CC BY
22
дигиена и санитария. 2016; 95(7)
DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-682-685_
Оригинальная статья
О МАМИНА В.П., ЖИГАЛЬСКИЙ О.А., 2016 УДК 614.7:546.76]:612.616.064.083
Мамина В.П., Жигальский О.А.
ВЛИЯНИЕ р-КАРОТИНА НА СОСТОЯНИЕ СПЕРМАТОГЕННОГО ЭПИТЕЛИЯ И ВЫХОД ДОМИНАНТНЫХ ЛЕТАЛЬНЫХ МУТАЦИЙ ПРИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ШЕСТИВАЛЕНТНОГО ХРОМА
Институт экологии растений и животных Уральского отделения РАН, 620144, Екатеринбург
У крыс, подвергнутых воздействию шестивалентного хрома (ежедневное внутрибрюшинное введение бихро-мата калия - KCrO7 в дозах 0,028; 0,28 и 2,8 мг/кг массы тела в течение 48 дней), наблюдается снижение индекса напряженности сперматогенеза и усиление процессов перекисного окисления липидов в семенниках. Кроме того, отмечается увеличение сперматид с микроядрами, патологических форм сперматозоидов и процента эмбриональных потерь. Пероральное введение животным бета-каротина, обработанного шестивалентным хромом (CrVI), приводит к нормализации сперматогенеза, процессов перекисного окисления липидов и снижению эмбриональных потерь.
Ключевые слова: шестивалентный хром; каротин; сперматогенный эпителий; сперматозоид; эмбриональные потери.
Для цитирования: Мамина В.П., Жигальский О.А. Влияние р-каротина на состояние сперматогенного эпителия и выход доминантных летальных мутаций при экспериментальном воздействии шестивалентного хрома. Гигиена и санитария. 2016; 95(7): 682-685. DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-682-685
Mamma V.P., Zhigalsky O.A.
INFLUENCE OF В - CAROTENE ON THE SPERMATOGENIC EPITHELIUM AND OUTPUT OF DOMINANT LETHAL MUTHATIONS IN RATS UNDER THE EXPOSURE TO HEXAVALENT CHROMIUM
Institute of Ecology of Plants and Animals, Ural Branch of RAS, Ekaterinburg, 620144, Russian Federation
In adult rats exposed to hexavalent chromium (intraperitoneal injection of0.028; 0.28 and 2.8 mg KCrO,/(kg bw/ day) during 48 days there is observed the decrease in the intensity of index of spermatogenesis, increase ofspermatids with micronuclei, intensifying of processes peroxidation of lipids in testis, resulted in the increase in the number of the abnormal spermatozoa and of percent of a fetal death. Simultaneous supplementation of ft-carotene in Cr (VI) exposed rats showed the increase of intensity index of spermatogenesis. Morphology of a sperm, intensity ofprocesses peroxidation of lipids in testis and of number of viable embryos was restored
Keywords: hexavalent chromium; в -carotene; spermatogenic epithelium spermatozoa and fetal death.
For citation: Mamma V.P., Zhigalsky O.A. Influence of p - carotene on the spermatogenic epithelium and output dominant lethal muthations in rats under the exposure to hexavalent chromium. Gigiena i Sanitaria (Hygiene and Sanitation, Russian journal) 2016; 95(7): 682-685. (In Russ.). DOI: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-682-685
For correspondence: Vera P. Mamina, MD, PhD., senior researcher of the Laboratory of population ecology and modeling, Institute of Ecology of Plants and Animals, Ural Branch of RAS, Ekaterinburg, 620144, Russian Federation. E-mail: mamina@ ipae.uran.ru
Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest. Funding. The study had no sponsorship. Received: 15 April 2015 Accepted: 17 November 2015
Введение
На сегодняшний день проблема воздействия химических факторов окружающей среды на репродуктивную функцию мужчин остается весьма актуальной в связи с ростом идиопати-ческого мужского бесплодия [1]. В репродуктивной токсикологии накопилось достаточное количество эпидемиологических, экспериментальных и клинических наблюдений, позволяющих оценить токсикологическое действие солей тяжелых металлов в области мужской репродукции [2, 3]. К особо опасным загрязнителям окружающей среды следует отнести соединения шестивалентного хрома, которые входят в перечень потенциально опасных химических веществ по действию на репродуктивную функцию человека [4]. Шестивалентный хром является одним из основных факторов риска в период полового созревания организма [5]. В экспериментальных условиях установлено, что одним из возможных механизмов гонадотоксичности шестивалентного хрома является активация процессов перекисного окисления липидов [6]. При длительном воздействии химиче-
Для корреспонденции: Мамина Вера Павловна, канд. биол. наук, ст. науч. сотр. лаб. экологического прогнозирования, Институт экологии растений и животных Уральского отделения РАН, 620144, Екатеринбург. E-mail: mamina@ipae.uran.ru
ских факторов окружающей среды на организм одной из актуальных задач репродуктивной токсикологии является поиск и внедрение профилактических средств, препятствующих развитию каких-либо нарушений репродуктивной функции. К перспективной группе препаратов, обладающих антиоксидантными и антимутагенными свойствами, относят природные регуляторы обмена каротиноиды, в частности бета-каротин [7, 8]. Экспериментальные исследования с использованием антиоксидантных свойств каротиноидов, в основном, связаны с радиобиологическими проблемами и, как правило, изучение проводят на соматических клетках [9-11].
