CC BY
29
© В.В. КУЗОВНИКОВ, Д.Г.ЧАНЧИКОВ, В.В. ГАРЬКАВЕНКО, И В. СИМКО, О.В. ОСИПОВА, В.И. ЛАЗАРЕНКО, И.Н. БОЛЬШАКОВ
ВЛИЯНИЕ ИМПЛАНТАЦИИ ХИТОЗАНА НА ФОРМИРОВАНИЕ МИКРОЦИРКУЛЯТОРНОГО РУСЛА В ТЕНОНОВОМ ПРОСТРАНСТВЕ В ЭКПЕРИМЕНТЕ В.В. Кузовников, Д.Г.Чанчиков, В.В. Гарькавенко, И.В. Симко, О.В. Осипова,
В.И. Лазаренко, И.Н. Большаков Красноярская государственная медицинская академия им. В.Ф. Войно-Ясенецкого,
ректор - д.м.н. проф. И.П. Артюхов; кафедра офтальмологии, зав. - д.м.н., проф. Е.В.
Козина; кафедра оперативной хирургии и топографической анатомии, зав. - д.м.н., проф.
П. А. Самотёсов.
Резюме. В представленной работе рассматривается гистологическая реакция тканей на введение в теноново пространство хитозонового гидрогеля, с образованием хорошо развитой сети микроциркуяции в эксперименте, в различные сроки.
Ключевые слова: хитозан, реваскуляризация, теноново пространство.
В теноново пространство глаза вводятся разнообразные ауто-, алло-, ксенопластические и синтетические материалы в виде имплантатов, взвесей и суспензий, с целью стабилизации гемодинамики, а следовательно и обменных процессов в заднем полюсе глаза, для улучшения или стабилизации зрительных функций [1]. В результате подобной имплантции на поверхности склеры образуется рыхлый регенерат с хорошо развитой сосудистой сетью, активизируются перивазальные хориоидоэписклеральные анастомозы (vasa vasorum arteriarum ciliarium longarum et brevium atque venarum vorticosarum) [2].
Материалы и методы
Исследование проведено на 10 кроликах (самцы и самки) породы шиншилла массой 2,5 - 3 кг. Кроликам под внутривенным тиопенталовым наркозом в теноново пространство вводили с помощью канюли 0,3-0,5 мл водорастворимого 8% высокоочищенного гидрогелевого раствора соли хитозана со степенью деацетилирования до 94%-98%, молекулярной массой равной 100-700 kDa, включающего сложную рецептуру, содержащую сульфатированные и несульфатированные гликозаминогликаны, факторы роста. В послеоперационном периоде назначалась стандартная противовоспалительная терапия на протяжении 7 дней: закапывались капли Sol. Dexamethasoni 0,1%, Sol. Cipromedi 0,3%. Кроликов выводили из опыта через 2, 5 и 7 недель. Глаза кроликов
фиксировали в нейтральном 10% формалине, заливали в парафин и готовили серийные срезы, окрашивали их гематоксилином-эозином и по Ван-Гизону.
Результаты и обсуждение
У всех животных отмечался умеренный отек, инъекция сосудов конъюнктивы в течение первых 3-5 дней после введения гидрогелевого комбинированного раствора в теноново пространство. Объективно наблюдалась субконъюнктивальная подушечка в области имплантации, которая частично рассасывалась и уплотнялась с образованием отграничения.
На серийных срезах глазного яблока кроликов, при гистологическом исследовании, в области имплантации хитозанового гидрогеля, в теноновом пространстве, обнаружена асептическая воспалительная клеточная реакция, которая приводила к постепенному лизису, резорбции и замещению гидрогеля собственной соединительной тканью, а также прослежены этапы роста и дифференциации сосудов, развивающихся в новообразованной ткани, замещающей биоматериал.
На 2-ой неделе после имплантации в срезах выявлено отграничение имплантированного гидрогеля волокнистой тканью. В сгустках самого гидрогеля обнаружены скопления нейтрофилов. Отмечено новообразование капилляров путем пролиферации эндотелиоцитов от предшествующих капилляров и венул. Выявлены растущие капилляры в виде слепо заканчивающихся эндотелиальных выростов, состоящих вначале из одной, а затем - из нескольких клеток, в их стенке прослежено появление базальной мембраны и их канализация. Растущие капилляры образовывали петли, которые анастомозируя между собой, сформировали локальные капиллярные сети. Слияние нескольких локальных капиллярных сетей приводило в последующем к образованию единого микрососудистого русла. Новообразование лимфатических капилляров тоже происходило за счет почек роста, состоящих из эндотелиоцитов, которые вытягивались в длину из стенки предшествующего лимфатического капилляра. Отмечалось образование малодифференцированной лимфатической сети, в сосудах которой не определялись клапаны.
На 5-ой неделе после имплантации в срезах выявлена сформированная грануляционная ткань, постепенно трансформировавшаяся в фиброзную. Наблюдалась почти полная резорбция имплантата. Для новообразованной эписклеральной ткани характерным было наличие большого количества новообразованных сосудов капиллярного типа и хаотичное расположение коллагеновых волокон (рис.1). В центральных участках новообразованной капиллярной сети отмечалась дифференциация микрососудов: некоторые капилляры
увеличились в диаметре, а в структуре их стенки обнаруживались гладкомышечные или адвентициальные клетки в зависимости от того какой сосуд формировался - артериола или венула (рис.2). В периферических участках, по мере дальнейшего фиброзирования, наблюдались процессы переориентации и упорядоченного расположения волокон рубца, которые становились ориентированными параллельно склеральным. Рост новых капилляров в периферических отделах новообразованной сети и дифференциация сосудов в центральных отделах, происходили параллельно. В стенке новообразованных лимфатических сосудов выявляются клапаны, а архитектоника лимфатической сети приобрела признаки дефинитивной.
