшроскошчну будову паренх1ми печшки та пор1вняти його ефективнють i3 д1ею референс-препарату «Ситбшшу» за умов експериментального токсичного ураження печiнки.
© Г.1. Фещенко, С.М. Марчишин, 2019 233
Матер1ал i методи дослщження.
Гепатопротекторш властивост ЛЕТХ вивчали на моделi гострого токсичного ураження печiнки тетрахлор-метаном [2]. Дослiдження проведено на 28 нелшйних бiлих щурах самцях масою 235-290 г (iнтактний контроль -(280±12) г; контрольна патолопя (КП) - (246±18) г; КП+ЛЕТХ - (284±10) г; КП+«С™бЫн» - (279±11) г). Експерименти проводили в^повщно до правил «Свропейсько! конвенцп по захисту хребетних тварин, яких використовують для експерименталь-них та наукових щлей» [8]. Рандомiзацiю тддослщних тварин проводили методом випадково! вибiрки. Гострий токсичний гепатит викликали шляхом введення 50 % олiйного розчину тетрахлорметану (ТХМ) щурам внутрiшньошлунково в дозi 0,7 мл/100 г маси тша одноразово. Препаратом порiвняння
Рис. 1. А - фрагмент печшки щура штактно! групи. Характерне радiальне розмiщення тяж1в гепатоцит1в (1). Б - печшка шддостдно1" тварини июля введення тетрахлорметану. Осередок некрозу та макровези^лярно1' жировоí дистрофií гепатоцит1в, помрна запальна реакцiя (1); нерiвномiрне повно^в'я гемокапiлярiв та судин портального тракту (2). В - фрагмент печшки щура тсля введення тетрахлоретану. Нерiвномiрне розширення та повнокрiв'я гемокапiлярiв (1), сладж еритроцит1в. Забарвлення гематоксилiном-еозином. Х 200.
було обрано еталонний гепатопротектор рослинного походження тд торговою маркою «Сил1бшш» (виробництва ООО «Фармацевтическая компания «Здоров'я», м. Харк1в, Украíна), який мютить екстракт плод1в розторопш1 плямистоЗи Шматочки печшки забирали на 7 добу експеримента, фшсували у 10 % розчиш формалшу, тсля стандартноí процедури зневоднення у спиртах зростаючоí концентрацп заливали у парафш, блоки р1зали на санному мшротом^ отримаш зр1зи розмщували на предметш скельця та забарвлювали гематоксилшом i еозином зпдно загальноприйнято1* методики [1]. Мшропрепарати вивчали за допомогою свiтлового мшроскопа Granum та документували цифровою вщеокамерою Granum DCM 310. Фотознiмки обробляли на комп'ютерi Pentium 2,4GHz за допомогою програми Toup View.
Результата дослщження та i'x обговорення. Мiкроскопiчнi дослщ-ження гiстопрепаратiв печiнки щурiв групи iнтактного контролю показали типову для цих тварин структурну оргашзащю органа [4]. У тварин, яким вводили ТХМ, структура ne4iHKH значно порушена. Пошкоджен дшян-кн локaлiзувaлися як у центро-лобулярних, так i в перипортальних зонах часточок i були представленi ознаками некрозу, жирово1* макро-везикулярно1* дистрофií та ознаками циркуляторних розладiв (рис. 1). При цьому у тварин у межах групи нашть на одному i тому ж мiкропрепаратi спостер^али не тiльки комбiнацií цих змш, але i, не рiдко, виразну перевагу якоюь ознаки. Як правило, у деструктивно змшених дiлянках мала мюце рiзна за виразнiстю запальна реакщя.