Цель работы - исследовать нарушения сперматогенеза и выход доминантно-летальных мутаций у крыс при воздействии шестивалентным хромом в малых дозах и возможности предотвращения данных нарушений введением в организм бета-каротина.
Материал и методы
Исследования были выполнены на 40 крысах-самцах с массой тела 230-260 г и 80 интактных самках линии Вистар. Моделирование хромовой интоксикации осуществляли при ежедневном внутрибрюшинном введении бихромата калия (К2Сг207) в дозах 1/1000, 1/100 и 1/10 от ЛД50: (ЛД50 - 28 мг/кг массы тела), что составляет 0,028; 0,28; 2,8 мг/кг массы тела по
Интактные животные
0,028 0,28 Доза Сг, мг/кг ш Сг □ Сг+КМ
Количество сперматогенных клеток и клеток Сертоли на мазках из клеточного гомогената семенников (а), индекс напряженности сперматогенеза (б) у крыс после воздействия шестивалентного хрома (Сг) в разных дозах и в сочетании с КМ. 1 - сперматогонии; 2 - сперматоциты; 3 - сперматиды; 4 - клетки Сертоли. * - различия с контролем значимы при р < 0,05.
веществу в течение 48 дней. Наибольшая из доз соответствовала уровню порога острого действия по общетоксическим показателям, дозы 0,028 и 0,28 мг/кг в токсикологии считаются малыми [12]. Отечественный препарат «Каротин микробиологический в масле» (КМ) вводили перорально через зонд три раза в неделю в суточной дозе 2,8 мг, соответствующей противоопухолевому эффекту у лабораторных животных [13]. Животные, получавшие бихромат калия, были разделены по дозам на группы: 1-я группа - контроль, вводили физиологический раствор; 2-я группа - 0,028 мг/кг; 3-я группа - 0,28 мг/кг и 4-я группа - 2,8 мг/кг. Животные, обработанные С^1 и одновременно получавшие КМ, также были разделены на группы: 5-я группа - контроль, вводили подсолнечное масло; 6-я группа -0,028 мг/кг СгУ[ в сочетании с КМ; 7-я группа - 0,28 мг/кг СгУ[ в сочетании с КМ и 8-я группа - 2,8 мг/кг СгУ[ в сочетании с КМ. В конце экспозиционного периода животных умерщвляли путем цервикальной дислокации с соблюдением требований международных принципов Хельсинкской декларации о гуманном отношении к животным для экстирпации органов [14], затем были удалены семенники и хвостовая часть эпидидими-са. Проводили цитологический анализ окрашенных мазков го-могенатов ткани семенников: процентное соотношение клеток разных генераций сперматогенного эпителия (сперматогоний, сперматоцитов и сперматид), количество округлых сперматид
с микроядрами, количество клеток Сертоли, определяли индекс напряженности сперматогенеза, митотический и мейоти-ческий индексы [15]. Общепризнанными тестами для оценки мутагенного действия различных факторов на половые клетки млекопитающих являются анализ АГС и анализ частоты индуцированных доминантных леталей [16, 17]. Мы на мазках из эпидидимиса оценивали процент сперматозоидов с аномальными головками. Подсчет числа сперматозоидов проводили в камере Горяева. Уровень перекисного окисления липидов (ПОЛ) в семенниках определяли по накоплению конъюгиро-ванных диенов [18] и малонового диальдегида [19], активность антиоксидантной системы - по подавлению Fe2+-зависимого окисления фосфолипидов желтка [20]. В конце экспозиционного периода самцов из каждой опытной и контрольной группы спаривали с девственными самками в стадии эструса (в соотношении 1:2). У самок на 19-20-й день беременности определяли: количество желтых тел в яичниках, число живых эмбрионов и число резорбции. Учитывали процент беременных самок, общую эмбриональную смертность (желтые тела - живые эмбрионы/желтые тела х100) и постимплантационную гибель эмбрионов (отношение числа мертвых эмбрионов к сумме живых и мертвых эмбрионов S100) [21]. Для статистической обработки экспериментального материала использовали непараметрический тест Вилкоксона-Манна-Уитни и критерий х2.
