CC BY
110
ЛЕКАРСТВЕННЫЕ РАСТЕНИЯ
© ЛЕВЕНТА А.И., ОДИНЕЦ А.Д., ОХРЕМЧУК Л.В., УСОВ Л.А. — 2010
ВЛИЯНИЕ ИЗВЛЕЧЕНИИЙ ИЗ ГОРНОКОЛОСНИКА И РОДОДЕНДРОНА АДАМСА НА ПОВЕДЕНЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ ЛАБОРАТОРНЫХ ЖИВОТНЫХ
А.И. Левента, А.Д. Одинец, Л.В. Охремчук, Л.А.Усов (Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов, кафедра фармакологии, зав. — к.ф.н. А.И. Левента, кафедра эндокринологии и клинической фармакологии,
зав. — д.м.н., проф. Л.Ю. Хамнуева)
Резюме. В статье представлены экспериментальные данные, полученные при проведении тестирования лабораторных животных на установке «Открытое поле» (англ. «Open field»), показаны количественные изменения показателей локомоторного и исследовательского поведения, а также эмоционального статуса крыс, получавших препараты известных адаптогенов (Элеутерококк колючий и родиола розовая) и исследуемых препаратов: горноколосника колючего (Orostachys spinosa (Pallas) Fich.), рододендрона Адамса (Rhododenron adamsii Rhed)
Ключевые слова: открытое поле, поведенческие реакции, горноколосник колючий (Orostachys spinosa (Pallas) Fich.), рододендрон Адамса (Rhododenron adamsii Rhed)
INFLUENCE OF EXTRACTIONS FROM OROSTACHYS SPINOSA (PALLAS) FICH. AND RHODODENDRON ADAMS ON BEHAVIOURAL REACTIONS IN LABORATORIAL ANIMALS
A.I. Leventa, A.D. Odinets, L.V. Ohremchuk, L.A. Usov (Irkutsk State Medical University)
Summary. In article the experimental data received in carrying out of testing of laboratory animals on installation «Open field» are presented, quantitative changes of indicators and research behavior, and also the emotional status of the rats received preparations of well-known adaptogenes (Eleutherococcus senticosus Maxim. and Rhodiola rosea L.) and investigated preparations: Orostachys spinosa (Pallas) Fich., Rhododenron adamsii Rhed have been shown.
Key words: Open field, behavioral reactions, Orostachys spinosa (Pallas) Fich., Rhododenron adamsii Rhed.
Согласно Пекинской декларации ВОЗ от 2008 г. рекомендуется особое внимание уделять средствам народной и традиционной медицины. Несомненно, что в изучение наследия ряда традиционных восточных медицин весомый вклад внесли российские ученые. Они показали самобытность и индивидуальность тибетской медицинской системы, включавшей как теорию, так и практику лечения с соответствующими лекарственными средствами. В их числе сотрудника кафедры фармакологии Иркутского государственного медицинского университета И.А. Обергард, Н.П. Шавров, М.Н. Варлаков, С.И. Верхозин, С.Р. Семенов. Ими доказана необходимость изучения тибетской медицины, проведена огромная работа по систематизации средств и методов лечения на фактическом материале (медицинским трактатам, рецептурным справочникам, лекарственном растительном сырье). Так же, в последнее время активно ведутся работы по изучению перспективных лекарственных растений народной медицины в странах юго-восточной Азии (Южная Корея, Китай) [9, 14, 15, 16]. Особо перспективным является поиск новых природных адаптогенов, позволяющий расширить арсенал средств способствующих адаптации организма человека к неблагоприятным факторам внешней среды[8,9]. Нами проводились эксперименты по изучению влияния извлечений из растений горноколосника колючего (Orostachys spinosa (Pallas) Fich.), рододендрона Адамса (Rhododenron adamsii Rhed), и хорошо известных адаптогенных средств — экстракта элеутерококка и экстракта родиолы розовой на поведенческие реакции крыс [10].
Наиболее распространенным и информативным тестом для определения влияния лекарственных веществ на эмоциональное состояния и двигательную активность животных является тест «Открытое поле» (ОП) [1,2]. Согласно классическим представлениям, у крыс в ОП проявляются ориентировочно-исследовательская и защитно-оборонительная поведенческие реакции [3,4,]. Как правило, ориентировочно-исследовательская реакция крыс оценивается по горизонтальной и вертикальной двигательной активности, времени реакции обнюхивания [4,5,12]. В то время как, эмоциональный статус животного оценивают по числу болюсов, уринаций, груминговой активности, времени выхода из центра и времени замирания [5,6]. Все эти показатели изменяют-
ся при введении в организм различных нейротропных фармакологических препаратов [6,7].