Введення ЛЕТХ спрняло кращш збeрeжeностi структурн печш-
Рис. 2. А - фрагмент печшки щура, якому вводили екстракт хамер1ю. Вщсутнють некрозу та жирово! дистрофп гепатоцит^в (1), багато гепатоцит1в у мгтотичному подiлi (2), клiтини з гшертрофованими ядрами (3). Б -фрагмент печшки щура, якому вводили екстракт хамерго. Помiрна за площею д^нка некрозу центролобулярно (1), повнокрiв'я синусо!дних гемокапiлярiв (2), збереження типово! радiальноí спрямованост тяж1в гепатоцит1в поза зоною некрозу (3). Забарвлення гематоксилшом-еозином. Х 200.
ки у бiльшостi щурiв: у них були вщсутш як некротичнi змiни у найбшьш вразливих зонах часточок, так i жирова дистрофiя гепатоцитiв, запальна к^тинна реакцiя, виразно менше були виражеш судиннi розлади, збереженою була типова архгтектошка паренхiми. Лише в дшянках трiад виявлялась лейкоцитарна iнфiльтрацiя. Спостер^алась активацiя процесiв регенерацií - наявш
численш м^ози гепатоципв, мшроскошчно виявлено збшьшення кiлькостi двоядерних клiтин, а також появу численних гепатоцитiв iз гшертрофованими ядрами та збiльшенням розмiрiв ядерець в них [5], що е морфолопчним свiдченням посилення процесiв бшкового синтезу (рис. 2 А). На окремих дiлянках гiстопрепаратiв виявили нечислент дiлянки некрозу гепатоцитiв центролобулярно,
але площа цих зон суттево поступалась контрольнш патологи. Гемокапiляри були ви-разно повнокровнi, наявнi окремi дiапедезнi крововиливи. Бiльшiсть же д^нок часточок мали нормальну пстолопчну
(рис. 2 Б).
Шсля введення препарату порiвняння "Сишбшш» вияв-ленi вогнища некрозу рiзноl виразност як у цетролобуляр-нiй, так i в перипортальнiй зонах часточок iз бiльше чи менш вираженою клiтинною iнфiльтрацiею, що замiщуе пошкоджеш гепатоцити (рис. 3 А, Б). Практично у вах випад-
Рис. 3. А - фрагмент печшки щура, якому вводили «Ситбшш». Осередок некрозу перипортально! зони часточки (1), запальна реакщя, нер1вном1рне розширення та повнокр1в'я синусо!дних гемокашляр1в (2). Б - фрагмент печшки щура, якому вводили «Сил1бшш». Др1бш вогнища некрозу центролобулярно (1) ¡з замщенням пошкоджених ках зберiгалися ознаки цирку-гепатоциив щшьною круглоклгтинною шфшьтращею (2), нормальний стан паренх1ми поза д1лянками некрозу. Забарвлення гематоксилшом-еозином. Х 200.
ляторних розладiв у виглядi нерiвномiрно розширених пов-нокровних синусо!дних кашля-рiв зi сладжем еритроцитiв у !х просвiтах, повнокровними су-динами венозного типу, дiапе-
[6]. некрозу
гiстоархiтектонiка паренх1ми органа була не змiненою. Виявляли помiтнi ознаки регенераторних процесiв у виг-лядi гiпертрофованих ядер кштин, а поблизу д1лянок некрозу часто були наявш гепатоцити у сташ мшэзу (рис. 4 А). Пстолопчно у печiнцi частини тварин помггних змiн у мiкроскопiчнiй будовi парен-х1ми органа не спостерiгали
В цшому наш1 резуль-тати узгоджуються з даними, отриманими шшими дослщни-
Рис. 4. А - фрагмент печшки щура, якому вводили «Ситбшш». Поблизу вогнища некрозу (1) видно виразну гшертрофто ядер гепатоципв (2), ознаки под1лу (3); д1апедезш (рис. 4 Б). крововиливи Забарвлення гематоксилшом-еозином. Х 200. Б - фрагмент печшки щура, якому вводили «Сил1бшш». Збережене балкове розташування гепатоци™ ¡з нормохромними ядрами (1). Пом1рне кровонаповнення судин (2). Забарвлення гематоксилшом-еозином. Х 250.