Таблица 1
Морфофункциональные характеристики сперматогенного эпителия, сперматозоидов и показатели перекисного окисления липидов (ПОЛ) в семенниках крыс после воздействии шестивалентного хрома (Сг) и в сочетании с КМ
Показатель Контроль Сг 0,028 мг/кг Сг + КМ Сг 0,28 мг/кг Сг + КМ Сг 2,8 мг/кг Сг + КМ
Митотический индекс, %о 0,32 ± 0,04 0,19 ± 0,03 0,25 ± 0,04 0,19 ± 0,04 0,28 ± 0,04 0,21 ± 0,05 0,29 ± 0,05
Мейотический индекс, %о 0,63 ± 0,06 0, 53 ± 0,10 0,58 ± 0,08 0,51 ± 0,08 0,60 ± 0,06 0,55 ± 0,05 0,60 ± 0,07
Округлые сперматиды с микроядрами, % 0,35 ± 0,05 0,80 ± 0,09* 0,50 ± 0,05 0,70 ± 0,08* 0,45 ± 0,05 2,20 ± 0,35* 0,60 ± 0,08
Патологические сперматозоиды, % 2,80 ± 0,40 4,10 ± 0,40* 3,0 ± 0,45 4,89 ± 0,51* 3,20 ± 0,50 4,50 ± 0,46* 2,50 ± 0,35
ПОЛ, нмоль/г ткани
ДК 6,950 ± 0,750 8,281 ± 0,868* 7,310 ± 0,820 7,618 ± 0,782* 7,0 ± 0,790 7,764 ± 0,795* 7,355 ± 0,810
МДА 3,622 ± 0,286 3,942 ± 0,566 3,520 ± 0,480 3,836 ± 0,210 3,680 ± 0,320 3,962 ± 0,424* 4,150 ± 0,510
АОА, усл. ед 0,40 ± 0,06 0,280 ± 0,05 0,350 ± 0,04 0,260 ± 0,04 0,380 ± 0,05 0,30 ± 0,03 0,45 ± 0,55
Примечание. Здесь и в табл. 2: * - достоверно значимые различия с контролем прир < 0,05.
гиена и санитария. 2016; 95(7)
РР1: 10.18821/0016-9900-2016-95-7-682-685_
Оригинальная статья
Таблица 2
Результаты доминантно-летального анализа у крыс после воздействия шестивалентного хрома (Сг) и в сочетании с КМ
Показатель Группа
1 2 3 4 5 6 7
Число беременных самок, % 85 72 75 77 80 75 78
Среднее число на самку:
желтых тел 12,2 ± 0,41 11,0 ± 0,52 12,0 ± 0,48 11,3 ± 0,35 11,8 ± 0,40 11,2 ± 0,33 11,5 ± 0,45
живых эмбрионов 9,2 ± 0,52 6,5 ± 0,81* 9,7 ± 0,80 7,0 ± 0,90* 8,4 ± 0,30 7,1 ± 0,80* 7,5 ± 1,0
число резорбции 0,5 ± 0,02 1,8 ± 0,31* 0,7 ± 0,12 1,4 ± 0,20* 0,8 ± 0,13 1,2 ± 0,22* 0,8 ± 0,04
Общая эмбриональная смертность, % 24,5 37,5* 24,0 38,1* 26,6 35,5* 29,3
Доимплантационные потери, % 20,5 24,5 18,2 25,6 19,8 25,8 21,1
Постимплантационные потери, % 5,1 21,6* 6,5 16,7* 7,0 16,7* 7,9
Результаты и обсуждение
Цитологический анализ мазков из клеточного гомогената семенников у крыс, подвергнутых воздействию СгУ[, показал достоверное снижение числа сперматоцитов, сперматид и увеличение числа клеток Сертоли при всех исследуемых дозах (рис. 1, а). Интегральный показатель сперматогенеза, индекс напряженности сперматогенеза, также значимо снижался (рис. 1, б). При всех исследуемых дозах наблюдали незначимое снижение митотического и мейотического индексов (табл. 1).