Материалы и методы
Эксперимент выполнен на белых крысах линии Wistar массой 170-220 г. Все процедуры с животными выполнялись с соблюдением международных правил и норм [13], при выполнении работы травмы животным не наносили. Животные были использованы в последующих поведенческих экспериментах. Популяция обследованных крыс состояла из 40 самок. До начала эксперимента животные содержались в клетках в группах по 6-7 животных в стандартных условиях вивария. В работе использовались деалкоголизированные методом выпаривания и восстановления объема препараты сравнения: экстракт родиолы жидкий (30 мл., дата изготовления 13.03.2009 г., серия 020309, годен до 04.2014 г.), элеутерококка экстракт жидкий (50 мл, дата изготовления 18.01.2008 г., серия 150309, годен до 01.04.2013 г.) и исследуемых извлечений, изготовленных методом перколяции 70% этанолом: жидкий экстракт горноколосника колючего (Orostachys spinosa (Pallas) Fich.), и рододендрона Адамса (Rhododenron adamsii Rhed).
Оценка ориентировочно-исследовательского поведения осуществлялась в тесте ОП. Установка теста ОП для крыс представляет собой камеру размером 1 м в длину и 1 м в ширину, с высотой стенок 0,7 м, из белой фанеры, дно которой было расчерчено на 25 равных квадратов с отверстиями диаметром 4 см в каждом квадрате.
За 40 мин до опыта внутрибрюшинно вводились водные растворы препаратов в разведении 1:7, в дозировке 1,0 мл на 1 кг массы животного, и 0,5 мл физиологического раствора натрия хлорида в контрольной группе, затем животных держали в течение 1 минуты в затемненной картонной камере размером 30 см х 20 см х 20 см с отверстиями для доступа воздуха. Длительность нахождения животного в тесте ОП была равна 3 мин. Все процедуры связанные с тестированием в ОП проводились с 15.00 до 18.00. Крыс помещали в центр ОП и засекали время выхода из центрального квадрата. Подсчитывали число пересеченных квадратов как показатель горизонтальной двигательной активности, число вертикальных стоек —
показатель вертикальной двигательной активности, число дефекаций и урина-ций, рассчитывали сумму дефекаций и уринаций. Определяли число заглядываний в отверстия, время реакции замирания, время реакции обнюхивания и время груминга.
Проверку результатов на нормальное распределение проводили с помощью критерия Колмогорова-Смирнова. Средние результаты показателей, имеющих нормальное распределение, в группах сравнивались с помощью стандартного ^критерия Стьюдента. Так как значения времени груминга, числа дефекаций и уринаций не подчинялись закону нормального распределения, сравнение их средних проводили с помощью критерия знаков [11].
Результаты и обсуждение
Судя по полученным результатам теста ОП (табл. 1), время пребывания в центре «открытого поля» — наиболее малозначимой и опасной зоны для грызунов, у животных опытных групп имело некоторое уменьшение по сравнению с контролем (минимально у горноко-лосника 59% и родиолы розовой 75%), но при этом незначительно увеличивается на фоне действия препарата рододендрона Адамса. По показателям горизонтальной активности, характеризующей реакцию ориентировки в пространстве и поисковую функцию, более активными и беспокойными были животные опытных групп, причём большая активность отмечена у родиолы розовой (на 94%) и горноколосника (на 117%).
На рис.1 представлены результаты влияния препаратов на локомоторное и исследовательское поведение крыс в тесте ОП.
Горизонтальная активность Ориентировочноисследовательское поведение
Поведение крыс в тесте ОП включает и такие компоненты, как вставания за задние лапы (стойки), относящиеся к репертуару ориентировочно-исследовательского
Таблица 1
Данные теста ОП
поведения. У крыс, получавших препараты-адаптогены число стоек было значимо выше по сравнению с контролем (элеутерококк на 56%, родиола розовая на 84%) такой же эффект вызвал препарат горноколосника (выше на 72%) и рододендрона Адамса (выше на 59%). Уровень эмоционального состояния крыс оценивается по количеству дефекаций, уринаций, грумингу и количеству эпизодов «Замирания». На рис.2 представлены результаты экспериментального исследования влияния препаратов на эмоциональное состояние крыс.
Уровень эмоционального состояния крыс оценивается по количеству дефекаций, уринаций, грумингу и количеству эпизодов «Замирания». Так на рис.2 представлены результаты экспериментального исследования влияния на эмоциональное состояние крыс.