ками [2, 5, 6, 7]. Порушення обм1ну речовин обов'язково призводять до змш у структур! та до порушення функцш печшки, тому важливим завданням е пошук та дослщження засоб1в з гепатопротекторною активнютю у експериментальнш та ктшчнш медициш [5]. Хамерш вузьколистий (Chamerion angustifolium L.) використовуеться у народнш медициш для л1кування цшого ряду захворювань, зокрема виразково! хвороби шлунка та дванадцятипало! кишки, гастриту, кол1ту, як протипухлинний i жовчогшний зас1б [7]. Люфшзований екстракт трави хамерш (ЛЕТХ) мiстить фенольнi сполуки (флавоно!ди, гiдроксикоричнi кислоти, дубильнi речовини) вiдомi сво!ми антиоксидантними властивостями [9]. Гепатопротекторш властивостi ЛЕТХ вивчали на моделi гострого токсичного ураження печiнки тетрахлорметаном [2]. Пiсля введення препарату порiвняння
"Сктбшш» виявлеш вогнища некрозу pi3H0Ï виразносп як у цетролобулярнiй, так i в перипортальнiй зонах часточок i3 бiльше чи менш вираженою кттинною iнфiльтрацieю, що замiщуe пошкодженi гепатоцити [4, 6]. Пюля застосування хамерда вузьколистого спостерiгалася активацiя процесiв регенераци - численнi мiтози гепатоцитiв, збшьшення кiлькостi двоядерних клiтин, поява численних гепатоцитiв i3 гiпертрофованими ядрами та збшьшенням розмiрiв ядерець в них [5], що е морфологiчним свщченням посилення процесiв бiлкового синтезу. Мшроскошчш дослiдження гiстопрепаратiв печiнки щурiв у груш штактного контролю показали типову для цих тварин структурну оргашзащю печiнки [4].
11ис> мок
Пстолопчно встановлено, що лiофiлiзований екстракт з трави хамерда вузьколистого мае виразний гепатопротекторний ефект на моделi гострого токсичного ураження печшки тетрахлорметаном. Позитивний вплив дослщжуваного засобу проявляеться активащею регенераторних процесiв, що покращуе структурну органiзацiю печiнки тварин тсля гострого токсичного ураження тетрахлорметаном. Порiвняльна оцiнка ступеня структурних змiн печшки рiзних груп щурiв показала, що за виразнютю коригуючого впливу люфшзований екстракт з трави хамерiю вузьколистого на данш моделi патологiï переважае референс-препарат ^^¡бшн».
Перспективи подалъших дождженъ полягають у позитивному ефектi впливу лiофiлiзованого екстракту з трави хамерЮ вузьколистого на пристосувалъно-компенсаторт змши компонентiв печшково'1 mpe^iM^ Отже, дощлъно продовжити вивчення комбтованого застосування даного екстракту з шшими чинниками рослинного походження.
