CC BY
11THE INFLUENCE OF SILICON GLYCEROKINASE BACTERIAL COMPOSITION OF THE MICROFLORA OF THE ORAL CAVITY OF EXPERIMENTAL ANIMALS
Bakurinskikh A.
assistant of the department of pharmacology and clinical pharmacology FSBEI HE USMUMOH, Ekaterinburg, Russian Federation
Larionov L.
MD, Professor of the department ofpharmacology and clinical pharmacology, FSBEI HE USMU MOH, Ekaterinburg, Russian Federation
Bgdoyan S. student of the faculty of dentistry, FSBEI HE USMU MOH, Ekaterinburg, Russian Federation
Semashkin N. student of the faculty of dentistry, FSBEI HE USMU MOH, Ekaterinburg, Russian Federation
Bakurinskikh A.
PhD, associate Professor of obstetrics and gynecology, FSBEI HE USMU MOH, Ekaterinburg, Russian Federation
Nevskaya N.
bacteriologist, head of laboratory of clinical Microbiology, Ekaterinburg, Russian Federation
Ternova T.
laboratory doctor of laboratory of clinical Microbiology, Ekaterinburg, RussianFederation
ВЛИЯНИЕ КРЕМНИЙСОДЕРЖАЩИХ ГЛИЦЕРОГИДРОГЕЛЕЙ НА БАКТЕРИАЛЬНЫЙ СОСТАВ МИКРОФЛОРЫ ПОЛОСТИ РТА ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
Бакуринских А.А.
ассистент кафедры фармакологии и клинической фармакологии ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет,
г. Екатеринбург, Российская Федерация Ларионов Л.П.
д.м.н., профессор кафедры фармакологии и клинической фармакологии, ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет,
г.Екатеринбург, Российская Федерация
Бгдоян С.Г.
студент стоматологического факультета, ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет,
г.Екатеринбург, Российская Федерация Семашкин Н.Е. студент стоматологического факультета, ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет,
г.Екатеринбург, Российская Федерация
Бакуринских А.Б. к.м.н., доцент кафедры акушерства и гинекологии, ФГБОУ ВО Уральский государственный медицинский университет,
г.Екатеринбург, Российская Федерация
Невская Н.Н.
врач - бактериолог, заведующая лабораторией клинической микробиологии,
г. Екатеринбург, Российская Федерация
Терновая Т.Н.
врач-лаборант лаборатории клинической микробиологии, г. Екатеринбург, Российская Федерация
Abstract.
The paper presents data on the bacterial composition of the mucosa of the mouth (oral mucous membrane) of the experimental animals on the background of 14-day course of pharmacologically active compositions based on silicon-containing glycomolecules in comparison with known means of " Solcoseril". The results of the experiment revealed that after the application of the studied composition the level of conditionally pathogenic and pathogenic microflora decreases. Adhesive dental paste "Solcoseril" did not have an effective effect on the bacterial composition of the oral cavity of animals. Аннотация.
В работе представлены данные о бактериальном составе слизистой оболочки полости рта (СОПР) экспериментальных животных на фоне 14-дневного курсового применения фармакологически активной ком-
позиции на основе кремнийсодержащего глицерогидрогеля в сравнительном аспекте с известным средством «Солкосерил». По результатам экспериментавыявлено, что после применения исследуемой компо-зицииснижается уровень условно-патогенной и патогенной микрофлоры. Адгезивная дентальная паста «Солкосерил» не оказала эффективного воздействия на бактериальный состав полости рта животных.
Keywords: glycerogel, microbiota, bacterial composition, the mucous membrane, solcoseril Ключевые слова: глицерогидрогели, микрофлора, бактериальный состав, слизистая оболочка, сол-косерил
Введение.Организм человека представлен в виде многоуровневой системы, которая участвует в обеспечении взаимодействия элементов экосистемы «макроорганизм - микроорганизм». Нормальная микрофлора полости рта участвует в обеспечении защитных функций организма[1]. Конкурирующее влияние на патогенную микрофлору происходит путем продукции химических медиаторов антагонизма, таких как лизоцим, молочная кислота, нуклеаза, что играет не мало важную роль в поддержании биоценоза [2].