Поведение чистки шерсти (груминг) — важный компонент поведения крысы вообще, и в тесте ОП — в частности. Груминг, как элемент врожденного поведения грызунов, имеет биологическое значение для поддержания чистоты шерстного покрова. Однако уже давно было показано, что у грызунов эпизоды груминга учащаются в обстановке, вызывающей у животного испуг и тревогу. В соответствии с классическими взглядами Н. Тинбергена
было высказано предположение, что груминг, в особенности в условиях помещения животного в новую обстановку, есть проявление конфликта между исследовательской мотивацией и мотивацией страха-тревоги, являясь, в сущности говоря, «смещенной реакцией» (по терминологии этологов). Отмечено положительное влияние на эмоциональную сферу животных препарата рододендрона Адамса (длительность груминга выше на 42% по сравнению с контролем). Остальные препараты повышали уровень тревожности: снижение
времени груминга на 30% у элеутерококка, на 48% у родиолы розовой, на 41% у горноколосника. Еще одним показателем проявления мотивации страха-тревоги у грызунов является число эпи-
Рис. 1. Влияние препаратов на локомоторное и исследовательское поведение крыс в тесте ОП. Обозначения на графике 1 — контроль, 2 — препарат элеутерококка, 3 — препарат рододендрона Адамса, 4 — препарат родиолы розовой, 5 — препарат горноколосника.
Рис. 2. Влияние препаратов на эмоциогенные компоненты поведенческой активности в ОП. Обозначения аналогичны рисунку 1.
Показатели двигательной активности Физ. раствор по 0,5 мл. внутри-брюшинно Препарат элеутеро- кокка Препарат рододендрона Адамса Препарат родиолы розовой Препарат горно- колосника
Время в центре «ОП», с 17,75 ±1,1 14,34 ±1,15 18,3 ±2,4 10,08 +1,54 11,15 + 1,27
Горизонтальная активность 32,9±9,55 44,7±5,87 35,3±7,7 64,08+10,9 71,4+8,78
Норка, шт. 4,3±1,55 7,8±1,82 8,1 + 1,05 14,0+2,6 11,2+2,05
Вертикальная активность 4,4±0,4 6,9±1,2 7,0+1,1 8,1 + 1,8 7,6+1,4
Время замирания и обнюхивания, с 105±7,1 117+9,3 96±8,3 85+5,0 72+4,4
Груминг, с 18,4±1,9 12,9±1,21 26,3+2,7 9,4+1,7 11,2+1,5
Болюсы 5,9±0,7 4,4±0,37 2,8+0,85 3,3+0,6 2,1+0,33
зодов «замирания», когда животное сохраняет полную неподвижность в течение более или менее протяженных промежут-
ков времени. В эксперименте меньшая тревожность отмечалась при использовании препаратов родиолы розовой (время замирания меньше на 19%) и горноколосника (время замирания меньше на 32%), что также подтверждается меньшим временем пребывания в центре поля.
На проведенных нами психофармакологических тестах впервые выявлено наличие нейротропной активности у препаратов горноколосника и рододендрона Адамса в сравнении с известными адаптогенными средствами. Поведенческие реакции крыс на тесте ОП достоверно показали, что извлечения из горноко-лосника колючего и известные адаптогенные препараты однонаправленно изменяют ориентировочноисследовательскую и защитно-оборонительную по-
веденческие реакции, а также эмоциональный статус. Это косвенно свидетельствует о сходном фармакологическом характере действия. Для рододендрона Адамса характерно наличие поведенческих реакций как адап-тогенного (количество норок), так и анксиолитического характера действия (груминг). Данные эффекты можно обьяснить наличием в 70% спиртовом извлечении веществ различной химической структуры (полифеноль-ные комплексы, эфирные масла, смолы) Горноколосник колючий и рододендрон Адамса являются перспективными источниками биологически активных веществ нейротропного характера для получения новых инновационных препаратов используемых в медицинской практике.
ЛИТЕРАТУРА
1. Буреш Я., Буреш О., Хьюстон Дж.П. Методики и основные эксперименты по изучению мозга и поведения. — М.: Наука, 1992. — 250 с.
2. Закусов В.В. Фармакология центральных синапсов. — М.: Медицина, 1973. — 228 с.
3. Шаляпина В.Г., Ракицкая В.В., Петрова Е.И. // Журнал Высшей нервной деятельности им. Павлова. — 2005. — №2. — С. 241-246.
4. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. — М.: Медицина, 2005. — С. 832.