Отмечалась тенденция к снижению эпидидимальных сперматозоидов: при дозе 0,028 мг/кг - 37,9 тыс./мл; при 0,28 мг/кг -36,1 тыс./мл; при 2,8 мг/кг - 35,5 тыс./мл против 46,9 тыс./мл в контроле. Уменьшение числа герминативных клеток, возможно, обусловлено как их гибелью в результате токсического действия хрома, так и блоком митозов и мейозов. Снижение мейотического индекса вызывает задержку дифференцировки и созревания половых клеток на стадиях сперматоцитов и сперматид. Нагрузка КМ хромобработанных крыс приводит к увеличению числа сперматогенных клеток и росту индекса напряженности сперматогенеза (см. рис. 1, а и б). При всех исследуемых дозах наблюдали достоверное увеличение числа округлых сперматид с микроядрами и числа патологических форм сперматозоидов, что говорит о мутагенном эффекте шестивалентного хрома. Введение животным КМ снижает число округлых сперматид с микроядрами и процент патологических форм сперматозоидов (рис. 2). У животных после воздействия СгУ[ во всех группах значимо возрастала концентрация диеновых конъюгатов (ДГ), а у крыс, получивших СгУ[ в дозе 2,8 мг/кг - и содержание малонового диальдегида (МДА), наблюдалась тенденция к подавлению активности антиоксидантной системы (см. табл. 1). По-видимому, интенсификация процессов перекисного окисления липидов обусловлена развитием общего неспецифического адаптационного синдрома (стресса) [22, 23]. При введении КМ показатели ПОЛ не отличались от контрольного уровня. Анализ доминантных летальных мутаций при всех исследуемых дозах показал достоверно значимое увеличение общей эмбриональной смертности, которая происходит за счет постимплантационных потерь (табл. 2). КМ достоверно значимо приводит к снижению эмбриональных потерь.
Заключение
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о том, что введение в организм КМ способствует нормализации показателей репродуктивной функции самцов крыс, подвергнутых воздействию шестивалентного хрома. Учитывая анти-оксидантные, мембраностабилизирующие и антимутагенные свойства КМ его можно использовать в качестве эффективной биодобавки в структуре лечебно-профилактического питания населения, проживающего в условиях антропогенного воздействия.
Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.
Литература
(п.п. 1, 5-6, 11-12, 14, 17, 19, 21, 23 см. References)
2. Боков Д.А., Шевлюк Н.Н. Характеристика сперматогенеза у мышей CBASC57Bl6 при комбинированном действии хрома и бензола. Проблемы репродукции. 2004; (2): 7-11.
3. Боков Д.А., Ковбык Л.В., Семенова М.В. Влияние хрома и бензола на клетки Лейдига семенников. Известия Оренбургского государственного аграрного университета. 2013; (3): 104-6.
4. Мамырбаев А.А. Токсикология хрома и его соединений. Ак-тобе: Национальный центр гигиены труда и профессиональных заболеваний; 2012.
7. Сергеев А.В., Вакулова Л.А, Шашкина М.Я., Жидкова Т.А. Медико-биологические аспекты каротиноидов. Вопросы медицинской химии. 1992; 38(6): 8-11.
8. Антипов В.А., Кузьминова Е.В., Семененко М.П., Соловьев В.С. Биологические основы применения каротиноидов. Доклады Российской академии сельскохозяйственных наук. 2008; (4): 48-50.
9. Коломийцева И.К., Потехина Н.И., Семенова Т.П., Медвинская Н.И., Попов В.И., Вакулова Л.А. Влияние хронического воздействия гамма-излучения и бета-каротина на уровень липидов пресинаптических мембран коры головного мозга. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2000; 129(6): 629-32.