По данным литературы, включая отечественных и зарубежных авторов [3, 4, 5, 6, 7], содержание бактерий в биологической жидкости полости рта варьирует от 43 млн. до 5,5 млрд. в 1 мл. По видовому составу насчитывается более 700 видов, из них 85-90% принадлежит кокковой флоре. Представителями резидентной нормальной микрофлоры ротовой полости являются аэробные и анаэробные кокковые формы, непатогенные коринобактерии, спирохеты, молочнокислые бактерии, бактероиды и др. Транзиторная флора представлена энтеробак-териями, синегнойной палочкой, спорообразую-щими бактериями, микроорганизмами рода Campylobacter, нейссерий, грибами рода Candida и др. [8, 9].
В данной статье рассматривается влияние новой фармакологически активной композиции на основе кремнийсодержащего глицерогидрогеля и препарата сравнения «Солкосерил» на микрофлору полости рта экспериментальных животных. Учитывая, что микрофлора полости рта животных разнообразная и постоянно подлежит изменениям, в нашей статье, на основании полученных дан-ных,микрофлора полости рта экспериментальных животных приближена к микрофлоре человека.
Цель. Определить возможное влияние фармакологически активной композиции «СГБ» и препарата сравнения «Солкосерил» на микрофлору полости рта после 14-дневного курсового применения на слизистую оболочку полости рта.
Материалы и методы исследования
Изучали микробиоценоз нормализующее действие фармакологически активной композиции следующего состава: «Силативит» + гидроксиапатит (ГАП) + бифидумбактерин» («СГБ») и препарата сравнения «Солкосерил». На основании разрешения Локального этического комитета (выписка из протокола №3 от 17.04.15) эксперимент проводили на крысах популяции линии Wistar обоего пола. Сформировано 2 группы крыс по 10 особей в каждой (в первой и второй группах по 5 самцов и 5 самок). Средняя масса самок 170±20 г, самцов 180±20 г, возраст животных 14-15 недель. Животные содержались на стандартной диете для указанных особей согласно правилам лабораторной практики
проведения доклинических исследований в РФ (Содержание животных соответствовало правилам лабораторной практики (GLP), Приказ № 199н от 15.04.16 «Об утверждении Правил надлежащей лабораторной практике»). Животные находились в контролируемых условиях окружающей среды: температура воздуха 18-220С; относительная влажность 60-70%. Освещение в помещении естественно-искусственное. Первая опытная группа -крысы с аппликацией фармакологически активной композицией «СГБ». Вторая контрольная группа -крысы с аппликацией на СОПР препарата «Солко-серил». Фармакологически активную композицию «СГБ» и препарат «Солкосерил» в нативном виде наносили местно на слизистую ротовой полости в дозе 230 мг/кг массы животного в течение 14 суток. Эта доза соответствовала 1/100 от максимально вводимой дозы в желудок особи при выявлении острой токсичности.
Микробиологический анализ проводили с по-мощьютранспортной системы со средой Амиеса с углем и стерильным тампоном для взятия мазка на металлической палочке, с герметично закрывающейся пробкой. Для выделения и идентификации микроорганизмов в течение 2 часов образцы доставлены в лабораторию с последующим посевом на средах (5% кровяно-дрожжевойагар (КД), эндо-среда для энтеробактерий, желточно-солевой агар (ЖСО) для выделения стафилококков, Сабуро-для выявления грибов, тиогликолевая среда - для выявления анаэробов). Затем проводили оценку количественного роста микроорганизмов по следующим критериям: очень скудный рост, скудный рост - до 103; умеренный рост - 104 ; обильный рост - 105 -106 (согласно Приказу № 535 от 22.02.1985 г. «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования»). Умеренный и обильный рост свидетельствуют об этиологической роли определенного микроорганизма, а очень скудный и скудный - о носительстве или контаминации [10].