5. Буслович С.Ю., Котеленец А. И., Фридлянд Р. М. Интегральные методы оценки поведения белых крыс в открытом поле // Журн. высш. нерв. деят. —1989. — Т.39. — №1. — С.168-171.
6. Исмайлова Х.Ю., Агаев Т.М., Семенова Т.П. Индивидуальные особенности поведения: (моноаминергиче-ские механизмы). — Баку: Нурлан, 2007. — 228 с.
7. Яременко И.В. Адаптогены как средства профилактической медицины. — Томск: Изд-во Томского унив-та, 1990. — 96 с.
8. Левента А.И., Усов Л.А. К вопросу о фармакологической адаптации человека к ритмам современной жизни // Вестник Иркутского регионального отделения АН ВШ России. — 2007. — №1. — С.187-193.
9. Левента А.И. К истории изучения тибетской медицины сотрудниками кафедры фармакологии Иркутского государственного медицинского университета// Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 2008. — №1. — С. 103-105.
10. Усов Л.А., Мирович В.М., Левента А.И. и др. К сравнительной оценке тонизирующего и стимулирующего действия рододендрона Адамса // Сибирский медицинский журнал (Иркутск). — 1995. — №3. — С. 37-39.
11. Фролов Ю.П. Математические методы в биологии. ЭВМ и программирование. — Самара: Изд-во СамГУ, 1997. — 265 с.
12. Saenz J.C.B., Villagra O.R., Trias J.F. Factor analysis of Forced Swimming test, Sucrose Preference test and Open Field test on enriched, social and isolated reared rats // Behavioural Brain Research. — 2006. — V.169. — No1. — P.57-65.
13. European Communities Council Directives of 24 November1986, 86/609/EEC.
14. Je Ma C., Jung W.J., Lee K.Y., et al. To search for calpain inhibitors from natural products of Orostachys japonicus. //Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry. — 2009. — №3. — Р. 676-679.
15. W. Dong, J. R. Park,W. T. Tsoi.// Ethnopharmacology. — 2005. — Vol. 102, №3. — Р. 313-318.
16. Yoon Y, Kim K.S., Hong S.G. // Ethnopharmacology. — 2000. — Vol. 5, №10. — Р. 73-78.
Информация об авторах: 664003, Иркутск, ул. Красного восстания, 1 Левента Алексей Иванович — к.ф.н., зав. кафедрой Усов Лев Акимович — д.м.н., профессор Охремчук Людмила Васильевна — к.м.н., ассистент
© УСОВА Н.Ф., ФЕДОСЕЕВА Г.М., СКИБИНА Е.В., ГОРДЕЕВА В.В. — 2010
ОПЫТ ПРОЛОНГИРОВАНИЯ ТЕРАПЕВТИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ ФИТОПРЕПАРАТОВ В ЛЕЧЕНИИ ГИНГИВИТА И ПАРОДОНТИТА
Н.Ф. Усова, Г.М. Федосеева, Е.В. Скибина, В.В. Гордеева (Иркутский государственный медицинский университет, ректор — д.м.н., проф. И.В. Малов,
кафедра терапевтической стоматологии, зав. — д.м.н., проф. В.Д. Молоков, кас зав. — д.ф.н., проф. Г.М. Федосеева, кафедра технологии лекарственных (
едра фармакогнозии и ботаники, юрм, зав. — доц. Т.П. Зюбр)
Резюме. Представлены результаты использования фитотерапевтических препаратов для лечения больных с гингивитами и парадонтитами.
Ключевые слова: гингивит, пародонтит, лечение, фитопрепараты.
EXPERIENCE OF PROLONGED THERAPEUTIC EFFECT OF PHYTOPREPARATIONS IN TREATMENT OF GINGIVITIES AND PARADONTITES
N.F. Usova, G.M. Fedoseeva, E.V. Skibina, V.V. Gordeeva (Irkutsk State Medical University)
Summary. The results of usage of phytopreparations for the treatment of patients with gingivites and paradontites have been presented.
Key words: gingivitis, paradontites, treatment, phytopreparations.
В настоящее время арсенал средств и методов консервативного лечения гингивита и пародонтита существенно обогащается за счет различных фитопрепаратов. Эта группа лекарственных средств характеризуется низкой токсичностью, малоаллергенностью и высокой
коммерческой доступностью. Поскольку основные черты гингивита и пародонтита — бактериальный, воспалительный и сниженная иммунная и регенераторная составляющие, в наибольшей степени задачам купирования инфекционного воспаления и улучшение