10. Круглова Н.Л., Карнаухов В.Н. Исследование защитного влияния бета-каротина на уровень хроматина при действии радиации в малых дозах на крыс. Цитология. 2001; 43(4): 356.
13. Потемина Т.Е. Нарушение сперматогенеза в условиях стресса у самцов крыс. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 2008; 146(6): 645-7.
15. Иванов Ю.В. Ускоренные методы изучения гонадотоксическо-го действия веществ. Гигиена и санитария. 1990; (1): 72-4.
16. Померанцева М.Д., Рамайя Л.К., Рубанович А.В., Шевченко В.А. Генетические последствия повышенного радиационного фона у мышевидных грызунов. Радиационная биология. Радиоэкология. 2006; 46(3): 279-86.
18. Костюк В.А., Потапович А.И., Лунец Е.В. Спектрофотоме-трическое определение диеновых конъюгатов. Вопросы медицинской химии. 1983; (4): 125-7.
20. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселкин Ю.О. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеидов. Лабораторное дело. 1988; (2): 59-62.
22. Казимирко В.К., Мальцев В.И., Бутылин В.Ю., Горобец Н.И. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия. Киев: Морион; 2004.
Reference s
1. Dohle G.R., Diemer T., Kopa Z., Krausz C., Giwercman A., Jungwirth A. et al. European Association of Urology guidelines on vasectomy. Eur Urol. 2012; 61(1): 159-63.
2. Bokov D.A., Shevlyuk N.N. The characteristic of a spermatogenesis at mice CBASC57Bl6 at the combined action of chrome and benzene. Problemy reproduktsii. 2004; (2): 7-11. (in Russian)
3. Bokov D.A., Kovbyk L.V., Semenova M.V. Influence of chrome and benzene on cells Leydig of testis. Izvestiya Orenburgskogo gosudarstvennogo agrarnogo universiteta. 2013; (3): 104-6. (in Russian)
4. MamyrbaevA.A. Toxicology of Chrome and its Bonds [Toksikologiya khroma i ego soedineniy]. Aktobe: Natsional'nyy tsentr gigieny truda i professional'nykh zabolevaniy; 2012. (in Russian)
5. Saxena D.K., Murthy R.C., Lal B., Srivastava R.S., Chandra S.V. Effect of hexavalent chromium on testicular maturation in the rat. Reprod. Toxicol. 1990; 4(3): 223-8.
6. Bagchi D., Stohs S.J., Downs B.W., Bagchi M., Preuss H.G. Cytotoxicity and oxidative mechanisms of different forms of chromium. Toxicology. 2002; 180(1): 5-22.
7. Sergeev A.V., Vakulova L.A, Shashkina M.Ya., Zhidkova T.A. Medicobiological aspects of carotenoids. Voprosy meditsinskoy khimii. 1992; 38(6): 8-11. (in Russian)
8. Antipov V.A., Kuz'minova E.V., Semenenko M.P., Solov'ev V.S. Biological bases of application of carotenoids. Doklady Rossiyskoy akademii sel 'skokhozyaystvennykh nauk. 2008; (4): 48-50. (in Russian)
9. Kolomiytseva I.K., Potekhina N.I., Semenova T.P., Medvinskaya N.I., Popov V.I., Vakulova L.A. Influence of chronic action of a gamma radiation and beta-carotene on a level of lipids of presynaptic membranes of a cortex of a brain. Byulleten ' eksperimental 'noy biologii i meditsiny. 2000; 129(6): 629-32. (in Russian)
10. Kruglova H.L., Karnaukhov V.N. Research of protective influence of beta-carotene on a level of a chromatin at action of radiation in small doses on rats. Tsitologiya. 2001; 43(4): 356. (in Russian)
11. El-Habit O.H., Saada H.N., Azab K.S., Abdel-Rahman M., El-Malah D.F. The modifying effect of beta-carotene on gamma radiation-induced elevation of oxidative reactions and genotoxicity in male rats. Mutat. Res. 2000; 466(2): 179-86.
12. Sheyko L.D., Balezin S.L. Morphostructural changes in rat gonads from hexavalent chromium. Reprod. Toxicol. 1993; 7(5): 525.