Статистическую обработку результатов проводили на базе пакета стандартных программ Windows (Excel) и Statistics 20. Непараметрический статистический тест Т-критерий Вилкоксона, используемый для проверки различий между двумя выборками парных или независимых измерений. Критический уровень значимости при проверке статистических гипотез принимали меньшим или равным 0,05. Результаты представлены: медиана [интерквартильный размах].
Результаты и обсуждение
Для удобства восприятия полученные данные систематизированы и представлены в виде таблицы.
Таблица.
Оценка бактериального состава полости рта экспериментальных животных _на фоне местного применения «СГБ» и «Солкосерил»_
Название Период Наименование исследуемых композиций
«СГБ» «Солкосерил»
до 105 [104; 105] 104 [104; 105]
St.aureus после 103 [103; 103] р=0,0006 104 [104; 105]
до 105 [104; 105] 105 [102; 105]
Haemophilus parainfluenzae после 103 [103; 104] 104 [102; 104]
St.epidermidis до 104 [104; 105] 104 [104; 105]
после 104 [103; 104] 104 [104; 105]
до 104 [104; 105] 104 [104; 105]
Klebsiella pneumoniae после 103 [103; 103] р=0,018 104 [104; 105]
до 104 [103; 105] 105 [105; 106]
St. viridans после 103 [103; 103] 105 [105; 106]
до 104 [104; 105] 105 [105; 105]
Acinetobacter spp. после 103 [103; 104] р=0,035 105 [104; 106]
до 104 [104; 105] 105 [104; 105]
Pseudomonas aeruginosa после 103 [103; 104] 104 [104; 105]
до 104 [104; 105] 104 [104; 104]
Enterobacter aerogenes после 103 [103; 104] р =0,023 104 [104; 104]
Примечание: результаты представлены как медиана [интерквартильный размах]. p - статистическая значимость различий с контрольной группой
На фоне 14-дневного применения фармакологически активной композиции «СГБ» уровень St.aureus снижен (103[103; 103] при р=0,0006), что соответствует очень скудному росту (или скудный рост). Применение адгезивной дентальной пасты «Солкосерил» не показал изменений бактериального состава. Количество Haemophilus parainfluenzae соответствует очень скудному росту (или скудный рост) - 103, после применения пасты «Солкосерил» уровень соответствует умеренному росту микроорганизмов (104 [102; 104]). Уровень бактерий после применения «СГБ» незначительно снизился, но определяется умеренный рост флоры (104 [103; 104]). Применение адгезивной дентальной пасты «Солкосерил» не оказал влияние на количественный состав микроорганизмов и соответствует умеренному росту (104 [104; 105]). При изучении количественного состава Klebsiella pneumoniae до и
после курсового применения«СГБ» показатели соответствуют очень скудному росту (или скудный рост) 103 [103; 103], при р=0,018; применение препарата «Солкосерил» рост микроорганизмов соответствует умеренному (104 [104; 105]). Уровень St. viridans после применения «СГБ» снижен и соответствуют очень скудному (или скудный) росту -103 [103; 103]. Показатели применения после 14-дневного курса «Солкосерил» соответствуют первоначальным данным - обильный рост микроорганизмов (105 [105; 106]). Применение фармакологически активной композиции «СГБ» показала, что АсшейЬайег spp. с умеренного роста снизились до очень скудного (или скудный), что соответствует 103 [103; 104], при р=0,035. В группе, где апплика-ционно применяли «Солкосерил» уровень АсшейЬайег spp. увеличился до обильного роста -
105. При анализе показателей количественного состава Pseudomonas aeruginosa определяется тенденция к снижению уровня микроорганизмов 103 [103; 104], со стороны группы экспериментальных животных, которым наносили «Солкосерил», уровень микроорганизмов данного вида соответствовал умеренному росту (104 [104; 105]). Количество Enterobacter aerogenes на фоне применения «СГБ» уменьшилось и соответствовало 103 [103; 104], при р=0,023. Показатели до и после применения препарата «Солкосерил» соответствовали умеренному росту 104 [104; 104].