Рис. 1. Склера кролика в области имплантации гидрогеля на пятой неделе после
операции.
Грануляционная ткань с большим числом новообразованных сосудов капиллярного и хаотичное расположение коллагеновых волокон. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 100
Рис.2. Эписклеральный рубец на пятой неделе после операции
Грануляционная ткань с разрастанием фибробластов, хаотичное расположение коллагеновых волокон с чередованием рыхлых и плотных слоев эписклерального рубца. Дифференциация микрососудов в центральных отделах и рост новых капилляров в периферических отделах регенерата. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 100
На 7-ой неделе после имплантации над склерой располагался рубец, состоявший из прослоек рыхлой соединительной ткани, перемежающихся с пучками коллагеновых волокон, сохраняющих параллельную ориентацию относительно склеры. После полной резорбции биоматериала и его замещения регенератом отмечалось максимальное развитие новообразованной микрососудистой сети (рис.3). К этому сроку все звенья микроциркуляторного русла имели нормальное строение. Обнаруживалась магистрализация артериол и венул за счет редукции части капилляров (рис.4б). На 7-й неделе в оперированном глазу установлено утолщение склеры от 469,85±9,6 мкм в здоровом парном глазу (рис.4а) до - 2841,5±10,05 мкм (р<0,001) (рис.4б).
Рис. 3 Центр и периферия эписклерального рубца на седьмой неделе после операции
Прослойки рыхлой соединительной ткани в рубце. Параллельные склеральным, пучки коллагеновых волокон. Большое число клеточных элементов. Развитая микрососудистая новообразованная сеть. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 100
Рис. 4. Динамика утолщения склеры кролика за счет хорошо васкуляризированного
эписклерального рубца (2841,5 ± 10,05 рт)
а - здоровый парный глаз (толщина склеры 469,85 ± 9,6 цш), ув. 40; б - 7 неделя после операции, магистрализация сосудов, редукция капилляров, ув. 100. Окраска гематоксилином и эозином.
Таким образом, имплантация в теноново пространство 0,3 - 0,5 мл водорастворимого 8% высокоочищенного гидрогелевого раствора соли хитозана со степенью деацетилирования до 94%-98%, молекулярной массой равной 100-700 kDa, включающего сложную рецептуру, содержащую сульфатированные и несульфатированные гликозаминогликаны, факторы роста, ведет к образованию собственной эписклеральной соединительной ткани, полностью замещающей комбинированный гидрогель, интимно спаянной со склерой. В новообразованной ткани, замещающей биоматериал, развивается микрососудистое русло, параметры которого свидетельствуют о полноценном развитии кровеносных и лимфатических сосудов регенерата.
INFLUENCE OF CHITOSAN IMPLANTACION ON FORMATION OF IMPLANTATION OF A CHANNEL IN TENON’S SPACE
V.V. Kuzovnikov, D.G. Chanchikov, V.V. Garkavenko, I.V. Simko, O.V. Osipova,
V.I. Lazarenko, I.N. Bolshakov
Krasnoyarsk state medical academy named in honour of V.F. Vojno-Yasenetskij
In the submitted work the reaction of fabrics to introduction in Tenon’s space chitosan hydrohel, about formation of the well advanced network microcirculation in experiment, in various terms is considered histology.
Литература
1. Беляев В.С., Госсен Ж.Х. О возможности хирургического лечения и профилактики дистрофии сетчатой оболочки и зрительного нерва // Вест. офтальмол., - 1983. - №6. - С. 18-21.
2. Родионов О.В., Султанов Р.З., Ларин А.И. и др. Диспергированный биоматериал «Аллоплант» в лечении диабетической ретинопатии: матер. I ЕвроАзиат. конф. по офтальмохирургии. - Екатеринбург, 1998. - С. 54.
Рис. 1. Склера кролика в области имплантации гидрогеля на пятой неделе после
операции.
Грануляционная ткань с большим числом новообразованных сосудов капиллярного и хаотичное расположение коллагеновых волокон. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 100
Рис.2. Эписклеральный рубец на пятой неделе после операции
Грануляционная ткань с разрастанием фибробластов, хаотичное расположение коллагеновых волокон с чередованием рыхлых и плотных слоев эписклерального рубца. Дифференциация микрососудов в центральных отделах и рост новых капилляров в периферических отделах регенерата. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 100
Рис.3 Центр и периферия эписклерального рубца на седьмой неделе после операции
Прослойки рыхлой соединительной ткани в рубце. Параллельные склеральным, пучки коллагеновых волокон. Большое число клеточных элементов. Развитая микрососудистая новообразованная сеть. Окраска гематоксилином и эозином. Ув. 100
Рис. 4. Динамика утолщения склеры кролика за счет хорошо васкуляризированного
эписклерального рубца (2841,5 ± 10,05 рт)
а - здоровый парный глаз (толщина склеры 469,85 ± 9,6 цш), ув. 40; б - 7 неделя после операции, магистрализация сосудов, редукция капилляров, ув. 100. Окраска гематоксилином и эозином.