13. Potemina T.E. Disturbance of a spermatogenesis in conditions of stress at male rats. Byulleten' eksperimental'noy biologii i meditsiny. 2008; 146(6): 645-7. (in Russian)
14. World Medical Association. Declaration of Helsinki. Ethical Principles for Medical Research Involving Human Subject. UMS; 2002: 42-6.
15. Ivanov Yu.V. The accelerated methods of studying gonadtoxicity actions of substances. Gigiena i sanitariya. 1990; (1): 72-4. (in Russian)
16. Pomerantseva M.D., Ramayya L.K., Rubanovich A.V., Shevchenko V.A. Genetical consequences of the raised background radiation at rodents. Radiatsionnaya biologiya. Radioekologiya. 2006; 46(3): 279-86. (in Russian)
17. Lamb J.C., Ross M.D., Chapin R.E. Experimental methods for studying male reproductive function in standard toxicology studies. Int. J. Toxicol. 1986; 5(4): 225-34.
18. Kostyuk V.A., Potapovich A.I., Lunets E.V. Spectrophotometric definition of diene conjugates. Voprosy meditsinskoy khimii. 1983; (4): 125-7. (in Russian)
19. Asakawa G., Matsushita S. Coloring conditios of thiobarbituric acid test for detecting lipid peroxides. Lipids. 1980; 15(3): 137.
20. Klebanov G.I., Babenkova I.V., Teselkin Yu.O. Assessment of antioxidative activity of a blood plasma with application of vitelline lipoproteins. Laboratornoe delo. 1988; (2): 59-62. (in Russian)
21. Daev E.V. Induction of dominant lethals in progeny of CBA male mice after pheromonal action. Genetika. 2003; 39(10): 1347-52.
22. Kazimirko V.K., Mal'tsev V.I., Butylin V.Yu., Gorobets N.I. The Oxidation Freeradical and Antioxidatic Therapy [Svobodnoradikal'noe okislenie i antioksidantnaya terapiya]. Kiev: Morion; 2004. (in Russian)
23. Agarwal A., Nandipati K.C., Sharma R.K., Zippe C.D., Raina R. Role of oxidative stress in the pathophysiological mechanism of erectile dysfunction. J. Androl. 2006; 27(3): 335-47.
Поступила 15.04.15 Принята к печати 17.11.15
Знаменательные события и даты
О ШИГАН Е.Е., 2016 УДК 613.6 (091):614.2
Шиган Е.Е.
ВОПРОСЫ МЕДИЦИНЫ ТРУДА В РАБОТАХ А.Н. СЫСИНА
(НАВСТРЕЧУ 85-ЛЕТНЕМУ ЮБИЛЕЮ ФГБУ «НИИ ЭКОЛОГИИ ЧЕЛОВЕКА И ГИГИЕНЫ
ОКРУЖАЮЩЕЙ СРЕДЫ ИМЕНИ А.Н. СЫСИНА» Минздрава России)
ФГБНУ «НИИ медицины труда», 105275, Москва
Научные приоритеты Алексея Николаевича Сысина (1879-1956) были обращены к изучению вопросов санитарно-эпидемиологического благополучия России. Ученый-гигиенист с мировым именем был одним из основоположников в вопросах общей и коммунальной гигиены, эпидемиологии и дезинфекции. Немало уделял внимание А.Н. Сысин и проблемам профессиональной гигиены, совместно с другими учеными заложив фундамент современной медицины труда. Победа Великой Октябрьской революции поставила перед организаторами и учеными медицинской науки, в числе которых был и А.Н. Сысин, новые задачи в решении многих сложных вопросов, в том числе и вопросов профессиональной гигиены. Уже в первые месяцы существования молодой республики им подготовлены десятки директив, постановлений и распоряжений, написано большое число проектов законов санитарной службы, разработаны первые нормативные акты о санитарном надзоре на предприятиях страны. Ведущую роль в появлении многих печатных газет и журналов, сборников и бюллетеней по общим вопросам здравоохранения, профилактической медицины, гигиены, эпидемиологии, медицины труда принадлежит именно А.Н. Сысину. Им было опубликовано свыше 250 научных работ по различным вопросам гигиенической науки: от проблем эпидемий опасных инфекций до условий труда и быта различных предприятий. Много уделял внимания А.Н. Сысин и производственному травматизму, проблемам нарастающей профессиональной токсикологии, внедрению новейших форм общих и индивидуальных средств защиты