Выводы
На основании полученных данных отчётливо прослеживается тенденция к улучшению показателей бактериального состава полости рта экспериментальных животных. В группе животных на фоне применения фармакологически активной композиции «СГБ» - отмечено снижение уровня микроорганизмов. Это объясняется тем, что в состав «СГБ» входит бифидумбактерин - пробиотический препарат, действие которого направлено на поддержание и восстановление микробного пейзажа в норме. Во второй экспериментальной группе, после 14-дневного курса аппликаций препаратом «Солкосерил», показатели микроорганизмов оставались на прежнем уровне с тенденцией их к увеличению.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ:
1. Шамшурина В.Н., Воложин А.И., Царев В.Н. Характеристика микробиоценоза полости рта пациентов с полным отсутствием зубов в ближайшие сроки после дентальной имплантации//Россий-ский стоматологический журнал №3, 2008 г., с.28-33.
2. Бухарин О.В., Васильев Н.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине. - Томск, 1974, с.209.
3. Боровский Е.В., Леонтьев В.К. Биология полости рта. - Второе, стереотипное изд. - Нижний Новгород: НГМА, 2001. - 304 с.
4. Aas JA, Paster BJ, Stokes LN, Olsen I, De-whirst FE. Defining the normal bacterial flora of the oral cavity. J Clin Microbiol, 2005, 43: 5721-32.
5. Zarco M.F., T.J. Vess and G.S. Ginsburg. 2012. The oral microbiome in health and disease and the potential impact on personalized dental medicine. Oral Dis. 18(2): 109-120.
6. Бакуринских А.А., ЛарионовЛ.П. Общая характеристика некоторых свойств фармакологически активной композиции на основе кремнийсодер-жащего глицерогидрогеля /Экспериментальная и клиническая фармакология. V съезд фармакологов. Ярославль 2018 г. С.22.
7. Burczynska A., Dziewit L., Decewicz P., Struzycka I., Wroblewska M. Application of Meta-genomic Analyses in Dentistry as a Novel Strategy Enabling Complex Insight into Microbial Diversity of the Oral Cavity. PolishJournalofMicrobiology2017, Vol. 66, No 1,p.9-15.
8. Кренделев М.С. Нормальная микрофлора ротовой полости человека// Современные проблемы науки и образования. - 2015. - №5. - С.635.
9. Крюков А.И., Кунельская Н.Л., Гуров А.В., Изотова Г.Н., Старостина А.Е., Лапченко А.С. Кли-нико-микробиологическая характеристика дисбио-тических изменений слизистой оболочки полости рта и ротоглотки// Медицинский совет. - 2016. - №6. - С.33-34.
10. Игнатьев В.О., Алтынбеков О.М. Нормальная Микрофлора Организма Животных//Студент и аграрная наука. - Уфа: Башкирский государственный аграрный университет, 2015. - С. 73-74.
MECHANISMS OF PAINFUL FEELING OF THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM
Grachev V.
Doctor of technological science, academician of the Academy of Medical and Technical Science of Russian Federation, professor, CEO Scientific & Industrial company «AVERS», Moscow.
Marinkin I.
Doctor of medical sciences, academician of the Academy of medical and technical sciences of Russian Federation, professor, rector of the Novosibirsk State Medical University, Head of the Department of Obstetrics and Gynecology of the Pediatric Faculty, Novosibirsk
Suslonova N.
Doctor of medical sciences, Academician of the Academy of Medical and Technical Sciences of the Russian Federation, professor, Advisor to the Governor of the Moscow Region, Moscow