Список .Ш1|>;||>|>11
1. Goralskyi LP, Xomych VT, Kononskyi OI. Osnovy histolohichnoyi tekhniky i morfofunktsionalni metody doslidzhen u normi ta pry patologiyi. Zhytomyr; 2011. 288 s. [in Ukrainian]
2. Drohovoz SM, Hubskyi YuI, Skakun MP, Kovalenko VM, Derymedvid LV. Eksperymentalne vyvchennya zhovchohinnoyi, kholespazmolitychnoyi, kholelitiaznoyi ta hepatoprotektornoyi aktyvnosti novykh likarskykh zasobiv. V: Stefanov OV, redaktor. Doklinichni doslidzhennya likarskykh zasobiv (metodychni rekomendatsiyi). Kyiv: Avicena; 2001. 334-51. [in Ukrainian]
3. Kolman Ya, Rem K-G, redaktory. Naglyadnaya biokhimiya. Moskva; 2009. 469 s. [in Russian]
4.Marchyshyn SM, Savych AO, Andriyishyn OP. Vplyv zboru antydiabetychnoho na histologichnyi stan pechinky shhuriv za umov modelyuvannya tsukrovoho diabetu II typu. Farmakolohiya ta likarska toksykolohiya. 2016; 3(49):66-72. [in Ukrainian]
5. Okovityi SV, redaktor. Gepatoprotektory. Moskva: GEOTAR-Media; 2010. 28-36. [in Russian]
6.Tovstukha YeS. Zoloti retsepty ukrayinskoyi narodnoyi medytsyny. Kyiv: KM Publishing; 2010. 335-6. [in Ukrainian]
7. Osyodlo HV, Fedorova OO. Kombinovanyi zakhyst pechinky osnova suchasnoyi hepatolohiyi. Ratsionalna farmakoterapiya. 2016. 2 (39): 45-52. [in Ukrainian]
8. European convention for the protection of vertebrale animals used for experimental and other scientific purposes. Council of Europe, Strasburg: 1986. EST. 123. 53 p.
9. Feshchenko H, Oleshchuk O, Lukanyuk M, Feshchenko BM. Investigation of phenolic compounds content in Chamerion angustifolium L. herb freeze-dried extract. The Pharma Innovation Journal. 2017; 6(3):40-3.
IY(|k|>iiiii
ВЛИЯНИЕ ЛИОФИЛИЗИЗИРОВАННОГО ЭКСТРАКТА ХАМЕРИЯ УЗКОЛИСТНОГО НА ГИСТОЛОГИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ ПЕЧЕНИ КРЫС В УСЛОВИЯХ ОСТРОГО ТОКСИЧЕСКОГО ПОРАЖЕНИЯ ТЕТРАХЛОРМЕТАНОМ Фещенко Г.И., Марчишин С.М., Волков К. С., Андриишин А.П., Ярема Н.И.
В опытах на белых крысах исследована гистологическая структура печени в условиях острого токсического поражения после введения экстракта хамерия и препарата сравнения «Силибинин». Выявлено, что исследуемый экстракт оказывает выразительное защитное влияние на микроструктуру печени. Полученные морфологические данные засвидетельствовали, что экстракт хамерия существенно уменьшает повреждающее действие тетрахлорметана и содействует активному восстановлению паренхимы печени, оказывает лучший положительный эффект чем препарат сравнения «Силибинин». Положительное влияние исследуемого средства проявляется активацией регенераторных процессов, улучшает структурную организацию печени животных после острого токсического поражения тетрахлорметаном.
Ключевые слова: гистологическое исследование, печень, экспериментальный токсический гепатит, тетрахлор-метан, лиофилизированный экстракт травы хамерия.
Стаття надшшла 16.02.2019 р.
CHAMERION EXTRACT INFLUENCE ON THE HISTOLOGICAL STATUS OF RAT LIVER UNDER ACUTE TOXIC AFFECTION BY TETRACHLORMETANE Feshchenko G. I., Marchyshyn S. M., Volkov K.S., Andriyishyn A.P., Yarema N.I.
In experiments on white rats, the histological structure of the liver was studied under the conditions of acute toxic damage after administration of chameria extract and the Silibinin referential drug. It was revealed that the studied extract has a pronounced protective effect on the liver microstructure. The obtained morphological data showed that chameria extract significantly reduced the damaging effect of carbon tetrachloride and promoted active restoration of the liver parenchyma, had a better positive effect than the Silibinin referential drug. The positive effect of the studied agent is manifested by the activation of regenerative processes, which improves the structural organization of the liver in animals after acute toxic damage with tetrachloromethane.
Key words: histological examination, liver, experimental toxic hepatitis, carbon tetrachloride, lyophilized chameria herb extract.
Рецензент Срошенко Г.А.
